卡山烷二萜phangininA衍生物及其药物组合物和其应用

卡山烷二萜phanginin a衍生物及其药物组合物和其应用
技术领域
1.本发明属于药物技术领域，具体地，涉及卡山烷二萜phanginina衍生物，以其为药物有效成分的药物组合物，它们在制备预防和治疗2型糖尿病的药物中的应用。


背景技术：

2.糖尿病(diabetes mellitus，dm)是由胰岛素缺失和(或)胰岛素抵抗引发的一种慢性代谢疾病，以糖脂代谢紊乱为主要特征。根据国际糖尿病联盟(international diabetes federation,idf)最新统计，全球约4.63亿成年人(20-79岁)患糖尿病，预计到2030年，糖尿病患者将达到5.784亿，到2045年糖尿病患者会达到7.002亿。糖尿病患者中以2型糖尿病患者为主，占比超过90％。目前已有40多种抗糖尿病药物批准用于治疗糖尿病，但1型和2型糖尿病均尚不能完全治愈，糖尿病患者对安全有效的糖尿病治疗药物仍得不到充分满足，这也极大促了低毒副作用的新型抗糖尿病新药的进一步研发。
3.糖异生是机体在体内糖的来源不足时，利用非糖物质如丙酮酸、甘油、乳酸和绝大多数氨基酸等转变为葡萄糖和糖原的过程，可以维持机体正常血糖浓度，为脑、红细胞等高度依赖葡萄糖的器官或组织提供能量。胰岛素和胰高血糖素是维持体内血糖动态平衡的重要激素，但发生胰岛素抵抗时，胰岛素抑制糖异生、促进糖摄取和糖原合成的能力均明显减弱，而胰高血糖素强烈刺激导致肝脏糖异生功能异常增强，这是造成2型糖尿病患者空腹高血糖的重要原因。因此，抑制过度增加的肝脏糖异生，减少非糖物质向葡萄糖转化，是改善2型糖尿病患者慢性高血糖的有效手段之一(current diabetes reports,2019,19(9):77)。因此，研究和开发有效抑制肝糖异生的药物，对于改善糖尿病患者高血糖症状具有重要意义。
4.phanginina是从豆科云实属植物苏木中发现的卡山烷二萜类化合物，文献仅报道该化合物有微弱的肿瘤细胞毒活性(phytochemistry,2016,122,286-293.)。本发明人研究发现phanginina具有抗糖异生抑制活性，对该化合物进行初步结构修饰发现13个活性显著化合物，且申请了专利并已获得授权(中国专利“呋喃卡山烷二萜衍生物及其药物组合物和其在制药中的应用”，专利号：zl201710025227.5)。发明人的进一步研究发现phanginina可通过增加sik1磷酸化间接激活pde4，抑制camp/pka/creb信号通路，从而发挥抑制肝糖异生作用。phanginina单次和长期给药均可降低2型糖尿病ob/ob小鼠的血糖，并且长期给药可改善机体糖脂代谢紊乱(molecular metabolism,2020,41,101045.)。为进一步挖掘phanginina的药用潜能，本发明对该化合物进一步开展结构修饰与抗糖异生抑制活性评价，结果找到活性更显著的phanginina衍生物。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于：提供卡山烷二萜phanginina衍生物，或其药学上可接受的盐，以其为有效成分的药物组合物，其制备方法，以及该类化合物及其药物组合物在制备预防和治疗2型糖尿病药物中的应用。
6.为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：
7.式(i)和式(ii)所示的卡山烷二萜phanginin a衍生物，或其药学上可接受的盐，
[0008][0009]
式中，n选自1-10；x选自o或s；
[0010]
r1选自氢、甲基、羧基、羟甲基、亚甲基卤素；c
1-10
烷氧基亚甲基、c
2-10
酰氧基亚甲基、-coor、-ch2nh2、
[0011]
其中卤素为氟、氯、溴；
[0012]
r为c
1-10
烷基；
[0013]
r'＝h时，r"＝c
1-10
烷基；
[0014]
r'和r"均为c
1-10
烷基时，r'和r"可以相同或不同；
[0015]
r2选自h、c
1-10
烷基、c
2-10
酰基。
[0016]
如上所示的卡山烷二萜phanginina衍生物，为如下化合物：
[0017][0018]
本发明同时提供了所述的卡山烷二萜phanginina衍生物1-15的制备方法，该方法包括下述步骤：
[0019]
化合物1-6的制备
[0020]
phanginina溶于ch2cl2溶液中，并加入三氟化硼乙醚和乙二醇或1,3-丙二醇或1,4-丁二醇或1,5-戊二醇或1,6-己二醇或巯基乙醇进行反应，处理后得化合物1或2或3或4或5或6。
[0021][0022]
化合物7-9的制备
[0023]
phanginina溶于ch2cl2溶液中，并加入三氟化硼乙醚和二甘醇或三甘醇或四甘醇进行反应，处理后得化合物7或8或9。
[0024][0025]
化合物10的制备
[0026]
化合物1溶于甲醇溶液中，并加入4％koh溶液进行反应，处理后得化合物10。
[0027][0028]
化合物11的制备
[0029]
化合物1溶于thf溶液中，并加入lialh4进行反应，处理后得化合物11。
[0030][0031]
化合物12的制备
[0032]
化合物11溶于ch2cl2溶液中，并加入醋酐、三乙胺、dmap进行反应，处理后得化合物12。
[0033][0034]
化合物13的制备
[0035]
化合物10溶于ch2cl2溶液中，并加甲胺盐酸盐、三乙胺、1-羟基苯并三唑(hobt)、1-乙基-3(3-二甲基丙胺)碳二亚胺(edci)进行反应，处理后得化合物13。
[0036][0037]
化合物14的制备
[0038]
化合物10溶于ch2cl2溶液中，并加乙胺盐酸盐、三乙胺、1-羟基苯并三唑(hobt)、1-乙基-3(3-二甲基丙胺)碳二亚胺(edci)进行反应，处理后得化合物14。
[0039][0040]
化合物15的制备
[0041]
化合物10溶于ch2cl2溶液中，并加正丙胺、二异丙基乙基胺、1-羟基苯并三唑(hobt)、1-乙基-3(3-二甲基丙胺)碳二亚胺(edci)进行反应，处理后得化合物15。
[0042][0043]
本发明所述的卡山烷二萜phanginina衍生物的药学上可接受的盐，包括与碱金属锂、钠、钾或碱土金属钙、镁成的盐，或与有机酸酒石酸、马来酸、琥铂酸、柠檬酸、樟脑磺酸、丁酸、甲磺酸、对甲苯磺酸成的盐，或与无机酸盐酸、硫酸、磷酸成的盐。
[0044]
本发明还提供了治疗或预防2型糖尿病的药物组合物，其中含有治疗有效量的上述的卡山烷二萜phanginina衍生物或其药学上可接受的盐，及可药用载体。
[0045]
另一种治疗或预防2型糖尿病的药物组合物，其中含有治疗有效量的上述的化合物1-15，及可药用载体。
[0046]
此外，本发明提供了上述呋喃卡山烷二萜衍生物或其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备治疗或预防2型糖尿病的药物中的应用。
[0047]
还提供了上述化合物1-15在制备治疗或预防代谢性疾病的药物中的应用。
[0048]
本发明中的化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。也可以与其他药物组成复方的形式使用，该药物组合物含有0.1～99％，优选为0.5～90％的本发明化合物，其余为药物学上可接受的，对人和动物无毒和惰性的药物制剂常用的药用载体和/或赋形剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。可以使用不同的药用辅料，制成固体制剂(片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂等)、液体制剂(注射剂、口服液)。
[0049]
除非另有说明，本发明使用的术语“烷基”是指直链或者支链的饱和一价烃基，其中烷基可以任选地被一个或多个取代基取代。烷基的实施方式包括但不限于甲基、乙基、丙基(包括所有同分异构形式)、n-丙基、异丙基、丁基(包括所有同分异构形式)、n-丁基、异丁基、t-丁基、戊基(包括所有同分异构形式)、和己基(包括所有同分异构形式)。
[0050]
除非另有说明，本发明使用的术语“酰基”是指直链或支链，环状或非环状的饱和
烃基取代的碳酰或磺酰基，也可以是烯基、炔基、芳基等不饱和烃基取代的碳酰或磺酰基。
[0051]
除非另作说明，本发明使用的术语“烯基”是指包含一个或多个碳碳双键的直链或者支链一价烃基。烯基可以任选地被一个或多个取代基取代。术语“烯基”也包括“顺式(cis)”和“反式(trans)”结构的基团，或者本领域普通技术人员所理解的“e”和“z”式结构。除非另作说明，本发明使用的术语“烯基”包括直链和支链烯基。例如，c
2-6
烯基是指2到6个碳原子的直链不饱和一价烃基或者3到6个碳原子的支链不饱和一价烃基。
[0052]
除非另作说明，本发明使用的术语“炔基”是指包含一个或多个碳碳三键的直链或者支链一价烃基。炔基可以任选地被一个或多个取代基取代。除非另作说明，术语“炔基”也包括直链和支链炔基。
[0053]
除非另作说明，本发明使用的术语“芳基”是指单环芳基和/或包含至少一个芳香烃环的多环单价芳基。
附图说明
[0054]
图1为本发明的卡山烷二萜phanginina衍生物对肝细胞糖异生抑制作用的活性结果图。
[0055]
图2为本发明的卡山烷二萜phanginina衍生物结构示意图。
具体实施方式
[0056]
以下结合附图，通过本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但并不以任何形式来限制本发明。
[0057]
实施例1：
[0058]
本发明的具体实验方法：
[0059]
化合物phanginin a是从采自广西产豆科云石属植物苏木(caesalpinia sappan)乙醇提取物中分离得到的。
[0060][0061]
化合物phanginin a的制备：
[0062]
苏木(c.sappan)种子20kg，粉碎后用95％乙醇于室温浸泡提取四次，每次24小时，合并提取液减压浓缩得粗提物(3.0kg)。将粗提物分散于水中，用等体积的乙酸乙酯萃取四次，减压浓缩萃取液。乙酸乙酯萃取物(1.0kg)经硅胶柱反复柱层析及重结晶得到化合物phanginin a(20g)。
[0063]
实施例2：
[0064]
化合物1的制备
[0065][0066]
化合物phanginin a(20mg)溶于2ml ch2cl2溶液中，在氮气保护下加入乙二醇(9μl)，三氟化硼乙醚(4.2μl)于室温反应1h。向反应液中加饱和碳酸氢钠溶液5ml，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和nacl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得无色油状物。经硅胶柱层析(石油醚:丙酮＝8:2)得到化合物1(18mg，产率80％)。
[0067]
化合物1：无色油状物；1h nmr(500mhz,cdcl3)δ1h nmr(500mhz,cdcl3)δ7.21(br s,1h),6.16(br s,1h),4.57(s,1h),4.22(dd,j＝11.7,2.4hz,1h),3.64-3.76(m,3h),3.67(s,3h),4.22(dd,j＝7.9,4.9hz,1h),2.74(dd,j＝15.5,5.2hz,1h),2.54-2.62(m,1h),2.19-2.39(m,4h),1.89-2.13(m,4h),1.57-1.73(m,3h),1.49(td,j＝11.6,5.2hz,1h),1.34-1.43(m,1h),1.18-1.30(m,2h),0.96(d,j＝7.1hz,3h).
13
c nmr(125mhz,cdcl3)δ175.5,149.1,140.5,122.5,109.8,103.6,70.7,62.6,62.0,51.6,45.5,45.3,42.4,39.1,38.0,37.4,35.5,31.5,29.5,23.6,22.5,20.9,16.8.hresims m/z:427.2092(calcd.for 427.2091c
23h32
o6na[m na]

).
[0068]
实施例3：
[0069]
化合物2的制备
[0070][0071]
化合物phanginin a(30mg)溶于3ml ch2cl2溶液中，在氮气保护下加入1,3-丙二醇(20μl)，三氟化硼乙醚(6.2μl)于室温反应1h。向反应液中加饱和碳酸氢钠溶液5ml，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和nacl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得无色油状物。经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝8:2)得到化合物2(25mg，产率72％)。
[0072]
化合物2：无色油状物；1h nmr(500mhz,cdcl3)δ1h nmr(500mhz,cdcl3)δ7.21(d,j＝1.7hz,1h),6.18(d,j＝1.7hz,1h),4.52(s,1h),4.16(dd,j＝11.7,2.4hz,1h),3.82(ddd,j＝9.7,7.3,5.5hz,1h),3.64-3.72(m,2h),3.66(s,3h),3.36(dt,j＝9.7,5.9hz,1h),2.72(dd,j＝15.5,5.2hz,1h),2.54-2.61(m,1h),2.20-2.39(m,2h),1.87-2.11(m,
4h),1.55-1.84(m,6h),1.46(td,j＝11.6,5.2hz,1h),1.36(ddd,j＝25.4,12.7,3.5hz,1h),1.16-1.28(m,3h),0.95(d,j＝7.0hz,3h).
13
c nmr(125mhz,cdcl3)δ175.7,149.3,140.4,122.5,109.8,103.0,64.7,61.8,60.5,51.6,45.5,45.4,42.4,38.9,38.1,37.1,35.6,32.6,31.5,29.5,23.6,22.5,21.0,16.8.hresims m/z:441.2245(calcd.for 441.2248 c
24h34
o6na[m na]

).
[0073]
实施例4：
[0074]
化合物3的制备
[0075][0076]
化合物phanginin a(20mg)溶于2ml ch2cl2溶液中，在氮气保护下加入1,4-丁二醇(15μl)，三氟化硼乙醚(4.1μl)于室温反应1h。向反应液中加饱和碳酸氢钠溶液5ml，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和nacl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得无色油状物。经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝8:2)得到化合物3(21mg，产率88％)。
[0077]
化合物3：无色油状物；1h nmr(500mhz,cdcl3)δ7.21(d,j＝1.6hz,1h),6.18(d,j＝1.6hz,1h),4.52(s,1h),4.16(dd,j＝11.7,2.4hz,1h),3.65-3.72(m,2h),3.66(s,3h),3.57(t,j＝6.3hz,2h),3.27(dt,j＝9.7,5.9hz,1h),2.71(dd,j＝15.5,5.2hz,1h),2.54-2.60(m,1h),2.24-2.39(m,3h),2.12(ddd,j＝15.8,12.3,2.8hz,1h),2.04(dd,j＝13.5,5.5hz,1h),1.87-2.01(m,2h),1.49-1.69(m,6h),1.42-1.48(m,2h),1.35(ddd,j＝26.0,13.0,3.8hz,1h),1.13-1.28(m,2h),0.95(d,j＝7.1hz,3h).
13
c nmr(125mhz,cdcl3)δ175.8,149.4,140.4,122.5,109.8,102.7,67.3,62.6,61.8,51.6,45.5,45.5,42.4,38.8,38.1,37.0,35.6,31.5,29.8,29.6,26.1,23.5,22.4,21.0,16.8.hresims m/z:455.2403(calcd.for 455.2404c
25h36
o6na[m na]

).
[0078]
实施例5：
[0079]
化合物4的制备
[0080][0081]
化合物phanginin a(20mg)溶于2ml ch2cl2溶液中，在氮气保护下加入1,5-戊二醇(17μl)，三氟化硼乙醚(4.3μl)于室温反应1h。向反应液中加饱和碳酸氢钠溶液5ml，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和nacl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得无色油状物。经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝8:2)得到化合物4(19mg，产率77％)。
[0082]
化合物4：无色油状物；1h nmr(500mhz,cdcl3)δ7.21(d,j＝1.6hz,1h),6.19(d,j＝1.6hz,1h),4.51(s,1h),4.16(dd,j＝11.7,2.4hz,1h),3.65-3.73(m,2h),3.66(s,3h),3.49(t,j＝6.6hz,2h),3.22(dt,j＝9.5,6.4hz,1h),2.71(dd,j＝15.5,5.2hz,1h),2.53-2.61(m,1h),2.25-2.40(m,3h),2.08-2.18(m,1h),2.05(dd,j＝13.5,5.5hz,1h),1.87-2.02(m,2h),1.41-1.70(m,8h),1.28-1.40(m,3h),1.13-1.28(m,2h),0.95(d,j＝7.1hz,3h).
13
c nmr(125mhz,cdcl3)δ175.8,149.5,140.4,122.5,109.8,102.7,67.2,62.8,61.8,51.6,45.5,45.5,42.4,38.8,38.1,36.9,35.5,32.3,31.5,29.6,29.4,23.5,22.7,22.4,21.1,16.8.hresims m/z:469.2561(calcd.for 469.2561 c
26h38
o6na[m na]

).
[0083]
实施例6：
[0084]
化合物5的制备
[0085][0086]
化合物phanginin a(30mg)溶于2ml ch2cl2溶液中，在氮气保护下加入1,6-己二醇(30mg)，三氟化硼乙醚(6.2μl)于室温反应1h。向反应液中加饱和碳酸氢钠溶液5ml，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和nacl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得无色油状物。经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝8:2)得到化合物5(23mg，产率60％)。
[0087]
化合物5：无色油状物；1h nmr(500mhz,cdcl3)δ1h nmr(500mhz,cdcl3)δ7.21(d,j＝1.7hz,1h),6.19(d,j＝1.7hz,1h),4.51(s,1h),4.16(dd,j＝11.7,2.4hz,1h),3.64-3.72(m,2h),3.66(s,3h),3.53(t,j＝6.6hz,2h),3.21(dt,j＝9.5,6.3hz,1h),2.71(dd,j＝15.5,5.2hz,1h),2.54-2.62(m,1h),2.25-2.40(m,3h),2.15(m,1h),2.05(dd,j＝13.5,5.6hz,1h),1.88-2.02(m,2h),1.13-1.71(m,15h),0.95(d,j＝7.1hz,3h).
13
c nmr(125mhz,cdcl3)δ175.8,149.5,140.3,122.5,109.8,102.7,67.1,62.8,61.8,51.5,45.5,45.5,42.4,38.8,38.1,36.9,35.5,32.7,31.5,29.6,29.6,26.3,25.2,23.5,22.4,21.1,16.8.hresims m/z:483.2719(calcd.for 483.2717 c
27h40
o6na[m na]

).
[0088]
实施例7：
[0089]
化合物6的制备
[0090][0091]
化合物phanginin a(37mg)溶于3ml ch2cl2溶液中，在氮气保护下加入巯基乙醇(21.0μl)，三氟化硼乙醚(8.0μl)于室温反应1h。向反应液中加饱和碳酸氢钠溶液5ml，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和nacl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得无色油状物。经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝8:2)得到化合物6(18mg，产率42％)。
[0092]
化合物6：无色油状物；1h nmr(500mhz,cdcl3)δ1h nmr(500mhz,cdcl3)δ7.23(d,j＝1.7hz,1h),6.19(d,j＝1.7hz,1h),4.92(s,1h),4.49(dd,j＝11.9,2.4hz,1h),3.65-3.83(m,3h),3.69(s,3h),2.87-2.93(m,1h),2.51-2.76(m,4h),2.30-2.45(m,1h),2.24(dd,j＝13.5,5.7hz,1h),1.89
–
2.13(m,3h),1.52
–
1.74(m,4h),1.23
–
1.46(m,4h),0.96(d,j＝6.9hz,3h).
13
c nmr(125mhz,cdcl3)δ175.3,149.0,140.6,122.5,109.8,89.7,62.6,62.0,51.7,46.1,45.5,42.8,42.0,41.3,38.3,36.1,35.6,31.4,29.1,23.8,22.0,21.4,16.7.hresims m/z:443.1867(calcd.for 443.1863 c
23h32
o5sna[m na]

).
[0093]
实施例8：
[0094]
化合物7的制备
[0095][0096]
化合物phanginin a(30mg)溶于3ml ch2cl2溶液中，在氮气保护下加入二甘醇
(23.0μl)，三氟化硼乙醚(6.3μl)于室温反应1h。向反应液中加饱和碳酸氢钠溶液5ml，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和nacl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得无色油状物。经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝7:3)得到化合物7(31mg，产率84％)。
[0097]
化合物7：无色油状物；1h nmr(500mhz,cdcl3)δ1h nmr(500mhz,cdcl3)δ7.21(br s,1h),6.19(br s,1h),4.58(s,1h),4.21(dd,j＝11.7,2.4hz,1h),3.80(ddd,j＝11.0,4.8,3.4hz,1h),3.65-3.73(m,1h),3.66(s,3h),3.55-3.59(m,2h),3.39-3.52(m,4h),2.70(dd,j＝15.4,5.2hz,1h),2.54-2.60(m,1h),2.48(dd,j＝15.3,11.6hz,1h),2.24-2.39(m,2h),2.15(ddd,j＝18.6,12.6,3.2hz,1h),2.06(dd,j＝13.6,5.5hz,1h),1.99(tdd,j＝13.1,6.4,2.4hz,1h),1.84-1.94(m,2h),1.55-1.71(m,3h),1.46(td,j＝11.6,5.2hz,1h),1.30-1.41(m,1h),1.24(td,j＝13.9,6.1hz,1h),1.13-1.19(m,1h),0.95(d,j＝7.1hz,3h).
13
c nmr(125mhz,cdcl3)δ175.7,149.6,140.4,122.4,109.8,102.8,72.1,70.3,66.4,61.9,61.8,51.6,45.5,45.5,42.4,38.8,38.0,36.8,35.5,31.5,29.5,23.5,22.3,21.0,16.8.hresims m/z:471.2357(calcd.for 471.2353 c
25h36
o7na[m na]

).
[0098]
实施例9：
[0099]
化合物8的制备
[0100][0101]
化合物phanginin a(35mg)溶于3ml ch2cl2溶液中，在氮气保护下加入三甘醇(38.0μl)，三氟化硼乙醚(7.3μl)于室温反应1h。向反应液中加饱和碳酸氢钠溶液5ml，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和nacl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得无色油状物。经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝6:4)得到化合物8(28mg，产率60％)。
[0102]
化合物8：无色油状物；1h nmr(500mhz,cdcl3)δ1h nmr(500mhz,cdcl3)δ7.20(d,j＝1.6hz,1h),6.17(d,j＝1.6hz,1h),4.57(s,1h),4.19(dd,j＝11.7,2.4hz,1h),3.79(ddd,j＝11.0,5.1,3.6hz,1h),3.64-3.73(m,2h),3.66(s,3h),3.56-3.61(m,2h),3.44-3.52(m,4h),3.39-3.43(m,2h),2.69(dd,j＝15.4,5.1hz,1h),2.55(dd,j＝12.8,6.6hz,1h),2.47(dd,j＝15.3,11.6hz,1h),2.24-2.39(m,2h),2.16(m,1h),2.05(dd,j＝13.6,5.5hz,1h),1.96(m,3h),1.54-1.69(m,3h),1.45(td,j＝11.6,5.1hz,1h),1.36(ddd,j＝26.0,13.0,3.8hz,1h),1.13-1.28(m,3h),0.95(d,j＝7.0hz,3h).
13
c nmr(125mhz,cdcl3)δ175.8,149.6,140.2,122.4,109.8,102.7,72.5,70.4,70.4,70.2,66.1,61.8,61.7,51.6,45.5,45.5,42.4,38.8,38.0,36.8,35.5,31.5,29.6,23.5,22.4,21.0,16.9.hresims m/z:515.2617(calcd.for 515.2615 c
27h40
o8na[m na]

).
[0103]
实施例10：
[0104]
化合物9的制备
[0105][0106]
化合物phanginin a(35mg)溶于3ml ch2cl2溶液中，在氮气保护下加入四甘醇(50.0μl)，三氟化硼乙醚(7.3μl)于室温反应1h。向反应液中饱和碳酸氢钠溶液5ml，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和nacl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得无色油状物。经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝5:5)得到化合物9(34mg，产率65％)。
[0107]
化合物9：无色油状物；1h nmr(500mhz,cdcl3)δ1h nmr(500mhz,cdcl3)δ7.19(brs,1h),6.17(br s,1h),4.56(s,1h),4.18(dd,j＝11.7,2.3hz,1h),3.75-3.81(m,1h),3.64-3.72(m,3h),3.66(s,3h),3.36-3.63(m,13h),2.68(dd,j＝15.4,5.1hz,2h),2.52-2.58(m,1h),2.47(dd,j＝15.2,11.7hz,1h),2.23-2.38(m,2h),2.10-2.20(m,1h),2.05(dd,j＝13.5,5.5hz,1h),1.86-2.01(m,2h),1.55-1.69(m,2h),1.44(td,j＝11.6,5.2hz,1h),1.30-1.40(m,1h),1.12-1.27(m,2h),0.95(d,j＝7.0hz,3h).
13
c nmr(125mhz,cdcl3)δ175.7,149.7,140.2,122.4,109.8,102.7,72.5,70.6,70.4,70.3,70.3,70.3,66.3,61.8,61.7,51.5,45.5,45.5,42.4,38.8,38.0,36.7,35.5,31.5,29.6,23.5,22.3,21.0,16.9.hresims m/z:559.2877(calcd.for 559.2878 c
29h44
o9na[m na]

).
[0108]
实施例11：
[0109]
化合物10的制备
[0110][0111]
化合物1(15mg)溶于4ml甲醇溶液中，加入4％koh 0.5ml，于80℃反应12h。向反应液中加1n hcl 0.1ml，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和nacl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得无色油状物。经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝7:3)得到化合物10(13mg，产率87％)。
[0112]
化合物10：无色油状物；1h nmr(500mhz,cd3od)δ7.20(d,j＝1.7hz,1h),6.16(d,j＝1.7hz,1h),4.60(s,1h),4.20(dd,j＝11.7,2.5hz,1h),3.74(dt,j＝10.5,5.1hz,1h),3.61-3.65(m,3h),3.36-3.41(m,1h),3.29-3.31(m,2h),2.70(dd,j＝15.5,5.2hz,1h),2.52-2.58(m,1h),2.30-2.47(m,3h),2.19-2.29(m,1h),2.11(dd,j＝13.5,5.5hz,1h),1.97-2.05(m,1h),1.91(dd,j＝13.2,6.1hz,1h),1.67-1.73(m,1h),1.55-1.63(m,2h),
1.47(td,j＝11.6,5.2hz,1h),1.23-1.42(m,3h),0.96(d,j＝7.0hz,3h).
13
c nmr(125mhz,cd3od)δ178.8,150.7,141.4,123.5,110.6,104.3,70.0,63.1,62.4,46.7,46.4,43.9,40.1,39.3,38.4,37.0,32.8,30.9,24.5,23.4,22.2,17.2.hresims m/z:389.1972(calcd.for 389.1970 c
22h29
o6[m-h]-).
[0113]
实施例12：
[0114]
化合物11的制备
[0115][0116]
化合物1(40mg)溶于5ml四氢呋喃溶剂中，加入lialh4(15mg)于室温下2h。向反应液中加入1ml 5％硫酸溶液搅拌5分钟，用乙酸乙酯萃取，萃取液用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得无色油状物。经硅胶柱层析，石油醚:乙酸乙酯＝7:3，得到化合物11(37mg，产率99％)。
[0117]
化合物11：无色油状物；1h nmr(500mhz,cd3od)δ7.19(d,j＝1.6hz,1h),6.15(d,j＝1.6hz,1h),4.61(s,1h),3.82(dd,j＝11.0,2.2hz,1h),3.69-3.74(m,1h),3.57-3.66(m,2h),3.32-3.39(m,2h),3.27-3.32m,2h),3.22(d,j＝10.9hz,1h),2.68(dd,j＝15.5,5.2hz,1h),2.51-2.58(m,1h),2.43(dd,j＝15.4,11.6hz,1h),2.25-2.38(m,2h),2.03-2.12(m,2h),1.76-1.82(m,1h),1.67-1.74(m,1h),1.49-1.65(m,3h),1.43(td,j＝11.6,5.2hz,1h),1.29-1.38(m,1h),1.23-1.28(m,1h),1.18(td,j＝13.5,5.7hz,1h),0.94(d,j＝7.1hz,3h).
13
c nmr(125mhz,cd3od)δ150.8,141.4,123.5,110.6,105.1,69.9,67.4,65.2,62.5,46.2,44.1,40.4,39.8,38.5,38.1,35.7,32.9,31.0,23.5,22.5,22.4,17.2.hresims m/z:399.2145(calcd.for 399.2142 c
22h32
o5na[m na]

).
[0118]
实施例13：
[0119]
化合物12的制备
[0120][0121]
化合物11(15mg)溶于3ml ch2cl2溶液中，于室温下加入乙酸酐(21μl)、三乙胺(31μ
l)、dmap(3.0mg)并室温反应2h。向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液5ml，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和nacl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得无色油状物。经硅胶柱层析，石油醚:乙酸乙酯＝9:1，得到化合物12(13mg，产率76％)。
[0122]
化合物12：无色油状物；1h nmr(500mhz,cd3od)δ7.21(d,j＝1.7hz,1h),6.17(d,j＝1.9hz,1h),4.62(s,1h),4.17-4.24(m,1h),4.11(ddd,j＝12.0,4.1,2.5hz,1h),3.83-3.88(m,2h),3.82(d,j＝11.1hz,1h),3.78(d,j＝11.1hz,1h),3.39-3.48(m,2h),2.69(dd,j＝15.5,5.2hz,1h),2.50-2.57(m,1h),2.44(dd,j＝15.4,11.6hz,1h),2.26-2.35(m,1h),2.06-2.12(m,1h),2.04(s,3h),1.83(dd,j＝12.2,6.1hz,1h),1.66-1.73(m,1h),1.62(s,3h),1.51-1.60(m,2h),1.42-1.49(m,2h),1.25-1.36(m,3h),1.21(td,j＝13.7,5.9hz,1h),0.95(d,j＝7.0hz,3h).
13
c nmr(125mhz,cd3od)δ172.9,172.8,150.8,141.4,123.6,110.7,104.8,69.8,66.7,64.5,64.5,46.5,43.9,40.3,39.6,37.8,37.3,35.9,32.9,30.9,23.3,22.7,22.2,20.7,20.3,17.2.hresims m/z:483.2352(calcd.for 483.2353 c
26h36
o7na[m na]

).
[0123]
实施例14：
[0124]
化合物13的制备
[0125][0126]
化合物10(25mg)溶于2ml ch2cl2溶液中，于室温下加入甲胺盐酸盐(13mg)、三乙胺(26μl)、1-羟基苯并三唑(hobt，17.3mg)、1-乙基-3(3-二甲基丙胺)碳二亚胺(edci,18.4mg)并室温反应5h。向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液5ml，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和nacl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得无色油状物。经硅胶柱层析，石油醚:乙酸乙酯＝6:4，得到化合物13(23mg，产率92％)。
[0127]
化合物13：无色油状物；1h nmr(500mhz,cd3od)δ7.54(q,j＝4.5hz,1h),7.20(d,j＝1.7hz,1h),6.16(d,j＝1.7hz,1h),4.60(s,1h),4.21(dd,j＝11.4,2.5hz,1h),3.74(dt,j＝15.3,5.1hz,1h),3.60-3.67(m,3h),3.39(ddd,j＝10.5,5.7,4.8hz,1h),2.69-2.73(m,1h),2.69(d,j＝4.5hz,3h),2.52-2.57(m,1h),2.31-2.47(m,3h),2.07-2.23(m,2h),1.81-1.94(m,2h),1.68(ddd,j＝12.6,7.5,3.4hz,1h),1.54-1.62(m,2h),1.47(td,j＝11.6,5.2hz,1h),1.33-1.44(m,1h),1.24-1.32(m,2h),0.95(d,j＝7.0hz,3h).
13
c nmr(125mhz,cd3od)δ178.7,150.7,141.2,123.5,110.6,104.3,70.0,63.3,62.4,46.9,46.1,43.9,40.3,39.3,38.5,37.5,32.8,30.9,26.4,24.1,23.5,22.4,17.2.hresims m/z:426.2251(calcd.for 426.2251 c
23h33
no5na[m na]

).
[0128]
实施例15：
[0129]
化合物14的制备
[0130][0131]
化合物10(25mg)溶于2ml ch2cl2溶液中，于室温下加入乙胺盐酸盐(15mg)、三乙胺(26μl)、hobt(17.3mg)、edci(18.4mg)并室温反应5h。向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液5ml，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和nacl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得无色油状物。经硅胶柱层析，石油醚:乙酸乙酯＝6:4，得到化合物14(22mg，产率82％)。
[0132]
化合物14：无色油状物；1h nmr(500mhz,cd3od)δ7.59(t,j＝5.3hz,1h),7.20(d,j＝1.7hz,1h),6.16(d,j＝1.7hz,1h),4.60(s,1h),4.20(dd,j＝11.4,2.5hz,1h),3.74(dt,j＝15.4,5.0hz,1h),3.61-3.66(m,3h),3.38(dt,j＝5.8,5.1hz,1h),3.15-3.22(m,2h),2.70(dd,j＝15.5,5.2hz,1h),2.52-2.58(m,1h),2.30-2.48(m,3h),2.14-2.23(m,1h),2.11(dd,j＝13.5,5.5hz,1h),1.80-1.95(m,2h),1.69(ddd,j＝12.2,7.2,3.1hz,1h),1.55-1.64(m,2h),1.37-1.52(m,2h),1.25-1.35(m,2h),1.09(t,j＝7.4hz,3h),0.95(d,j＝7.0hz,3h).
13
c nmr(125mhz,cd3od)δ177.9,150.7,141.5,123.5,110.6,104.4,70.0,63.4,62.4,46.7,45.9,43.9,40.3,39.2,38.5,37.5,35.1,32.8,30.8,23.9,23.5,22.4,17.2,15.0.hresims m/z:416.2441(calcd.for 416.2422 c
24h34
no5[m-h]-).
[0133]
实施例16：
[0134]
化合物15的制备
[0135][0136]
化合物10(30mg)溶于2ml ch2cl2溶液中，于室温下加入乙胺盐酸盐(15mg)、dipea(42μl)、hobt(21mg)、edci(22mg)并室温反应2h。向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液5ml，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和nacl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得无色油状物。经硅胶柱层析，石油醚:乙酸乙酯＝6:4，得到化合物15(23mg，产率70％)。
[0137]
化合物15：无色油状物；1h nmr(500mhz,cd3od)δ7.59(t,j＝5.5hz,1h),7.20(d,j＝1.7hz,1h),6.16(d,j＝1.7hz,1h),4.60(s,1h),4.20(dd,j＝11.5,2.5hz,1h),3.74(dt,j＝15.4,5.1hz,1h),3.60-3.67(m,2h),3.39(ddd,j＝10.5,5.7,4.8hz,1h),3.12(dt,j＝12.1,6.0hz,2h),2.70(dd,j＝15.5,5.2hz,1h),2.52-2.59(m,1h),2.30-2.47(m,2h),
2.16-2.24(m,1h),2.11(dd,j＝13.6,5.4hz,1h),1.81-1.96(m,2h),1.51-1.71(m,3h),1.25-1.54(m,6h),0.95(d,j＝7.0hz,3h),0.90(t,j＝7.4hz,3h).
13
c nmr(125mhz,cd3od)δ178.1 150.7,141.5,123.5,110.6,104.4,70.0,63.4,62.4,46.7,46.0,43.9,42.1,40.3,39.2,38.5,37.6,32.8,30.8,24.0,23.6,23.5,22.4,17.2,11.8.hresims m/z:454.2568(calcd.for 454.2564 c
25h37
no5na[m na]

).
[0138]
实施例17：
[0139]
化合物1-15对糖异生的抑制作用：
[0140]
(1)实验方法：
[0141]
a、小鼠过夜禁食后经500mg/kg的水合氯醛腹腔注射麻醉后,全身酒精消毒，迅速开腹，门静脉插管固定,用37℃的前灌流液以10～15ml/min灌流，同时剪断下腔静脉，约10mins。
[0142]
b、换含胶原酶的后灌流溶液以5～7ml/min灌流，灌流至肝包膜下组织呈龟背状裂隙或门静脉破裂时中止，时间约15～20min。
[0143]
c、灌流结束后，分离完整肝脏，经mem培养液清洗后置于含相同培液的培养皿中，用镊子撕去肝包膜，用滴管轻轻吹打分散后，100目筛网过滤，将滤液吸到50ml离心管中，离心500rpm，3min，弃上清。
[0144]
d、percoll分离细胞，离心500rpm，5min。吸去上清液和死细胞。加入10％fbsmem培养液(含10nm insulin和10nm dex)悬浮细胞，经0.4％台盼蓝进行细胞活性检测并计数，按7
×
104个/well细胞接种于铺有明胶的48-well培养板中，置于37℃、5％co2培养箱中培养。
[0145]
e、小鼠原代肝细胞培养4h，贴壁后，换入含有不同浓度的化合物、0.1％dmso(溶剂对照)或500μm metformin(阳性对照)的无糖dmem培养液，预处理1.5h后，换入含有或不含有糖异生底物(20mm乳酸钠，2mm丙酮酸钠)及不同浓度的化合物、0.1％dmso(溶剂对照)或500μm metformin(阳性对照)的无糖dmem溶液。37℃孵育4h后，收集培液，检测葡萄糖浓度。同时，用pbs洗细胞3遍后加入0.5m naoh裂解细胞，测定蛋白浓度并经蛋白浓度校正葡萄糖读数后求得单位细胞数所产生葡萄糖的量。
[0146]
(2)实验结果：
[0147]
实验结果表明化合物1-15对肝糖异生具有显著抑制作用，具有治疗2型糖尿病的潜力。
[0148]
表1.本发明化合物对肝细胞糖异生的影响
[0149][0150]a阳性对照二甲双胍500μm时糖异生值为0.57
[0151]
实施例18：
[0152]
片剂的制备：
[0153]
按实施例2-16的方法先制得本发明的上述化合物，按其与赋形剂重量比为1:5-1:10的比例加入赋形剂，制粒压片。
[0154]
实施例19：
[0155]
口服液制剂的制备：
[0156]
按实施例2-16的方法先制得本发明的上述化合物，以及利用碱金属(锂、钠、钾)或碱土金属(钙、镁)、有机酸(酒石酸，柠檬酸，甲酸，乙二酸等)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸等)制成的盐，按常规口服液制法制成口服液。
[0157]
实施例20：
[0158]
胶囊剂、颗粒剂、或冲剂的制备：
[0159]
按实施例2-16的方法先制得本发明的上述化合物，按其与赋形剂重量比为5:1的比例加入赋形剂，制成胶囊或颗粒剂或冲剂。