一种真菌杀虫剂专用桶混增效助剂及其制备方法

1.本发明属于微生物农药助剂领域，更具体地说，尤其涉及一种真菌杀虫剂专用桶混增效助剂。同时，本发明还涉及一种真菌杀虫剂专用桶混增效助剂的制备方法。


背景技术：

2.真菌杀虫剂是指以昆虫生防真菌活体物质(孢子、孢子菌丝混合体)为活性物经过剂型化加工，通过工业规模生产的可用于防治农林虫害的生物农药商品制剂。生物杀虫剂与传统的广谱化学杀虫剂相比具有公认的生态优势，其对特定的有害昆虫具有高效的生态防控效果，而对生活在同一环境中的其他动植物几乎没有影响。真菌杀虫剂具有寄主范围广、对环境安全、防治害虫不产生抗药性等优点。经过几十年的发展，真菌杀虫剂的应用已成为害虫综合治理的重要组成部分，具有广阔的发展前景。
3.与化学农药相比真菌杀虫剂的剂型加工更加困难。作为生物活体微生物对外界环境因素如温度、湿度和光照等比较敏感，制剂稳定性差，作用速度慢，田间持效短。所以在进行制剂加工中筛选助剂，时除了需要考虑制剂理化性能要求外，还要考虑一些特殊助剂，如防光剂、增效剂、促生助剂等。因此真菌杀虫剂所使用的功能助剂种类较多，其制剂配方通常比化学农药更加复杂。再者，微生物作为活体，与各种助剂的相容性一般比化学农药差，很多化学助剂对杀虫真菌都存在一定的生理毒性，而且这种生理毒性随着接触时间增加而增加，甚至某些助剂可能完全不能使用，因此选择助剂时要注意与活性微生物的相容性，这又极大限制了可用助剂的范围，进一步提高了真菌杀虫剂的研制难度。
4.可见，直接在真菌杀虫剂制剂中使用功能助剂的技术要求苛刻，不仅需要助剂提供有优良的功能性，还需要与真菌繁殖体具备良好的生物相容性，而大部分功能化学助剂很难达到与菌体长期接触毒性低的要求，这极大限制了优良化学功能助剂在真菌杀虫剂中的使用。这一特性不仅提高了成功真菌杀虫剂的研制难度与研制成本，也极大影响了真菌杀虫剂的长期贮存稳定性与田间药效。而将真菌繁殖体与部分功能助剂物理分离，在使用时再混合的桶混助剂技术是解决以上技术瓶颈的思路之一。开发和使用桶混增效助剂可在一定程度上降低助剂生物相容性要求，进而扩大真菌杀虫剂可用功能助剂的范围，可有效避免大部分化学助剂与真菌繁殖体长期接触的生理毒性，是一种较为理想的真菌杀虫剂助剂技术解决方案。
5.综上所述，开发基于广泛的短时接触低毒性评价基础之上的，并能够提供施用后的光保护与增效作用的具有自分散性、高贮存稳定性和方便使用的桶混增效助剂方案是提高真菌杀虫剂制剂性能和田间药效的重要研究方向之一。


技术实现要素：

6.本发明的目的在于提供一种真菌杀虫剂专用桶混增效助剂及其制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
7.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
8.一种真菌杀虫剂专用桶混增效助剂，所述助剂总重为100重量份，其配方组成如下：10～15重量份的光保护剂、1～5重量份的分散剂、0.5～2重量份的润湿剂、5～15重量份的大豆蛋白胨、1～5重量份的低聚糖、0.5～1重量份的壳聚寡糖、0.0.1～0.05重量份的微量元素、0.05～0.2重量份的高分子悬浮助剂、0.5～1.5重量份的ph调节剂以及余量份的去离子水。
9.优选的，所述光保护剂为自分散性水性黄色颜料色浆，具体为浙江纳美新材股份有限公司生产的商品名为黄m-gr和黄m-hr中的一种。
10.优选的，所述分散剂为萘磺酸盐甲醛缩合物类高分子表面活性剂，具体为阿克苏诺贝尔(akzonoble)公司生产的商品名为d-425、d-450、d-400中的一种。
11.优选的，所述润湿剂为水溶性有机硅润湿剂，具体为道康宁(dowcorning)公司生产的商品名为ofx-0193。
12.优选的，所述低聚糖为分子量＜2000da的木低聚糖、蔗糖低聚糖、海藻低聚糖和果糖低聚糖中的一种或几种。
13.优选的，所述微量元素为硫酸锰、硫酸铜和硫酸亚铁中的一种或几种。
14.优选的，所述高分子悬浮助剂为卡波姆940、卡波姆941、卡波姆970中的一种。
15.优选的，所述ph调节剂为三乙醇胺、二乙醇胺和乙醇胺中的一种。
16.一种真菌杀虫剂专用桶混增效助剂的制备方法，包括如下步骤：
17.s1、色浆研磨：按照配方组成以质量计，分别称取颜料色浆、分散剂和润湿剂，先用和颜料色浆等重量份的去离子水溶解分散剂和润湿剂，将其加入颜料色浆并充分搅拌均匀，后将物料置于砂磨时中研磨，砂磨机条件为：研磨锆珠直径为0.2-0.3mm，填充率为70-75％，研磨至颜料粒径d90≤110nm或者d100≤230nm时为止；
18.s2、蛋白胨溶液配制：
19.按照配方组成以质量计，分别称取大豆蛋白胨、低聚糖、壳聚寡糖和微量元素，将大豆蛋白胨加入按照质量比1:3的60-65℃热去离子水中，充分搅拌直至完全溶解，冷却至室温后加入低聚糖、壳聚寡糖和微量元素搅拌直至全部溶解；
20.s3、高分子悬浮助剂溶液配制：
21.按照配方组成以质量计，称取高分子悬浮助剂，将其加入按照质量比1:50的40-45℃热去离子水中并充分混合均匀，边搅拌边加入ph调节剂至ph值为7-8；
22.s4、混合调制：
23.将配制好的高分子悬浮助剂溶液置于搅拌状态下，将研磨好的颜料色浆缓慢加入并搅拌均匀，再将配置好的蛋白胨溶液缓慢加入并搅拌均匀，后边搅拌边加入ph调节剂至物料ph值为7-8，最后加入剩余去离子水至100重量份并搅拌均匀即得到助剂制品。
24.与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明的真菌杀虫剂专用桶混增效助剂主要配合玫烟色虫草和爪哇虫草杀虫剂使用，可在施用后为真菌活体提供光保护与增效作用，具有自分散性好、稳定性高和方便使用等特点，在避免了化学助剂对活菌体的长期接触毒性的同时，可在配合施用后为真菌杀虫剂活体繁殖体提供环境保护与增效等功能，具有促进真菌杀虫剂药效的发挥和延长药效持效期的作用。本发明提供的真菌杀虫剂专用桶混增效助剂生产过程简单、生产成本低，产品具有自分散性好、贮存稳定性高和使用方便的特点。
附图说明
25.图1为本发明颜料色浆黄m-gr对玫烟色虫草if-1106分生孢子的紫外保护作用的谱图；
26.图2为本发明颜料色浆黄m-gr对玫烟色虫草if-1106分生孢子的紫外保护作用的谱图。
具体实施方式
27.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
28.实施例1
29.一种真菌杀虫剂专用桶混增效助剂，所述助剂总重为100重量份，其配方组成如下：10～15重量份的光保护剂、1～5重量份的分散剂、0.5～2重量份的润湿剂、5～15重量份的大豆蛋白胨、1～5重量份的低聚糖、0.5～1重量份的壳聚寡糖、0.0.1～0.05重量份的微量元素、0.05～0.2重量份的高分子悬浮助剂、0.5～1.5重量份的ph调节剂以及余量份的去离子水。
30.所述光保护剂为自分散性水性黄色颜料色浆，具体为浙江纳美新材股份有限公司生产的商品名为黄m-gr和黄m-hr中的一种，所述分散剂为萘磺酸盐甲醛缩合物类高分子表面活性剂，具体为阿克苏诺贝尔(akzonoble)公司生产的商品名为d-425、d-450、d-400中的一种，所述润湿剂为水溶性有机硅润湿剂，具体为道康宁(dowcorning)公司生产的商品名为ofx-0193，所述低聚糖为分子量＜2000da的木低聚糖、蔗糖低聚糖、海藻低聚糖和果糖低聚糖中的一种或几种，所述微量元素为硫酸锰、硫酸铜和硫酸亚铁中的一种或几种，所述高分子悬浮助剂为卡波姆940、卡波姆941、卡波姆970中的一种，所述ph调节剂为三乙醇胺、二乙醇胺和乙醇胺中的一种。
31.一种真菌杀虫剂专用桶混增效助剂的制备方法，包括如下步骤：
32.s1、色浆研磨：按照配方组成以质量计，分别称取颜料色浆、分散剂和润湿剂，先用和颜料色浆等重量份的去离子水溶解分散剂和润湿剂，将其加入颜料色浆并充分搅拌均匀，后将物料置于砂磨时中研磨，砂磨机条件为：研磨锆珠直径为0.2-0.3mm，填充率为70-75％，研磨至颜料粒径d90≤110nm或者d100≤230nm时为止；
33.s2、蛋白胨溶液配制：
34.按照配方组成以质量计，分别称取大豆蛋白胨、低聚糖、壳聚寡糖和微量元素，将大豆蛋白胨加入按照质量比1:3的60-65℃热去离子水中，充分搅拌直至完全溶解，冷却至室温后加入低聚糖、壳聚寡糖和微量元素搅拌直至全部溶解；
35.s3、高分子悬浮助剂溶液配制：
36.按照配方组成以质量计，称取高分子悬浮助剂，将其加入按照质量比1:50的40-45℃热去离子水中并充分混合均匀，边搅拌边加入ph调节剂至ph值为7-8；
37.s4、混合调制：
38.将配制好的高分子悬浮助剂溶液置于搅拌状态下，将研磨好的颜料色浆缓慢加入并搅拌均匀，再将配置好的蛋白胨溶液缓慢加入并搅拌均匀，后边搅拌边加入ph调节剂至
物料ph值为7-8，最后加入剩余去离子水至100重量份并搅拌均匀即得到助剂制品。
39.本实施例采用的助剂配方为13重量份的黄m-2g、5重量份的d-425、1重量份的ofx-0193、10重量份的大豆蛋白胨、1重量份的海藻低聚糖、1重量份的蔗糖低聚糖、1重量份的壳聚寡糖、0.01重量份的硫酸锰、0.01重量份的硫酸铜、0.01重量份的硫酸亚铁、0.1重量份的卡波姆940、1.2重量份的三乙醇胺以及66.67重量份的去离子水。
40.按照以上配方组成，先用13重量份的去离子水溶解d-425和ofx-0193，将其加入黄m-2g并充分搅拌均匀，后将物料置于砂磨时中研磨，砂磨机条件为：研磨锆珠直径0.2-0.3mm，填充率75％，研磨至颜料粒径d90≤110nm或者d100≤230nm时为止，得到颜料色浆。将大豆蛋白胨加入到30重量份的60-65℃热去离子水中，充分搅拌直至完全溶解，冷却至室温后加入海藻低聚糖、蔗糖低聚糖、壳聚寡糖、硫酸锰、硫酸铜、硫酸亚铁，充分搅拌直至全部溶解，得到蛋白胨溶液。将卡波姆940加入按照5重量份的40-45℃热去离子水中并充分混合均匀，边搅拌边加入三乙醇胺至ph值为7-8，得到卡波姆940溶液。搅拌状态下，将研磨好的颜料色浆缓慢加入卡波姆940溶液并搅拌均匀，再将蛋白胨溶液缓慢加入并搅拌均匀，后边搅拌边加入三乙醇胺至物料ph值为7-8，最后加入剩余去离子水至100重量份并搅拌均匀即得到助剂制品。
41.实施例2
42.本实施例是在实施例1的基础上，与实施例1的区别在于：
43.本实施例采用的助剂配方为10重量份的黄m-2g、3重量份的d-425、0.5重量份的ofx-0193、15重量份的大豆蛋白胨、2重量份的海藻低聚糖、1重量份的壳聚寡糖、0.01重量份的硫酸锰、0.01重量份的硫酸铜、0.01重量份的硫酸亚铁、0.1重量份的卡波姆970、1.5重量份的乙醇胺以及66.87重量份的去离子水。
44.按照以上配方组成，先用10重量份的去离子水溶解d-450和ofx-0193，将其加入黄m-2g并充分搅拌均匀，后将物料置于砂磨时中研磨，砂磨机条件为：研磨锆珠直径0.2-0.3mm，填充率75％，研磨至颜料粒径d90≤110nm或者d100≤230nm时为止，得到颜料色浆。将大豆蛋白胨加入到45重量份的60-65℃热去离子水中，充分搅拌直至完全溶解，冷却至室温后加入海藻低聚糖、壳聚寡糖、硫酸锰、硫酸铜、硫酸亚铁，充分搅拌直至全部溶解，得到蛋白胨溶液。将卡波姆970加入按照5重量份的40-45℃热去离子水中并充分混合均匀，边搅拌边加入乙醇胺至ph值为7-8，得到卡波姆970溶液。搅拌状态下，将研磨好的颜料色浆缓慢加入卡波姆970溶液并搅拌均匀，再将蛋白胨溶液缓慢加入并搅拌均匀，后边搅拌边加入乙醇胺至物料ph值为7-8，最后加入剩余去离子水至100重量份并搅拌均匀即得到助剂制品。
45.实施例3
46.本实施例是在实施例1的基础上，与实施例1的区别在于：
47.本实施例采用的助剂配方为15重量份的黄m-hr、3重量份的d-425、0.5重量份的ofx-0193、12重量份的大豆蛋白胨、2重量份的海藻低聚糖、1重量份的果糖低聚糖、0.5重量份的壳聚寡糖、0.01重量份的硫酸锰、0.01重量份的硫酸铜、0.02重量份的硫酸亚铁、0.15重量份的卡波姆941、1.5重量份的三乙醇胺以及64.31重量份的去离子水。
48.按照以上配方组成，先用15重量份的去离子水溶解d-425和ofx-0193，将其加入黄m-hr并充分搅拌均匀，后将物料置于砂磨时中研磨，砂磨机条件为：研磨锆珠直径0.2-0.3mm，填充率75％，研磨至颜料粒径d90≤110nm或者d100≤230nm时为止，得到颜料色浆。
将大豆蛋白胨加入36重量份的60-65℃热去离子水中，充分搅拌直至完全溶解，冷却至室温后加入海藻低聚糖、果糖低聚糖、壳聚寡糖、硫酸锰、硫酸铜、硫酸亚铁，充分搅拌直至全部溶解，得到蛋白胨溶液。将卡波姆941加入按照7.5重量份的40-45℃热去离子水中并充分混合均匀，边搅拌边加入三乙醇胺至ph值为7-8，得到卡波姆941溶液。搅拌状态下，将研磨好的颜料色浆缓慢加入卡波姆941溶液并搅拌均匀，再将蛋白胨溶液缓慢加入并搅拌均匀，后边搅拌边加入三乙醇胺至物料ph值为7-8，最后加入剩余去离子水至100重量份并搅拌均匀即得到助剂制品。
49.实施例4
50.本实施例是在实施例1的基础上，与实施例1的区别在于：
51.本实施例采用的助剂配方为15重量份的黄m-hr、5重量份的d-400、1重量份的ofx-0193、10重量份的大豆蛋白胨、1重量份的海藻低聚糖、0.5重量份的木低聚糖、0.5重量份的果糖低聚糖、0.8重量份的壳聚寡糖、0.01重量份的硫酸铜、0.01重量份的硫酸亚铁、0.1重量份的卡波姆940、1.2重量份的二乙醇胺以及66.67重量份的去离子水。
52.按照以上配方组成，先用15重量份的去离子水溶解d-400和ofx-0193，将其加入黄m-hr并充分搅拌均匀，后将物料置于砂磨时中研磨，砂磨机条件为：研磨锆珠直径0.2-0.3mm，填充率75％，研磨至颜料粒径d90≤110nm或者d100≤230nm时为止，得到颜料色浆。将大豆蛋白胨加入20重量份的60-65℃热去离子水中，充分搅拌直至完全溶解，冷却至室温后加入海藻低聚糖、木低聚糖、果糖低聚糖、壳聚寡糖、硫酸铜、硫酸亚铁，充分搅拌直至全部溶解，得到蛋白胨溶液。将卡波姆940加入按照5重量份的40-45℃热去离子水中并充分混合均匀，边搅拌边加入二乙醇胺至ph值为7-8，得到卡波姆940溶液。搅拌状态下，将研磨好的颜料色浆缓慢加入卡波姆940溶液并搅拌均匀，再将蛋白胨溶液缓慢加入并搅拌均匀，后边搅拌边加入三乙醇胺至物料ph值为7-8，最后加入剩余去离子水至100重量份并搅拌均匀即得到助剂制品。
53.本发明提供的真菌杀虫剂专用桶混增效助剂生产过程简单、生产成本低，产品具有自分散性好、贮存稳定性高和使用方便的特点。该制品配合真菌杀虫剂施用，可为真菌活体提供环境光保护、低湿度下的萌发促进与生长所需营养物质等功能，具有促进真菌杀虫剂药效的发挥和延长药效持效期的作用。
54.其主要性能指标请参阅表1；
55.表1本发明的主要技术指标
56.性能指标指标值d90≤110nmph值7-8紫外保护作用值650-800
57.为了对本发明进行进一步的说明，但不限于本发明，从以下四个试验进行验证：
58.1、有机黄颜料分散体系对菌株孢子紫外保护作用
59.以uv-b(波长312nm)2j/cm2辐照后孢子的萌发率为评价指标筛选和明确有机黄颜料的紫外保护作用，具体试验方法为：将加入相应粒径和浓度的紫外保护剂的孢子浓度为5
×
105孢子/ml孢子悬浮液置于uv-b(312nm)紫外灯下进行辐照后取1μl于pda平板上，再加1ml无菌水，用涂布器涂布均匀置于25℃培养箱培养。培养72h后记录萌发后产生的单个菌
落数量，每个处理3次重复，计算孢子萌发率。
60.请参阅图1中颜料色浆黄m-gr对玫烟色虫草if-1106分生孢子的紫外保护作用以及图2中颜料色浆黄m-gr对玫烟色虫草if-1106分生孢子的紫外保护作用，图1中研磨前(d90≤300nm)，图2中研磨后(d90≤110nm)；
61.结果显示：颜料色浆黄m-gr对玫烟色虫草if-1106气生孢子具有明显的紫外保护作用，同时研磨后的保护效果明显高于研磨前，研磨后(粒径d90≤110nm)体系中颜料浓度为5mg/l是时的紫外保护效果最好(孢子萌发率达到87.45％)。
62.2、2、助剂的紫外保护作用评价
63.3、分别使用含2％葡萄糖和1％的蛋白胨的萌发洗脱液和实施例一助剂制品稀释10000倍并加入2％葡萄糖和1％的蛋白胨的助剂测定液，配制孢子玫烟色虫草if-1106孢子悬浮液，使孢子浓度达到在显微镜下(10
×
40)每个视场有50个孢子左右。将以上孢子悬浮液在uv-b(波长312nm)下辐照剂量为2j/cm2，之后将孢子悬浮液置于25℃的培养箱中恒温培养12h后，镜检其孢子存活率。每个处理4次重复，每次观察3个视场，记录视场内的孢子萌发数和总孢子数，计算孢子存活率。以p＝(f
a-f0)/f0×
100，计算助剂的紫外保护作用值，其中fa为加入助剂孢子悬浮液紫外辐照后的萌发率，f0为加入助剂孢子悬浮液紫外辐照后的萌发率，请参阅表2中助剂的紫外保护作用表格：
64.4、表2助剂的紫外保护作用
[0065][0066][0067]
结果显示：在室内条件下，配合使用助剂后，经uv-b(波长312nm)2j/cm2剂量能量辐照后，玫烟色虫草if-1106孢子的萌发率较未使用助剂对照大幅提高，表明该助剂制品对菌株孢子具有良好的紫外保护作用。
[0068]
3、室内生测增效作用评价
[0069]
分别以0.1％吐温-80的无菌水和实施例一助剂制品10000倍稀释灭菌液，配制106、107和108孢子/ml玫烟色虫草if-1106和爪哇虫草ij-tg19菌株气生孢子悬浮液。使用喉头喷雾器将不同浓度孢子悬浮液均匀喷至皿中(每皿放置消毒新鲜甘蓝叶片，叶片上接入20头同日龄新蜕桃蚜无翅成蚜)，共喷雾20次，用封口膜将培养皿封口。每个处理20头成蚜，重复5次，并以0.1％tween-80溶液喷雾作为空白对照处理。喷雾接种后置于光照培养箱(25
℃，12l:12d)饲养。逐天记录亡蚜数，并计算累计校正死亡率和致死剂量效应值。
[0070]
请参阅表3助剂的室内生测增效作用进行结果分析；
[0071]
表3助剂的室内生测增效作用
[0072][0073]
结果显示：在室内条件下，配合使用助剂后的两种杀虫真菌孢子悬浮液的杀虫药效和致死速率明显提高，表明该助剂制品有一定促进杀虫药效的作用。
[0074]
4、助剂田间施用效果评价
[0075]
采用自制玫烟色虫草可湿性粉剂配制孢子浓度为5
×
10 7孢子/ml的喷雾液，并在喷雾液中加入本助剂制品(稀释10000倍)，制得1#-5#测试喷雾液。所有喷雾液均配制5l，喷施前要将药液搅拌均匀。试验用背负式电动喷雾器均匀喷雾，共施药2次，第1次和第1次施药后3d。试验共调查3次结果，分别是在第一次施药后3d、7d、14d各调查一次残留活虫数，在施药前需要记录取样样本的虫口基数。调查方法：将每一个处理分为上下两个取样区，在每个取样区用5点取样法，在每一个点里选取2株植物样本，每次都查全株虫口数，采取每次定点查样。采用以下公式计算虫口减退率和防治效果：
[0076]
虫口减退率＝(施药前活虫数-施药后活虫数)/施药前活虫数
×
100
[0077]
防治效果＝(药剂处理区虫口减退率-空白对照区虫口减退率)/(100-空白对照区虫口减退率)
×
100；
[0078]
具体请参阅表4中发明助剂制品配合玫烟色虫草可湿性粉剂防治温室蚜虫田间药效测定；
[0079]
表4发明助剂制品配合玫烟色虫草可湿性粉剂防治温室蚜虫田间药效测定
[0080][0081]
结果显示：玫烟色虫草可湿性粉剂配合助剂后，防治效果明显提高，尤其是在施药
中后前期，可以有效提高真菌杀虫剂对蚜虫的防治效果。
[0082]
综上，本发明在于获得一种与玫烟色虫草和爪哇虫草真菌杀虫剂配合使用的，可在施用后为真菌杀虫剂活体繁殖体提供环境光保护和增效功能，达到促进真菌杀虫剂药效的发挥和延长药效持效作用的真菌杀虫剂专用桶混增效助剂；本发明的还在于获得一种与玫烟色虫草和爪哇虫草真菌杀虫剂配合使用的，可在施用后为真菌杀虫剂活体繁殖体提供环境光保护和增效功能，达到促进真菌杀虫剂药效的发挥和延长药效持效作用的真菌杀虫剂专用桶混增效助剂的制备方法；本发明还在于获得一种与玫烟色虫草和爪哇虫草真菌杀虫剂配合使用的，可在施用后为真菌杀虫剂活体繁殖体提供环境光保护和增效功能，达到促进真菌杀虫剂药效的发挥和延长药效持效作用的真菌杀虫剂专用桶混增效助剂制品。
[0083]
本发明的真菌杀虫剂专用桶混增效助剂生产过程简单、生产成本低，产品具有自分散性好、贮存稳定性高和使用方便的特点。该制品配合真菌杀虫剂施用，可为真菌活体提供环境光保护、低湿度下的萌发促进与生长所需营养物质等功能，具有促进真菌杀虫剂药效的发挥和延长药效持效期的作用。
[0084]
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。