自动化T细胞培养的制作方法

技术特征：
1.用于t细胞的规模缩减加工的自动化方法，其包括：通过使从一个或更多个供体获得的t细胞输入组与一种或更多种活化试剂自动接触来活化所述t细胞输入组，以产生活化的t细胞组；通过使所述活化的t细胞组与重组病毒载体在促进所述活化的t细胞组的病毒感染的条件下自动接触来转导所述活化的t细胞组，以产生经转导的t细胞组，其中所述重组病毒载体包含编码异源重组蛋白的核酸；扩增所述经转导的t细胞组；从扩增培养基中自动回收所述经转导的t细胞组；以及通过自动冷冻保存所述经转导的t细胞组来收获所述经转导的t细胞组，以产生收获的经转导的t细胞组。2.权利要求1所述的方法，其还包括通过将所述活化的t细胞组自动转移至接种培养基中来接种所述活化的t细胞组。3.权利要求1或权利要求2所述的方法，其中活化包括：自动洗涤所述t细胞输入组；任选地，自动获得经洗涤的t细胞输入组的测试样品以用于活细胞计数；使所述经洗涤的t细胞输入组与所述一种或更多种活化试剂自动接触；以及任选地，在与所述一种或更多种活化试剂接触之后，自动获得所述活化的t细胞组的测试样品以用于活细胞计数。4.权利要求1至3中任一项所述的方法，其中转导包括：任选地，自动获得所述活化的t细胞组的测试样品以用于活细胞计数；自动制备所述活化的t细胞组用于旋转孵育；通过使所述活化的t细胞组与所述重组病毒载体接触并对所述活化的t细胞组施加离心力来使所述活化的t细胞组进行自动旋转孵育；以及任选地，在转导之后在哺乳动物细胞培养箱中孵育或接种所述活化的t细胞组。5.权利要求1至4中任一项所述的方法，其中接种包括：任选地，在转导之后自动获得所述活化的t细胞组的测试样品以用于活细胞计数；以及通过将所述活化的t细胞组自动转移至扩增板并将含有所述活化的t细胞组的扩增板置于哺乳动物细胞培养箱中来接种所述活化的t细胞组。6.权利要求1至5中任一项所述的方法，其中扩增还包括：获得所述经转导的t细胞组的测试样品以用于活细胞计数；以及自动进行模拟灌注/细胞培养基更换。7.权利要求1至6中任一项所述的方法，该方法还加压脱珠，其中脱珠包括：通过施加磁场，使所述经转导的t细胞组和/或所述活化的t细胞组自动脱珠。8.权利要求1至7中任一项所述的方法，其中收获包括：将所述经转导的t细胞组置于带有冷冻保存培养基的冷冻瓶中；以及将所述冷冻瓶置于液氮罐中。9.权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述t细胞包括cd4 t细胞。10.权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述t细胞包括cd8 t细胞。11.权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述t细胞包括cd4 t细胞和cd8 t细胞。
12.权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述异源重组蛋白包括重组受体。13.权利要求12所述的方法，其中所述重组受体能够与靶抗原结合，所述靶抗原与疾病、障碍或病症的细胞或组织相关、对疾病、障碍或病症的细胞或组织具有特异性和/或在疾病、障碍或病症的细胞或组织上表达。14.权利要求13所述的方法，其中所述疾病、障碍或病症是感染性疾病或障碍、自身免疫病、炎性疾病或者肿瘤或癌症。15.权利要求13或14所述的方法，其中所述靶抗原是肿瘤抗原。16.权利要求12至15中任一项所述的方法，其中所述重组受体是或包含功能性非tcr抗原受体或tcr或其抗原结合片段。17.权利要求12至15中任一项所述的方法，其中所述重组受体是嵌合抗原受体(car)。18.权利要求1至17中任一项所述的方法，其中所述重组病毒载体包括是逆转录病毒载体。19.权利要求18所述的方法，其中所述逆转录病毒载体是慢病毒载体或γ逆转录病毒载体。20.权利要求1至19中任一项所述的方法，其中所述t细胞包括从一个或更多个供体获得的原代t细胞。21.权利要求20所述的方法，其中所述一个或更多个供体是人对象。22.用于t细胞的规模缩减加工的自动化方法，其包括：通过使从一个或更多个供体获得的t细胞输入组与一种或更多种活化试剂自动接触来活化所述t细胞输入组，以产生活化的t细胞组；通过使所述活化的t细胞与重组多核苷酸在促进所述重组多核苷酸并入到所述活化的t细胞中的条件下接触，来修饰所述活化的t细胞组以产生经修饰的t细胞组，其中所述重组多核苷酸包含编码异源重组蛋白的核酸；扩增所述经修饰的t细胞组；从扩增培养基中回收所述经修饰的t细胞组；以及通过自动冷冻保存所述经修饰的t细胞组来收获所述经修饰的t细胞组，以产生收获的经修饰的t细胞组。23.权利要求22所述的方法，其中所述修饰步骤包括转导、电穿孔、基于试剂的转染、细胞加压或挤压。24.权利要求22或权利要求23所述的方法，其中所述方法的一个或更多个步骤是自动进行的和/或没有来自操作者的干预。25.权利要求22至24中任一项所述的方法，其还包括通过将所述活化的t细胞组自动转移至接种培养基中来接种所述活化的t细胞组。26.权利要求22至25中任一项所述的方法，其中活化包括：自动洗涤所述t细胞输入组；任选地，自动获得经洗涤的t细胞输入组的测试样品以用于活细胞计数；使所述经洗涤的t细胞输入组与所述一种或更多种活化试剂自动接触；以及任选地，在与所述一种或更多种活化试剂接触之后，自动获得所述活化的t细胞组的测试样品以用于活细胞计数。
27.权利要求23至26中任一项所述的方法，其中转导包括：任选地，自动获得所述活化的t细胞组的测试样品以用于活细胞计数；自动制备所述活化的t细胞组用于旋转孵育；通过使所述活化的t细胞组与重组病毒载体接触并对所述活化的t细胞组施加离心力来使所述活化的t细胞组进行自动旋转孵育；以及任选地，在转导之后在哺乳动物细胞培养箱中孵育或接种所述活化的t细胞组。28.权利要求27所述的方法，其中接种包括：任选地，在转导之后自动获得所述活化的t细胞组的测试样品以用于活细胞计数；以及通过将所述活化的t细胞组自动转移至扩增板并将含有所述活化的t细胞组的扩增板置于哺乳动物细胞培养箱中来接种所述活化的t细胞组。29.权利要求22至28中任一项所述的方法，其中扩增还包括：获得所述经修饰的t细胞组的测试样品以用于活细胞计数；以及自动进行模拟灌注/细胞培养基更换。30.权利要求22至29中任一项所述的方法，其还包括脱珠，其中脱珠包括：通过施加磁场，使所述经修饰的t细胞组和/或所述活化的t细胞组自动脱珠。31.权利要求22至30中任一项所述的方法，其中收获包括：将所述经修饰的t细胞组置于带有冷冻保存培养基的冷冻瓶中；以及将所述冷冻瓶置于液氮罐中。32.权利要求22至31中任一项所述的方法，其中所述t细胞包括cd4 t细胞。33.权利要求22至31中任一项所述的方法，其中所述t细胞包括cd8 t细胞。34.权利要求22至31中任一项所述的方法，其中所述t细胞包括cd4 t细胞和cd8 t细胞。35.权利要求22至34中任一项所述的方法，其中所述异源重组蛋白包括重组受体。36.权利要求35所述的方法，其中所述重组受体能够与靶抗原结合，所述靶抗原与疾病、障碍或病症的细胞或组织相关、对疾病、障碍或病症的细胞或组织具有特异性和/或在疾病、障碍或病症的细胞或组织上表达。37.权利要求36所述的方法，其中所述疾病、障碍或病症是感染性疾病或障碍、自身免疫病、炎性疾病或者肿瘤或癌症。38.权利要求36或权利要求37所述的方法，其中所述靶抗原是肿瘤抗原。39.权利要求35至38中任一项所述的方法，其中所述重组受体是或包含功能性非tcr抗原受体或tcr或其抗原结合片段。40.权利要求35至38中任一项所述的方法，其中所述重组受体是嵌合抗原受体(car)。41.权利要求22至40中任一项所述的方法，其中所述t细胞包含从一个或更多个供体获得的原代t细胞。42.权利要求41所述的方法，其中所述一个或更多个供体是人对象。43.用于t细胞转导的多路自动化系统，其包括：自动液体处理系统，以及与所述自动液体处理系统通信的控制系统，所述控制系统包括一个或更多个处理器，所述处理器被编程为控制所述自动液体处理系统以进行以下单元处理：
活化t细胞组；修饰所述t细胞组；使所述t细胞组脱珠；接种所述t细胞组；扩增所述t细胞组；以及收获所述t细胞组。44.权利要求43所述的系统，其中所述自动液体处理系统包括柔性通道液体操纵模块，其被配置为以独立的多通道移液管形式转移液体，其中每个移液管被配置为独立操作。45.权利要求44所述的系统，其中所述柔性通道液体操纵模块被配置为基于液体类别的确定来精确操纵约0.5至5000μl的流体体积。46.权利要求44或权利要求45所述的系统，其中所述柔性通道液体操纵模块被配置为使用一次性尖端来提供无菌培养。47.权利要求44至46中任一项所述的系统，其中所述柔性通道液体操纵模块是液体置换柔性通道臂。48.权利要求43至47中任一项所述的系统，其中所述自动液体处理系统包括被配置为以多通道移液管形式转移液体的静态多通道液体操纵模块。49.权利要求48所述的系统，其中所述静态多通道液体操纵模块是液体置换柔性通道臂或多通道臂。50.权利要求43至49中任一项所述的系统，其中所述自动液体处理系统包括具有可互换夹持器配置的容器操纵模块。51.权利要求50所述的系统，其中所述可互换夹持器配置包括：被配置用于水平接近和运输实验室器具的偏心指件；被配置用于垂直接近实验室器具的中心指件；以及被配置用于运输管类型的实验室器具的管指件。52.权利要求50或权利要求51所述的系统，其中所述容器操纵模块是长z轴机器人夹持器臂。53.权利要求43至52中任一项所述的系统，其中所述自动液体处理系统包括可独立配置用于活化、修饰、接种、扩增、脱珠和收获单元操作的工作台。54.权利要求43至53中任一项所述的系统，其中所述自动液体处理系统包括温度受控的机器人离心机。55.权利要求43至54中任一项所述的系统，其中所述自动液体处理系统包括被配置为容纳和夹持圆形实验室器具的瓶夹持器模块。56.权利要求43至55中任一项所述的系统，其中所述自动液体处理系统包括被配置为进行活细胞计数测量的自动细胞计数模块。57.权利要求43至56中任一项所述的系统，其中所述自动液体处理系统包括被配置为容纳冷冻瓶的便携式冷冻瓶冷却室/盖容纳室。58.权利要求43至57中任一项所述的系统，其中所述自动液体处理系统提供无菌环境。59.权利要求43至58中任一项所述的系统，其还包括哺乳动物细胞培养箱。60.权利要求43至59中任一项所述的系统，其中所述控制系统另外被编程为控制所述自动液体处理系统以通过使所述t细胞组与重组多核苷酸在促进所述重组多核苷酸并入到
所述t细胞组中的条件下接触来修饰所述t细胞组；并且其中修饰所述t细胞组包括转导、转染、细胞加压或细胞挤压操作中的一者以将所述重组多核苷酸并入到所述t细胞组中。

技术总结
T细胞的规模缩减加工的自动化方法。所述方法包括：通过使T细胞与一种或更多种活化试剂自动接触来活化所述T细胞；通过使所述T细胞与重组病毒载体自动接触来转导所述T细胞；自动接种T细胞；自动扩增所述T细胞；任选地，使所述T细胞自动脱珠；以及自动收获所述T细胞。用于T细胞的规模缩减加工的自动化方法的系统。于T细胞的规模缩减加工的自动化方法的系统。于T细胞的规模缩减加工的自动化方法的系统。


技术研发人员：伊维
受保护的技术使用者：朱诺治疗学股份有限公司
技术研发日：2020.06.05
技术公布日：2022/3/18