一种离子液体提取菊科类药物成分的萃取方法与流程

1.本发明涉及离子液体萃取技术领域，具体涉及一种离子液体提取菊科类药物成分的萃取方法。


背景技术：

2.近年来，随着检测技术的不断提高，以及国家对中草药研究的重视，作为传统中草药，辣蓼草有抗hiv活性和抗肿瘤的作用。此外，还有祛风利湿、散瘀止痛、解毒消肿、杀虫止痒之功效。常用于痢疾、胃肠炎、腹泻、风湿关节痛、跌打肿痛、功能性子宫出血等病症的治疗；外用于毒蛇咬伤、皮肤湿疹。目前国内对有效成分的研究报道也较多，刘信瓶等人用gc/ms对辣蓼草水蒸馏法提取的挥发油进行了分析，分离并鉴定出了50个组分(占总峰面积的97.84％)。其主要挥发活性成分为：n-(2-乙胺)次乙亚胺、3,4,5,6-四氢邻苯二甲酸酐、3-己烯-1-醇等；姚祖凤等人也用gc/ms法对湘西辣蓼提取物进行了分析，结果表明其中含高达52％的萜类化合物，主要为1-菲兰烯、姜烯、α-苎烯、β-石竹烯、α-蒎烯、γ-松油烯、香柠檬烯、律草烯、红没药烯等；张国英等人采用聚酰胺柱层析的方法，从江西宁都辣蓼中分离得到5个黄酮类化合物：金丝桃苷、芦丁、斛皮素、异鼠李素、山萘酚，采用超临界二氧化碳技术萃取辣蓼叶中的挥发油，并用gc-ms联用方法对挥发油的化学成分进行了分离和鉴定，鉴定组分占挥发油总量的80.66％。另外，罗杰等人用hplc测定水辣蓼中芦丁的含量；赖东美等人用rp-hplc法测定了辣蓼中没食子酸量。因此，综合近年来有关辣蓼草研究的成果表明，其主要有效成分为以黄酮类及萜类物质为主的活性物质，且具有种类多、含量丰富的特点。
3.离子液体是一类由有机或无机阴阳离子构成的熔点较低的有机盐类物质，是继“超临界流体”和“双水相”之后的第三种绿色溶剂，由于它的良溶性、不挥发、热稳定及化学惰性等特点，已被逐渐应用于医药、化妆品、制药及食品等方面。与常规有机溶剂相比，利用离子液体从植物、环境样品和中药材等样品中提取生物活性化合物具有很大的前景，它可以减轻环境污染，并提高样品预处理过程中对目标化合物的选择性和提取收率。
4.目前，尚未有将离子液体用于萃取菊科药物的报道。尽管已有应用离子液体萃取其他药物成分的初步研究，但是现有的萃取方法存在萃取效果较差，方法复杂，且具有有害物质残留等问题。


技术实现要素：

5.本发明针对现有技术存在的问题提供一种简单易行、产品安全无毒、绿色环保的一种离子液体提取菊科类药物成分的萃取方法。
6.本发明采用的技术方案是：
7.一种离子液体提取菊科类药物成分的萃取方法，包括以下步骤：
8.步骤1：将菊科类植物清洗、干燥、粉粹、筛分后，得到所需药粉；
9.步骤2：将离子液体和步骤1得到的药粉充分混合，反应后得到混合物；
10.步骤3：将步骤2得到的混合物离心分离、水洗、洗脱、干燥、复溶后离心即可得到所
需药物成分。
11.进一步的，所述步骤1中菊科植物为艾叶、紫茎泽兰、臭灵丹、叶下花、辣子草中的一种、两种及以上混合构成。
12.进一步的，所述步骤2中反应条件：采用超声或微波条件下，同时搅拌。
13.进一步的，所述步骤2中离子液体为牛磺酸、n,n-二甲基-n-(2-羟基乙氧基乙基)丙酸铵、n,n-二甲基(氰基乙基)丙酸铵、1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐、氯化1-乙基-3-甲基咪唑、氯化1-丁基-3-甲基咪唑、氯化1-己基-3-甲基咪唑、氯化1-辛基-3-甲基咪唑、1-丁基-3-甲基咪唑基六氟磷酸盐和氨基酸中的一种、两种及以上混合构成(具体例子参见表1)。
14.进一步的，所述步骤2中离子液体和药粉的质量比为10:1～3，离子液体为离子液体和溶剂构成的混合溶液，其中离子液体混合液中按照体积计溶剂占离子混合液的30～80％。
15.进一步的，所述步骤2中反应条件如下：
16.首先混合后，药粉在离子液体中进行浸泡，浸泡时间为30～60min；
17.然后超声处理或微波处理：超声时间为20～120min，超声功率为200～500w；微波处理时间为20～50min，微波功率为118w；冷却至室温后，静置2～10min；超声处理或微波处理过程中同时进行搅拌。
18.进一步的，所述搅拌为磁力搅拌、人工搅拌、机械搅拌中的一种。
19.进一步的，所述步骤3中离心处理过程中，转速为10000～15000r/min，离心时间为15～30min，离心处理温度条件为4～10℃。
20.进一步的，所述步骤2中离子液体为牛磺酸、n,n-二甲基-n-(2-羟基乙氧基乙基)丙酸铵和氨基酸按照摩尔比为3:2:1混合构成。
21.进一步的，所述步骤3中离心处理后通过spe柱除去离子液体，水洗后通过乙醇水溶液进行洗脱；对洗脱液通过氮气吹干干燥，然后用乙醇水溶液复溶，再次离心后取上清液即可得到所需药物成分。
22.本发明的有益效果是：
23.(1)本发明利用离子液体从植物、环境样品和中药材等样品中提取生物活性化合物具有很大前景；
24.(2)本发明方法对目标化合物具有选择性和提取收率，萃取率高；环境友好，萃取方法简单易行、产品安全无毒、绿色环保；
25.(3)本发明方法中的微波和超声，能显著促进偶联反应，促进产物的生成。
具体实施方式
26.下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。
27.一种离子液体提取菊科类药物成分的萃取方法，其特征在于，包括以下步骤：
28.步骤1：将菊科类植物采摘、清洗、干燥、粉粹、筛分后，得到所需药粉；菊科植物为具有抗hiv活性的菊科中草药，艾叶、紫茎泽兰、臭灵丹、叶下花、辣子草中的一种、两种及以上混合构成。干燥方法为日晒法、摊晾法、烘炕法、烘房和干燥机烘干法、远红外加热干燥法、微波干燥法一种或几种。粉碎仪器为铁研船、球磨机、榔头机、万能粉碎机等一种或几种。筛分粒度在为60至200目之间。
29.步骤2：将离子液体和步骤1得到的药粉同时加入反应管中，在超声波或微波辅助
下使用搅拌，充分反应后得到混合物；离子液体为牛磺酸、n,n-二甲基-n-(2-羟基乙氧基乙基)丙酸铵、n,n-二甲基(氰基乙基)丙酸铵、1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐、氯化1-乙基-3-甲基咪唑、氯化1-丁基-3-甲基咪唑、氯化1-己基-3-甲基咪唑、氯化1-辛基-3-甲基咪唑、1-丁基-3-甲基咪唑基六氟磷酸盐和氨基酸中的一种、两种及以上混合构成。
30.离子液体和药粉的质量比为10:1～3，离子液体为离子液体和溶剂构成的混合溶液，其中离子液体混合液中按照体积计溶剂占离子混合液的30～80％。其中离子液体的浓度为0.2-1mol
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，其中溶剂选择乙醇等。
31.反应条件如下：
32.首先混合后，药粉在离子液体中进行浸泡，浸泡时间为30～60min；
33.然后超声处理或微波处理：超声时间为20～120min，超声功率为200～500w；微波处理时间为20～50min，微波功率为118w；冷却至室温后(微波或超声波处理会发热)，静置2～10min；超声处理或微波处理过程中同时进行搅拌。搅拌为磁力搅拌、人工搅拌、机械搅拌中的一种。
34.步骤3：将步骤2得到的混合物离心分离，收集上清液，过spe柱(c18)除去离子液体。水洗后再用乙醇洗脱，将收集到的洗脱液氮气吹干，再加乙醇水溶液复溶，再次离心后取上清液得到其药物成分。离子液体可以通过减压加热蒸馏回收，从而实现循环使用。
35.离心处理过程中，转速为10000～15000r/min，离心时间为15～30min，离心处理温度条件为4～10℃。
36.实施例1
37.按照以下步骤提取药物成分：
38.步骤1：将辣子草采摘、清洗，经过干燥机烘干并高温杀菌和寄生虫卵，用球磨机进行粉碎并筛分出粒度为100目药粉。
39.步骤2：将药粉和离子液体混合，在超声功率300w条件下，超声处理30min，冷却至室温，静置时间为两分钟，经磁力搅拌充分。离子液体为牛磺酸、n,n-二甲基-n-(2-羟基乙氧基乙基)丙酸铵和组氨酸rch(nh2)cooh按照摩尔比为3:2:1混合构成。
40.步骤3：将混合物经过离心分离，在转速为10000r/min的离心机上，离心15min收集上清液，过spe柱(c18)除去离子液体，水洗后再用乙醇洗脱，将收集到的洗脱液氮气吹干，再加乙醇水溶液复溶，再次离心后取上清液得到复合药物成分。
41.上述离子液体中，由于它们存在广泛的氢键网络以及三者的协同作用，对菊科植物中斛皮素的萃取率有大量的提高作用。由于在协同萃取体系中生成了更为稳定的含有多种配位体的配合物，这种配合物油溶性增大，能显著提高萃取率。
42.实施例2
43.按照以下步骤提取药物成分：
44.步骤1：将辣子草和艾叶采摘、清洗，经过干燥机烘干并高温杀菌和寄生虫卵，用球磨机进行粉碎并筛分出粒度为150目药粉。
45.步骤2：将药粉和离子液体混合，在微波功率118w条件下，超声处理20～50min，冷却至室温，静置时间为两分钟，经磁力搅拌充分。离子液体为n,n-二甲基-n-(2-羟基乙氧基乙基)丙酸铵和氯化1-乙基-3-甲基咪唑按照摩尔比为3:2混合构成。
46.步骤3：将混合物经过离心分离，在转速为10000r/min的离心机上，离心10min收集
上清液，过spe柱(c18)除去离子液体，水洗后再用乙醇洗脱，将收集到的洗脱液氮气吹干，再加乙醇水溶液复溶，再次离心后取上清液得到复合药物成分。
47.上述离子液体中，由于它们存在广泛的氢键网路以及三者的协同作用，对菊科植物中斛皮素的萃取率有大量的提高作用。由于在协同萃取体系中生成了更为稳定的含有多种配位体的配合物，这种配合物油溶性增大，能显著提高萃取率。
48.表1所用离子液体的化学式举例
49.50.本发明与现有的萃取方法相比，利用离子液体从植物、环境样品和中药材等样品中提取生物活性化合物具有很大的前景，它可以减轻环境污染，并提高样品预处理过程中对目标化合物的选择性和提取收率。