吲哚类生物碱在制备抑制α-葡萄糖苷酶药物中的用途

吲哚类生物碱在制备抑制
α-葡萄糖苷酶药物中的用途
技术领域
1.本发明属中药制药技术领域，具体涉及一种吲哚类生物碱在制备抑制α-葡萄糖苷酶药物中的新用途。


背景技术：

2.研究公开了糖尿病是一种由胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损，或两者兼有引起的以高血糖为特征的代谢性疾病。据国际糖尿病联盟(idf)统计数据显示：2017年全球糖尿病成人患者约有2.25亿，预计到2045年，糖尿病患者可能达到6.29亿，仅2015年就有500万人死于糖尿病，超过了艾滋病、肺结核和疟疾致死人数的总和。因此，寻找安全有效的治疗糖尿病已迫在眉睫。目前常用的降糖药主要有磺酰脲类促泌剂、噻唑烷二酮类衍生物促敏剂、胰岛素及其类似物、苯茴酸类生物促泌剂、二甲双胍类、glp-1受体激动剂、dpp-4酶抑制剂和α-葡萄糖苷酶抑制剂等。在降糖药物的研究中，α-葡萄糖苷酶抑制剂因其毒副作用小，服用方便等优点受到了越来越多药物学家的青睐。而目前大多数α-葡萄糖苷酶抑制剂主要是合成药物，其具有水溶性差，成本高等缺点。天然产物因其复杂性、多样性和丰富性为α-葡萄糖苷酶抑制药物的研发提供了理想的资源。
3.百合(lilium brownii var.viridulum)为百合科百合属植物，主要分布于北温带和亚热带地区，我国南北省均有分布，以西南华中地区居多。目前对百合鳞茎的化学成分及其药理活性研究较多，而关于百合根的研究鲜有报道。化合物neoechinulin a是从该植物根中分离得到的一种吲哚类生物碱，但迄今尚未见关于该种类型生物碱的α-葡萄糖苷酶抑制活性的报道。


技术实现要素：

4.本发明的目的是提供一种已知化合物吲哚类生物碱在制备抑制α-葡萄糖苷酶药物中的新用途。
5.本发明应用现代分离技术以及药理筛选方法，对植物药中的具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的物质进行研究，从百合科百合(l.brownii var.viridulum)根的二氯甲烷部位分离得到化合物neoechinulin a，并证实其具有显著的α-糖苷酶抑制活性。
6.本发明涉及的吲哚类生物碱neoechinulin a具有式ⅰ的化学结构：
[0007][0008]
本发明所述的吲哚类生物碱通过下述方法制备：
[0009]
百合根粗粉室温下以95％的乙醇反复渗漉提取数次后，提取液减压浓缩，得到的
浸膏混悬于蒸馏水中，分别依次用石油醚和二氯甲烷萃取。二氯甲烷萃取物经过硅胶柱、凝胶柱和制备液相的富集和分离，得到化合物neoechinulin a。
[0010]
本发明实验采用的试剂、酶均为本领域公知技术，可市购。
[0011]
本发明的化合物neoechinulin a进行了α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选试验，结果证实，其对α-糖苷酶具有显著的抑制活性，ic
50
为73.4μm，且强于阳性对照药物阿卡波糖；表明所述的neoechinulin a具有抑制α-葡萄糖苷酶的药用价值。
[0012]
进一步，本发明的吲哚类生物碱neoechinulin a可用于制备抑制α-葡萄糖苷酶的药物，以及用于制备治疗糖尿病的药物。
附图说明：
[0013]
图1是百合根中neoechinulin a的提取分离流程图。
具体实施方式
[0014]
实施例1制备neoechinulin a
[0015]
百合根粗粉3.5kg室温下以95％乙醇渗漉4次，减压浓缩得浸膏，浸膏混悬于2l的蒸馏水中，分别依次以石油醚和二氯甲烷各萃取4次(每次2l)，二氯甲烷萃取物29.3g经浓缩、硅胶拌样、烘干后，以干法装硅胶柱，干法上样，依次以二氯甲烷、二氯甲烷-甲醇、甲醇进行梯度洗脱，得到11个流份(fr.1～fr.11)。fr.2经凝胶色谱柱，以甲醇为流动相洗脱，得到4个流份(fr.2-1～fr.2-4)。其中fr.2-3经制备液相，以10ml/min的流速，42％乙腈/水为流动相，制备得到化合物neoechinulin a(2.3mg)，其化学结构经波谱分析并与文献(chemical&pharmaceutical bulletin,2004,52:375)数据对照后鉴定。
[0016]
实施例2α-葡萄糖苷酶抑制活性试验
[0017]
待测组分和对硝基苯基-α-d-吡喃葡萄糖苷(pnpg)分别溶于ph 6.8的磷酸钠缓冲液(0.1m pbs)，得到不同浓度的待测组分和2mm pnpg。α-葡萄糖苷酶溶于0.01m pbs，得到0.1u/mlα-葡萄糖苷酶溶液。将50μl不同浓度的待测组分和50μl 0.1u/mlα-葡萄糖苷酶溶液混匀，37℃水浴孵育10分钟，加入100μl 2mm pnpg，37℃水浴孵育20分钟，加入50μl 0.2m碳酸钠溶液终止反应。4500rpm离心5分钟，取200μl上清液于96孔板中，测定405nm下的吸光值。酶活力半数抑制时的药物的浓度ic
50
按照量效数据进行换算。每个实验重复三次。结果如表1所示，neoechinulin a对α-葡萄糖苷酶表现出明显的抑制活性。
[0018]
表1 neoechinulin aα-葡萄糖苷酶抑制活性试验
[0019][0020]
*
：阳性对照
[0021]
实验结果表明，所述的的吲哚类生物碱neoechinulin a可用于制备抑制α-葡萄糖苷酶的药物，以及用于制备治疗糖尿病的药物。


技术特征：
1.如下结构式的吲哚类生物碱在制备抑制α-葡萄糖苷酶药物中的用途，所述的吲哚类生物碱为neoechinulin a。2.权利要求1所述的生物碱在制备治疗糖尿病药物中的用途。3.按权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述的化合物neoechinulin a对α-糖苷酶具显著的抑制有活性，ic
50
为73.4μm。4.按权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的吲哚类生物碱通过下述方法制备：百合根粗粉室温下以95％的乙醇反复渗漉提取数次后，提取液减压浓缩，得到的浸膏混悬于蒸馏水中，分别依次用石油醚和二氯甲烷萃取，二氯甲烷萃取物经过硅胶柱、凝胶柱和制备液相的富集和分离，得到化合物neoechinulin a。

技术总结
本发明属中药制药领域，涉及一种吲哚类生物碱在制备抑制α-葡萄糖苷酶药物中的新用途。本发明从百合科百合(L.brownii var.viridulum)根的二氯甲烷部位分离得到neoechinulin A，α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选试验证实，neoechinulin A对α-葡萄糖苷酶具有显著的抑制活性，IC


技术研发人员：卢燕 陈道峰 夏校
受保护的技术使用者：复旦大学
技术研发日：2020.12.02
技术公布日：2022/6/4