技术特征:
1.一种重组sortasea酶,其特征在于,所述重组sortasea酶是通过在sortasea酶的c末端引入一个半胱氨酸进行序列改造得到的,该重组sortasea酶的蛋白序列如seq id no.1所示。2.根据权利要求1所述的重组sortasea酶,其特征在于,表达重组sortasea酶的载体为pet-28a,表达重组sortasea酶的菌株为大肠杆菌bl21。3.一种如权利要求1所述的重组sortasea酶的编码基因,其特征在于,所述编码重组sortasea酶的基因的核苷酸序列如seq id no.2所示。4.一种如权利要求1所述的重组sortasea酶在蛋白质的合成与修饰中的应用。5.一种如权利要求1所述的重组sortasea酶的固定化方法,其特征在于,利用半胱氨酸将sortasea酶通过巯基偶联固定到商品化树脂上。6.一种利用如权利要求5所述的固定化方法制得的固定化sortasea酶。7.一种如权利要求6所述的固定化sortasea酶在蛋白质的合成与修饰中的应用。8.根据权利要求7所述的固定化sortasea酶在蛋白质的合成与修饰中的应用,其特征在于,利用所述固定化sortasea酶发挥蛋白修饰功能后,使用低速离心机,在3000rpm离心5min后即可去除固定化sortasea酶。
技术总结
本发明属于生物工程领域,具体公开了一种重组SortaseA酶及其固定化方法和应用,通过在SortaseA酶的末端引入一个半胱氨酸,利用巯基共价偶联的原理,将SortaseA酶固定到商品化的偶联树脂上,反应结束后,只需要通过简单的离心方法,即可将SortaseA酶去除,该方法大幅度地减少了操作的时间、实现了基本以零成本的方式去除了反应中多余的SortaseA酶,提高了SortaseA酶在蛋白质的合成与修饰中的应用价值。值。值。
技术研发人员:王峰 陈倩 桂文君 高敏奇 黄亚亮
受保护的技术使用者:无锡佰翱得生物科学有限公司
技术研发日:2022.04.06
技术公布日:2022/6/3
再多了解一些
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