一种抑制口腔致病菌的中药组合物及其制备方法与流程

1.本发明属于医药技术领域，尤其涉及一种抑制口腔致病菌的中药组合物及其制备方法。


背景技术：

2.在人类口腔中存在着种类繁多的天然菌群，其多样性仅次于肠道菌群，口腔菌群的重要性，往往被严重低估。龋齿、牙周炎和口臭等多类口腔问题，都和口腔菌群密切关联。金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌、牙龈卟啉菌、莫雷梭菌(solobacterium moorei)和幽门螺杆菌是口腔中常见的致病菌，这些致病菌的过度增殖往往导致龋齿、牙周炎、口腔溃疡、口腔白斑等多种口腔问题。同时，口腔菌群的影响远不限于口腔本身，炎症性肠病、结肠癌等肠道疾病，糖尿病、肥胖和类风湿性关节炎这样的全身性疾病，都与口腔菌群有着千丝万缕的关联。
3.肉桂为樟科植物肉桂cinnamomum cassia presl的干燥树皮。味辛、甘，性大热，归肾、脾、心、肝经，有补火助阳，引火归元，散寒止痛，温通经脉的功效。现代药理研究证明，肉桂精油及存在于其中的肉桂醛、桂皮酸等对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉和青霉菌等均有较强的抑制作用。桂皮醛对牙周可疑致病菌，牙龈卟啉单胞菌的mic及mbc为32mg/ml、对核梭杆菌的mic及mbc为32mg/ml、对粘性放线菌的mic为64mg/ml、mbc为128mg/ml。
4.紫草为紫草科植物新疆紫草arnebia euchroma(royle)johnst.或内蒙紫草arnebia guttata bunge.的根。性寒，味甘、咸。归心经、肝经，有凉血、活血、解毒透疹的功效。研究表明，紫草对主要致龋细菌及生物膜生长、产酸、产糖及黏附均有抑制作用，并且还可预防和抑制口臭。紫草油通过不同给药方式治疗包括口腔溃疡、烧伤烫伤、湿疹皮炎、妇科炎症在内的皮肤黏膜类损伤。shindo等学者研究发现紫草素能通过抑制人牙周膜细胞(hpdlc)中ikb-α抑制剂的磷酸化和降解，对牙周病的治疗有一定的效果。紫草中的主要成分紫草素对部分细菌以及真菌有较强的抗菌作用，其效果可与左氧氟沙星相当。


技术实现要素：

5.鉴于上述现有技术存在的缺陷，本发明的目的是提出一种抑制口腔致病菌的中药组合物及其制备方法，通过将肉桂提取物和紫草提取物进行不同比例组合的联合使用，达到显著协同增效抑制口腔致病菌过度增殖的效果。
6.本发明的目的通过如下技术方案得以实现：
7.本发明的目的之一在于提供一种抑制口腔致病菌的中药组合物，所述中药组合物包括肉桂提取物和紫草提取物；所述肉桂提取物和紫草提取物的重量份配比为1:5至5:1。
8.进一步的，所述肉桂提取物是通过如下制备方法制备得到的：
9.将肉桂粉粹至80目以上，使用醇进行提取，得到肉桂醇提液；
10.将肉桂醇提液浓缩至无醇味，得到肉桂浓缩液，然后使用乙酸乙酯进行萃取，取有
机相并挥干乙酸乙酯溶剂，得到肉桂提取物；
11.所述肉桂浓缩液与所述乙酸乙酯的用量比为1:(1-15)。
12.进一步的，所述紫草提取物是通过如下制备方法制备得到的：
13.将紫草粉碎至80目以上，使用醇进行提取，得到紫草醇提液；
14.将紫草醇提液浓缩至无醇味，得到紫草浓缩液，然后使用石油醚进行萃取，取有机相并挥干石油醚溶剂，得到紫草提取物；
15.所述紫草浓缩液与所述乙酸乙酯的用量比为1:(1-15)。
16.本发明的目的之二在于提供一种抑制口腔致病菌的中药组合物的制备方法，其是通过将肉桂提取物和紫草提取物分别使用甲醇复溶至生药浓度为200mg/ml，然后按比例复配制备得到的。
17.本发明的目的之三在于提供一种抑制口腔致病菌的中药组合物在制备抑制口腔致病菌生长的药物中的应用。
18.本发明的目的之四在于提供一种抑制口腔致病菌的中药组合物在制备抑制口腔致病菌生长的口腔护理剂中的应用。
19.进一步的，所述口腔致病菌包括革兰氏阴性杆菌、革兰氏阳性菌、真菌和革兰氏阴性厌氧球杆菌中的一种或几种的组合。
20.进一步的，所述口腔致病菌包括革兰氏阴性杆菌、革兰氏阳性菌、真菌和革兰氏阴性厌氧球杆菌中的一种或几种的组合。
21.进一步的，所述口腔致病菌包括金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌、牙龈卟啉菌、莫雷梭菌和幽门螺杆菌中的一种或多种。
22.本发明的目的之五在于提供一种抑制口腔致病菌的中药组合物，其特征在于：采用牙膏、牙粉、牙齿凝胶、漱口水、口腔喷雾、泡腾片、口腔贴膜、口腔含片、口香糖及牙托的剂型。
23.本发明的突出效果为：
24.本发明的一种抑制口腔致病菌的中药组合物可有效改善口腔有害菌革兰氏阴性杆菌、革兰氏阳性菌、真菌和革兰氏阴性厌氧球杆菌的过度生长，是一种能够调节口腔菌群平衡的天然抗菌剂。
具体实施方式
25.下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
26.需要说明的是：
27.本发明中，如果没有特别的说明，本文所提到的所有实施方式以及优选实施方法可以相互组合形成新的技术方案。
28.本发明中，如果没有特别的说明，本文所提到的所有技术特征以及优选特征可以相互组合形成新的技术方案。
29.本发明中，如果没有特别的说明，百分数(％)或者份指的是相对于组合物的重量
百分数或重量份。
30.本发明中，如果没有特别的说明，所涉及的各组分或其优选组分可以相互组合形成新的技术方案。
31.本发明所公开的“范围”以下限和上限的形式，可以分别为一个或多个下限，和一个或多个上限。
32.本发明中，除非另有说明，各个反应或操作步骤可以顺序进行，也可以按照顺序进行。优选地，本文中的反应方法是顺序进行的。
33.除非另有说明，本文中所用的专业与科学术语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法或材料也可应用于本发明中。
34.本发明提供了一种抑制口腔致病菌的中药组合物及其制备方法。
35.本发明还提供了一种抑制口腔致病菌的中药组合物在制备抑制口腔致病菌生长的药物中的应用。
36.本发明还提供了一种抑制口腔致病菌的中药组合物在制备抑制口腔致病菌生长的口腔护理剂中的应用。
37.其中：所述口腔致病菌包括革兰氏阴性杆菌、革兰氏阳性菌、真菌和革兰氏阴性厌氧球杆菌中的一种或几种的组合。具体的，所述口腔致病菌包括金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌、牙龈卟啉菌、莫雷梭菌和幽门螺杆菌中的一种或多种。
38.本发明还提供了一种抑制口腔致病菌的中药组合物，采用牙膏、牙粉、牙齿凝胶、漱口水、口腔喷雾、泡腾片、口腔贴膜、口腔含片、口香糖及牙托的剂型。
39.实施例1
40.本实施例的一种抑制口腔致病菌的中药组合物，所述中药组合物包括肉桂提取物和紫草提取物；所述肉桂提取物和紫草提取物的重量份配比为1:1。
41.其中，
42.所述肉桂提取物是通过如下制备方法制备得到的：
43.将肉桂粉粹至80目以上，使用醇进行提取，得到肉桂醇提液；
44.将肉桂醇提液浓缩至无醇味，得到肉桂浓缩液，然后使用乙酸乙酯进行萃取，取有机相并挥干乙酸乙酯溶剂，得到肉桂提取物；
45.所述肉桂浓缩液与所述乙酸乙酯的用量比为1:10。
46.所述紫草提取物是通过如下制备方法制备得到的：
47.将紫草粉碎至80目以上，使用醇进行提取，得到紫草醇提液；
48.将紫草醇提液浓缩至无醇味，得到紫草浓缩液，然后使用石油醚进行萃取，取有机相并挥干石油醚溶剂，得到紫草提取物；
49.所述紫草浓缩液与所述乙酸乙酯的用量比为1:10。
50.上述抑制口腔致病菌的中药组合物的制备方法，其是通过将肉桂提取物和紫草提取物分别使用甲醇复溶至生药浓度为200mg/ml，然后按比例复配制备得到的。
51.实施例2
52.本实施例的一种抑制口腔致病菌的中药组合物，所述中药组合物包括肉桂提取物和紫草提取物；所述肉桂提取物和紫草提取物的重量份配比为1:5。
53.其中，
54.所述肉桂提取物是通过如下制备方法制备得到的：
55.将肉桂粉粹至80目以上，使用醇进行提取，得到肉桂醇提液；
56.将肉桂醇提液浓缩至无醇味，得到肉桂浓缩液，然后使用乙酸乙酯进行萃取，取有机相并挥干乙酸乙酯溶剂，得到肉桂提取物；
57.所述肉桂浓缩液与所述乙酸乙酯的用量比为1:1。
58.所述紫草提取物是通过如下制备方法制备得到的：
59.将紫草粉碎至80目以上，使用醇进行提取，得到紫草醇提液；
60.将紫草醇提液浓缩至无醇味，得到紫草浓缩液，然后使用石油醚进行萃取，取有机相并挥干石油醚溶剂，得到紫草提取物；
61.所述紫草浓缩液与所述乙酸乙酯的用量比为1:1。
62.上述抑制口腔致病菌的中药组合物的制备方法，其是通过将肉桂提取物和紫草提取物分别使用甲醇复溶至生药浓度为200mg/ml，然后按比例复配制备得到的。
63.实施例3
64.本实施例的一种抑制口腔致病菌的中药组合物，所述中药组合物包括肉桂提取物和紫草提取物；所述肉桂提取物和紫草提取物的重量份配比为5:1。
65.其中，
66.所述肉桂提取物是通过如下制备方法制备得到的：
67.将肉桂粉粹至80目以上，使用醇进行提取，得到肉桂醇提液；
68.将肉桂醇提液浓缩至无醇味，得到肉桂浓缩液，然后使用乙酸乙酯进行萃取，取有机相并挥干乙酸乙酯溶剂，得到肉桂提取物；
69.所述肉桂浓缩液与所述乙酸乙酯的用量比为1:15。
70.所述紫草提取物是通过如下制备方法制备得到的：
71.将紫草粉碎至80目以上，使用醇进行提取，得到紫草醇提液；
72.将紫草醇提液浓缩至无醇味，得到紫草浓缩液，然后使用石油醚进行萃取，取有机相并挥干石油醚溶剂，得到紫草提取物；
73.所述紫草浓缩液与所述乙酸乙酯的用量比为1:15。
74.上述抑制口腔致病菌的中药组合物的制备方法，其是通过将肉桂提取物和紫草提取物分别使用甲醇复溶至生药浓度为200mg/ml，然后按比例复配制备得到的。
75.对本实施例1-3得到的中药组合物进行实验验证：
76.1.k-b纸片琼脂扩散法测定药物的抑菌强度
77.将中药提取物和中药组合物配制成浓度为200mg/ml的药液备用，给药前梯度稀释。吸取受试菌悬液0.2ml于营养琼脂平板中涂布均匀，制成含菌平板，于超净工作台静置30min，待用。用打孔器将定性滤纸打成直径6mm的圆形纸片，分装于洁净干燥的试管内，灭菌干燥后在不同浓度的中药提取液中浸泡12h，烘干。同法用无菌蒸馏水制作阴性对照。用无菌镊子夹取滤纸片贴在含菌平板上，每个平板上均匀贴3片，于37℃培养箱中倒置培养24h后，采用十字交叉法，用游标卡尺测量两个垂直方向的抑菌圈直径大小，抑菌圈直径包含滤纸片直径。药敏试验判定标准：抑菌圈直径≧7mm判定为有抑菌作用，《7mm判定为无抑制作用。实验结果见表1。
78.表1.中药及其组合物对口腔常见致病菌株的体外抑菌结果
79.80.[0081][0082][0083]
“‑”
为无抑菌圈。
[0084]
2.琼脂稀释法测定抗菌药物最低抑菌浓度(mic)
[0085]
吸取各菌液5μl点种于含不同药物浓度的琼脂平板上培养48h，以平板上无细菌生长的最低含药浓度为桂皮醛的mic值，并计算分级抑菌浓度(fractional inhibitory concentration，fic)指数，fic指数＝mic(a组联合)/mic(a组单用) mic(b组联合)/mic(b组单用)。当fic指数小于0.5时，两种药为协同作用；当fic指数为0.5-1时，两种药为相加作用；当fic指数大于l且小于2时，两种药为无关作用；当fic指数大于2时，两种药为拮抗作用。实验结果见表2。
[0086]
表2.中药及其组合物对口腔常见致病菌株的mic值(mg/ml)
[0087][0088][0089]
实验结果表明，本发明的肉桂提取物、紫草提取物和中药组合物对6种试验菌均有一定的抑菌活性，且抑菌活性和浓度呈正相关。在药物浓度100mg/ml时，肉桂提取物对白色念珠菌抑菌效果最强，抑菌圈直径为17.8mm；紫草提取物对金黄色葡萄球菌抑菌效果最强，抑菌圈直径为14.5mm；中药组合物对白色念珠菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用在6种试验菌中的表现最为突出，抑菌圈直径分别达到为37.4mm和30.9mm。fic指数多在0.5以下，显示
协同作用，大肠杆菌、白色念珠菌、牙龈卟啉菌、莫雷梭菌和幽门螺杆菌的协同作用更明显。