一种总胆红素测定试剂、试剂球的制备方法及测定芯片与流程

1.本技术实施例涉及检测试剂技术领域，尤其涉及一种总胆红素测定试剂、试剂球的制备方法及测定芯片。


背景技术：

2.总胆红素是人体内由血红素代谢产生的结合型和非结合型胆红素的总称，包括直接胆红素和间接胆红素。总胆红素是临床上判定黄疸的重要依据，也是测定肝、胆功能的重要指标。
3.目前，临床上测定血清总胆红素的方法主要有重氮盐法和化学氧化法。重氮盐法试剂必须由亚硝酸钠和氨基磺酸临时配制，易丧失稳定性且保存时间较短。化学氧化法有钒酸盐氧化法和亚硝酸盐氧化法。钒酸盐氧化法试剂易受谷丙氨酸等物质的干扰，且钒离子为重金属，易污染环境。亚硝酸盐氧化法易受游离胆红素、δ-胆红素等的干扰。以上方法的测定结果都不够准确。


技术实现要素：

4.本技术实施例提供一种总胆红素测定试剂、试剂球的制备方法及测定芯片，测定结果的准确度高。
5.第一方面，本技术实施例中提供了一种总胆红素测定试剂，包括以下组分：
[0006][0007]
在一些实施例中，所述缓冲液包括三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液、4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液和n-氨基甲酰甲基乙磺酸缓冲液中的至少一种。
[0008]
在一些实施例中，所述赋形剂包括peg3350、peg8000、葡聚糖1万、葡聚糖4万、海藻糖、水溶性淀粉和甘露醇中的至少一种。
[0009]
在一些实施例中，所述稳定剂包括牛血清白蛋白、聚乙烯吡咯烷酮k30和氯化钾中的至少一种。
[0010]
在一些实施例中，所述表面活性剂包括曲拉通x-100、失水山梨醇月桂酸酯、碳酸钠和胆酸中的至少一种。
[0011]
在一些实施例中，所述试剂的ph值范围为7.0-7.5。
[0012]
在一些实施例中，所述总胆红素测定试剂呈球状，体积在2.5ul-3.5ul之间。
[0013]
第二方面，本技术实施例中提供了一种总胆红素测定试剂球的制备方法，步骤如下：
[0014]
将缓冲液加入第一预设量的水中，调节ph值至预设ph值，得到第一溶液；
[0015]
在所述第一溶液中依次加入赋形剂和稳定剂至完全溶解，得到第二溶液；
[0016]
在所述第二溶液中加入胆红素氧化酶，得到第三溶液；
[0017]
在所述第三溶液中加入表面活性剂，得到第四溶液；
[0018]
将所述第四溶液的液滴滴在液氮中，以使所述液滴形成冰球；
[0019]
将所述冰球进行冷冻干燥，制得所述总胆红素测定试剂球。
[0020]
第三方面，本技术实施例中还提供了一种总胆红素测定芯片，所述总胆红素测定芯片包括芯片本体和所述总胆红素测定试剂，其中，所述总胆红素测定试剂设置于所述芯片本体内部。
[0021]
本技术实施例的有益效果是：区别于现有技术，本技术实施例提供的总胆红素测定试剂包括：缓冲液、赋形剂、稳定剂、胆红素氧化酶以及表面活性剂。该总胆红素测定试剂包含有效的稳定剂成分和表面活性剂成分，在很大程度上可以提高测定试剂中胆红素氧化酶的稳定性，进而提高了测定结果的准确度。
附图说明
[0022]
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对本发明实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。显而易见地，下面所描述的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0023]
图1为本技术一实施例提供的总胆红素测定试剂球的制备方法的流程示意图；
[0024]
图2为本技术一实施例提供的总胆红素测定芯片的临床相关性分析图；
[0025]
图3为本技术一实施例提供的总胆红素测定芯片的线性范围分析图。
具体实施方式
[0026]
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0027]
需要说明的是，如果不冲突，本发明实施例中的各个特征可以相互组合，均在本发明的保护范围之内。另外，虽然在装置示意图中进行了功能模块的划分，在流程图中示出了逻辑顺序，但是在某些情况下，可以以不同于装置示意图中的模块划分，或流程图中的顺序执行所示出或描述的步骤。
[0028]
除非另有定义，本说明书所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本说明书中在本发明的说明书中所使用的术语，例如“第一”、“第二”、“第三”等，只是为了描述具体的实施方式的目的，不是用于限制本发明。本说明书所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
[0029]
本技术实施例提供的总胆红素测定试剂通过有效的稳定剂成分和表面活性剂成分提高了试剂中胆红素氧化酶的稳定性，增强了试剂的抗干扰能力，提高了检测结果的准确度。
[0030]
本技术实施例提供的总胆红素测定试剂的检测原理如下：检测样本与总胆红素测
定试剂接触，样本中的总胆红素在胆红素氧化酶的作用下氧化成胆绿素。此时，胆红素特有的黄色减少，通过在450nm波长下测定此反应所引起的吸光度变化可求得总胆红素的浓度。
[0031]
为了便于读者理解本发明，下面结合具体的实施例进行说明。
[0032]
本技术实施例提供一种总胆红素测定试剂，包括以下组分：
[0033][0034]
胆红素氧化酶主要起催化氧化作用，用于与待测样本中的总胆红素发生氧化反应，样本中的总胆红素被氧化成胆绿素，使得胆红素特有的黄色减少，通过在450nm波长下测定此反应所引起的吸光度变化可求得总胆红素的浓度。
[0035]
在一些实施例中，所述缓冲液包括三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液、4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液和n-氨基甲酰甲基乙磺酸缓冲液中的至少一种。
[0036]
缓冲液对溶液的酸碱性能起到很好的缓冲作用，缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关，但缓冲溶液组分的浓度不能太大，否则，不能忽视离子间的作用。
[0037]
在一些实施例中，所述赋形剂包括peg3350、peg8000、葡聚糖1万、葡聚糖4万、海藻糖、水溶性淀粉和甘露醇中的至少一种。
[0038]
赋形剂能够赋予总胆红素测定试剂良好的外观，使总胆红素测定试剂疏松多孔，易于冻干和复溶。
[0039]
在一些实施例中，所述稳定剂包括牛血清白蛋白、聚乙烯吡咯烷酮k30和氯化钾中的至少一种。
[0040]
稳定剂能够使本技术实施例提供的试剂中胆红素氧化酶的活性稳定，减少因长期储存、温度变化、运输颠簸等造成的试剂性能下降，确保测定结果的准确度。
[0041]
其中，牛血清白蛋白还可以与甘露醇组成复合稳定剂，有效地保护了试剂中胆红素氧化酶的稳定性。
[0042]
在一些实施例中，所述表面活性剂包括曲拉通x-100、失水山梨醇月桂酸酯、碳酸钠和胆酸中的至少一种。
[0043]
其中，碳酸钠还可以和胆酸形成胆酸盐，胆酸盐能很好乳化、增稠各成分活性，起到抗血脂干扰的作用，减少了干扰物质的影响。
[0044]
在一些实施例中，当总胆红素测定试剂的ph值在7.0-7.5时，总胆红素测定试剂中胆红素氧化酶的活性最好。
[0045]
在一些实施例中，总胆红素测定试剂呈球状，体积在2.5ul-3.5ul之间。
[0046]
在实际应用中，可以将呈液体状的总胆红素试剂通过定量控制滴珠点胶机直接滴在液氮中结成冰球，并使冰球体积控制在2.5-3.5ul，之后将冰球置于真空冷冻干燥机中进行冻干，氮气复压后可以将冻干试剂球收集保存在干燥的铝瓶中。
[0047]
本技术实施例还提供一种总胆红素测定试剂球的制备方法，请参阅图1，包括如下步骤：
[0048]
s10：将缓冲液加入第一预设量的水中，调节ph值至预设ph值，得到第一溶液；
[0049]
在一些实施例中，可以采用ph试纸等方法测试该总胆红素测定试剂混合液的ph值，并通过加入ph调节液调整该总胆红素测定试剂混合液的ph值至预设值。
[0050]
在另一些实施例中，可以使用盐酸或者氢氧化钠调整溶液的ph值，也可以使用其他ph调节液，此处只是对本实施例技术方案的简单说明，不构成对技术方案的限制。
[0051]
s20：在第一溶液中依次加入赋形剂和稳定剂至完全溶解，得到第二溶液；
[0052]
赋形剂能够赋予总胆红素测定试剂良好的外观，使总胆红素测定试剂疏松多孔，易于冻干和复溶；稳定剂能够使本技术实施例提供的试剂中胆红素氧化酶的活性稳定，减少因长期储存、温度变化、运输颠簸等造成的试剂性能下降，确保测定结果的准确度。
[0053]
具体的，牛血清白蛋白可以与甘露醇组成复合稳定剂，可以更有效地保护试剂中胆红素氧化酶的稳定性。
[0054]
s30：在第二溶液中加入胆红素氧化酶，得到第三溶液；
[0055]
胆红素氧化酶作为反应物质，主要起催化氧化作用，当其与待测样本中的总胆红素接触时，样本中的总胆红素可以被胆红素氧化酶氧化成胆绿素，使得胆红素特有的黄色减少。
[0056]
s40：在第三溶液中加入表面活性剂，得到第四溶液；
[0057]
表面活性剂可以起到润滑、乳化、分散、抗静电等作用，比如，表面活性剂采用碳酸钠和胆酸，碳酸钠可以和胆酸形成胆酸盐，胆酸盐能很好乳化、增稠各成分活性，起到抗血脂干扰的作用。
[0058]
s50：将第四溶液的液滴滴在液氮中，以使液滴形成冰球；
[0059]
在一些实施例中，配制好混合液后，可以通过点胶机将混合液的液滴滴在液氮中，使液滴在液氮中凝结成冰球。本领域技术人员可以根据实际需要调整滴入液氮中的混合液的液滴的大小，并通过控制液滴的大小来调整冰球的体积。
[0060]
在一些实施例中，冰球的体积为2.5ul-3.5ul。
[0061]
s60：将所述冰球进行冷冻干燥，制得所述总胆红素测定试剂球。
[0062]
在获得冰球后，将冰球置于真空冷冻干燥机进行冷冻干燥，获得总胆红素测定试剂球，待氮气复压后将总胆红素测定试剂球收集并保存在干燥的铝瓶中。
[0063]
冷冻干燥后，冰球中除水外的各组分(缓冲液、非离子型去垢剂、阴离子染料、赋形剂)本身留在冻结时的冰架中，因此冷冻干燥后的冰球疏松多孔且体积不变，由于冰球干燥前始终处于冻结状态，同时冰晶均匀分布于物质中，升华过程不会因脱水而发生浓缩现象。冷冻干燥后得到的试剂球呈海绵状疏松多孔，体积基本与干燥前的冰球保持不变，极易溶于水而恢复原状。
[0064]
从而，通过该方法制备出的含有上述任一实施例试剂组分的总胆红素测定试剂球，具有较好的形态及复融溶解性，还能完全冻干。
[0065]
本技术实施例还提供了一种总胆红素测定芯片，该总胆红素测定芯片包括芯片本体和如上任一实施例所述的试剂，其中，总胆红素测定试剂设置于芯片本体内部。
[0066]
在一些实施例中，芯片本体由注塑成型的塑料基底和光学膜通过粘结胶层粘贴而成，芯片本体包括样本槽、稀释液槽、定量槽、混合槽、废液槽、液流通道和比色孔等结构。芯片本体还包括多个可存放试剂球的比色孔，检测样本进入比色孔后与试剂球发生化学反
应。
[0067]
在一些实施例中，该总胆红素测定芯片可以应用于poct分析仪，领用poct分析仪检测37℃下450nm波长处吸光度的变化值，并使用校准品进行定标，可计算得到样本中总胆红素的浓度。
[0068]
可以理解的是，基于赋形剂能够赋予试剂球良好的外观，使试剂球疏松，从而，使得试剂球与检测样本接触后，溶解性良好，与样本反应充分。
[0069]
为进一步阐述本技术的技术方案，以下提供本技术总胆红素测定试剂的若干实施例。
[0070]
在一些实施例中，总胆红素测定试剂可以是以下组分：
[0071][0072]
其中，总胆红素测定试剂的ph值在7.0-7.5。
[0073]
具体的：
[0074]
实施例一：
[0075]
上述总胆红素测定试剂可以是以下组分：4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液200mmol/l、甘露醇10g/l、peg3350 100g/l、牛血清白蛋白1g/l、聚乙烯吡咯烷酮k30 10g/l、胆红素氧化酶100u/l、碳酸钠0.1g/l、胆酸0.1g/l、失水山梨醇月桂酸酯50g/l。该总胆红素测定试剂的ph值在为7.1。
[0076]
实施例二：
[0077]
上述总胆红素测定试剂可以是以下组分：4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液160mmol/l、甘露醇60g/l、peg3350 40g/l、牛血清白蛋白5g/l、聚乙烯吡咯烷酮k30 7g/l、胆红素氧化酶50u/l、碳酸钠4g/l、胆酸4g/l、失水山梨醇月桂酸酯30g/l。该总胆红素测定试剂的ph值在为7.5。
[0078]
实施例三：
[0079]
上述总胆红素测定试剂可以是以下组分：4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液40mmol/l、甘露醇100g/l、peg3350 10g/l、牛血清白蛋白10g/l、聚乙烯吡咯烷酮k30 1g/l、胆红素氧化酶20u/l、碳酸钠10g/l、胆酸10g/l、失水山梨醇月桂酸酯10g/l。该总胆红素测定试剂的ph值在为7.4。
[0080]
在另一些实施例中，总胆红素测定试剂还可以是以下组分：
[0081][0082]
其中，总胆红素测定试剂的ph值在7.0-7.5。
[0083]
具体的：
[0084]
实施例四：
[0085]
上述总胆红素测定试剂可以是以下组分：三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液40mmol/l、甘露醇10g/l、蔗糖100g/l、牛血清白蛋白10g/l、氯化钾1g/l、胆红素氧化酶100u/l、碳酸钠10g/l、胆酸10g/l、曲拉通x-100 50g/l。该总胆红素测定试剂的ph值在为7.2。
[0086]
实施例五：
[0087]
上述总胆红素测定试剂可以是以下组分：三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液130mmol/l、甘露醇50g/l、蔗糖60g/l、牛血清白蛋白7g/l、氯化钾5g/l、胆红素氧化酶60u/l、碳酸钠6.0g/l、胆酸6.0g/l、曲拉通x-100 20g/l。该总胆红素测定试剂的ph值在为7.0。
[0088]
实施例六：
[0089]
上述总胆红素测定试剂可以是以下组分：三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液200mmol/l、甘露醇100g/l、蔗糖10g/l、牛血清白蛋白1g/l、氯化钾10g/l、胆红素氧化酶20u/l、碳酸钠0.1g/l、胆酸0.1g/l、曲拉通x-100 10g/l。该总胆红素测定试剂的ph值在为7.1。
[0090]
在另一些实施例中，总胆红素测定试剂还可以是以下组分：
[0091]
[0092]
其中，总胆红素测定试剂的ph值在7.0-7.5。
[0093]
具体的：
[0094]
实施例七：
[0095]
上述总胆红素测定试剂可以是以下组分：n-氨基甲酰甲基乙磺酸缓冲液200mmol/l、甘露醇10g/l、葡聚糖1万100g/l、牛血清白蛋白1g/l、胆红素氧化酶20u/l、碳酸钠10g/l、胆酸10g/l、曲拉通x-100 10g/l、失水山梨醇月桂酸酯50g/l。该总胆红素测定试剂的ph值在为7.4。
[0096]
实施例八：
[0097]
上述总胆红素测定试剂可以是以下组分：n-氨基甲酰甲基乙磺酸缓冲液150mmol/l、甘露醇40g/l、葡聚糖1万70g/l、牛血清白蛋白5g/l、胆红素氧化酶60u/l、碳酸钠5g/l、胆酸5g/l、曲拉通x-100 30g/l、失水山梨醇月桂酸酯30g/l。该总胆红素测定试剂的ph值在为7.2。
[0098]
实施例九：
[0099]
上述总胆红素测定试剂可以是以下组分：n-氨基甲酰甲基乙磺酸缓冲液40mmol/l、甘露醇100g/l、葡聚糖1万10g/l、牛血清白蛋白10g/l、胆红素氧化酶100u/l、碳酸钠0.1g/l、胆酸0.1g/l、曲拉通x-100 50g/l、失水山梨醇月桂酸酯10g/l。该总胆红素测定试剂的ph值在为7.5。
[0100]
下面结合具体的测试对比实验，对采用本技术实施例1中的总胆红素测定试剂制成的芯片(下称总胆红素测定芯片1)的性能进行说明。
[0101]
在空气湿度8％的环境中，向总胆红素测定芯片1中注入检测样本，然后，使用便携式自动生化分析仪vp10进行检测，检测37℃下450nm波长吸光度的变化值。并使用校准品进行定标，可计算得到检测样本中总胆红素浓度。
[0102]
1)精密度测试：采用总胆红素测定芯片1检测已知总胆红素浓度的检测样本1，该检测样本1的总胆红素浓度为30.5umol/l，检测20次，得到20个检测到的浓度值。
[0103]
计算这20个浓度值的均值、标准差和变异系数，得到均值为30.40umol/l，标准差sd＝0.88，变异系数cv＝2.90％。
[0104]
可知，测得浓度(30.40umol/l)与实际浓度(30.5umol/l)十分接近，准确度高，并且，标准差和变异系数均较小，说明总胆红素测定芯片1的稳定性好。
[0105]
2)准确度测试：采用总胆红素测定芯片1测试已知总胆红素浓度为30.1umol/l的检测样本2，重复检测三次，获得浓度值，计算测得的浓度值的平均值为29.99umol/l，相对偏差为-0.38％。
[0106]
可知，测得浓度29.99umol/l与实际浓度30.1umol/l接近，准确度高，并且，相对偏差较小。
[0107]
3)临床相关性分析
[0108]
准备不同浓度总胆红素的血清样本集a1和a2，即a1包括50份不同浓度总胆红素的血清样本，a2与a1一样，也包括50份不同浓度总胆红素的血清样本，采用某品牌对比试剂盘检测样本集a1中各血清样本的总胆红素浓度，以及，采用总胆红素测定芯片1(本法)检测样本集a2中各血清样本的总胆红素浓度。检测结果如表1所示：
[0109]
表1临床相关性分析的检测结果
[0110]
[0111][0112]
将表1中，某品牌对比试剂盘对应的检测浓度值作为x轴的值，将总胆红素测定芯片1(本法)对应的检测浓度值作为y轴的值，得到两组检测结果之间的相关方程如下：
[0113]
y＝0.9605x 0.664；
[0114]
该相关方程的拟合线如图2所示，其中，相关系数r＝0.9966，相关系数越接近1代表两组数据之间的相关性越强。因此，本技术实施例提供的总胆红素测定芯片1与某品牌对比试剂盘的测试结果相关性强。
[0115]
4)线性范围测试
[0116]
要求在[2，550]umol/l区间内，其线性相关系数r≥0.990。
[0117]
根据试剂的最大上限浓度，收集浓度大于待检试剂线性范围上限浓度的新鲜血清或与新鲜血清具有相同的基体状态的样本(或血清中加入待测物质纯品)作为高值样本，浓度极低或无该分析物的样本作为低限样本，但因低限样本难以收集，一般以生理盐水代替。
[0118]
测试方法如下：将高低浓度标准血清样品以不同比例混合成6个不同浓度的血清样本，采用本技术实施例提供的总胆红素测定芯片1分别测试6个血清样本的总胆红素浓度，每个血清样本测试3次，分别求出6个血清样本中总胆红素测得浓度值的平均值y。以每个样本稀释后的浓度x为自变量，以每个样本的测得浓度值均值y为因变量求出线性回归方程，如下：
[0119]
y＝0.3423x-3.6766；
[0120]
该相关方程的拟合线如图3所示，其中，相关系数r＝0.9997，相关系数r越接近1，则说明采用本技术实施例提供的总胆红素测定芯片1测得的结果与稀释后的实际结果越接近，即测得值接近实际值，本技术实施例提供的总胆红素测定芯片1具有较高的准确度，另一方面，对于不同浓度的样本，都能准确测到，则线性范围好。
[0121]
5)热稳定性测试
[0122]
在8％空气湿度环境中，将本技术实施例提供的总胆红素测定芯片1封袋，在37℃避光环境中贮存0、2、3、4、6、8天。以校准品和质控品为检测样本，测试本技术实施例提供的总胆红素测定芯片1的准确度，相对偏差应在
±
10.0％以内。
[0123]
具体的，准备两组质控品(样本1和样本2)，分别采用达到上述存储要求后的总胆
红素测定芯片1分别检测样本1和样本2，对于同种类的总胆红素测定芯片1，检测三次。
[0124]
表2为样本1通过存储各天数后的总胆红素测定芯片1检测到的检测结果，表3为样本2通过存储各天数后的总胆红素测定芯片1检测到的检测结果。其中，平均值为三次检测到的浓度的平均值，靶值为样本中总胆红素的实际浓度。
[0125]
从表2和表3中可以得出，本技术实施例提供的总胆红素测定芯片1在环境中存储2、3、4、6和8天后，相对偏差的绝对值仍在10.0％以内，因此，具有较好的热稳定性，在环境中储存多天后仍能确保其检测结果的准确度。
[0126]
表2样本1的检测结果
[0127][0128][0129]
表3样本2的检测结果
[0130][0131]
6)长期稳定性测试
[0132]
在8％空气湿度环境中，将本技术实施例提供的总胆红素测定芯片1封袋，在2-8℃避光环境中贮存0、3、6、9、12、15个月后。以校准品和质控品为检测样本，测试该总胆红素测定芯片1的准确度，相对偏差应在
±
10.0％以内。具体的，准备两组质控品(样本3和样本4)，分别采用在2-8℃避光环境中贮存0、3、6、9、12、15个月后的总胆红素测定芯片1检测样本3和样本4，对于同种类的总胆红素测定芯片1，检测三次。
[0133]
表4为在2-8℃避光环境中贮存0、3、6、9、12、15个月后的总胆红素测定芯片1对样本3的检测结果，表5为在2-8℃避光环境中贮存0、3、6、9、12、15个月后的总胆红素测定芯片1对样本4的检测结果。其中，平均值为三次检测到的浓度的平均值，靶值为样本中总胆红素的实际浓度。
[0134]
从表4和表5中可以得出，本技术实施例提供的总胆红素测定芯片1在环境中存储0、3、6、9、12、15个月后，相对偏差的绝对值仍在10.0％以内，因此，具有较好的长期稳定性，
在环境中储存较长时间后仍能确保其检测结果的准确度。
[0135]
表4样本3的检测结果
[0136][0137]
表5样本4的检测结果
[0138][0139]
7)抗干扰能力
[0140]
干扰性试验：分为空白对照组和实验组，实验组加入不同的干扰物质，使其在血清中的浓度达到如下表6所示的要求。然后分别测定含有如下四种干扰物质的总胆红素的含量，每种干扰物质重复三次，取平均值。测定结果见下表6。表6为干扰物质存在时的总胆红素测定芯片1对总胆红素含量的检测结果。相对偏差(％)＝(干扰样本的测定均值－对照组测定均值)/对照组测定均值
×
100％。
[0141]
表6抗干扰测试结果
[0142][0143][0144]
由上表6可看出，本技术实施例提供的总胆红素测定芯片1在干扰物质存在时测试值的相对偏差的绝对值仍在10.0％以内，因此，本技术实施例提供的总胆红素测定芯片1具有较好的抗干扰性，在多种干扰物质中仍能确保其检测结果的准确度。
[0145]
综上所述，本技术实施例提供的总胆红素测定试剂包括：缓冲液、赋形剂、稳定剂、胆红素氧化酶以及表面活性剂。该总胆红素测定试剂包含有效的稳定剂成分和表面活性剂
成分，提高了测定试剂中胆红素氧化酶的稳定性，以使其在检测总胆红素浓度时稳定性更好，抗干扰能力强，提高了检测结果的准确度。
[0146]
总胆红素测定试剂可制成总胆红素测定试剂球；总胆红素测定试剂可置于测定芯片体内，制成总胆红素测定芯片，利用反应体系在450nm处吸光度的变化可计算出检测样本中总胆红素浓度的含量。测试结果表明，本技术实施例提供的总胆红素测定试剂稳定性好，抗干扰能力强，且操作简单、方便。
[0147]
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本技术的技术方案，而非对其限制；在本技术的思路下，以上实施例或者不同实施例中的技术特征之间也可以进行组合，步骤可以以任意顺序实现，并存在如上所述的本技术的不同方面的许多其它变化，为了简明，它们没有在细节中提供；尽管参照前述实施例对本技术进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本技术各实施例技术方案的范围。