一种人参的提取方法与流程

一种人参的提取方法
1.本发明属于天然产物的提取方法，特别涉及利用复合酶处理人参的加工方法。


背景技术：

2.人参(panax ginseng)属于五加科人参属中的多年生草本植物。人参属包括大约14种具肉质根的缓慢生长的多年生植物，如大叶三七、假人参、姜状三七、三七、西洋参等，属于名贵药用植物。自古以来，人参的干燥根就已在中国，日本和韩国等国家用作治疗药物和保健补品。人参根含有人参皂苷、聚乙炔、多酚化合物、酸性多糖等多种活性物质，具有抗肿瘤、缓解炎症、降血糖、提高免疫力等多种生理功能。
3.其中，人参皂苷被认为是人参中最具有功能价值的组分，也是评价人参功效的重要指标。人参皂苷在人参中含量不一，一些人参皂苷在人参中含量较高，如rb1、rg1、re等；而一些含量相对较低的人参皂苷，如rd、rh1、rh2、ck 等，虽然含量少但是功能强大。根据人参中不同人参皂苷的含量多少，可分为主要人参皂苷和稀有人参皂苷，天然状态下某些含量较高的人参皂苷即为主要人参皂苷(rb1、rb2、rc)；天然状态下某些含量极为稀少的人参皂苷即为稀有人参皂苷(rd、rg3、rh2、f2、ck、rg2、rh1、f1)，稀有人参皂苷在未经处理的人参中含量几乎为零，因此主要人参皂苷向较小的去糖基化皂苷的转化是必要的。
4.目前，许多研究都集中在使用理化方法转化主要人参皂苷为稀有人参皂苷，相比之下，已经提出的生物学转化方法具有良好的针对性，缓和的反应条件，环境相容性以及工业应用的便利性。现代生物学转化方法包括酶转化和微生物转化。微生物转化法的反应条件温和、专一性好，但是由于有复杂的酶系和微生物生长的代谢作用，副产物较多；而酶转化法具有专一性强，副产物少，转化周期短等优势。
5.因此，亟需开发一种人参的酶法提取技术，以促进主要人参皂苷向稀有人参皂苷转化，提高稀有人参皂苷的含量；同时使多糖含量增加，从而最大化其利用价值。


技术实现要素：

6.为了解决利用传统加工工艺生产的人参制品中，稀有人参皂苷含量低，生物利用率低等问题，本发明提供了一种采用酶转化法，即利用复合酶加工人参的方法。
7.第一方面，本发明提供了一种复合酶制剂，包含纤维素酶、木瓜蛋白酶、复合果胶酶x，可用于加入人参悬浮液中，加工制备人参。
8.进一步地，所述纤维素酶重量百分比为0.05％～0.30％；木瓜蛋白酶重量百分比为0.05％～0.30％；复合果胶酶x体积百分比为1％～6％。
9.优选地，所述纤维素酶的重量百分比为0.15～0.30％；木瓜蛋白酶重量百分比为0.15％～0.30％；复合果胶酶x体积百分比为3％～5％。
10.最优选地，所述纤维素酶的重量百分比为0.20％；木瓜蛋白酶重量百分比为 0.20％；复合果胶酶x体积百分比为4％。
11.第二方面，本发明提供了第一方面所述复合酶制剂在加工制备人参中的应用，其特征在于，所述复合酶制剂包含纤维素酶、木瓜蛋白酶、复合果胶酶x。
12.进一步地，所述纤维素酶重量百分比为0.05％～0.30％；木瓜蛋白酶重量百分比为0.05％～0.30％；复合果胶酶x体积百分比为1％～6％。
13.优选地，所述纤维素酶的重量百分比为0.15～0.30％；木瓜蛋白酶重量百分比为0.15％～0.30％；复合果胶酶x体积百分比为3％～5％。
14.最优选地，所述纤维素酶的重量百分比为0.20％；木瓜蛋白酶重量百分比为 0.20％；复合果胶酶x体积百分比为4％。
15.第三方面，本发明提供了一种利用复合酶制剂制备人参的方法，其特征在于，包括如下步骤：
16.(1)粉碎：将人参破碎成为小块，然后用粉碎机粉碎成为粉末；
17.(2)制备人参悬浊液：称取一定量人参粉末加入水中，搅拌均匀得人参悬浊液；
18.(3)复合酶处理：将上述人参悬浊液灭菌，投入复合酶酶解之后进行灭酶处理；
19.(4)真空冷冻干燥：将步骤(3)所得酶解后人参悬浊液冻干成粉末，即得复合酶加工后的人参；
20.进一步地，所述步骤(3)中复合酶包含包含纤维素酶、木瓜蛋白酶、复合果胶酶x。
21.优选地，所述步骤(3)中纤维素酶重量百分比为0.05％～0.30％；木瓜蛋白酶重量百分比为0.05％～0.30％；复合果胶酶x体积百分比为1％～6％。
22.进一步优选地，所述纤维素酶的重量百分比为0.15～0.30％；木瓜蛋白酶重量百分比为0.15％～0.30％；复合果胶酶x体积百分比为3％～5％。
23.最优选地，所述纤维素酶的重量百分比为0.20％；木瓜蛋白酶重量百分比为0.20％；复合果胶酶x体积百分比为4％。
24.本发明的有益效果：
25.1、本发明通过综合利用物理和生物技术进行人参的加工处理，物理粉碎后使用生物复合酶加工人参。整株干人参被粉碎后，后续复合酶可以更好地发挥作用，从而促进营养物质快速释放。且使用该方法加工后的人参可以直接食用，易于人体对有效成分的吸收利用。
26.2、本发明通过使用纤维素酶、木瓜蛋白酶、复合果胶酶x三种酶作为复合酶剂，破坏了植物细胞具有的天然屏障系统，使得人参中含有的纤维素、半纤维素、果胶质、蛋白质等被复合酶降解，有利于人参中其他有效成分的释放，产生了更多生物活性小分子，如人参多糖，从而解决了未处理人参中稀有人参皂苷含量低的问题，促进了主要人参皂苷向稀有人参皂苷的转化。
27.3、采用本发明制备的人参中人参皂苷总量增加，由1.539mg/g增加至2.336mg/g；且人参皂苷rd增加5倍；人参多糖含量也有增加，由于稀有人参皂苷具有比主要人参皂苷更高的药理活性，该制品为更好地发挥人参抗肿瘤、治疗肠炎、调节肠道菌群、提高免疫力的作用提供了物质基础，具有更高的药用价值。
附图说明
28.说明书附图
29.图1.纤维素酶添加量对人参总糖含量的影响。
30.图2.木瓜蛋白酶添加量对人参总糖含量的影响。
31.图3.复合果胶酶x添加量对人参总糖含量的影响。
32.图4.复合酶处理时间对人参总糖含量的影响。
33.图5.酶处理后人参中人参皂苷薄层层析分析，1为实施例1制备的人参，2为实施例2制备的人参，3为实施例3制备的人参，4为实施例制备的人参，5为实施例5制备的人参。
34.图6.复合酶加工人参后人参皂苷hplc分析。
实施例
35.下面实施例用于说明本发明，但是本发明并不限于下述实施例。
36.实施例1、未经复合酶加工制备的人参
37.取干净、晒干的4～5年人参，将人参破碎成为小块，然后用粉碎机粉碎成为粉末，并过20～40目筛；称取一定量人参粉末，按照料液比为1:20，加入水中，搅拌均匀得人参悬浊液；将上述人参悬浊液高温高压灭菌后加入10％na2co3 调整ph至6.4，保持温度37℃，于37℃恒温震荡培养箱中处理，设置转速200rpm，处理2h之后进行灭酶处理；通过真空冷冻干燥，人参悬浊液冻干成粉末，得未经复合酶加工后的人参。
38.实施例2、纤维素酶加工制备人参
39.取干净、晒干的4～5年人参，将人参破碎成为小块，然后用粉碎机粉碎成为粉末，并过20～40目筛；称取一定量人参粉末，按照料液比为1:20，加入水中，搅拌均匀得人参悬浊液；将上述人参悬浊液高温高压灭菌后加入10％na2co3 调整ph至6.4，保持温度37℃，将纤维素酶按照重量百分比0.05％、0.10％、0.15％、 0.20％、0.25％、0.30％分别加入到人参悬浊液，于37℃恒温震荡培养箱中处理，设置转速200rpm，酶解2h之后进行灭酶处理；通过真空冷冻干燥，人参悬浊液冻干成粉末，得纤维素酶加工后的人参。根据糖含量变化，确定纤维素酶添加量，结果如图1所示，分析表明纤维素酶最优加酶量为0.20％。
40.实施例3、木瓜蛋白酶加工制备人参
41.取干净、晒干的4～5年人参，将人参破碎成为小块，然后用粉碎机粉碎成为粉末，并过20～40目筛；称取一定量人参粉末，按照料液比为1:20，加入水中，搅拌均匀得人参悬浊液；将上述人参悬浊液高温高压灭菌后加入10％na2co3 调整ph至6.4，保持温度37℃，将木瓜蛋白酶按照重量百分比0.05％、0.10％、 0.15％、0.20％、0.25％、0.30％分别加入到人参悬浊液，于37℃恒温震荡培养箱中处理，设置转速200rpm，酶解2h之后进行灭酶处理；通过真空冷冻干燥，人参悬浊液冻干成粉末，得木瓜蛋白酶加工后的人参。根据糖含量变化，确定木瓜蛋白酶添加量，结果如图2所示，分析表明木瓜蛋白酶的最优加酶量为0.20％。
42.实施例4、复合果胶酶x加工制备人参
43.取干净、晒干的4～5年人参，将人参破碎成为小块，然后用粉碎机粉碎成为粉末，并过20～40目筛；称取一定量人参粉末，按照料液比为1:20，加入水中，搅拌均匀得人参悬浊液；将上述人参悬浊液高温高压灭菌后加入10％na2co3 调整ph至6.4，保持温度37℃，将复合果胶酶x按照体积百分比1％、2％、3％、 4％、5％、6％分别加入到人参悬浊液，于37℃恒温震荡培养箱中处理，设置转速200rpm，酶解2h之后进行灭酶处理；通过真空冷冻干燥，人参悬浊液冻干成粉末，得复合果胶酶x加工后的人参。根据糖含量变化，确定复合果胶酶x添加量，结果如图3所示，分析表明复合果胶酶x最优加酶量为4％。
44.实施例5：复合酶加工制备人参
结果如图6所示。
53.表1复合酶加工人参后人参皂苷含量
[0054][0055]
分析hplc结果可发现，未经复合酶加工的人参含有的人参皂苷主要是re、 rg1、rb1、rc、rg2、rb2、rd，复合酶加工后增加了re&rg1、rg2&rb2、rd、 rg3和总苷的含量，降低了rc含量。其中，人参皂苷rd含量增加约5倍，总苷含量增加约1.5倍，表明复合酶加工可以促进人参皂苷发生有益转化。