一种眼用制剂容器中塑料添加剂的检测方法与流程

1.本技术属于药包材相容性分析技术领域，尤其涉及一种眼用制剂容器中塑料添加剂的检测方法。


背景技术：

2.3-(1,1-二甲基乙基)-β-[3-(1,1-二甲基乙基)-4-羟苯基]-4-羟基-β-甲基苯甲酸-1,2-亚乙基酯（塑料添加剂08）和1,1
′‑
二（十八烷基）二硫化物（塑料添加剂15）是药用包材中常见的有害物质。欧洲药典指出，用于注射剂与眼用制剂容器的含聚乙烯材料（包括塑料添加剂08和15）的含量不得超过0.3%。
[0003]
目前，塑料添加剂08和15的检测方法多采用液相uv法或薄层色谱法，但这些方法的准确性较差。同时，塑料添加剂08和15为药品中致突变杂质、质控要求更高，以上对容器中塑料添加剂的限度评估方法已经不足以支撑药品使用安全规范。因此，急需改善药用制剂容器中塑料添加剂检测方法的准确性和检出限，提高药品质量安全。


技术实现要素：

[0004]
有鉴于此，本技术提供了一种眼用制剂容器中塑料添加剂的检测方法，解决现有药用包材中塑料添加剂08和15检测方法准确性、检出限等性能差的问题，能够准确评估眼用制剂容器中塑料添加剂的含量。
[0005]
本技术的具体技术方案如下：本技术提供一种眼用制剂容器中塑料添加剂的检测方法，包括如下步骤：将眼用制剂容器在第一有机溶剂中煮沸、回流，再加入第二有机溶液，过滤，用第一、第二有机溶剂的混合溶剂稀释，得到提取样品；将眼用制剂容器在预设条件下放置一定时间取出内容物，得到迁移样品；取眼用制剂容器的提取样品或迁移样品在水浴中蒸发至干，残留物用萃取溶剂溶解、稀释，采用高效液相色谱分析，其中，采用流动相乙腈-水或甲醇-水分析塑料添加剂08含量，采用流动相正己烷或环己烷分析塑料添加剂15含量。
[0006]
优选地，塑料添加剂08的液相色谱条件为：色谱柱采用c18色谱柱，流动相体积比例为乙腈：水=（70~80）:（20~30），检测波长为260~280nm。
[0007]
优选地，塑料添加剂15的液相色谱条件为：色谱柱采用二氧化硅色谱柱，检测器采用cad检测器，cad雾化器温度60~80℃。
[0008]
优选地，高效液相色谱条件为：柱温为20~30℃，流速为0.5~2 ml/min，进样体积为1~5μl。
[0009]
优选地，萃取试剂选自正己烷、环己烷、四氢呋喃和乙腈中的一种或多种。
[0010]
优选地，塑料添加剂15的萃取试剂为环己烷，塑料添加剂08的萃取试剂为四氢呋喃和乙腈，体积比为（1~2）：1。
[0011]
优选地，第一有机溶液为甲苯，第二有机溶液为甲醇。
[0012]
优选地，第一有机溶剂和第二有机溶剂的体积比为1：（1~2），混合溶剂中第一、第二有机溶剂的体积比为1：（1~2）。
[0013]
优选地，眼用制剂包括玻璃酸钠滴眼液，容器包括低密度聚乙烯药用瓶。
[0014]
优选地，迁移样品的迁移条件为：将眼用制剂容器在温度为20~60℃、湿度为50~80%条件下放置0~24个月。
[0015]
综上所述，本技术提供了一种眼用制剂容器中塑料添加剂的检测方法。本技术的检测方法通过将眼用制剂容器的提取样品或迁移样品用萃取溶剂处理后采用高效液相色谱分析，并对液相色谱条件进行优化，克服了溶剂效应、提高目标峰的分离度，可以用于眼用制剂容器中塑料添加剂08和15含量的检测和安全评估，解决现有检测方法准确性差、灵敏度低的技术问题，能够满足药用包材中塑料添加剂质控的高要求。
附图说明
[0016]
为了更清楚地说明本技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。
[0017]
图1为本技术实施例1中对照品溶液的专属性图谱；图2为本技术实施例1中加标供试品溶液的专属性图谱；图3为本技术实施例2中对照品溶液的专属性图谱；图4为本技术实施例2中加标供试品溶液的专属性图谱；图5为本技术对比例2中加标供试品溶液的检测图谱；图6为本技术对比例3中加标供试品溶液的检测图谱。
具体实施方式
[0018]
为使得本技术的目的、特征、优点能够更加的明显和易懂，对本技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，下面所描述的实施例仅仅是本技术一部分实施例，而非全部的实施例。基于本技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本技术保护的范围。
[0019]
本技术实施例所使用的试剂和原料均为市售或自制。
[0020]
实施例1本技术实施例为玻璃酸钠滴眼液与低密度聚乙烯药用单剂量滴眼剂瓶的提取样品中塑料添加剂15的检测方法，具体步骤如下：1、溶液配制：对照品溶液：精密称取塑料添加剂15对照品25mg，置于10ml容量瓶中，加入萃取试剂环己烷溶解稀释并定容、稀释，即得对照品溶液；供试品溶液：将低密度聚乙烯药用单剂量滴眼剂瓶剪成长宽均不超过1cm的小片。精密称取上述小片约2g，置于玻璃烧瓶中，加入80ml甲苯，煮沸，恒速搅拌回流90min，冷却至60℃，持续搅拌下加入120ml甲醇，用玻璃漏斗过滤，再用甲苯-甲醇（40:60，v/v）混合溶液淋洗烧瓶、漏斗和滤纸，合并滤液和洗液，用甲苯-甲醇（40:60，v/v）混合溶液稀释并定容
至250ml量瓶，摇匀。精密移取上述溶液50ml，在45℃水浴下旋转蒸发至干，残留物用5ml环己烷溶解，即得。
[0021]
加标供试品溶液：取上述残留物适量用稀释后的对照品溶液溶解，配置100%限度浓度的加标供试品溶液。
[0022]
2、液相色谱条件：色谱柱：二氧化硅色谱柱，柱温20℃，流速0.3 ml/min，进样体积1μl，流动相正己烷，cad滤波5.0s，cad雾化器温度70℃。
[0023]
实施例2本技术实施例为玻璃酸钠滴眼液与低密度聚乙烯药用单剂量滴眼剂瓶的提取样品中塑料添加剂08的检测方法，具体步骤如下：1、溶液配制：对照品溶液：精密称取塑料添加剂08对照品25mg，置于10ml容量瓶中，加入萃取试剂四氢呋喃-乙腈（50:50，v/v）溶解稀释并定容、稀释，即得对照品溶液。
[0024]
供试品溶液：将低密度聚乙烯药用单剂量滴眼剂瓶剪成长宽均不超过1cm的小片。精密称取上述小片约2g，置于玻璃烧瓶中，加入80ml甲苯，煮沸，恒速搅拌回流90min，冷却至60℃，持续搅拌下加入120ml甲醇，用玻璃漏斗过滤，再用甲苯-甲醇（40:60，v/v）混合溶液淋洗烧瓶、漏斗和滤纸，合并滤液和洗液，用甲苯-甲醇（40:60，v/v）混合溶液稀释并定容至250ml量瓶，摇匀。精密移取上述溶液50ml，在45℃水浴下旋转蒸发至干，残留物用5ml四氢呋喃-乙腈（50:50，v/v）溶解，即得。
[0025]
加标供试品溶液：取上述残留物适量用稀释后的对照品溶液溶解，配置100%限度浓度的加标供试品溶液。
[0026]
2、液相色谱条件：色谱柱：碳十八色谱柱，柱温30℃，流速2 ml/min，进样体积5μl，检测波长280nm，流动相乙腈-水（70:30）。
[0027]
检测方法验证结果：1、专属性分别取实施例1~2中萃取试剂、对照品溶液、供试品溶液和加标供试品溶液进样检测，考察是否干扰目标峰测定。塑料添加剂08和15的专属性验证图谱分别见图1~4所示，结果表明，塑料添加剂15在13~14min处出峰，塑料添加剂08在23~24min处出峰，加标供试品溶液与对照品溶液的目标峰一致且不受基质环境影响，萃取试剂、供试品溶液对目标峰均无干扰，塑料添加剂08和15的加标供试品溶液的方法专属性均符合要求。
[0028]
2、系统适用性取实施例1~2中对照品溶液注入高效液相色谱仪，计算连续6针对照品溶液各峰面积的相对标准偏差。结果表明，塑料添加剂08对照品rsd为0.31%，塑料添加剂15对照品rsd为0.27%，方法的系统适用性均符合要求。
[0029]
3、线性分别取浓度范围为浓度为24~720
µ
g/ml的塑料添加剂08对照品溶液和浓度范围为24~480
µ
g/ml的塑料添加剂15对照品溶液进样测试，以溶液浓度(
µ
g/ml)为横坐标，峰面积为纵坐标，作标准曲线。结果表明，塑料添加剂08在浓度23.96
µ
g/ml～718.80
µ
g/ml范围内，相关系数r为0.999，大于0.990，满足要求，线性关系良好。塑料添加剂15在浓度23.89~
477.80
µ
g/ml范围内，相关系数r为0.996，大于0.990，满足要求。
[0030]
4、定量限和检测限取实施例1中浓度为1.1980
µ
g/ml对照品溶液作为定量限溶液，连续进样测试6针，信噪比大于11，rsd4.4%。取浓度为0.5990
µ
g/ml对照品溶液作为检测限溶液连续进样测试2针，信噪比大于5.5。
[0031]
取实施例2中浓度为1.4334μg/ml的对照品溶液作为定量限溶液，连续进样测试6针，信噪比最小值为23.6，峰面积rsd不大于5.4%。取浓度为0.7167μg/ml的对照品溶液作为检测限溶液连续进样测试2针，信噪比最小值为26.1。
[0032]
5、准确度分别取实施例1~2中100限度浓度加标供试品溶液，连续上样3次，计算样品回收率。塑料添加剂08的平均回收率为92.82%，rsd为2.56%。塑料添加剂15的平均回收率为90.95%，rsd为0.40%。
[0033]
6、稳定性取实施例1中加标100%限度浓度加标供试品溶液，室温（25℃）下放置5h、36h、43.5h，分别进样，与0h的峰面积比较。结果表明，塑料添加剂08的100%限度浓度加标供试品溶液放置在室温（25℃）下至少43.5个小时稳定。
[0034]
取实施例2中加标100%限度浓度加标供试品溶液，室温（25℃）下放置3h、18h、24h，分别进样，与0h的峰面积比较。结果表明，塑料添加剂15的100%限度浓度加标供试品溶液放置在室温（25℃）下至少24个小时稳定。
[0035]
对比例1参照实施例1中玻璃酸钠滴眼液与低密度聚乙烯药用单剂量滴眼剂瓶的提取样品中塑料添加剂15的检测方法，区别仅在于调整流动相分别为异丙醇、异丙醇：正己烷（10:90，v/v），配置加标供试品溶液上样检测。结果表明，目标峰响应低，基本无出峰，方法不适用。
[0036]
对比例2参照实施例2中玻璃酸钠滴眼液与低密度聚乙烯药用单剂量滴眼剂瓶的提取样品中塑料添加剂08检测方法，区别仅在于调整流动相分别为乙腈-水（90:10），且将甲苯替换为二氯甲烷进行预处理得到提取样品配置加标供试品溶液上样检测。实验图谱见图5所示，结果表明，目标峰的保留时间约为5min，目标峰出峰过早、与溶剂峰相近，影响待测物检测。
[0037]
对比例3参照实施例2中玻璃酸钠滴眼液与低密度聚乙烯药用单剂量滴眼剂瓶的提取样品中塑料添加剂08检测方法，区别仅在于调整流动相分别为乙腈-水（90:10），配置加标供试品溶液上样检测。实验图谱见图6所示，结果表明，目标峰附近有杂质峰，分离度小于1.5，回收率低于50%，方法不适用。
[0038]
以上所述，以上实施例仅用以说明本技术的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本技术进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本技术各实施例技术方案的精神和范围。