细胞损伤修复培养器的制作方法

1.本实用新型属于医疗器具，特别是涉及一种细胞损伤修复培养器，可应用于治疗、生产和研究用细胞损伤后修复、中毒后恢复以及亚健康状态调整。


背景技术：

2.人及动物的许多原代、传代细胞在生物医药领域应用广泛，譬如：干细胞、免疫细胞治疗疾病；基因工程细胞生产蛋白药物；bhk、vero细胞生产疫苗；组织工程种子细胞；科研用细胞等。
3.但是，这些在临床、生产、科研领域非常重要的细胞，往往存在某些缺陷。譬如：细胞在分离制备、消化传代、冻存复苏等过程中，难免会造成损伤；在来源的机体和分离、培养、传代、冻存等环节使用试剂或药物，可能造成的细胞中毒；由于分离制备、冻存复苏等原因，导致的细胞亚健康状态等。细胞的这些问题，需要专业检测才能发现，往往被人们忽视。
4.由于人及动物的细胞没有植物那样的细胞壁保护，加之生长相对缓慢，细胞损伤、中毒、亚健康状态等缺陷，不容易自行修复、解毒、恢复。为了保证人及动物细胞的质量，需要对具有损伤、中毒、亚健康状态等缺陷的细胞进行修复、解毒、恢复性培养，以便取得更好的治疗、生产、研究应用效果。尤其是，临床移植用的治疗细胞，由于损伤的细胞在机体内更容易发生死亡或凋亡，直接影响到细胞治疗的效果，甚至可能导致医疗风险。
5.目前，专业化的细胞修复培养仪器还非常缺乏，亟需进行研发生产。


技术实现要素：

6.本实用新型的目的就是为了解决治疗、生产、研究用细胞的损伤、中毒、亚健康状态等缺陷，提供高质量的健康细胞。
7.实现上述目的的本实用新型的技术方案为：细胞损伤修复培养器由支撑固定系统（1）、调理培养系统（2）、过滤循环系统（3）、供氧通气系统（4）组成。各系统间以及不同系统内部可方便地进行安装、拆卸，以利于清洗、灭菌。支撑固定系统（1）包括底座（101）、自攻螺钉a（102）、自攻螺钉b（103）、支架（104）、螺栓（105）和螺母a（106）；调理培养系统（2）包括培养罐（201）、螺丝（202）、盖子（203）、密封圈（204）、螺母b（205）；过滤循环系统（3）包括蠕动泵（301）、软管a（302）、软管b（303）、锥形滤网a（304）、万向转轴a（305）、吸排管a（306）、锥形滤网b（307）、万向转轴b（308）和吸排管b（309）；供氧通气系统（4）包括除菌过滤器（401）、连接软管（402）和通气管（403）。
8.软管a（302）、软管b（303）为同一软管的两端。吸排管a（306）、吸排管b（309），既可以吸取也可以排出细胞培养液。锥形滤网a（304）、锥形滤网b（307）为顶部开口的圆锥形网筒，网孔直径＜5μm，以保证过滤循环系统（3）工作时培养细胞不会进入软管内。为了防止培养细胞堵塞网孔，当过滤循环系统（3）工作时，万向转轴a（305）、万向转轴b（308）可以分别保证锥形滤网a（304）、锥形滤网b（307）在培养液中随意转动。
9.除整个支撑固定系统（1）和过滤循环系统（3）中的蠕动泵（301）外，其余部分均可
高压蒸汽灭菌（103.4kpa、121.3℃、15～20min）。培养罐（201）为耐高温高压的硼硅酸盐玻璃制造，透明，便于观察细胞培养情况；支撑固定系统（1）以及过滤循环系统（3）中的吸排管a（306）、吸排管b（309）、锥形滤网a（304）、锥形滤网b（307）、万向转轴a（305）、万向转轴b（308）均为医用级不锈钢制造。
10.本实用新型的技术方案具有的优点包括：
①
细胞损伤修复培养器采用自身培养液循环流动搅拌培养物，搅拌柔和、均匀，对培养细胞无损伤；
②
细胞损伤修复培养器的设计避免了安装ph、溶氧、温度等探头，既减少了污染发生机会，又避免了培养细胞在浸入培养液中探头部分的黏附，还简化了操作，降低了成本；
③
细胞损伤修复培养器自身不带加热系统，工作时置于二氧化碳培养箱或恒温培养箱内，通过调节二氧化碳培养箱或恒温培养箱温度来满足培养细胞需要的最适温度，温度变化柔和，不损伤细胞；
④
细胞损伤修复培养器的万向转轴设计，有利于防止培养细胞堵塞锥形滤网；
⑤
细胞损伤修复培养器培养罐底部的球形设计，具有较好的流体动力学优势，避免培养细胞在底部滞留；
⑥
细胞损伤修复培养器操作方便，价格适宜，便于推广应用。
附图说明
11.附图1是本实用新型的透视图。
12.图中，1、支撑固定系统，101、底座，102、自攻螺钉a，103、自攻螺钉b，104、支架，105、螺栓，106、螺母a；2、调理培养系统，201、培养罐，202、螺丝，203、盖子，204、密封圈，205、螺母b；3、过滤循环系统，301、蠕动泵，302、软管a，303、软管b，304、锥形滤网a，305、万向转轴a，306、吸排管a，307、锥形滤网b，308、万向转轴b，309、吸排管b；4、供氧通气系统，401、除菌过滤器，402、连接软管，403、通气管。
具体实施方式
13.本实用新型的安装使用。
14.如图所示，细胞损伤修复培养器由支撑固定系统（1）、调理培养系统（2）、过滤循环系统（3）、供氧通气系统（4）组成。支撑固定系统（1）包括底座（101）、自攻螺钉a（102）、自攻螺钉b（103）、支架（104）、螺栓（105）和螺母a（106）；调理培养系统（2）包括培养罐（201）、螺丝（202）、盖子（203）、密封圈（204）、螺母b（205）；过滤循环系统（3）包括蠕动泵（301）、软管a（302）、软管b（303）、锥形滤网a（304）、万向转轴a（305）、吸排管a（306）、锥形滤网b（307）、万向转轴b（308）和吸排管b（309）；供氧通气系统（4）包括除菌过滤器（401）、连接软管（402）和通气管（403）。
15.使用前，先将培养罐（201）、锥形滤网a（304）、万向转轴a（305）、吸排管a（306）、锥形滤网b（307）、万向转轴b（308）和吸排管b（309）按照培养细胞要求清洗后，用3%甲基硅树脂酒精溶液进行硅化，以防止进行细胞培养时细胞在上面黏附。再将细胞损伤修复培养器各部分高压蒸汽灭菌（103.4kpa、121.3℃、15～20min），但是，支撑固定系统（1）以及过滤循环系统（3）中的蠕动泵（301）除外。
16.安装使用步骤：（1）在超净工作台或生物安全柜内，无菌操作：
①
连接预先灭菌的锥形滤网a（304）、万向转轴a（305）、吸排管a（306），将吸排管a（306）安装到盖子（203）上，另一端与软管b（303）连接；
②
连接预先灭菌的锥形滤网b（307）、万向转轴b（308）、吸排管b
（309），将吸排管b（309）安装到盖子（203）上，另一端与软管a（302）连接；
③
连接除菌过滤器（401）、连接软管（402）、通气管（403），将通气管（403）安装到盖子（203）上；
④
将密封圈（204）安装到盖子（203）上；
⑤
向培养罐（201）中加入需要修复、解毒、恢复的细胞样品，再根据细胞数量加入相应的培养液、试剂和药品（根据具体需要确定添加种类和数量，但所加试剂和药品必须预先过滤除菌）；
⑥
将盖子（203）安装到培养罐（201）上，适当拧紧螺丝。（2）将支架（104）用自攻螺钉a（102）、自攻螺钉b（103）固定到底座（101）上；（3）将组装好的培养罐（201）置于支架（104）的圆圈内，手动安装螺栓（105）和螺母a（106），适当拧紧；（4）将软管a（302）、软管b（303）装入蠕动泵（301），置于底座（101）上；（5）将安装好的细胞损伤修复培养器置于二氧化碳培养箱或恒温培养箱内，调节温度为细胞生长最适温度（人、哺乳动物细胞为37℃），调节蠕动泵转速以使细胞培养混合物柔和运动；（6）细胞调理性培养时间通常为数小时至数十小时，若中间需要换液时，把细胞损伤修复培养器从培养箱内取出，在超净工作台或生物安全柜内，通过无菌操作，利用蠕动泵从吸排管a（306）或吸排管b（309）内抽出适量（通常为50%）消耗过的培养液后再加入等量新鲜培养液，若需要添加其他试剂或药物，经过滤除菌后，随新鲜培养液一同加入；（7）恢复细胞损伤修复培养器原来的连接，放回培养箱内，调节温度和蠕动泵转速，继续培养。
17.上述技术方案仅体现了本实用新型技术方案的优选技术方案，本技术领域的技术人员对其中某些部分所可能做出的一些变动均体现了本实用新型的原理，属于本实用新型的保护范围之内。