苦味受体阻滞剂及其鉴定方法与流程

苦味受体阻滞剂及其鉴定方法
1.相关申请的交叉引用
2.本技术要求2019年9月9日提交的第62/897,844号和2020年4月15日提交的第63/010,655号美国临时申请和2019年12月16日提交的第19216401.0号欧洲专利申请的优先权，每一个都通过引用并入本文，如同它们整体在本文中阐述一样。
3.参考电子格式的序列表
4.本技术提交了一份名为snmx054woseqlist.txt的电子序列表，创建于2020年9月4日，大小为13,621字节。电子序列表中的信息通过引用整体并入本文。
技术领域
5.本公开概括而言提供用于鉴定阻断(阻滞，block)苦味受体，特别是由柑橘提取物中通常存在的某些化合物激活的苦味受体的化合物的方法。本公开还提供了包含此类化合物的组合物及其使用方法。


背景技术：

6.味觉系统提供有关外界化学成分的感官信息。味觉转导是动物中化学触发的感觉中更复杂的形式之一。从简单的后生动物到最复杂的脊椎动物，在整个动物界中都可以找到味觉的信号。哺乳动物被认为具有五种基本的味觉形式：甜味、苦味、酸味、咸味和鲜味。
7.苦味是这五种味觉形式中最敏感的一种，人们普遍认为苦味是令人不快的、强烈的且不合意的。已知大量的苦味化合物是有毒的。因此，检测低浓度苦味化合物的能力提供了一定的进化优势。即便如此，许多无毒食物和饮料产品都含有苦味化合物，例如咖啡、茶、绿叶蔬菜和柑橘类水果。对许多人来说，此类食物和饮料中苦味化合物的浓度低于引起不愉快反应的水平。但其他人可能对苦味的感知阈值较低，并且在食用这些产品时可能会体验到减少的乐趣。在此类产品中添加甜味剂例如蔗糖有助于抵消苦味。但是添加甜味剂会增加产品的热量含量，并且对于那些可以轻松承受这些产品的温和天然苦味而不用增甜的人来说可能会过度改变味道。
8.当苦味化合物激活通常位于舌头中的25种不同苦味受体中的一种或多种时，人类会感觉到苦味。这些苦味受体是tas2r(味觉受体，2型)受体家族的成员。25种不同的苦味受体中的每一种都含有一种蛋白质，其序列对于每种苦味受体都不同。这25种不同的苦味受体一般都用编号来表示，例如tas2r1、tas2r3、tas2r4等。不同的苦味化合物可以激活不同组的苦味受体。因此，阻断某些苦味化合物苦味的化合物可能无法有效地阻断其他苦味化合物的苦味。
9.柑橘类水果含有多种人类通常认为是苦味的化合物。许多这些化合物大量存在于柑橘类水果的果皮(peel)或外皮(rind)中，但它们也可以存在于水果的果瓤(meat)和果肉(pulp)中。一些苦味受体阻滞剂(阻断剂，blockers)可有效阻止某些食物或饮料例如咖啡中存在的苦味化合物的苦味。但这些化合物在阻断柑橘产品的苦味方面并不那么有效。因此，一直需要发现这样的化合物，其可以阻断那些导致人类将某些柑橘类产品视为苦味倾
向的苦味受体。


技术实现要素：

10.本公开涉及tas2r味觉受体集合的发现，这些味觉受体主要负责人类对柑橘中天然存在的某些化合物的苦味的感知。
11.在第一形态中，本公开提供了seq id no:1的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。
12.在第二形态中，本公开提供了seq id no:2的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。
13.在第三形态中，本公开提供了seq id no:3的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。
14.在第四形态中，本公开提供了seq id no:4的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。
15.在第五形态中，本公开提供了seq id no:5的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。
16.在第六形态中，本公开提供了鉴定减少苦味的化合物的方法，该方法包括：使测试化合物和苦味化合物接触(introduce
…
to
…
)一种或多种味觉受体蛋白，其中该一种或多种味觉受体蛋白是包含以下序列的多肽：seq id no:1的多肽序列，或其功能片段；seq id no:2的多肽序列，或其功能片段；seq id no:3的多肽序列，或其功能片段；seq id no:4的多肽序列，或其功能片段；seq id no:5的多肽序列，或其功能片段；或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同；以及通过比较该一种或多种味觉受体蛋白在存在和不存在该测试化合物的情况下对该苦味化合物的活性来测量该一种或多种味觉受体蛋白中每一种对该测试化合物的反应。在一些实施方案中，该方法进一步包括：基于所测得的反应来鉴定出减少苦味的活性测试化合物；选择该活性测试化合物作为减少苦味的化合物。
17.在第七形态中，本公开提供了第六形态的某些实施方案的任何经鉴定或经选择的活性测试化合物用于减少可摄取组合物的苦味的用途。在其一些实施方案中，可摄取组合物是源自柑橘类水果的组合物。在一些实施方案中，可摄取组合物是天然存在的组合物。在一些其他实施方案中，可摄取组合物是非天然存在的组合物。在一些实施方案中，经鉴定或经选择的活性化合物是多甲氧基黄酮(pmf)，例如源自柑橘类水果的pmf。在一些这样的实施方案中，pmf从由甜橙黄酮(sinensetin)、4
’‑
羟基-甜橙黄酮、栎草亭(quercetogetin)、川陈皮素(nobiletin)、橘皮素(tangeretin)、七甲氧基黄酮以及它们的任何组合构成的群组中选出。
18.在第八形态中，本公开提供了多甲氧基黄酮(pmf)例如源自柑橘类水果的pmf用于减少一种或多种苦味化合物的苦味的用途。在其一些实施方案中，该一种或多种苦味化合物包含在可摄取组合物中。在其一些实施方案中，可摄取组合物是源自柑橘类水果的组合物。在一些实施方案中，可摄取组合物是天然存在的组合物。在一些其他实施方案中，可摄取组合物是非天然存在的组合物。在一些这样的实施方案中，pmf从由甜橙黄酮、4
’‑
羟基-甜橙黄酮、栎草亭、川陈皮素、橘皮素、七甲氧基黄酮以及它们的任何组合构成的群组中选出。在一些实施方案中，苦味化合物是这样一种化合物，其调节(例如激活)seq id no:2的
多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。在一些实施方案中，苦味化合物是柠檬苦素类化合物(limonoids)，例如柠檬苦素(limonin)、诺米林(nomilin)、诺米林酸(nomilinic acid)或它们的任何组合。
19.在第九形态中，本公开提供了减少可摄取组合物的苦味的方法，包括使一定量(例如减少苦味的有效量)的第六形态的某些实施方案的任何经鉴定或经选择的活性测试化合物接触可摄取组合物。在其一些实施方案中，可摄取组合物包含一种或多种源自柑橘类水果的化合物。在一些实施方案中，可摄取组合物是非天然存在的组合物。在一些实施方案中，经鉴定或经选择的活性化合物是多甲氧基黄酮(pmf)，例如源自柑橘类水果的pmf。在一些这样的实施方案中，pmf从由甜橙黄酮、4
’‑
羟基-甜橙黄酮、栎草亭、川陈皮素、橘皮素、七甲氧基黄酮以及它们的任何组合构成的群组中选出。
20.在第十形态中，本公开提供了减少可摄取组合物的苦味的方法，包括使一定量(例如减少苦味的有效量)的多甲氧基黄酮(pmf)接触可摄取组合物。在其一些实施方案中，可摄取组合物包含一种或多种苦味化合物。在其一些实施方案中，可摄取组合物是源自柑橘类水果的组合物。在一些实施方案中，可摄取组合物是天然存在的组合物。在一些其他实施方案中，可摄取组合物是非天然存在的组合物。在一些这样的实施方案中，pmf从由甜橙黄酮、4
’‑
羟基-甜橙黄酮、栎草亭、川陈皮素、橘皮素、七甲氧基黄酮以及它们的任何组合构成的群组中选出。在一些实施方案中，苦味化合物是这样一种化合物，其调节(例如激活)seq id no:2的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。在一些实施方案中，苦味化合物是柠檬苦素类化合物，例如柠檬苦素、诺米林、诺米林酸或它们的任何组合。
21.在第十一形态中，本公开提供了可摄取组合物，其包含第六形态的某些实施方案的任何经鉴定或经选择的活性测试化合物。在其一些实施方案中，可摄取组合物包含一种或多种源自柑橘类水果的化合物。在一些实施方案中，可摄取组合物是非天然存在的组合物。
22.在第十二形态中，本公开提供了包含一种或多种多甲氧基黄酮(pmf)的可摄取组合物。在一些实施方案中，一种或多种pmf以减少苦味的有效量存在于可摄取组合物中。在其一些实施方案中，可摄取组合物包含一种或多种苦味化合物。在其一些实施方案中，可摄取组合物是源自柑橘类水果的组合物。在一些实施方案中，可摄取组合物是天然存在的组合物。在一些其他实施方案中，可摄取组合物是非天然存在的组合物。在一些这样的实施方案中，pmf从由甜橙黄酮、4
’‑
羟基-甜橙黄酮、栎草亭、川陈皮素、橘皮素、七甲氧基黄酮以及它们的任何组合构成的群组中选出。在一些实施方案中，苦味化合物是这样一种化合物，其调节(例如激活)seq id no:2的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。在一些实施方案中，苦味化合物是柠檬苦素类化合物，例如柠檬苦素、诺米林、诺米林酸或它们的任何组合。
23.在第十三形态中，本公开提供了包含第十一形态的可摄取组合物的已调味产品。在一些实施方案中，已调味产品是饮料产品，例如苏打水、调味水、茶等。在一些其他实施方案中，已调味产品是食物产品。
24.在第十四形态中，本公开提供了包含第十二形态的可摄取组合物的已调味产品。
在一些实施方案中，已调味产品是饮料产品，例如苏打水、调味水、茶等。在一些其他实施方案中，已调味产品是食物产品。
25.在第十五形态中，本公开提供了用于减少从患有柑橘黄龙(绿化)病(citrus greening disease)的柑橘类水果获得的柑橘类组合物的苦味的方法，该方法包括：(a)从柑橘类水果获得柑橘类组合物，其中该柑橘类水果的至少一部分患有柑橘黄龙病；(b)使柑橘类组合物接触减少苦味的组合物，其包含多甲氧基黄酮(pmf)，例如一定量(例如减少苦味的有效量)的多甲氧基黄酮(pmf)。在一些实施方案中，柑橘类组合物包含浓度异常高的一种或多种苦味化合物。在一些这样的实施方案中，pmf从由甜橙黄酮、4
’‑
羟基-甜橙黄酮、栎草亭、川陈皮素、橘皮素、七甲氧基黄酮以及它们的任何组合构成的群组中选出。在一些实施方案中，苦味化合物是这样一种化合物，其调节(例如激活)seq id no:2的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。在一些实施方案中，苦味化合物是柠檬苦素类化合物，例如柠檬苦素、诺米林、诺米林酸或它们的任何组合。在一些实施方案中，减少苦味的组合物获自柑橘类废物。
26.进一步的形态及其实施方案在下文的详细描述、附图、摘要和权利要求书中阐述。
附图说明
27.提供以下附图是为了说明本文公开的组合物和方法的各种实施方案。提供附图仅用于说明目的，而无意于描述任何优选的组合物或优选的方法，也不作为对所要求保护的发明的范围的任何限制的来源。
28.图1显示了六种多甲氧基黄酮(pmf)，发现它们具有拮抗柑橘中苦味化合物的活性。
具体实施方式
29.以下详细描述阐述了本文提供的各个形态和实施方案。该描述将从相关领域的普通技术人员的角度来阅读。因此，这些普通技术人员所熟知的信息不一定包括在内。
30.定义
31.除非本文另有规定，否则以下术语和短语具有以下指示的含义。本公开可以采用本文未明确定义的其他术语和短语。此类其他术语和短语对于本领域普通技术人员而言具有在本公开的语境中所具有的含义。在某些情况下，术语或短语可以单数或复数定义。在这种情况下，应理解，除非明确指出相反的意思，否则单数形式的任何术语都可以包括其复数形式，反之亦然。
[0032]“苦味化合物”是指在受试者中引起可检测的苦味风味的化合物，例如在体外激活tas2r受体的化合物。“苦味受体阻滞剂”或“苦味阻滞剂”是指在体外通过苦味化合物拮抗一种或多种tas2r受体活化的化合物。
[0033]“多甲氧基黄酮”是指在3、5、6、7、8、2’、3’、4’、5’和6’位置具有三个或更多个，或者四个或更多个，或者五个或更多个甲氧基取代基的黄酮衍生物，其中编号遵循通常的黄酮编号，如下所示：
[0034][0035]
非限制性例子包括以下化合物，左栏给出通用名称，而右栏给出替代名称。
[0036][0037][0038]“功能片段”是指与苦味化合物结合的多肽序列的一部分。多肽序列通常包含某些不主动参与结合但可能用于其他目的的氨基酸。在一些情况下，多肽序列的这些非功能部分可以去除或部分替换，同时保持序列的功能部分完整。据说这些经修饰的蛋白包含原始多肽序列的功能片段。
[0039]
如本文所用，单数形式的“一个”、“一种”和“该”包括复数指示物，除非上下文另外明确指出。例如，提及“一个取代基”涵盖单个取代基以及两个或更多个取代基，等等。
[0040]
如本文所用，“例如”、“如”、“诸如”或“包括”旨在引入进一步阐明更一般主题的例子。除非另外明确指出，否则提供这样的例子仅是为了帮助理解本公开中示出的实施方案，并且并不意味着以任何方式进行限制。这些短语也不表示对于所公开的实施方案的任何种类的偏好。
[0041]
如本文所用，“包括”、“包含”、“含”和“含有(comprised of)”是指开放的组，意味着该组除了明确陈述的那些之外还可以包括其他成员。例如，短语“包含a”表示必须存在a，但是也可以存在其他成员。术语“包括”、“具有”和“含有(composed of)”及其语法变体具有
相同的含义。相反，“由
……
组成(consist of)”或“由
……
构成”或“构成为”是指封闭的组。例如，短语“由a组成”是指有且仅有a存在。
[0042]
如本文所用，“视情况/可选地/任选地(optionally)”是指随后描述的事件可以发生或可以不发生。在一些实施方案中，可选事件不发生。在一些其他实施方案中，可选事件的确发生一次或多次。
[0043]
如本文所用，“或”将被给予其最广泛的合理解释，并且不限于“要么/要么”构造。因此，短语“包含a或b”是指a可以存在而b不存在，或者b存在而a不存在，或者a和b都存在。此外，例如，如果a定义了可以具有多个成员(例如，a1和a2)的一类，则可以同时存在该类的一个或多个成员。
[0044]
其他术语在本说明书的其他部分中定义，即使未包含在本小节中。
[0045]
苦味化合物激活的多肽序列
[0046]
本公开提供了某些多肽序列，其可用于在体外模拟某些人类苦味受体在口服摄取时将对此类化合物表现出的反应。
[0047]
在第一形态中，本公开提供了seq id no:1的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。对应于seq id no:1的多肽序列列于一起提交的序列表中，并以引用的方式并入。为清楚起见并避免任何混淆，对应于seq id no:1的多肽序列从其n-末端开始，为：mfspadnifiilitgefilgilgngyialvnwidwikkkkistvdyiltnlviariclisvmvvngivivlnpdvytknkqqiviftfwtfanylnmwittclnvfyflkiassshplflwlkwkidmvvhwillgcfaisllvsliaaivlscdyrfhaiakhkrnitemfhvskipyfepltlfnlfaivpfivslisffllvrslwrhtkqiklyatgsrdpstevhvraiktmtsfifffflyyissilmtfsylmtkyklavefgeiaailyplghslilivlnnklrqtfvrmltcrkiacmi，使用标准的单字母氨基酸代码。
[0048]
在第二形态中，本公开提供了seq id no:2的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。对应于seq id no:2的多肽序列列于一起提交的序列表中，并以引用的方式并入。为清楚起见并避免任何混淆，对应于seq id no:2的多肽序列从其n-末端开始，为：mitflpiifsilivvifvignfangfialvnsiewvkrqkisfvdqiltalavsrvgllwvlllhwyatqlnpafysvevritaynvwavtnhfsswlatslsmfyllrianfsnliflrikrrvksvvlvillgpllflvchlfvinmdetvwtkeyegnvtwkiklrsamyhsnmtltmlanfvpltltlisflllicslckhlkkmqlhgkgsqdpstkvhikalqtvtsflllcaiyflsmiisvcnlgrlekqpvfmfcqaiifsypsthpfililgnkklkqiflsvlrhvrywvkdrslrlhrftrgalcvf，使用标准的单字母氨基酸代码。
[0049]
在第三形态中，本公开提供了seq id no:3的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。对应于seq id no:3的多肽序列列于一起提交的序列表中，并以引用的方式并入。为清楚起见并避免任何混淆，对应于seq id no:3的多肽序列从其n-末端开始，为：mltltrirtvsyevrstflfisvlefavgfltnafvflvnfwdvvkrqplsnsdcvllclsisrlflhgllflsaiqlthfqklseplnhsyqaiimlwmianqanlwlaaclsllycsklirfshtfliclaswvsrkisqmllgiilcscictvlcvwcffsrphftvttvlfmnnntrlnwqikdlnlfysflfcylwsvppfllflvssgmltvslgrhmrtmkvytrnsrdpsleahikalkslvsffcffvisscaafisvpllilwrdgvmvcvgimaacpsghaavlisgnaklrravmtillwaqsslkvradhkadsr
no:2的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。在一些进一步的实施方案中，味觉受体蛋白是包含以下序列的多肽：seq id no:2的多肽序列，或序列与其至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同的多肽序列。在一些实施方案中，seq id no:2的多肽序列可以称为ht2r44。
[0057]
在任何前述实施方案的一些进一步的实施方案中，接触步骤进一步包括使测试化合物和苦味化合物接触味觉受体蛋白，其中味觉受体蛋白是包含以下序列的多肽：seq id no:3的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。在一些进一步的实施方案中，味觉受体蛋白是包含以下序列的多肽：seq id no:3的多肽序列，或序列与其至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同的多肽序列。在一些实施方案中，seq id no:3的多肽序列可以称为ht2r51。
[0058]
在任何前述实施方案的一些进一步的实施方案中，接触步骤进一步包括使测试化合物和苦味化合物接触味觉受体蛋白，其中味觉受体蛋白是包含以下序列的多肽：seq id no:4的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。在一些进一步的实施方案中，味觉受体蛋白是包含以下序列的多肽：seq id no:4的多肽序列，或序列与其至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同的多肽序列。在一些实施方案中，seq id no:4的多肽序列可以称为ht2r65。
[0059]
在任何前述实施方案的一些进一步的实施方案中，接触步骤进一步包括使测试化合物和苦味化合物接触味觉受体蛋白，其中味觉受体蛋白是包含以下序列的多肽：seq id no:5的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。在一些进一步的实施方案中，味觉受体蛋白是包含以下序列的多肽：seq id no:5的多肽序列，或序列与其至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同的多肽序列。在一些实施方案中，seq id no:5的多肽序列可以称为ht2r75。
[0060]
注意，接触步骤可以包括使测试化合物和苦味化合物接触到前述五个段落的肽序列的任意组合中。这可以以任何合适的方式进行。例如，在一些非限制性例子中，当使测试化合物和苦味化合物接触两种或更多种不同的味觉受体蛋白时，接触可以在基于单细胞的测定中进行。但在一些其他非限制性例子中，当使测试化合物和苦味化合物接触两种或更多种不同的味觉受体蛋白时，接触可以在基于两种或更多种细胞的测定中进行，例如对每种味觉受体蛋白进行单独测定。
[0061]
本公开考虑了针对与本文所述的五种不同多肽序列中的每一种相关的两种或更多种、或三种或更多种、或四种或更多种、或五种不同的味觉受体蛋白的任何组合来筛选测试化合物。
[0062]
因此，在一些实施方案中，接触包括使测试化合物和苦味化合物接触第一味觉受体蛋白和第二味觉受体蛋白中的每一个(例如，在相同测定或不同测定中)；其中第一味觉受体蛋白是包含seq id no:1的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；其中第二味觉受体蛋白是包含seq id no:2的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；并且其中测量包括通过比较第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种在存在和不存在测试化合物的情况下对苦味化合物的活性来测量第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种对测试化合物的反应。在一些进一步的实施方案中，第一味觉受体
蛋白是包含seq id no:1的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，并且第二味觉受体蛋白是包含seq id no:2的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽。
[0063]
因此，在一些实施方案中，接触包括使测试化合物和苦味化合物接触第一味觉受体蛋白和第二味觉受体蛋白中的每一个(例如，在相同测定或不同测定中)；其中第一味觉受体蛋白是包含seq id no:1的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；其中第二味觉受体蛋白是包含seq id no:3的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；并且其中测量包括通过比较第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种在存在和不存在测试化合物的情况下对苦味化合物的活性来测量第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种对测试化合物的反应。在一些进一步的实施方案中，第一味觉受体蛋白是包含seq id no:1的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，并且第二味觉受体蛋白是包含seq id no:3的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽。
[0064]
因此，在一些实施方案中，接触包括使测试化合物和苦味化合物接触第一味觉受体蛋白和第二味觉受体蛋白中的每一个(例如，在相同测定或不同测定中)；其中第一味觉受体蛋白是包含seq id no:1的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；其中第二味觉受体蛋白是包含seq id no:4的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；并且其中测量包括通过比较第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种在存在和不存在测试化合物的情况下对苦味化合物的活性来测量第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种对测试化合物的反应。在一些进一步的实施方案中，第一味觉受体蛋白是包含seq id no:1的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，并且第二味觉受体蛋白是包含seq id no:4的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽。
[0065]
因此，在一些实施方案中，接触包括使测试化合物和苦味化合物接触第一味觉受体蛋白和第二味觉受体蛋白中的每一个(例如，在相同测定或不同测定中)；其中第一味觉受体蛋白是包含seq id no:1的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；其中第二味觉受体蛋白是包含seq id no:5的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；并且其中测量包括通过比较第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种在存在和不存在测试化合物的情况下对苦味化合物的活性来测量第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种对测试化合物的反应。在一些进一步的实施方案中，第一味觉受体蛋白是包含seq id no:1的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，并且第二味觉受体蛋白是包含seq id no:5的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽。
[0066]
因此，在一些实施方案中，接触包括使测试化合物和苦味化合物接触第一味觉受体蛋白和第二味觉受体蛋白中的每一个(例如，在相同测定或不同测定中)；其中第一味觉受体蛋白是包含seq id no:2的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少
90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；其中第二味觉受体蛋白是包含seq id no:3的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；并且其中测量包括通过比较第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种在存在和不存在测试化合物的情况下对苦味化合物的活性来测量第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种对测试化合物的反应。在一些进一步的实施方案中，第一味觉受体蛋白是包含seq id no:2的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，并且第二味觉受体蛋白是包含seq id no:3的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽。
[0067]
因此，在一些实施方案中，接触包括使测试化合物和苦味化合物接触第一味觉受体蛋白和第二味觉受体蛋白中的每一个(例如，在相同测定或不同测定中)；其中第一味觉受体蛋白是包含seq id no:2的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；其中第二味觉受体蛋白是包含seq id no:4的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；并且其中测量包括通过比较第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种在存在和不存在测试化合物的情况下对苦味化合物的活性来测量第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种对测试化合物的反应。在一些进一步的实施方案中，第一味觉受体蛋白是包含seq id no:2的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，并且第二味觉受体蛋白是包含seq id no:4的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽。
[0068]
因此，在一些实施方案中，接触包括使测试化合物和苦味化合物接触第一味觉受体蛋白和第二味觉受体蛋白中的每一个(例如，在相同测定或不同测定中)；其中第一味觉受体蛋白是包含seq id no:2的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；其中第二味觉受体蛋白是包含seq id no:5的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；并且其中测量包括通过比较第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种在存在和不存在测试化合物的情况下对苦味化合物的活性来测量第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种对测试化合物的反应。在一些进一步的实施方案中，第一味觉受体蛋白是包含seq id no:2的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，并且第二味觉受体蛋白是包含seq id no:5的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽。
[0069]
因此，在一些实施方案中，接触包括使测试化合物和苦味化合物接触第一味觉受体蛋白和第二味觉受体蛋白中的每一个(例如，在相同测定或不同测定中)；其中第一味觉受体蛋白是包含seq id no:3的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；其中第二味觉受体蛋白是包含seq id no:4的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；并且其中测量包括通过比较第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种在存在和不存在测试化合物的情况下对苦味化合物的活性来测量第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种对测试化合物的反应。在一些进一步的实施方案中，第一味觉受体蛋白是包含seq id no:3的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、
或至少97％等同的多肽，并且第二味觉受体蛋白是包含seq id no:4的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽。
[0070]
因此，在一些实施方案中，接触包括使测试化合物和苦味化合物接触第一味觉受体蛋白和第二味觉受体蛋白中的每一个(例如，在相同测定或不同测定中)；其中第一味觉受体蛋白是包含seq id no:3的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；其中第二味觉受体蛋白是包含seq id no:5的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；并且其中测量包括通过比较第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种在存在和不存在测试化合物的情况下对苦味化合物的活性来测量第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种对测试化合物的反应。在一些进一步的实施方案中，第一味觉受体蛋白是包含seq id no:3的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，并且第二味觉受体蛋白是包含seq id no:5的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽。
[0071]
因此，在一些实施方案中，接触包括使测试化合物和苦味化合物接触第一味觉受体蛋白和第二味觉受体蛋白中的每一个(例如，在相同测定或不同测定中)；其中第一味觉受体蛋白是包含seq id no:4的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；其中第二味觉受体蛋白是包含seq id no:5的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；并且其中测量包括通过比较第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种在存在和不存在测试化合物的情况下对苦味化合物的活性来测量第一受体蛋白和第二受体蛋白中每一种对测试化合物的反应。在一些进一步的实施方案中，第一味觉受体蛋白是包含seq id no:4的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，并且第二味觉受体蛋白是包含seq id no:5的多肽序列的多肽，或序列与其至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽。
[0072]
类似地，接触和测量可以涉及三种不同味觉受体蛋白的任意组合，例如：
[0073]
包含seq id no:1的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:2的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；和包含seq id no:3的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，对于三个不同的多肽序列中的每一种都有相应的测量步骤；或者
[0074]
包含seq id no:1的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:2的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；和包含seq id no:4的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，对于三个不同的多肽序列中的每一种都有相应的测量步骤；或者
[0075]
包含seq id no:1的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:2的多肽序列、其功能片段
的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；和包含seq id no:5的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，对于三个不同的多肽序列中的每一种都有相应的测量步骤；或者
[0076]
包含seq id no:2的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:3的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；和包含seq id no:4的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，对于三个不同的多肽序列中的每一种都有相应的测量步骤；或者
[0077]
包含seq id no:1的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:2的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；和包含seq id no:5的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，对于三个不同的多肽序列中的每一种都有相应的测量步骤；或者
[0078]
包含seq id no:1的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:3的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；和包含seq id no:5的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，对于三个不同的多肽序列中的每一种都有相应的测量步骤；或者
[0079]
包含seq id no:2的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:3的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；和包含seq id no:5的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，对于三个不同的多肽序列中的每一种都有相应的测量步骤；或者
[0080]
包含seq id no:1的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:5的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；和包含seq id no:5的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，对于三个不同的多肽序列中的每一种都有相应的测量步骤；或者
[0081]
包含seq id no:2的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:4的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；和包含seq id no:5的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，对于三个不同的多肽序列中的每一种都有相应的
测量步骤；或者
[0082]
包含seq id no:3的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:4的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；和包含seq id no:5的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，对于三个不同的多肽序列中的每一种都有相应的测量步骤。
[0083]
类似地，接触和测量可以涉及四种不同味觉受体蛋白的任意组合，例如：
[0084]
包含seq id no:1的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:2的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:3的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，和包含seq id no:4的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，对于三个不同的多肽序列中的每一种都有相应的测量步骤；或者
[0085]
包含seq id no:1的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:2的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:3的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，和包含seq id no:5的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，对于三个不同的多肽序列中的每一种都有相应的测量步骤；或者
[0086]
包含seq id no:1的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:2的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:4的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，和包含seq id no:5的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，对于三个不同的多肽序列中的每一种都有相应的测量步骤；或者
[0087]
包含seq id no:1的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:3的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:4的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，和包含seq id no:5的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，对于三个不同的多肽序列中的每一种都有相应的测量步骤；或者
[0088]
包含seq id no:2的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:3的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包
含seq id no:4的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，和包含seq id no:5的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，对于三个不同的多肽序列中的每一种都有相应的测量步骤。
[0089]
类似地，接触和测量可以涉及五种不同的味觉受体蛋白，例如：
[0090]
包含seq id no:1的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:2的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；包含seq id no:3的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，和包含seq id no:4的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽，和包含seq id no:5的多肽序列、其功能片段的多肽，或序列与前述任一者至少90％等同、或至少95％等同、或至少97％等同的多肽；对于三个不同的多肽序列中的每一种都有相应的测量步骤。
[0091]
前述实施方案涉及通过比较味觉受体蛋白在存在和不存在测试化合物的情况下对苦味化合物的活性来测量每种味觉受体蛋白对测试化合物的反应。该测量可以通过任何合适的方式进行。例如，在一些实施方案中，每种味觉受体蛋白在细胞表面上表达，并且针对在标准细胞测定中表达味觉受体蛋白的细胞筛选包含苦味化合物(在存在和不存在测试化合物的情况下)的组合物。可以通过通常用于确定细胞测定中的蛋白质结合的任何合适的方法来进行结合的测量。合适的方法包括但不限于使用荧光染料、钙指示剂蛋白、荧光camp指示剂等。测试化合物的活性通过其拮抗苦味化合物与一种或多种味觉受体蛋白结合的能力来确定。
[0092]
在任何前述实施方案的一些进一步的实施方案中，所述方法还包括基于所测得的反应来鉴定出减少苦味的活性测试化合物。根据前述实施方案，所鉴定的活性测试化合物是拮抗苦味化合物与一种、两种、三种、四种或五种味觉受体蛋白结合的化合物。例如，在一些实施方案中，所鉴定的活性测试化合物是拮抗苦味化合物与前述味觉受体蛋白之一的结合的化合物。在一些其他实施方案中，所鉴定的活性测试化合物是拮抗苦味化合物与前述味觉受体蛋白的两种不同组合的结合的化合物。在一些其他实施方案中，所鉴定的活性测试化合物是拮抗苦味化合物与前述味觉受体蛋白的三种不同组合的结合的化合物。
[0093]
在任何前述实施方案的一些实施方案中，测试化合物被确定为活性化合物，因为它拮抗至少30％、或至少40％、或至少50％、或至少60％、或至少70％、或至少80％、或至少90％的苦味化合物的结合活性。
[0094]
在一些进一步的实施方案中，该方法还包括选择活性测试化合物作为减少苦味的化合物。一旦鉴定出活性测试化合物，就可以通过任何合适的方式进行选择。
[0095]
测试化合物可以是任何适合用于细胞筛选测定的化合物。例如，在一些实施方案中，测试化合物是有机化合物。在一些实施方案中，测试化合物是天然存在的化合物或其糖基化衍生物。在一些其他实施方案中，测试化合物是非天然存在的化合物。
[0096]
可以使用任何合适的组合物来提供苦味化合物。在一些实施方案中，苦味化合物是来自楝(meliaceae)科的植物或来自芸香(rutaceae)科的植物的提取物。在一些进一步的实施方案中，苦味化合物是芸香(rutaceae)科和柑橘(citrus)属植物的提取物，例如橙
子(orange)、柠檬(lemon)、葡萄柚(grapefruit)、酸橙(lime)、金橘(kumquat)、柚子(pomelo)、橘柚(tangelo)、牙买加丑橘(ugli)、柑(tangerine)或香橙(yuzu)的树或果实的提取物。在一些进一步的实施方案中，苦味化合物是三萜。在一些实施方案中，苦味化合物是去四甲基三萜类化合物。在一些实施方案中，苦味化合物是柠檬苦素类化合物。在一些实施方案中，苦味化合物是柠檬苦素、诺米林、诺米林酸、印楝素或它们的任何组合。在一些进一步的实施方案中，苦味化合物是柠檬苦素。
[0097]
用途和方法
[0098]
在其他形态中，本公开提供了前述形态(包括如上所述的任何实施方案或其实施方案的组合)的任何经鉴定或经选择的活性化合物的用途。在某些相关形态中，本公开提供了前述形态(包括如上所述的任何实施方案或其实施方案的组合)的任何经鉴定或经选择的活性化合物用于增强可摄取组合物的甜味的用途。在其一些实施方案中，可摄取组合物包含甜味剂，例如有热量甜味剂。在某些其他相关形态中，本公开提供了前述形态(包括如上所述的任何实施方案或其实施方案的组合)的任何经鉴定或经选择的活性化合物用于减少可摄取组合物的酸味的用途。在一些实施方案中，经鉴定或经选择的活性化合物是多甲氧基黄酮(pmf)，例如源自柑橘类水果的pmf。在一些这样的实施方案中，pmf从由甜橙黄酮、4
’‑
羟基-甜橙黄酮、栎草亭、川陈皮素、橘皮素、七甲氧基黄酮以及它们的任何组合构成的群组中选出。
[0099]
在某些相关形态中，本公开提供了多甲氧基黄酮(pmf)例如源自柑橘类水果的pmf用于减少一种或多种苦味化合物的苦味的用途。在其一些实施方案中，一种或多种苦味化合物包含在可摄取组合物中。在其一些实施方案中，可摄取组合物是源自柑橘类水果的组合物。在一些实施方案中，可摄取组合物是天然存在的组合物。在一些其他实施方案中，可摄取组合物是非天然存在的组合物。在一些这样的实施方案中，pmf从由甜橙黄酮、4
’‑
羟基-甜橙黄酮、栎草亭、川陈皮素、橘皮素、七甲氧基黄酮以及它们的任何组合构成的群组中选出。
[0100]
苦味化合物可以是天然食物产品中常见的任何合适的苦味化合物。在一些实施方案中，苦味化合物是这样一种化合物，其调节(例如激活)seq id no:2的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。
[0101]
在一些实施方案中，苦味化合物是提取自楝(meliaceae)科植物或芸香(rutaceae)科植物的化合物。在一些进一步的实施方案中，苦味化合物是芸香(rutaceae)科和柑橘(citrus)属植物的提取物，例如橙子、柠檬、葡萄柚、酸橙、金橘、柚子、橘柚、牙买加丑橘、柑或香橙的树或果实的提取物。在一些实施方案中，苦味化合物是三萜。在一些进一步的实施方案中，苦味化合物是去四甲基三萜类化合物。在一些进一步的实施方案中，苦味化合物是柠檬苦素类化合物。在一些此类实施方案中，苦味化合物是柠檬苦素、诺米林、诺米林酸、印楝素或它们的任何组合。在一些实施方案中，苦味化合物是柠檬苦素。在一些实施方案中，苦味化合物是诺米林。
[0102]
本公开还提供了对应于前述每种用途的方法。因此，在某些相关形态中，本公开提供了增强可摄取组合物的甜味的方法，包括使一定量(例如甜味增强有效量)的前述形态(包括如上所述的任何实施方案或其实施方案的组合)的任何经鉴定或经选择的活性化合
物接触可摄入组合物。在一些其他相关形态中，本公开提供了减少可摄取组合物的苦味的方法，包括使一定量(例如减少苦味的有效量)的前述形态(包括如上所述的任何实施方案或其实施方案的组合)的任何经鉴定或经选择的活性化合物接触可摄取组合物。在一些实施方案中，经鉴定或经选择的活性化合物是多甲氧基黄酮(pmf)，例如源自柑橘类水果的pmf。在一些这样的实施方案中，pmf从由甜橙黄酮、4
’‑
羟基-甜橙黄酮、栎草亭、川陈皮素、橘皮素、七甲氧基黄酮以及它们的任何组合构成的群组中选出。
[0103]
在某些相关形态中，本公开提供了减少可摄取组合物的苦味的方法，包括使一定量(例如减少苦味的有效量)的多甲氧基黄酮(pmf)接触可摄取组合物。在其一些实施方案中，可摄取组合物包含一种或多种苦味化合物。在其一些实施方案中，可摄取组合物是源自柑橘类水果的组合物。在一些实施方案中，可摄取组合物是天然存在的组合物。在一些其他实施方案中，可摄取组合物是非天然存在的组合物。在一些这样的实施方案中，pmf从由甜橙黄酮、4
’‑
羟基-甜橙黄酮、栎草亭、川陈皮素、橘皮素、七甲氧基黄酮以及它们的任何组合构成的群组中选出。
[0104]
苦味化合物可以是天然食物产品中常见的任何合适的苦味化合物。在一些实施方案中，苦味化合物是这样一种化合物，其调节(例如激活)seq id no:2的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。
[0105]
在一些实施方案中，苦味化合物是提取自楝(meliaceae)科植物或芸香(rutaceae)科植物的化合物。在一些进一步的实施方案中，苦味化合物是芸香(rutaceae)科和柑橘(citrus)属植物的提取物，例如橙子、柠檬、葡萄柚、酸橙、金橘、柚子、橘柚、牙买加丑橘、柑或香橙的树或果实的提取物。在一些实施方案中，苦味化合物是三萜。在一些进一步的实施方案中，苦味化合物是去四甲基三萜类化合物。在一些进一步的实施方案中，苦味化合物是柠檬苦素类化合物。在一些此类实施方案中，苦味化合物是柠檬苦素、诺米林、诺米林酸、印楝素或它们的任何组合。在一些实施方案中，苦味化合物是柠檬苦素。在一些实施方案中，苦味化合物是诺米林。
[0106]
前述用途和方法通常涉及在含有一种或多种附加成分的组合物中使用经鉴定或经选择的活性化合物或pmf。例如，在至少一个形态中，本公开提供了组合物，其包含前述形态(包括如上所述的任何实施方案或其实施方案的组合)的任何经鉴定或经选择的活性化合物，其中以干重计(例如，基于不包括任何液体载体重量的组合物的总重量)，经鉴定或经选择的活性化合物构成组合物的至少50重量％。在相关形态中，本公开提供了固态组合物，其包含前述形态(包括如上所述的任何实施方案或其实施方案的组合)的任何经鉴定或经选择的活性化合物，其中基于组合物的总重量，经鉴定或经选择的活性化合物构成固态组合物的至少50重量％。在另一个相关形态中，本公开提供了可摄取组合物，其包含前述形态(包括如上所述的任何实施方案或其实施方案的组合)的任何经鉴定或经选择的活性化合物，其中可摄取组合物中经鉴定或经选择的活性化合物的浓度是不超过200ppm。在另一个相关形态中，本公开提供了可摄取组合物，其包含前述形态(包括如上所述的任何实施方案或其实施方案的组合)的任何经鉴定或经选择的活性化合物，其中可摄取组合物包含不超过1000ppm，或不超过900ppm，或不超过800ppm，或不超过700ppm，或不超过600ppm，或不超过500ppm，或不超过400ppm，或不超过300ppm，或不超过200ppm，或不超过100ppm，或不超过
50ppm的甜菊醇糖苷(包括莱鲍迪苷a)。在另一个相关形态中，本公开提供了可摄取组合物，其包含前述形态(包括如上所述的任何实施方案或其实施方案的组合)的任何经鉴定或经选择的活性化合物，其中可摄取组合物包含有热量甜味剂，例如蔗糖、果糖、木糖醇、赤藓糖醇或它们的组合。在另一个相关形态中，本公开提供了一种浓缩的增甜组合物，其包含前述形态(包括如上所述的任何实施方案或其实施方案的组合)的任何风味改良化合物，以及甜味剂。
[0107]
在本文阐述的涉及可摄取组合物的任何形态和实施方案的某些实施方案中，可摄取组合物是非天然存在的产品，例如专门为生产已调味产品例如食物或饮料产品而制造的组合物。
[0108]
在某些形态中，本公开提供了包含一种或多种多甲氧基黄酮(pmf)的可摄取组合物。在一些实施方案中，一种或多种pmf以减少苦味的有效量存在于可摄取组合物中。在其一些实施方案中，可摄取组合物包含一种或多种苦味化合物。在其一些实施方案中，可摄取组合物是源自柑橘类水果的组合物。在一些实施方案中，可摄取组合物是天然存在的组合物。在一些其他实施方案中，可摄取组合物是非天然存在的组合物。在一些这样的实施方案中，pmf从由甜橙黄酮、4
’‑
羟基-甜橙黄酮、栎草亭、川陈皮素、橘皮素、七甲氧基黄酮以及它们的任何组合构成的群组中选出。
[0109]
苦味化合物可以是天然食物产品中常见的任何合适的苦味化合物。在一些实施方案中，苦味化合物是这样一种化合物，其调节(例如激活)seq id no:2的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。
[0110]
在一些实施方案中，苦味化合物是提取自楝(meliaceae)科植物或芸香(rutaceae)科植物的化合物。在一些进一步的实施方案中，苦味化合物是芸香(rutaceae)科和柑橘(citrus)属植物的提取物，例如橙子、柠檬、葡萄柚、酸橙、金橘、柚子、橘柚、牙买加丑橘、柑或香橙的树或果实的提取物。在一些实施方案中，苦味化合物是三萜。在一些进一步的实施方案中，苦味化合物是去四甲基三萜类化合物。在一些进一步的实施方案中，苦味化合物是柠檬苦素类化合物。在一些此类实施方案中，苦味化合物是柠檬苦素、诺米林、诺米林酸、印楝素或它们的任何组合。在一些实施方案中，苦味化合物是柠檬苦素。在一些实施方案中，苦味化合物是诺米林。
[0111]
在前述形态中，或在涉及可摄取组合物的任何其他形态中，pmf可以任何合适的浓度存在于组合物中。例如，在一些实施方案中，pmf以1ppm至1000ppm，或1ppm至900ppm，或1ppm至800ppm，或1ppm至700ppm，或1ppm至600ppm，或1ppm至500ppm，或1ppm至400ppm，或1ppm至300ppm，或1ppm至250ppm，或1ppm至200ppm，或1ppm至150ppm，或1ppm至100ppm，或1ppm至80ppm，或1ppm至70ppm，或1ppm至60ppm，或1ppm至50ppm，或1ppm至40ppm，或1ppm至30ppm，或1ppm至20ppm，或5ppm至1000ppm，或5ppm至900ppm，或5ppm至800ppm，或5ppm至700ppm，或5ppm至600ppm，或5ppm至500ppm，或5ppm至400ppm，或5ppm至300ppm，或5ppm至250ppm，或5ppm至200ppm，或5ppm至150ppm，或5ppm至100ppm，或5ppm至80ppm，或5ppm至70ppm，或5ppm至60ppm，或5ppm至50ppm，或5ppm至40ppm，或5ppm至30ppm，或5ppm至20ppm的浓度存在于可摄取组合物中。在一些实施方案中，使至少一部分(例如，至少10重量％，或至少20重量％，或至少30重量％)的pmf接触可摄取组合物，例如，使得pmf的浓度高于天然产
品提取物中的含量。
[0112]
通常，可以以组合物例如可摄取组合物的形式单独或组合提供本文公开和描述的化合物。在一个实施方案中，通过在甜味剂组合物中将本文公开和描述的一种或多种化合物与一种或多种甜味剂组合，本文公开和描述的化合物可以单独或组合地赋予甜味剂组合物更类似糖的时间概貌(profile)或风味概貌。在另一个实施方案中，本文公开和描述的化合物单独地或组合地通过使组合物与本文公开和描述的化合物接触以形成改良的组合物，可以增加或增强组合物的甜味。
[0113]
因此，在一些实施方案中，在任何前述形态(包括任何用途或方法)中阐述的组合物包含经鉴定或经选择的活性化合物以及甜味剂。在一些实施方案中，组合物进一步包含媒介物。在一些实施方案中，媒介物是水。在一些实施方案中，经鉴定或经选择的活性化合物以等于或低于其甜味识别阈值的浓度存在。
[0114]
例如，在一些实施方案中，甜味剂以按重量计约0.1％至约12％的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以按重量计约0.2％至约10％的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以按重量计约0.3％至约8％的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以按重量计约0.4％至约6％的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以按重量计约0.5％至约5％的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以按重量计约1％至约2％的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以按重量计约0.1％至约5％的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以按重量计约0.1％至约4％的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以按重量计约0.1％至约3％的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以按重量计约0.1％至约2％的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以按重量计约0.1％至约1％的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以按重量计约0.1％至约0.5％的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以按重量计约0.5％至约10％的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以按重量计约2％至约8％的量存在。在本段落中阐述的实施方案的一些进一步的实施方案中，甜味剂是蔗糖、果糖、葡萄糖、木糖醇、赤藓糖醇或它们的组合。
[0115]
在一些其他实施方案中，甜味剂以10ppm至1000ppm的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以20ppm至800ppm的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以30ppm至600ppm的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以40ppm至500ppm的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以50ppm至400ppm的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以50ppm至300ppm的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以50ppm至200ppm的量存在。在一些实施方案中，甜味剂以50ppm至150ppm的量存在。在本段落中阐述的实施方案的一些进一步的实施方案中，甜味剂是甜菊醇糖苷、罗汉果苷、前述任一种的衍生物，例如糖苷衍生物(例如葡糖基化物)，或它们的任何组合。在一些实施方案中，甜味剂是甜菊醇糖苷，例如莱鲍迪苷a、莱鲍迪苷m、莱鲍迪苷d、莱鲍迪苷b或它们的任何组合。在一些实施方案中，甜味剂是罗汉果苷，例如罗汉果苷v、异罗汉果苷v、异罗汉果苷ive、罗汉果苷iiie、赛门苷i、赛门苷i的α异构体，或它们的任何组合。在一些实施方案中，甜味剂是蔗糖、果糖、葡萄糖、稀少糖(allulose)、赤藓糖醇或它们的任何组合。
[0116]
组合物可包括任何合适的甜味剂或多种甜味剂的组合。在一些实施方案中，甜味剂是常见的糖类甜味剂，例如蔗糖、果糖、葡萄糖以及包含天然糖例如玉米糖浆(包括高果糖玉米糖浆)或衍生自天然水果和蔬菜来源的其他糖浆或甜味剂浓缩物的甜味剂组合物。在一些实施方案中，甜味剂是蔗糖、果糖或它们的组合。在一些实施方案中，甜味剂是蔗糖。在一些其他实施方案中，甜味剂选自稀有天然糖，包括d-阿洛糖，d-阿洛酮糖，l-核糖，d-塔
格糖，l-葡萄糖，l-岩藻糖，l-阿拉伯糖，d-松二糖，和d-白菌二糖。在一些实施方案中，甜味剂选自半合成的“糖醇”甜味剂，如赤藓糖醇，异麦芽酮糖醇(isomalt)，乳糖醇，甘露醇，山梨糖醇，木糖醇，麦芽糊精等。在一些实施方案中，甜味剂选自人工甜味剂，例如阿斯巴甜，糖精，乙酰磺胺酸钾，环己氨磺酸盐，三氯蔗糖和阿力甜。在一些实施方案中，甜味剂可以从由如下构成的群组中选出：环己氨基磺酸(cyclamic acid)，罗汉果苷，塔格糖，麦芽糖，半乳糖，甘露糖，蔗糖，果糖，乳糖，纽甜和其他阿斯巴甜衍生物，葡萄糖，d-色氨酸，甘氨酸，麦芽糖醇，乳糖醇，异麦芽酮糖醇，氢化葡萄糖浆(hgs)，氢化淀粉水解产物(hsh)，甜菊苷，莱鲍迪苷a，其他甜味甜菊基糖苷，化学改性的甜菊醇糖苷(如葡糖基化甜菊醇糖苷)，罗汉果苷，化学改性的罗汉果苷(如葡糖基化罗汉果苷)，胍甜味剂(carrelame)和其他胍基甜味剂。在一些实施方案中，甜味剂是本段落中阐述的两种或更多种甜味剂的组合。在一些实施方案中，甜味剂可以是本文公开的两种、三种、四种或五种甜味剂的组合。在一些实施方案中，甜味剂可以是糖。在一些实施方案中，甜味剂可以是一种或多种糖与其他天然和人工甜味剂的组合。在一些实施方案中，甜味剂是糖。在一些实施方案中，糖是甘蔗糖(cane sugar)。在一些实施方案中，糖是甜菜糖。在一些实施方案中，糖可以是蔗糖、果糖、葡萄糖或它们的组合。在一些实施方案中，糖可以是蔗糖。在一些实施方案中，糖可以是果糖和葡萄糖的组合。
[0117]
甜味剂还可包括例如甜味剂组合物，其包含一种或多种天然或合成碳水化合物，例如玉米糖浆、高果糖玉米糖浆、高麦芽糖玉米糖浆、葡萄糖浆、三氯蔗糖糖浆、氢化葡萄糖浆(hgs)、氢化淀粉水解产物(hsh)或来自天然的水果和蔬菜来源的其他糖浆或甜味剂浓缩物，或半合成“糖醇”甜味剂，例如多元醇。在一些实施方案中，多元醇的非限制性例子包括赤藓糖醇、麦芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、乳糖醇、木糖醇、异麦芽酮糖醇、丙二醇、甘油(丙三醇)、苏糖醇、半乳糖醇、帕拉金糖、还原的异麦芽低聚糖、还原的木糖低聚糖、还原的龙胆寡糖、还原的麦芽糖浆、还原的葡萄糖浆、异麦芽酮糖(isomaltulose)、麦芽糊精等，以及能够被还原的不会对味道产生不利影响的糖醇或任何其他碳水化合物或它们的组合。
[0118]
甜味剂可以是天然或合成的甜味剂，包括但不限于龙舌兰菊粉，龙舌兰花蜜，龙舌兰糖浆，日本甘酒(amazake)，布拉齐因(brazzein)，糙米糖浆，椰子晶体，椰子糖，椰子糖浆，枣糖，果聚糖(也称为菊粉纤维，果糖低聚糖或低聚果糖)，绿色甜菊粉，甜叶菊(stevia rebaudiana)，莱鲍迪苷a，莱鲍迪苷b，莱鲍迪苷c，莱鲍迪苷d，莱鲍迪苷e，莱鲍迪苷f，莱鲍迪苷i，鲍勃苷h，莱鲍迪苷l，莱鲍迪苷k，莱鲍迪苷j，莱鲍迪苷n，莱鲍迪苷o，莱鲍迪苷m和其他甜叶菊基甜菊糖苷，甜菊苷，甜菊苷提取物，蜂蜜，菊芋(jerusalem artichoke)糖浆，甘草根，罗汉果(果实，粉末或提取物)，蛋黄果(lucuma)(果实，粉末或提取物)，枫树树液(包括例如从糖枫(acer saccharum)、黑枫(acer nigrum)、美国红枫(acer rubrum)、银枫(acer saccharinum)、挪威枫(acer platanoides)、梣叶槭(acer negundo)、大叶枫(acer macrophyllum)、粗齿枫(acer grandidentatum)、落基山枫(acer glabrum)、色木槭(acer mono)提取的树液)，枫树糖浆，枫糖，胡桃树液(包括例如从白胡桃(juglans cinerea)、黑胡桃(juglans nigra)、鬼胡桃(juglans ailatifolia)、胡桃(juglans regia)提取的树液)，桦树树液(包括例如从纸桦(betula papyrifera)、加拿大黄桦(betula alleghaniensis)、山桦(betula lenta)、河桦(betula nigra)、灰色桦木(betula populifolia)、垂枝桦(betula pendula)提取的树液)，美国梧桐(sycamore)树液(例如从
一球悬铃木(platanus occidentalis)提取的树液)，铁木树液(例如从美洲铁木(ostrya virginiana)提取的树液)，未精制蔗糖(mascobado)，糖蜜(molasses)(举例而言例如黑糖蜜(blackstrap molasses))，糖蜜糖，莫纳甜，莫奈林(monellin)，甘蔗糖(cane sugar)(也称为天然糖，未精制苷蔗糖或蔗糖(sucrose))，棕榈糖，墨西哥粗糖(panocha)，墨西哥粗糖条(piloncillo)，红糖砖(rapadura)，原糖，大米糖浆，高粱，高粱糖浆，木薯糖浆(也称为木薯淀粉糖浆)，奇异果甜蛋白(thaumatin)，雪莲果(yacon root)，麦芽糖浆，大麦麦芽糖浆，大麦麦芽粉，甜菜糖，甘蔗糖(cane sugar)，结晶果汁结晶，焦糖，卡必醇，角豆(carob)糖浆，蓖麻糖，氢化淀粉水纯露(hydrolates)，水解的罐装果汁，水解淀粉，转化糖，茴香脑，阿拉伯半乳聚糖，浓缩葡萄汁(arrope)，糖浆，p-4000，乙酰磺胺酸钾(也称为乙酰舒泛钾或ace-k)，阿力甜(也称为阿力糖(aclame))，爱德万甜，阿斯巴甜，白云参苷(baiyunosdie)，纽甜，苯甲酰胺衍生物，bernadame，阿斯巴甜别名(canderel)，胍甜味剂(carrelame)和其他胍基甜味剂，植物纤维，玉米糖，偶联糖，仙茅甜蛋白，环己氨基磺酸盐(cyclamates)，青钱柳苷i(cyclocaryoside i)，德梅拉拉糖(demerara)，葡聚糖，糊精，糖化麦芽(diastatic malt)，甘素(dulcin)，甜精(sucrol)，乙氧基苯脲(valzin)，杜尔可苷a，杜尔可苷b，艾木林(emulin)，甘草次酸(enoxolone)，麦芽糊精，糖精，草蒿脑(estragole)，乙基麦芽酚，羟苯基甘胺酸(glucin)，葡萄糖酸，葡萄糖酸内酯，葡糖胺，葡萄糖醛酸，甘油，甘氨酸，glycyphillin，甘草甜素，甘草次酸单葡糖醛酸化物，金黄糖，黄糖，金黄糖浆，砂糖，绞股蓝，贺兰甜精(hernandulcin)，异构化液体糖，jallab汁，菊苣根膳食纤维，犬尿氨酸衍生物(包括n'-甲酰基-犬尿氨酸，n'-乙酰基-犬尿氨酸，6-氯-犬尿氨酸)，半乳糖醇，利体素(litesse)，健美原蔗金砂糖(ligicane)，利卡新(lycasin)，n-(4-氰苯基)-n-(2,3-亚甲二氧苄基)胍乙酸(lugduname)，胍，法勒南糖浆(falernum)，马槟榔甜蛋白i，马槟榔甜蛋白ii，麦芽酚，结晶麦芽糖醇(maltisorb)，麦芽糊精，麦芽三糖醇(maltotriol)，甘露糖胺，神秘果蛋白(micraculin)，水饴(mizuame)，罗汉果苷(包括例如罗汉果苷iv，罗汉果苷v和新罗汉果苷)，无患子倍半萜苷(mukurozioside)，纳米糖(nano sugar)，柚皮苷二氢查尔酮，新橙皮苷二氢查尔酮，粗糖(nib sugar)，黑寡糖，诺布糖(norbu)，杏仁糖浆，欧亚水龙骨甜素(osladin)，派克梅兹(pekmez)，潘塔亭(pentadin)，巴西甘草甜素i(periandrin i)，紫苏醛，紫苏葶(perillartine)，petphyllum，苯丙氨酸，假秦艽苷i(phloisosideside i)，phlorodizin，叶甜素(phyllodulcin)，氢化葡萄糖浆(polyglycitol syrup)，多足蕨苷a(polypodoside a)，蝶卡苷a(pterocaryoside a)，蝶卡苷b，润贝安娜(rebiana)，精制糖浆，摩擦糖浆(rub syrup)，甜叶悬钩子苷(rubusoside)，蓨蕨素a(selligueain a)，舒格糖(shugr)，赛门苷i，罗汉果(siraitia grosvenorii)，大豆低聚糖，善品糖(splenda)，sri oxime v，甜菊醇糖苷，甜菊双糖苷，甜菊苷，叉柱花素(strogins)1、2和4，蔗糖酸(sucronic acid)，sucrononate，糖，对硝基苯基脲基丙酸钠(suosan)，根皮苷(phloridzin)，超级阿斯巴甜，四糖，苏糖醇，糖蜜(treacle)，三叶苷(trilobtain)，色氨酸及衍生物(6-三氟甲基-色氨酸，6-氯-d-色氨酸)，香草糖，庚七醇，桦树糖浆，阿斯巴甜-乙酰磺胺酸，艾苏格(assugrin)，以及它们任意两种或更多种的组合或共混物。
[0119]
在其他实施方案中，甜味剂可以是化学或酶改性的天然高效甜味剂。改性的天然高效甜味剂包括糖基化的天然高效甜味剂，例如含有1～50个糖苷残基的葡糖基、半乳糖基或果糖基衍生物。糖基化的天然高效甜味剂可以通过由具有转糖基化活性的各种酶催化的
酶促转糖基化反应来制备。在一些实施方案中，改性甜味剂可以是取代的或未取代的。
[0120]
另外的甜味剂还包括任何前述甜味剂中的任何两种或更多种的组合。在一些实施方案中，甜味剂可以包含本文所公开的两种、三种、四种或五种甜味剂的组合。在一些实施方案中，甜味剂可以是糖。在一些实施方案中，甜味剂可以是一种或多种糖与其他天然和人工甜味剂的组合。在一些实施方案中，甜味剂是有热量甜味剂，例如蔗糖、果糖、木糖醇、赤藓糖醇或它们的组合。在一些实施方案中，可摄取组合物不含(或在一些实施方案中)基本上不含甜菊衍生的甜味剂，例如甜菊醇糖苷、葡糖基化甜菊醇糖苷或莱鲍迪苷。例如，在一些实施方案中，可摄取组合物不含甜菊衍生的甜味剂，或以不超过1000ppm，或不超过500ppm，或不超过200ppm，或不超过100ppm，或不超过50ppm，或不超过20ppm，或不超过10ppm，或不超过5ppm，或不超过3ppm，或不超过1ppm的浓度包含甜菊衍生的甜味剂。
[0121]
经鉴定或经选择的活性化合物可以任何合适的量存在于可摄取组合物中。在一些实施方案中，经鉴定或经选择的活性化合物以足以增强组合物的味道(例如，增强甜味、减少酸味或减少苦味)的量存在。因此，在一些实施方案中，可摄取组合物包含的经鉴定或经选择的活性化合物浓度不大于200ppm，或不大于150ppm，或不大于100ppm，或不大于50ppm，或不大于40ppm，或不大于30ppm，或不大于20ppm。在一些实施方案中，经鉴定或经选择的活性化合物以最小量例如1ppm或5ppm存在。因此，在一些实施方案中，可摄取组合物包含的经鉴定或经选择的活性化合物的浓度范围为1ppm至200ppm，或1ppm至150ppm，或1ppm至100ppm，或1ppm至50ppm，或1ppm至40ppm，或1ppm至30ppm，或1ppm至20ppm，或5ppm至200ppm，或5ppm至150ppm，或5ppm至100ppm，或5ppm至50ppm，或5ppm至40ppm，或5ppm至30ppm，或5ppm至20ppm。在存在甜味剂例如蔗糖或果糖的实施方案中，可摄取组合物中甜味剂与经鉴定或经选择的活性化合物的重量比为1000:1至50000:1，或1000:1至10000:1，或2000:1至8000:1。
[0122]
在某些实施方案中，可摄取组合物或甜味剂浓缩物可以包含食物和饮料产品中常用的任何附加成分或多种成分的组合，包括但不限于：
[0123]
酸，包括例如柠檬酸、磷酸、抗坏血酸、硫酸氢钠、乳酸或酒石酸；
[0124]
苦味成分，包括例如咖啡因、奎宁、绿茶、儿茶素、多酚、罗布斯塔咖啡生豆提取物、咖啡生豆提取物、氯化钾、薄荷醇或蛋白质(例如来自植物、藻类或真菌的蛋白质和蛋白质分离物)；
[0125]
着色剂，包括例如焦糖色、红色#40、黄色#5、黄色#6、蓝色#1、红色#3、紫色胡萝卜、黑色胡萝卜汁、紫色地瓜、蔬菜汁、果汁、β-胡萝卜素、姜黄姜黄素或二氧化钛；
[0126]
防腐剂，包括例如苯甲酸钠、苯甲酸钾、山梨酸钾、偏亚硫酸氢钠、山梨酸或苯甲酸；
[0127]
抗氧化剂，包括例如抗坏血酸、edta钙二钠、α-生育酚、混合生育酚、迷迭香提取物、葡萄籽提取物、白藜芦醇或六偏磷酸钠；
[0128]
维生素或功能性成分，包括例如白藜芦醇，co-q10，ω3脂肪酸，茶氨酸，氯化胆碱(胞磷胆碱(citocoline))，纤维醇，菊粉(菊苣根)，牛磺酸，人参提取物，瓜拉那提取物，生姜提取物，l-苯丙氨酸，l-肉碱，l-酒石酸盐，d-葡萄糖醛酸内酯，肌醇，生物类黄酮，紫锥菊，银杏(ginkgo biloba)，马黛茶(yerba mate)，亚麻籽油，藤黄果(garcinia cambogia)皮提取物，白茶提取物，核糖，奶蓟草(milk thistle)提取物，葡萄籽提取物，盐酸吡多醇
(维生素b6)，氰钴胺(维生素b12)，烟酰胺(维生素b3)，生物素，乳酸钙，泛酸钙(泛酸)，磷酸钙，碳酸钙，氯化铬，多烟酸铬，硫酸铜，叶酸，焦磷酸铁，铁，乳酸镁，碳酸镁，硫酸镁，磷酸一钾，磷酸一钠，磷，碘化钾，磷酸钾，核黄素，硫酸钠，葡萄糖酸钠，聚磷酸钠，碳酸氢钠，硫胺素单硝酸盐，维生素d3，维生素a棕榈酸酯，葡萄糖酸锌，乳酸锌或硫酸锌；
[0129]
起云剂，包括例如酯胶、溴化植物油(bvo)或蔗糖乙酸异丁酸酯(saib)；
[0130]
缓冲液，包括例如柠檬酸钠、柠檬酸钾或盐；
[0131]
调味料(食用香精)，包括例如丙二醇、乙醇、甘油、阿拉伯胶(金合欢胶)、麦芽糊精、改性玉米淀粉、右旋糖、天然调味料、具有其他天然调味料的天然调味料(天然调味料wonf)、天然和人工调味料、人工调味料、二氧化硅、碳酸镁或磷酸三钙；或者
[0132]
淀粉和稳定剂，包括例如果胶、黄原胶、羧甲基纤维素(cmc)、聚山梨酯60、聚山梨酯80、中链甘油三酸酯、纤维素凝胶、纤维素胶、酪蛋白酸钠、改性食品淀粉、阿拉伯胶(金合欢胶)、菊粉或角叉菜胶。
[0133]
可摄取组合物或甜味剂浓缩物可具有任何合适的ph值。在一些实施方案中，在宽范围的ph值，例如从较低的ph值到中性ph值的经鉴定或经选择的活性化合物增强了甜味剂的甜度。较低和中性的ph值包括但不限于2.5至8.5；3.0至8.0；3.5至7.5，和4.0至7的ph值；在某些实施方案中，本文公开和描述的化合物单独地或组合地可在味道测试中以50μm，40μm，30μm，20μm或10μm的化合物浓度在低至中性ph值下增强固定浓度的甜味剂的所感知甜度。在某些实施方案中，本文公开和描述的化合物单独地或组合地在较低ph下的增强倍数基本上类似于化合物在中性ph下的增强倍数。这种在宽ph范围内一致的甜味增强特性允许本文公开和描述的化合物单独地或组合地广泛用于多种食物和饮料中。
[0134]
根据前述实施方案中任一项所述的可摄取组合物，在某些实施方案中还包括一种或多种另外的经鉴定或经选择的活性化合物，例如增强甜味的化合物(例如橙皮素、柚皮素、葡糖基化甜菊醇糖苷等)，阻断苦味的化合物，增强鲜味的化合物，减少酸味或甘草味的化合物，增强咸味的化合物，增强清凉效果的化合物，或前述的任何组合。
[0135]
已调味产品和浓缩物
[0136]
在某些形态中，本公开提供了包含前述形态的任何组合物的已调味产品。在一些实施方案中，已调味产品是饮料产品，例如苏打水、调味水、茶等。在一些其他实施方案中，已调味产品是食物产品，例如酸奶。
[0137]
在已调味产品是饮料的实施方案中，饮料可以选自增强型起泡饮料，可乐，柠檬-酸橙味起泡饮料，橙子味起泡饮料，葡萄味起泡饮料，草莓味起泡饮料，菠萝味起泡饮料，姜汁啤酒，根啤酒，果汁，水果味果汁，果汁饮料，蜜汁饮料，蔬菜汁，蔬菜味汁，运动饮料，能量饮料，强化水饮料，含维生素强化水，近水饮料，椰子水，茶类饮料，咖啡，可可饮料，含奶成分的饮料，含谷类提取物的饮料和冰沙(smoothie)。在一些实施方案中，饮料可以是软饮料。
[0138]
在本文所述的涉及已调味产品的任何形态和实施方案的某些实施方案中，已调味产品是非天然存在的产品，例如包装食物或饮料产品。
[0139]
食物和饮料产品或制剂的其他非限制性例子包括此类产品的甜味包衣，糖霜或糖衣，或包括于以下的任何实体：汤类，干加工食品类，饮料类，即食食品类，罐装或腌制食品类，冷冻加工食品类，冷藏加工食品类，零食食品类，烘焙食品类，糖果类，乳制品类，冰淇淋
类，代餐类，意大利面(pasta)和面条类，以及酱料、调味料、调味品类，婴儿食品类和/或涂抹酱类。
[0140]
通常，汤类是指罐装/腌制、脱水、速溶、冷藏、uht和冷冻汤。为了该定义的目的，汤是指由肉、禽、鱼、蔬菜、谷物、水果和其他成分制成的食品，在液体中煮熟，其中可能包含一些或全部这些成分的可见碎片。它可能是清澈的(作为高汤(broth))或浓稠的(作为杂烩浓汤(chowder))，光滑的，泥状的或大块的，即食的，半浓缩的或浓缩的，并且可冷可热，作为第一道菜或主菜或作为进餐之间的点心(啜饮饮料)。汤可用作制备其他膳食成分的原料，范围从高汤(broth)(清炖肉汤(consomm
é
))到酱汁(基于奶油或起司的汤)。
[0141]
脱水和烹饪食品类通常是指：(i)烹饪辅助产品，例如：粉状，颗粒状，糊状，浓缩的液体产品，包括压制块体、片剂或粉状或颗粒状的浓缩肉汤(bouillon)、肉汤和类似肉汤的产品，其作为成品或作为产品、调味料和配方混合物中的成分单独出售(与技术无关)；(ii)膳食溶液产品，例如：脱水汤和冻干汤，包括脱水汤混合物，脱水速溶汤，脱水即食汤，现成菜肴、膳食和单份主菜的脱水或自热制剂，包括意大利面、土豆和米饭；(iii)膳食点缀产品，例如：调味品，腌料，沙拉酱，沙拉浇头，蘸料，拌粉，面糊混合物，储藏稳定的酱料，烧烤酱，液体配方混合物，浓缩物，酱料或酱汁混合物，包括沙拉配方混合物，其作为成品或作为产品中的成分出售，无论是脱水、液态还是冷冻的。
[0142]
饮料类通常是指饮料、饮料混合物和浓缩物，包括但不限于碳酸饮料和非碳酸饮料，酒精和非酒精饮料，即饮饮料，用于制备饮料(例如苏打水)的液体浓缩制剂，以及干粉饮料前体混合物。饮料类还包括酒精饮料、软饮料、运动饮料、等渗饮料和热饮料。酒精饮料包括但不限于啤酒、苹果酒/梨酒、fabs、葡萄酒和烈性酒。软饮料包括但不限于碳酸饮料，例如可乐和非可乐碳酸饮料；水果汁，例如果汁、蜜饮、果汁饮料和水果味饮料；瓶装水，包括苏打水、泉水和纯净/餐用水；功能性饮料，可以是碳酸饮料或无气饮料，包括运动饮料、能量饮料或特效药(elixir)饮料；浓缩液，例如可即饮用的液体和粉末浓缩液。无论是热饮还是冷饮，都包括但不限于咖啡或冰咖啡，例如新鲜、速溶和混合咖啡；茶或冰茶，例如红茶、绿茶、白茶、乌龙茶和调味茶；以及其他饮料，包括与牛奶或水混合的调味的、基于麦芽或基于植物的粉末、颗粒、块或片剂。
[0143]
零食(小吃)类通常是指简易、非正式膳食的任何食物，包括但不限于甜味和咸味小吃以及零食棒。零食的例子包括但不限于水果点心、薯片/脆片、挤出零食、玉米饼/玉米片、爆米花、椒盐脆饼、坚果和其他甜味和咸味零食。零食棒的例子包括但不限于格兰诺拉麦片/麦片棒、早餐棒、能量棒、水果棒和其他零食棒。
[0144]
烘焙食品类通常是指任何制备过程中涉及暴露于热或过多阳光下的可食用产品。烘焙食品的例子包括但不限于面包，小圆面包(buns)，饼干，松饼，谷类食品(麦片)，烤面包机糕点，糕点，华夫饼，玉米饼，软饼干，派，百吉饼，蛋挞，乳蛋饼，蛋糕，任何烘焙食品及它们的任意组合。
[0145]
冰淇淋类通常是指包含奶油、糖和调味品的冷冻甜品。冰淇淋的例子包括但不限于：即食(impulse)冰淇淋；家庭装冰淇淋；冷冻酸奶和手工冰淇淋；基于大豆、燕麦、豆类(例如红豆和绿豆)和大米的冰淇淋。
[0146]
糖果类通常是指味道甜的可食用产品。糖果的例子包括但不限于硬糖、明胶、巧克力糖、砂糖食、口香糖等以及任何组合产品。
[0147]
代餐食品类通常是指旨在替代普通膳食的任何食品，特别是对于那些关注健康或健身的人。代餐的例子包括但不限于减肥产品和康复产品。
[0148]
即食食品类通常是指无需大量准备或加工即可作为膳食食用的任何食品。即食食品包括制造商为其添加了食谱“技能”的产品，因此具有高度的即食性、完备性和便利性。即食食品的例子包括但不限于罐装/腌制、冷冻、干燥、冷藏的即食食品；晚餐混合品；冷冻比萨；冷藏比萨；和预制沙拉。
[0149]
意大利面和面条类包括任何意大利面和/或面条，包括但不限于罐装、干燥和冷藏/新鲜的意大利面；以及普通、速食、冷藏、冷冻和零食类面条。
[0150]
罐装/腌制食品类包括但不限于罐装/腌制的肉和肉制品，鱼/海鲜，蔬菜，西红柿，豆类，水果，即食食品，汤，意大利面和其他罐装/腌制食品。
[0151]
冷冻加工食品类包括但不限于冷冻加工的红肉，加工的禽肉，加工的鱼/海鲜，加工的蔬菜，肉替代品，加工的马铃薯，烘焙产品，甜点，即食食品，比萨，汤，面条和其他冷冻食品。
[0152]
干加工食品类包括但不限于大米，甜点混合物，干即食食品，脱水汤，速食汤，干意大利面，纯面和速食面。冷藏加工食品类包括但不限于冷藏加工的肉类，加工的鱼/海鲜产品，午餐盒，鲜切水果，即食食品，比萨，预制沙拉，汤，新鲜意大利面和面条。
[0153]
酱料、调味料和调味品类包括但不限于番茄酱和泥，肉汤/汤块，药草和香料，谷氨酸单钠(msg)，佐餐酱，大豆类酱，意大利面酱，湿/烹饪酱，干酱/粉末混合物，番茄酱，蛋黄酱，芥末，沙拉酱，香醋沙司，蘸料，腌制品以及其他酱料、调味料和调味品。
[0154]
婴儿食品类包括但不限于基于牛奶或大豆的配方食品；以及准备好的、干燥的和其他婴儿食品。
[0155]
涂抹酱类包括但不限于果酱和蜜饯，蜂蜜，巧克力酱，坚果类涂抹酱和酵母类涂抹酱。
[0156]
乳制品类通常是指从哺乳动物的奶中产生的可食用产品。乳制品的例子包括但不限于饮用奶制品、奶酪、酸奶和酸乳饮料以及其他乳制品。
[0157]
如下提供已调味产品，特别是食物和饮料产品或制剂的另外的例子。示例性的可摄取组合物包括一种或多种糖果，巧克力糖，巧克力片，巧克力板(countlines)，袋装巧克力棒(selflines)/软棒(softlines)，盒装花色品种，标准盒装花色品种，扭转包裹的微型巧克力，调味巧克力，带玩具的巧克力，夹心饼，其它巧克力糖果，薄荷糖，标准薄荷糖，强力薄荷糖，硬糖，软锭剂，树胶，果冻和咀嚼物，太妃糖，焦糖和牛轧糖，含药糖果，棒棒糖，甘草，其他糖果，面包，包装/工业面包，散装/手工面包，糕点，蛋糕，包装/工业蛋糕，散装/手工蛋糕，饼干，巧克力涂层饼干，夹心饼干，夹馅饼干，咸饼干和薄脆饼干，面包替代品，早餐麦片，即食麦片，家庭早餐麦片，薄片，麦片，其他谷物，儿童早餐麦片，热麦片，冰淇淋，即食冰淇淋，单份奶制品冰淇淋，单份水冰淇淋，多包装奶制品冰淇淋，多包装水冰淇淋，家庭装冰淇淋，家庭装奶制品冰淇淋，冰淇淋甜点，散装冰淇淋，家庭装水冰淇淋，冷冻酸奶，手工冰淇淋，乳制品，牛奶，新鲜/巴氏灭菌奶，全脂新鲜/巴氏灭菌奶，半脱脂新鲜/巴氏杀菌奶，保存期较长的/超高温奶，全脂保存期较长的/超高温奶，半脱脂保存期较长的/超高温奶，无脂保存期较长的/超高温奶，羊奶，炼乳/淡炼乳，纯炼乳/淡炼乳，调味的、功能性和其它炼乳，调味乳饮料，乳制品仅调味乳饮料，调味带果汁乳饮品，豆浆，酸奶饮料，发酵乳饮料，
咖啡用奶精，奶粉，调味奶粉饮品，奶油，干酪，加工干酪，涂抹干酪，不易涂开的加工干酪，未加工干酪，涂抹未加工干酪，硬干酪，包装硬干酪，未封装的硬干酪，酸奶，原味/天然酸奶，调味酸奶，果冻酸奶，益生菌酸奶，饮用酸奶，常规饮用酸奶，益生菌饮用酸奶，冷冻和耐储存点心，基于乳品的点心，基于大豆的甜点，冷冻点心，鲜奶酪和夸克奶酪，普通鲜奶酪和夸克奶酪，调味鲜奶酪和夸克奶酪，可口的鲜奶酪和夸克奶酪，甜味和咸味零食，水果零食，薯条/薯片，膨化休闲食品，玉米粉圆饼/玉米片，爆米花，椒盐脆饼，坚果，其他甜味和咸味零食，零食棒，格兰诺拉麦片，早餐棒，能量棒，水果棒，其他零食棒，代餐，减肥产品，康复饮料，即食食品，罐头即食食品，冷冻即食食品，干燥即食食品，冷冻即食餐，晚餐混合物，冷冻比萨，冷藏比萨，汤，罐头汤，脱水汤，速溶汤，冷汤，热汤，速冻汤，意大利面，罐装意大利面，干面食，冷冻/新鲜的面食，面条，纯面，方便面，杯装/碗装方便面，袋装方便面，冷冻面条，零食面，罐头食品，肉类和肉制品罐头，鱼/海鲜罐头，蔬菜罐头，番茄罐头，豆类罐头，水果罐头，罐装即食食品，罐头汤，罐头意大利面，其他罐头食品，冷冻食品，冷冻加工红肉，冷冻加工家禽，冷冻加工鱼/海鲜，冷冻加工蔬菜，冷冻肉类替代品，冷冻土豆，烤箱烤薯片，其他烤箱烤马铃薯产品，非烤箱冷冻土豆，冷冻烘焙食品，冷冻甜品，冷冻即食食品，冷冻比萨饼，冷冻汤，冷冻面，其他的冷冻食品，干制食品，甜点混合物，干燥即食食品，脱水汤，速溶汤，干意大利面，素面条，方便面，杯装/碗装方便面，袋装方便面，冷藏食品，冷藏加工肉类，冷藏鱼/海鲜产品，冷藏加工鱼，冷藏鱼，冷藏涂覆鱼，冷藏熏鱼，冷藏午餐包，冷藏即食食品，冷藏比萨，冷藏汤，冷藏/新鲜意大利面，冷藏面条，油和脂肪，橄榄油，植物油和种子油，烹饪脂肪，黄油，人造黄油，涂抹油和脂，功能性涂抹油和脂，调味料，酱和调味品，番茄糊和泥，肉汤/汤料块，汤料块，肉汁颗粒，液体汤料和原料，药草和香料，发酵酱汁，大豆类酱，意大利面酱，湿酱料，干酱/粉末混合物，番茄酱，蛋黄酱，常规蛋黄酱，芥末，沙拉酱，常规沙拉酱，低脂沙拉酱，香醋沙司，蘸料，腌制品，其他酱料，调味料和调味品，婴儿食品，配方奶粉，标准配方奶粉，成长配方奶粉，幼儿配方奶粉，防过敏奶粉配方，婴儿配方奶粉食品，干制婴儿食品，其他婴儿食品，涂抹酱，果酱和蜜饯，蜂蜜，巧克力酱，坚果类涂抹酱和酵母类涂抹酱。示例性的可摄取组合物还包括糖果，烘焙产品，冰淇淋，乳制品，甜味和咸味零食，零食棒，代餐产品，即食食品，汤，意大利面，面条，罐头食品，冷冻食品，干食品，冷藏食品，油和脂肪，婴儿食品或涂抹食品或其混合物。示例性的可摄取组合物还包括早餐麦片，甜饮料或用于制备饮料的固体或液体浓缩物组合物，理想地是使得能够降低先前已知的糖类甜味剂或人工甜味剂的浓度。
[0158]
一些实施方案提供了可吞咽或可不吞咽的可咀嚼组合物。在一些实施方案中，可咀嚼组合物可以是胶糖，口香糖，糖化胶糖，无糖胶糖，功能性胶糖，泡泡糖，其单独地或组合地包含本文公开和描述的化合物。
[0159]
通常，可选地在甜味剂存在下在可摄取组合物中添加甜味受体调节量、甜味受体配体调节量、甜味风味调节量、甜味调味剂量、甜味风味增强量或治疗有效量的一种或多种本发明化合物，从而与不含本发明化合物而制备的可摄取组合物相比，甜味风味改良的可摄取组合物具有增加的甜味，这是一般而言由人或动物判断的，或者在配方测试的情况下，由至少八名人类味觉测试人员组成的小组的大多数人通过本领域众所周知的程序进行判断的。
[0160]
在一些实施方案中，本文公开和描述的化合物单独地或组合地调节其他天然或合
成甜味剂以及由此制备的可摄取组合物的甜味或其他味觉特性。在一个实施方案中，本文公开和描述的化合物可以其配体增强浓度单独或组合使用或提供。例如，本文公开和描述的化合物单独或组合存在的量可以为0.001ppm至100ppm，或更窄的替代范围为0.1ppm至50ppm，0.01ppm至40ppm，0.05ppm至30ppm，0.01ppm至25ppm，0.1ppm至30ppm，或0.1ppm至25ppm，或1ppm至30ppm，或1ppm至25ppm。
[0161]
在一些实施方案中，本文公开和描述的经鉴定或经选择的活性化合物可以单独地或组合地以调味浓缩物制剂的形式提供，例如适合于随后的加工以生产即用型(即即食型)产品。“调味浓缩物制剂”是指应当用一种或多种稀释介质复原以成为即用型组合物的制剂。术语“即用型组合物”在本文中与“可摄取组合物”互换使用，其表示无论打算用于还是不用于食用，无论是单独还是与另一种物质一起可以通过口服摄取的任何物质。在一个实施方案中，即用型组合物包括可以被人或动物直接食用的组合物。调味浓缩物制剂通常通过与一种或多种稀释介质例如任何可食用或可摄取的成分或产品混合或由其稀释来使用，以将一种或多种调味剂赋予或改变稀释介质。这样的使用过程通常被称为复原。复原可以在家庭环境或工业环境中进行。例如，消费者可以在厨房中用水或其他水性介质将冷冻的果汁浓缩物复原，以获得即用型果汁饮料。在另一个例子中，软饮料糖浆浓缩物可以由制造商以大规模工业规模用水或其他水性介质进行复原，以生产即用型软饮料。由于调味浓缩物制剂具有的调味剂或调味料的浓度高于即用型组合物，因此调味浓缩物制剂通常不适合不经复原而直接食用。使用和生产调味浓缩物制剂有许多好处。例如，一个好处是减少了运输的重量和体积，因为可以在使用时通过添加合适的溶剂、固体或液体来将调味浓缩物制剂复原。
[0162]
根据前述实施方案中任一项所述的已调味产品，在某些实施方案中还包括一种或多种额外的风味改良化合物，例如增强甜味的化合物(例如橙皮素、柚皮素、葡糖基化甜菊醇糖苷等)，阻断苦味的化合物、增强鲜味的化合物、减少酸味的化合物、增强咸味的化合物、增强清凉效果的化合物，或前述的任何组合。
[0163]
在本文所述的涉及增甜或调味浓缩物的任何形态和实施方案的某些实施方案中，该增甜或调味浓缩物是非天然存在的产品，例如专门为生产已调味产品例如食物或饮料产品而制造的组合物。
[0164]
在一个实施方案中，调味浓缩物制剂包含i)单独或组合形式的本文公开和描述的化合物；ii)载体；和iii)可选地至少一种佐剂。术语“载体”表示通常不活泼的辅助物质，例如溶剂、粘合剂或其他惰性介质，其与本发明化合物和一种或多种可选的佐剂组合使用以形成制剂。例如，水或淀粉可以是调味浓缩物制剂的载体。在一些实施方案中，载体与用于将调味浓缩物制剂复原的稀释介质相同；在其他实施方案中，载体不同于稀释介质。如本文所用，术语“载体”包括但不限于摄取上可接受的载体。
[0165]
术语“佐剂”表示补充、稳定、维持或增强活性成分例如本发明化合物的预期功能或功效的添加剂。在一个实施方案中，至少一种佐剂包含一种或多种调味剂。调味剂可以具有本领域技术人员或消费者已知的任何风味，例如巧克力、咖啡、茶、摩卡、法式香草、花生酱、奶茶(chai)，或其组合的风味。在另一个实施方案中，至少一种佐剂包含一种或多种甜味剂。一种或多种甜味剂可以是本技术中描述的任何甜味剂。在另一个实施方案中，该至少一种佐剂包含一种或多种从由如下构成的群组中选出的成分：乳化剂，稳定剂，抗微生物防
腐剂，抗氧化剂，维生素，矿物质，脂肪，淀粉，蛋白质浓缩物和分离物，盐，和它们的组合。乳化剂、稳定剂、抗微生物防腐剂、抗氧化剂、维生素、矿物质、脂肪、淀粉、蛋白质浓缩物和分离物以及盐的例子描述于美国专利no.6,468,576，其全部内容通过引用整体并入本文以用于所有目的。
[0166]
在一个实施方案中，本发明的调味浓缩物制剂可以为选自包括溶液和悬浮液的液体、固体、泡沫材料、糊剂、凝胶、乳剂以及它们的组合的形式，例如含有一定量固体内容物的液体。在一个实施方案中，调味浓缩物制剂为包括水基和非水基的液体形式。在一些实施方案中，本发明的调味浓缩物制剂可以是碳酸化的或非碳酸化的。
[0167]
调味浓缩物制剂可以进一步包含凝固点降低剂、成核剂或两者作为该至少一种佐剂。凝固点降低剂是摄取上可接受的化合物或试剂，其可以降低添加了该化合物或试剂的液体或溶剂的凝固点。即，含有凝固点降低剂的液体或溶液的凝固点比没有凝固点降低剂的液体或溶剂的凝固点低。除了降低起始凝固点之外，凝固点降低剂还可以降低调味浓缩物制剂的水活度。凝固点抑制剂的例子包括但不限于碳水化合物、油、乙醇、多元醇例如甘油以及它们的组合。成核剂表示能够促进成核的摄取上可接受的化合物或试剂。调味浓缩物制剂中成核剂的存在可以改善雪泥的口感，并通过增加所需的冰结晶中心的数量来帮助在冷冻温度下保持雪泥的物理性质和性能。成核剂的例子包括但不限于硅酸钙、碳酸钙、二氧化钛以及它们的组合。
[0168]
在一个实施方案中，调味浓缩物制剂被配制为具有低水活度以延长保存期限。水活度是在相同温度下制剂中水的蒸气压与纯水的蒸气压之比。在一个实施方案中，调味浓缩物制剂的水活度小于约0.85。在另一个实施方案中，调味浓缩物制剂的水活度小于约0.80。在另一个实施方案中，调味浓缩物制剂的水活度小于约0.75。
[0169]
在一个实施方案中，调味浓缩物制剂中本发明化合物的浓度为即用型组合物中化合物浓度的至少2倍。在一个实施方案中，调味浓缩物制剂中本发明化合物的浓度为即用型组合物中化合物浓度的至少5倍。在一个实施方案中，调味浓缩物制剂中本发明化合物的浓度为即用型组合物中化合物浓度的至少10倍。在一个实施方案中，调味浓缩物制剂中本发明化合物的浓度为即用型组合物中化合物浓度的至少15倍。在一个实施方案中，调味浓缩物制剂中本发明化合物的浓度为即用型组合物中化合物浓度的至少20倍。在一个实施方案中，调味浓缩物制剂中本发明化合物的浓度为即用型组合物中化合物浓度的至少30倍。在一个实施方案中，调味浓缩物制剂中本发明化合物的浓度为即用型组合物中化合物浓度的至少40倍。在一个实施方案中，调味浓缩物制剂中本发明化合物的浓度为即用型组合物中化合物浓度的至少50倍。在一个实施方案中，调味浓缩物制剂中本发明化合物的浓度为即用型组合物中化合物浓度的至少60倍。在一个实施方案中，调味浓缩物制剂中本发明化合物的浓度高达即用型组合物中的化合物浓度的100倍。
[0170]
根据前述实施方案中任一项所述的增甜或调味浓缩物，在某些实施方案中还包括一种或多种额外的风味改良化合物，例如增强甜味的化合物(例如橙皮素、柚皮素、葡糖基化甜菊醇糖苷等)、阻断苦味的化合物(例如圣草酚、高圣草酚、7-o-甲基圣草酚(sterubin)及其盐或糖苷衍生物，以及香草基木酚素，例如罗汉松树脂素(matairesinol)和pct公开号wo2012/146584中所述的其他化合物)、增强鲜味的化合物(例如鲁比胺(rubemamine)、鲁森胺(rubescenamine)、(e)-3-(3,4-二甲氧基苯基)-n-(4-甲氧基苯乙基)丙烯酰胺等)、减少
酸味和/或甘草味的化合物、增强咸味的化合物、增强清凉效果的化合物，或前述的任何组合。
[0171]
患病柑橘的组合物的处理
[0172]
在第十五形态中，本公开提供了用于减少从患有柑橘黄龙(绿化)病的柑橘类水果获得的柑橘类组合物的苦味的方法，该方法包括：(a)从柑橘类水果获得柑橘类组合物，其中该柑橘类水果的至少一部分患有柑橘黄龙病；(b)使柑橘类组合物接触减少苦味的组合物，其包含多甲氧基黄酮(pmf)，例如一定量(例如减少苦味的有效量)的多甲氧基黄酮(pmf)。
[0173]
在一些实施方案中，柑橘类组合物包含浓度异常高的一种或多种苦味化合物，例如异常高水平的柠檬苦素或诺米林。在一些实施方案中，苦味化合物是这样一种化合物，其调节(例如激活)seq id no:2的多肽序列，或其功能片段，或一种多肽序列，其序列与前述任一者至少90％等同，或至少95％等同，或至少97％等同。在一些实施方案中，苦味化合物是柠檬苦素类化合物，例如柠檬苦素、诺米林、诺米林酸或它们的任何组合。
[0174]
可以使用任何合适的pmf。在一些实施方案中，pmf从由甜橙黄酮、4
’‑
羟基-甜橙黄酮、栎草亭、川陈皮素、橘皮素、七甲氧基黄酮以及它们的任何组合构成的群组中选出。在一些实施方案中，包含pmf的减少苦味的组合物获自柑橘类废物。
[0175]
阻断药物api中的苦味
[0176]
许多药物化合物具有苦味，因此限制了它们的配制和给药方式。因此，在某些形态中，本公开提供了一种药物组合物，其包含苦味药物活性成分和一种或多种多甲氧基黄酮(pmf)。在一些实施方案中，一种或多种pmf从由甜橙黄酮、4
’‑
羟基-甜橙黄酮、栎草亭、川陈皮素、橘皮素、七甲氧基黄酮以及它们的任何组合构成的群组中选出。这样的药物组合物可以是任何适合口服给药的形式，例如片剂、锭剂、胶囊、粉剂、液体溶液、液体悬浮液等。此类药物组合物可包括任何合适的药物赋形剂、粘合剂等，例如在remington’s pharmaceutical sciences中阐述的那些。在一些实施方案中，苦味药物活性成分是离子通道抑制剂，例如质子通道抑制剂。苦味被一种或多种pmf减少的苦味api的其他例子包括但不限于阿托品(atropine)、布林佐胺(brinzolamide)、氯霉素(chloramphenicol)、氯喹(chloroquine)、克林霉素(clindamycin)、地塞米松(dexamethasone)、地高辛(digoxin)、地尔硫卓(diltiazem)、苯海拉明(diphenhydramine)、多库酯(docusate)、多佐胺(dorzolamide)、多虑平(doxepin)、多西拉敏(doxylamine)、依那普利(enalapril)、红霉素(erythromycin)、埃索美拉唑(esomeprazole)、法莫替丁(famotidine)、加巴喷丁(gabapentin)、银杏内酯a(ginkgolide a)、愈创甘油醚(guaifenesin)、l-组氨酸(l-histidine)、洛美沙星(lomefloxacin)、甲泼尼龙(methylprednisolone)、氧氟沙星(ofloxacin)、橄榄苦苷(oleuropein)、奥芬溴铵(oxyphenonium)、哌仑西平(pirenzepine)、泼尼松龙(prednisone)、雷尼替丁(ranitidine)、曲匹地尔(trapidil)、甲氧苄啶(trimethoprim)和西替利嗪(cetirizine)。
[0177]
实施例
[0178]
为了进一步说明本发明，包括以下实施例。当然，不应将这些实施例解释为具体限制本发明。权利要求书范围内的这些实施例的变型在本领域技术人员的能力范围内，并且被认为落入本文描述和要求保护的本发明的范围内。读者将认识到，掌握了本公开的熟练
技术人员和本领域技术人员能够在没有穷举示例的情况下准备和使用本发明。
[0179]
实施例1—味觉受体的鉴定
[0180]
表达混杂g蛋白(g16g44)的细胞使用transit-293(mirus)(带有编码22种功能性苦味受体cdna的表达载体)进行转染，每次转染使用一种受体。将细胞直接转染在384孔高密度板中并孵育28小时。之后，对细胞加载ca特异性染料fluo4-am。孵育60分钟后，洗去多余的染料，用各自的苦味激动剂来刺激细胞，同时使用flipr仪器记录细胞内荧光的变化。鉴定苦味激动剂和响应受体，然后在相同的测定中使用各自稳定的苦味受体细胞系，以使用各自的苦味激动剂进行全剂量反应分析。
[0181]
使用柠檬苦素作为苦味激动剂的非限制性例子进行前述方案。当使用柠檬苦素时，在12.5μm至50μm的浓度范围内记录了细胞中表达的五种不同苦味受体蛋白的正剂量反应。五种经表达的受体蛋白对应于本文鉴定为seq id no:1、2、3、4和5的氨基酸序列。
[0182]
实施例2—苦味的拮抗
[0183]
测试了某些pmf拮抗柠檬苦素与表达本文鉴定为seq id no:2的多肽的细胞结合的能力。表1显示了在没有测试拮抗剂的情况下和在浓度范围为50μm至200μm的测试拮抗剂存在下，使用25μm浓度的多肽的柠檬苦素活性百分比。
[0184]
表1
[0185]
[0186]