5-氨基乙酰丙酸在制备防治炎症性肠病产品中的应用的制作方法

1.本发明属于炎症性肠病防治技术领域，尤其涉及一种5-氨基乙酰丙酸在制备防治炎症性肠病产品中的应用。


背景技术：

2.炎症性肠病(ibd)是一组慢性肠道炎症性疾病，包括溃疡性结肠(uc)和克罗恩病(cd)，药物疗效差、致残率高，对患者生活质量产生重大影响。ibd的病因尚不明确，是遗传、环境和肠道微生物共同作用的结果。对于炎症性肠病，目前尚没有根治性疗法，大多反复发生缓解和复发，因此需要长期的医学管理。
3.肠道代谢组作为连接宿主和肠道微生物的桥梁，对宿主的生理产生重要而多样的影响，可以参与信号传导，免疫系统调节，或具有抗生素活性。目前已发现一些ibd患者与健康对照者间的差异代谢物，如短链脂肪酸、胆汁酸、色氨酸等，鉴定新的差异代谢物并探索其作用机制，有望为ibd寻找新的诊治靶点。
4.5-氨基乙酰丙酸(5-ala)是四氢吡咯的前缀化合物，是生物体合成叶绿素、血红素、维生素b12等必不可少的物质。在医学领域，5-ala作为一种新型光动力药物，不仅用于局部或全身的皮肤癌的治疗，还可用于膀胱癌、消化道癌、肺癌等的诊断。5-ala作为光敏剂，应用范围广泛，可用于痤疮、光化性角化病、各种皮肤病、膀胱癌、尖锐湿疣、上消化道癌、直肠癌、乳腺癌、鲜红斑痣、老年性黄斑变性、类风湿关节炎等疾病的治疗。如对基底细胞癌的治愈率达91％，对痤疮的治愈率达95％以上，对膀胱癌以及被认为顽疾的牛皮癣的治疗，都取得令人满意的疗效。5-ala也是一种重要的有机合成中间体。由于其具有广泛、安全的作用效果，且天然无污染，备受国内外学者及产业界的关注，具有广阔的应用前景和市场开发前景。
5.目前尚未有5-氨基乙酰丙酸与炎症性肠病之间相关性的有关报道。


技术实现要素：

6.有鉴于此，本发明的目的在于提供一种5-氨基乙酰丙酸在制备防治炎症性肠病产品中的应用，通过抑制干扰素信号通路发挥防治炎症性肠病的作用。
7.为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：
8.本发明提供了5-氨基乙酰丙酸在制备防治炎症性肠病产品中的应用。
9.优选的，所述产品包括药品、食品。
10.优选的，所述5-氨基乙酰丙酸通过调控干扰素信号通路发挥作用。
11.优选的，所述干扰素包括干扰素-γ。
12.优选的，所述5-氨基乙酰丙酸通过调控与干扰素信号通路有关的基因发挥作用。
13.优选的，所述基因包括stat1、irf7、ifit3、oasl2、usp18、rsad2、isg15、rtp4、psmb8、gbp2。
14.优选的，所述5-氨基乙酰丙酸通过下调所述基因表达水平发挥作用。
15.优选的，所述产品为药品时，所述5-氨基乙酰丙酸的使用剂量为100mg/kg-200mg/kg。
16.本发明的有益效果：
17.本发明首次提供了5-氨基乙酰丙酸在制备防治炎症性肠病产品中的应用，经动物实验表明补充5-氨基乙酰丙酸可抑制肠黏膜炎症，经细胞实验表明，经5-氨基乙酰丙酸干预肠炎小鼠肠组织后，与干扰素-γ通路有关的hub基因如stat1、irf7、ifit3、oasl2、usp18、rsad2、isg15、rtp4、psmb8、gbp2水平显著下降，而在肠炎小鼠肠组织中上述基因的水平都是上升的，进而，5-氨基乙酰丙酸通过抑制干扰素信号通路缓解炎症性肠病。
附图说明
18.图1为不同组别小鼠结肠、体重、疾病、肠粘膜变化情况，其中a-b为小鼠结肠大体形态及长度改变，c为小鼠体重变化，d为小鼠疾病活动指数评分，e为小鼠肠黏膜组织he染色；
19.图2为5-ala干预后，stat1、irf7、ifit3、oasl2、usp18、rsad2、isg15、rtp4、psmb8、gbp2基因表达量变化情况。
具体实施方式
20.本发明提供了5-氨基乙酰丙酸在制备防治炎症性肠病产品中的应用。
21.本发明对于5-氨基乙酰丙酸的具体来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品均可，在本发明具体实施例中，使用的是购买所得的分析纯级别的5-氨基乙酰丙酸。在本发明中，所述产品优选的包括药品、食品，当所述产品为药品时，所述5-氨基乙酰丙酸的使用剂量优选为100mg/kg-200mg/kg，更优选为120mg/kg-160mg/kg，所述使用剂量指的是按照动物体重计算，即，在使用本发明药品时，按照每千克体重服用100mg-200mg5-氨基乙酰丙酸的量计算药品使用量。
22.在本发明中，所述5-氨基乙酰丙酸优选的通过调控干扰素信号通路发挥作用，更优选的通过调控干扰素-γ信号通路发挥作用。
23.在本发明中，所述5-氨基乙酰丙酸优选的通过调控与干扰素信号通路有关的基因发挥作用，更优选的通过调控与干扰素-γ信号通路有关的基因发挥作用。所述基因优选的包括stat1、irf7、ifit3、oasl2、usp18、rsad2、isg15、rtp4、psmb8、gbp2。在动物实验中，上述hub基因在结肠炎小鼠的肠组织中的表达量是上升的，灌胃给予5-氨基乙酰丙酸后，上述基因的表达量均下降，在细胞实验中，用20mm终浓度的5-氨基乙酰丙酸干预人肠上皮细胞株ncm460，24h后，以上基因的水平也有显著下降。表明在本发明中，所述5-氨基乙酰丙酸通过下调上述基因表达水平发挥作用。
24.下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
25.实施例1
26.采用6周龄的c57bl/6小鼠，用dss构建实验性结肠炎模型。予以5-ala灌胃干预，每天一次，持续7天，分为三个剂量组，其中高剂量组(hd)200mg/kg，中剂量组(md)100mg/kg，低剂量组(ld)50mg/kg。以未进行dss处理的小鼠为空白对照组(对照组)，以未给予5-ala灌
胃干预处理的结肠炎模型小鼠为阴性对照组(dss组)。统计五组小鼠的结肠长度、体重、疾病、肠粘膜变化情况，结果如图1所示。
27.由图1可以看出，中剂量组及高剂量组5-ala灌胃干预后，小鼠结肠缩短程度减轻(p《0.05，图1a-b)，体重下降、腹泻及血便等症状缓解，疾病活动指数下降(p《0.05，图1c-d)，he染色显示其肠黏膜结构破坏及炎性细胞浸润程度等病理特征缓解(图1e)，提示5-ala可以减轻实验性结肠炎小鼠的炎症及肠黏膜损伤。
28.实施例2
29.提取实施例1对照组、dss组及5-ala高剂量干预组小鼠的肠组织，进行rna-seq测序研究。结果如表1所示，与实验性结肠炎小鼠相比，灌胃给予5-ala的实验性结肠炎小鼠的肠组织中，差异最大的hub基因包括：stat1、irf7、ifit3、oasl2、usp18、rsad2、isg15、rtp4、psmb8、gbp2，这些差异基因是干扰素-γ信号通路的重要因子，在肠炎小鼠的肠组织中都是上升的，而5-ala干预后均下降。
30.表1rna-seq测序结果
31.基因名称5-ala干预组v.s.dss组logfc值stat1-1.891525777irf7-3.122429087ifit3-3.529132031oasl2-3.650766538usp18-2.411050953rsad2-1.836606601isg15-4.20883179rtp4-2.46127824psmb8-1.85042157gbp2-2.626880742
32.实施例3
33.以终浓度为20ng/ml的人重组ifn-γ干预人正常肠上皮细胞ncm46024h造成细胞炎症模型，同时以5-ala干预，分为5组：control、ifn-γ、ifn-γ ala(5mm)、ifn-γ ala(10mm)、ifn-γ ala(20mm)。分别检测各组中stat1、irf7、ifit3、oasl2、usp18、rsad2、isg15、rtp4、psmb8、gbp2基因的表达量，结果如图2所示。
34.由图2可以看出，终浓度为20mm的5-ala干预后，stat1、irf7、ifit3、oasl2、usp18、rsad2、isg15、rtp4、psmb8、gbp2等基因均明显下降，证明5-ala干预可降低干扰素通路相关基因的水平。
35.以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。