双佐剂自载体原位纳米疫苗及其制备方法

技术特征：
1.一种双佐剂自载体原位纳米疫苗，其特征在于，所述双佐剂自载体原位纳米疫苗具有通过两亲性单体分子自组而成的球状结构，所述两亲性单体分子包含依次连接的疏水性佐剂分子、亲水性佐剂分子、微环境响应性连接分子和亲水性化疗药物分子，所述疏水性佐剂分子在所述球状结构的内侧，所述亲水性化疗药物分子在所述球状结构的外侧。2.根据权利要求1所述的双佐剂自载体原位纳米疫苗，其特征在于，所述亲水性佐剂分子包含cpg odn、qs21、il-1、il-2和ifn-γ中的一种或多种；或/和，所述亲水性化疗药物分子包含阿霉素、柔红霉素、米托蒽醌、博来霉素和环磷酰胺中的一种或者多种；或/和，所述微环境响应性连接分子包含基质金属蛋白酶响应性多肽、分子谷胱甘肽响应性分子、酶解α-乳白蛋白多肽分子和h2o2响应性分子中的一种或者多种；或/和，所述疏水性佐剂分子包含单磷脂酰a、r848和咪喹莫特中的一种或多种。3.根据权利要求1或者2所述的双佐剂自载体原位纳米疫苗，其特征在于，所述亲水性佐剂分子和所述微环境响应性连接分子之间的连接键为酰胺键或者二硫键。4.权利要求1至3任一项所述的双佐剂自载体原位纳米疫苗的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括制备所述两亲性单体分子以及所述两亲性单体分子自组装成所述双佐剂自载体原位纳米疫苗的步骤。5.根据权利要求4所述的双佐剂自载体原位纳米疫苗的制备方法，其特征在于，制备所述两亲性单体分子的步骤包括：将所述亲水性化疗药物分子连接在所述微环境响应性连接分子上，制备连接产物ⅰ；在所述连接产物ⅰ上连接所述亲水性佐剂分子，制备连接产物ⅱ；将所述疏水性佐剂分子连接在所述连接产物ⅱ上，制备所述两亲性单体分子。6.根据权利要求5所述的双佐剂自载体原位纳米疫苗的制备方法，其特征在于，将所述亲水性化疗药物分子连接在所述微环境响应性连接分子上的步骤包括：所述微环境响应性连接分子和活化剂a反应，制备活化产物a，所述活化产物a和所述亲水性化疗药物分子反应，制备所述连接产物ⅰ。7.根据权利要求6所述的双佐剂自载体原位纳米疫苗的制备方法，其特征在于，制备所述活化产物a的步骤中，所述活化剂a包含质量比为(0.9-1.3):(0.2-0.4)的1,2-二氯乙烷和n-羟基丁二酰亚胺，或/和，反应的条件包括：温度为22℃-28℃，时长为1.5h-2.5h。8.根据权利要求5至7任一项所述的双佐剂自载体原位纳米疫苗的制备方法，其特征在于，将所述疏水性佐剂分子连接在所述连接产物ⅱ上的步骤包括：所述疏水性佐剂分子和活化剂b反应，制备活化产物b；所述化产物b和所述连接产物ⅱ反应，制备所述两亲性单体分子。9.根据权利要求8所述的双佐剂自载体原位纳米疫苗的制备方法，其特征在于，制备所述活化产物b的步骤中，所述活化剂b包含n,n'-羰基二咪唑；或/和，反应的条件包括：温度为22℃-28℃，时长为1.5h-2.5h。10.根据权利要求5至7以及9任一项所述的双佐剂自载体原位纳米疫苗的制备方法，其特征在于，在所述连接产物ⅰ上连接所述亲水性佐剂分子的步骤包括：所述连接产物ⅰ和交联剂反应，制备连接产物
ⅱ’
；所述连接产物
ⅱ’
和经巯基修饰的所述亲水性佐剂分子反应，制备连接产物ⅱ。
11.根据权利要求10所述的双佐剂自载体原位纳米疫苗的制备方法，其特征在于，所述连接产物
ⅱ’
的制备步骤中，所述交联剂包含琥珀酰亚胺3-(2-吡啶基二硫基)-丙酸酯，或/和，所述连接产物ⅰ和所述琥珀酰亚胺3-(2-吡啶基二硫基)-丙酸酯的质量比为1:(1-2)；或/和，反应的条件包括：温度为22℃-28℃，时长为5h-7h；或/和，所述连接产物
ⅱ’
和经巯基修饰的所述亲水性佐剂分子的质量比＞10。

技术总结
本发明涉及一种双佐剂自载体原位纳米疫苗及其制备方法，双佐剂自载体原位纳米疫苗具有通过两亲性单体分子自组而成的球状结构，两亲性单体分子包含依次连接的疏水性佐剂分子、亲水性佐剂分子、微环境响应性连接分子和亲水性化疗药物分子，疏水性佐剂分子在球状结构的内侧，亲水性化疗药物分子在球状结构的外侧。本发明的双佐剂自载体原位纳米疫苗，不需要其它高分子材料的介入。而且，该原位纳米疫苗的内核是由双佐剂形成的球形核苷酸纳米颗粒，可高效刺激机体免疫反应的产生。采用该新的连接策略制备的双佐剂自载体原位纳米疫苗，粒径控制在200-300nm，更易于在肿瘤部位蓄积，有利于原位纳米疫苗产生更强的抗肿瘤效果。原位纳米疫苗产生更强的抗肿瘤效果。原位纳米疫苗产生更强的抗肿瘤效果。


技术研发人员：刘兰霞 冷希岗 马兵
受保护的技术使用者：中国医学科学院生物医学工程研究所
技术研发日：2021.12.20
技术公布日：2022/4/8