用于改善学龄期的记忆能力的婴幼儿用组合物的制作方法

1.本发明涉及以长双歧杆菌婴儿亚种作为有效成分的用于改善学龄期的记忆能力的婴幼儿用组合物。


背景技术：

2.记忆能力是在学龄期发展的能力之一。已开发出了支持改善学童们的记忆力的各种技术。作为对增强记忆力有效的成分，例如除了发现了二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸等以外，还开发出了以啤酒花提取物中包含的葎草酮类作为有效成分的具有记忆力增强作用的功能性饮食品等(专利文献1)。
3.另一方面，双歧杆菌属细菌已知是人类肠道中存在的量最多的有益肠道细菌，作为一种益生菌而被充分利用于各种用途。双歧杆菌属细菌中也有发挥与记忆相关的效果的细菌。
4.例如，报道了包含长双歧杆菌atcc baa-999的食用组合物增加已知与记忆相关的海马的脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,bdnf)的表达(专利文献2)。此外，还开发出了以两歧双歧杆菌nite bp-31作为有效成分的面向新生儿的脑功能改善用组合物。具体而言，作为基于新版k式发育检测2001的评价，证实了在特定的新生儿中发育指数显著改善(专利文献3)。
5.然而，尚未报道长双歧杆菌婴儿亚种对摄取或被给予了该细菌的婴幼儿在之后的学龄期的记忆能力改善方面有效。
6.现有技术文献
7.专利文献
8.专利文献1：日本特开2015-224193号公报
9.专利文献2：日本特表2011-517568号公报
10.专利文献3：国际公开第2017/179602号


技术实现要素：

11.发明要解决的问题
12.本发明的目的在于提供改善学龄期的记忆能力的技术。
13.用于解决问题的方案
14.本发明人等发现：长双歧杆菌婴儿亚种对摄取或被给予了该细菌的婴幼儿在之后的学龄期的记忆能力改善方面有效，以至完成了本发明。
15.即，本发明提供以长双歧杆菌婴儿亚种作为有效成分的用于改善学龄期的记忆能力的婴幼儿用组合物。
16.前述组合物的优选方式是：前述长双歧杆菌婴儿亚种为长双歧杆菌婴儿亚种nite bp-02623。
17.前述组合物的优选方式是：前述记忆能力为工作记忆能力。
18.前述组合物的优选方式为饮食品组合物。
19.发明的效果
20.本发明的组合物能够改善摄取或被给予了该细菌的婴幼儿在之后的学龄期的记忆能力。
附图说明
21.图1是示出本发明的实施例1的结果的图。
具体实施方式
22.以下对本发明进行详细地说明。
23.需要说明的是，本说明书中，有时将以长双歧杆菌婴儿亚种(bifidobacterium longum subsp.infantis)作为有效成分的用于改善学龄期的记忆能力的婴幼儿用组合物记为“本发明的组合物”。本发明的组合物是包括混合物的概念，无论其成分均匀或不均匀。
24.另外，本说明书中，有时将长双歧杆菌婴儿亚种记为“本发明的细菌”。
25.本发明的组合物中，包含长双歧杆菌婴儿亚种作为有效成分。相同细菌为双歧杆菌属细菌，革兰氏阳性的专性厌氧杆菌。
26.需要说明的是，长双歧杆菌婴儿亚种有时简记为双歧杆菌婴儿亚种(bifidobacterium infantis)。
27.作为长双歧杆菌婴儿亚种的具体例，可列举长双歧杆菌婴儿亚种nite bp-02623、长双歧杆菌婴儿亚种bi-26(dupont danisco)、长双歧杆菌婴儿亚种r0033(lallemand)、长双歧杆菌婴儿亚种cect7210(biopolis)、长双歧杆菌婴儿亚种cect2710(biopolis)、长双歧杆菌婴儿亚种evc001(evolve biosystems)。
28.赋予了nite bp-02623的保藏编号的细菌于2018年1月26日在独立行政法人产业技术综合研究所专利生物保藏中心(现在的国家技术评估学会，专利微生物保藏中心(npmd)、邮政编码：292-0818、地址：千叶县木更津市上总镰足2-5-8 122号室)以nite bp-02623的保藏编号进行了基于布达佩斯条约的国际保藏。同一细菌是与长双歧杆菌婴儿亚种m-63相同的细菌。
29.长双歧杆菌婴儿亚种nite bp-02623不限定于上述保藏菌，可以为与上述保藏菌实质上同等的细菌。与上述保藏菌实质上同等的细菌是指被分类为长双歧杆菌婴儿亚种的细菌，在婴幼儿期摄取或被给予了该细菌的对象的学龄期，能够改善该对象的记忆能力，进而其16srrna基因的碱基序列与上述保藏菌的16srrna基因的碱基序列具有优选为98％以上、进一步优选为99％以上，更优选为100％的同源性，且优选为具有与上述保藏菌相同的菌学性质的细菌。另外，长双歧杆菌婴儿亚种nite bp-02623中，还包括以相同细菌作为亲本菌株的突变株和基因重组株。
30.该情况也同样地适用于上述其它菌。
31.本发明中，长双歧杆菌婴儿亚种可以使用一株菌株，也可以使用两株以上菌株。
32.长双歧杆菌婴儿亚种可以通过培养相同细菌而容易地增殖。进行培养的方法只要能使相同细菌增殖就没有特别限定，可以根据需要适宜修改在双歧杆菌属细菌(双歧杆菌)的培养中通常使用的方法而使用。例如，培养温度可以为25～50℃，优选为30～40℃。另外，
培养优选在厌氧条件下进行，例如，可以边通入二氧化碳气体等厌氧气体边进行培养。另外，也可以在液体静置培养等微好氧条件下进行培养。
33.作为用于培养的培养基，没有特别限定，可以根据需要适宜修改在双歧杆菌属细菌的培养中通常使用的培养基而使用。即，作为碳源，例如可以根据同化性使用半乳糖、葡萄糖、果糖、甘露糖、纤维素二糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、海藻糖、淀粉、淀粉水解物、黑糖蜜等糖类。作为氮源，例如可以使用氨、硫酸铵、氯化铵、硝酸铵等铵盐类、硝酸盐类。另外，作为无机盐类，例如可以使用氯化钠、氯化钾、磷酸钾、硫酸镁、氯化钙、硝酸钙、氯化锰、硫酸亚铁等。另外，也可以使用蛋白胨、大豆粉、脱脂豆粕、肉提取物、酵母提取物等有机成分。另外，作为已制得的培养基，例如可以适宜地使用mrs培养基。
34.对于本发明的细菌，可以在培养后直接使用得到的培养物，也可以进行稀释或浓缩而使用，也可以使用从培养物中回收的菌体。另外，只要不损害本发明的效果，就可以在培养后进行加热和冷冻干燥等各种追加操作。需要说明的是，本发明的细菌可以是活菌或死菌。作为死菌，可列举通过加热等而被灭菌的死菌。
35.本发明的细菌具有在婴幼儿期摄取或被给予了该细菌的对象的学龄期改善该对象的记忆能力的作用。因此，本发明的细菌可以用作用于改善学龄期的记忆能力的婴幼儿用组合物的有效成分。
36.作为摄取或被给予本发明的组合物的对象，可列举人、除人以外的哺乳动物。作为除人以外的哺乳动物，可示例出牛、山羊、绵羊、猪、猴子、狗、猫、大鼠、小鼠、仓鼠、豚鼠等。
37.对象为人时，摄取或被给予本发明的组合物的对象可以在其婴幼儿期经历了与母亲的分离(即，母子分离)，也可以没经历与母亲的分离。母子分离例如母亲与孩子的分离是短暂的但却是日常生活中的母亲与孩子的分离。可列举例如：1天中大部分时间共同生活的母亲与孩子由于孩子仅1天中的几个小时被托管于托儿所等所致的分离。作为母亲与孩子分离的时间，可列举例如：每1天3小时以上且12小时以下。
38.对象若为除人以外的哺乳动物，则摄取或被给予本发明的组合物的对象可以在其婴幼儿期经历了与喂养者的分离，也可以未经历与喂养者的分离。
39.本发明的组合物是对象在婴幼儿期所摄取或给予者。
40.本发明的“婴幼儿期”是指“婴儿期和幼儿期”。
41.本发明的“婴儿期”是指：对象为人时，从出生时起至未满1岁(直至满1岁之日的前一天为止)。“婴儿期”是指以母乳等乳作为主要营养源的时期。
42.本发明的“幼儿期”是指：对象为人时，相当于从满1岁之日起至进入学龄期之前为止。优选指相当于从满1岁之日起至满6岁之日和上小学之日中的任一较早日的前一天为止，另外，可以为相当于从满1岁之日起至满6岁之日的前一天。
43.因此，本发明的组合物在对象为人时，优选在从出生时起至进入学龄期之前摄取或给予。需要说明的是，对象为除人以外的哺乳动物的情况，可以将“学龄期”理解为“成长期”。
44.另外，本发明的组合物在对象为人时，更优选在从出生时起至未满3岁(直至满3岁之日的前一天为止)摄取或给予，进一步优选在婴儿期摄取或给予，更进一步优选在从满3个月起至未满1岁(直至满1岁之日的前一天为止)摄取或给予。
45.对于对象为除人以外的哺乳动物时的该时期，换算为与这些相当的时期即可。
46.例如，后述的实施例中，示出使用了大鼠的实验结果。
47.对象为人时的“婴儿期”相当于大鼠从出生时起至满20天龄。以下同样地，牛相当于从出生时起至满10周龄之日的前一天。山羊相当于从出生时起至满10周龄之日的前一天。绵羊相当于从出生时起至满12周龄之日的前一天。猪相当于从出生时起至满8周龄之日的前一天。猴子相当于从出生时起至满14周龄之日的前一天。狗相当于从出生时起至满6周龄之日的前一天。猫相当于从出生时起至满6周龄之日的前一天。小鼠相当于从出生时起至满20天龄。仓鼠相当于从出生时起至满20天龄。豚鼠相当于从出生时起至满20天龄。
48.对象为人时的“幼儿期”相当于大鼠从满21天龄起至满5周龄之日的前一天。以下同样地，牛相当于从满10周龄起至满1岁之日的前一天。山羊相当于从满10周龄起至满1岁之日的前一天。绵羊相当于从满12周龄起至满1岁之日的前一天。猪相当于从满8周龄起至满4月龄之日的前一天。猴子相当于从满14周龄起至满1.5岁之日的前一天。狗相当于从满6周龄起至满6月龄之日的前一天。猫相当于从满6周龄起至满6月龄之日的前一天。小鼠相当于从满21天龄起至满5周龄之日的前一天。仓鼠相当于从满21天龄起至满5周龄之日的前一天。豚鼠相当于从满21天龄起至满5周龄之日的前一天。
49.对象为人时的“满3岁”相当于大鼠满4周龄。以下同样地，牛相当于满6月龄。山羊相当于满6月龄。绵羊相当于满6月龄。猪相当于满3月龄。猴子相当于满9月龄。狗相当于满3月龄。猫相当于满3月龄。小鼠相当于满4周龄。仓鼠相当于满4周龄。豚鼠相当于满4周龄。
50.对象为人时的“满3个月”相当于大鼠满5天龄。以下同样地，牛相当于满2.5周龄。山羊相当于满2.5周龄。绵羊相当于满3周龄。猪相当于满2周龄。猴子相当于满3周龄。狗相当于满1.5周龄。猫相当于满1.5周龄。小鼠相当于满5天龄。仓鼠相当于满5天龄。豚鼠相当于满5天龄。
51.对象为人时的“满1岁”相当于大鼠满21天龄。以下同样地，牛相当于满10周龄。山羊相当于满10周龄。绵羊相当于满12周龄。猪相当于满8周龄。猴子相当于满14周龄。狗相当于满6周龄。猫相当于满6周龄。小鼠相当于满21天龄。仓鼠相当于满21天龄。豚鼠相当于满21天龄。
52.本发明的组合物具有在婴幼儿期摄取或被给予了该细菌的对象的学龄期改善该对象的记忆能力的作用。
53.本发明的“学龄期”是指：对象为人时，从满6岁之日和进入小学之日中任一较早之日起至满12岁之日和小学毕业之日中任一较晚之日为止，另外，可以是从满6岁之日起至满12岁之日。需要说明的是，对象为除人以外的哺乳动物的情况，将“学龄期”理解为“成长期”。
54.对于对象为除人以外的哺乳动物时的该时期，换算为相当于这些的时期即可。
55.例如，后述的实施例中示出使用了大鼠的实验结果。
56.对象为人时的“学龄期”相当于大鼠从满5周龄起至满8周龄。以下同样地，牛相当于从满1岁起至满2岁。山羊相当于从满1岁起至满2岁。绵羊相当于从满1岁起至满2岁。猪相当于从满4月龄起至满7月龄。猴子相当于从满1.5岁起至满3岁。狗相当于从满6月龄起至满1岁。猫相当于从满6月龄起至满1岁。小鼠相当于从满5周龄起至满8周龄。仓鼠相当于从满5周龄起至满8周龄。豚鼠相当于从满5周龄起至满8周龄。
57.本发明的记忆能力包括工作记忆能力和参照记忆能力。需要说明的是，工作记忆
能力有时称为工作记忆、空间工作记忆能力、短期记忆能力，但本发明中的工作记忆能力是对与活动一起获得的信息(空间识别、情感、感觉等)进行综合地信息处理，在短时间内记忆而更有效地执行工作的能力。
58.另一方面，参照记忆能力有时被称为空间参照记忆能力、长期记忆能力。
59.对于学龄期的工作记忆能力改善，若对象为大鼠那样的哺乳动物，则例如后述的实施例所述，可以通过八方向放射状迷宫试验进行评价。通过该试验能够评价记忆能力是本领域的技术常识。详情例如记载于“日药理志,130,112～116(2007)”等中。简单而言，记忆能力为工作记忆能力时，可以通过限制喂食的动物将设置在八方向放射状迷宫的所有八方向臂上的食物全部回收所需的时间、再次侵入曾经侵入的臂中的次数来评价。记忆能力为参照记忆能力时，通过仅在八方向放射状迷宫中的四方向中设置食物，正确侵入有食物的臂中的次数来评价。
60.对象为人时，例如可以通过自动工作记忆评估(automated working memory assessment：awma)进行评价。
61.工作记忆能力是成为学习基础的能力，因此通过改善工作记忆能力而可以期待学习能力的广泛改善。
62.作为通过改善学龄期的记忆能力而可以预防或改善的疾病、障碍、症状、症候(本说明书中有时记为“疾病等”。)，可列举例如：学习障碍(例如，阅读障碍、写作障碍、计算障碍、几何学障碍、失算症、健忘性失语症等)等。
63.本发明的组合物中的本发明的细菌的含量可以通过组合物的方式进行适宜设定，但总量优选在1
×
104～1
×
10
13
cfu/g或1
×
104～1
×
10
13
cfu/ml的范围内，更优选在1
×
105～1
×
10
12
cfu/g或1
×
105～1
×
10
12
cfu/ml的范围内，进一步优选在1
×
106～1
×
10
10
cfu/g或1
×
106～1
×
10
10
cfu/ml的范围内，进一步优选在1
×
106～1
×
109cfu/g或1
×
106～1
×
109cfu/ml的范围内。
64.需要说明的是，本说明书中，“cfu”表示colony forming unit(菌落形成单位)。另外，本说明书中，本发明的细菌为死菌时，cfu/g或cfu/ml可以置换为个细胞/g或个细胞/ml。
65.本发明的组合物的摄取量或给予量可以根据组合物的形态、用法、对象、对象的年龄、性别、和其它条件等进行适宜设定，但只要在婴幼儿期摄取或被给予了该细菌的对象的学龄期发挥改善该对象的记忆能力的作用就没有特别限制。作为本发明的细菌的总量，每1天且每100g体重、优选在1
×
104～1
×
10
13
cfu的范围内，更优选在1
×
105～1
×
10
12
cfu的范围内，进一步优选在1
×
106～1
×
10
10
cfu的范围内，进一步优选在1
×
106～1
×
109cfu的范围内。
66.需要说明的是，本说明书中，本发明的细菌为死菌时，cfu可以置换为个细胞。
67.另外，本发明的组合物可以1天摄取或给予1次或分成多次摄取或给予。另外，可以数天或数周进行1次摄取或给予，但优选每天给予。另外，给予期间优选7天以上。
68.本发明的组合物可以经口摄取或给予，但不限定于此，例如也可以是经鼻摄取或给予、通过胃瘘、肠瘘进行摄取或给予。例如，也可以对对象通过经鼻胃营养管等进行摄取或给予。
69.本发明的组合物可以用作饮食品组合物、饲料组合物或药物组合物。
70.例如，可以提供：以长双歧杆菌婴儿亚种作为有效成分的用于改善学龄期的记忆能力的婴幼儿用饮食品组合物；
71.以长双歧杆菌婴儿亚种作为有效成分的用于改善成长期的记忆能力的婴幼儿用饲料组合物；或者，
72.以长双歧杆菌婴儿亚种作为有效成分的用于改善学龄期的记忆能力的婴幼儿用药物组合物。
73.以下，有时分别称为“本发明的饮食品组合物”、“本发明的饲料组合物”、“本发明的药物组合物”。
74.本发明的饮食品组合物只要含有本发明的细菌就没有特别限制。作为饮食品组合物，无论液体、膏状、凝胶状固体、粉末等形态，可以是饮食品，除了压片糖、流质食品等之外，可列举例如：面包、通心粉、意大利细面条、面类、蛋糕混合料、油炸粉、面包粉等小麦粉产品；方便面、杯面、蒸煮/烹调食品、烹调罐头、微波用食品、速溶汤/日式炖菜、速溶大酱汤/吸入物、罐装浓汤、冻/干食物、其它速食品等速食食品类；农作物罐头、水果罐头、果酱(jam)/橘子酱(marmalade)类、咸菜、煮豆类、农产品干物类、谷物(谷物加工品)等农产加工品；水产罐头、鱼肉火腿/香肠、水产糜类产品、水产鱼贝类、佃煮类等水产加工品；畜产罐头/糊剂类、畜肉火腿/香肠等畜产加工品；加工乳、乳饮料、酸奶类、乳酸菌饮料类、乳酪、冰激凌类、配方奶粉类、奶油、其它乳制品等乳/乳制品；黄油、人造奶油类、植物油等油脂类；酱油、大酱、沙司(sauce)类、西红柿加工调味剂、味醂类、食醋类等基础调味剂；烹调混合料、咖喱的原料类、鱼露类、沙拉(dressing)类、面汤类、香辛料类、其它复合调味剂等复合调味剂/食品类；材料冷冻食品、半烹调冷冻食品、经烹调的冷冻食品等冷冻食品；焦糖、糖果、软糖、口香糖、巧克力、曲奇(cookie)、饼干(biscuits)、蛋糕(cake)、馅饼(pie)、小吃(snack)、薄脆饼(cracker)、日本点心、米点心、豆点心、西式甜点、果冻、其它点心等点心类；碳酸饮料、天然果汁、果汁饮料、带有果汁的清凉饮料、果肉饮料、带有果粒的果实饮料、蔬菜系饮料、豆奶、豆奶饮料、咖啡饮料、茶饮料、粉末饮料、浓缩饮料、运动饮料、营养饮料、酒精饮料、其它偏好饮料等偏好饮料类；婴儿食品、米饭伴侣、茶泡饭海带等其它市售食品等；育儿用配方奶粉；经肠营养食品；特殊用途食品、保健功能食品(特定保健用食品、营养功能食品、功能性标示食品)；营养辅助食品等。
75.另外，本发明的饮食品组合物可以为营养增强剂，例如可以为平板状的营养增强剂。在为营养增强剂时，对于每天的饮食量和摄取卡路里，可以在不影响其它食品的情况下摄取本发明的细菌。
76.本发明的饮食品组合物可以通过在通常的饮食品的原料中添加本发明的细菌而制造，除了添加本发明的细菌以外，可以与通常的饮食品同样地制造。本发明的细菌的添加可以在饮食品组合物的制造工序的任意阶段进行。另外，也可以经过基于所添加的本发明的细菌的发酵工序而制造饮食品组合物。作为这样的饮食品组合物，可列举乳酸菌饮料和发酵乳等。另外，也可列举添加至被挤出的母乳、配方奶中的形态，还可假设让婴幼儿摄取添加后的奶。
77.本发明的饮食品组合物中还可包含用于制造饮食品组合物的原料和食品添加物等在饮食品组合物的制造工序或制造后添加至饮食品组合物中的物质。例如，本发明的细菌可以用作发酵乳制造用发酵剂。另外，也可以将本发明的细菌之后添加至制得的发酵乳
中。
78.另外，对于本发明的饮食品组合物，只要不损害本发明的效果，就可以使用公知的或未来发现的具有益生元效果的成分或辅助益生元效果的成分。例如，本发明的饮食品组合物可以通过将乳清蛋白、酪蛋白、大豆蛋白或豌豆蛋白(pea protein)等各种蛋白质或其混合物、分解物；亮氨酸、缬氨酸、异亮氨酸或谷氨酰胺等氨基酸；维生素b6或维生素c等维生素类；肌酸；柠檬酸；鱼油；或者低聚异麦芽糖、低聚半乳糖、低聚木糖、大豆低聚糖、低聚果糖、乳酮糖等低聚糖等成分与本发明的细菌配混而制造。
79.本发明的饮食品组合物中的本发明的细菌的含量可根据饮食品组合物的方式进行适宜设定，但总量优选在1
×
104～1
×
10
13
cfu/g或1
×
104～1
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10
13
cfu/ml的范围内，更优选在1
×
105～1
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10
12
cfu/g或1
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105～1
×
10
12
cfu/ml的范围内，进一步优选在1
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106～1
×
10
10
cfu/g或1
×
106～1
×
10
10
cfu/ml的范围内，更进一步优选在1
×
106～1
×
109cfu/g或1
×
106～1
×
109cfu/ml的范围内。
80.本发明的饮食品组合物的摄取量可以根据饮食品组合物的形态、用法、对象、对象的年龄、性别、和其它条件等进行适宜设定，但只要在婴幼儿期摄取了其的对象的学龄期发挥改善该对象的记忆能力的作用就没有特别限制。作为本发明的细菌的总量，每1天且每100g体重、优选在1
×
104～1
×
10
13
cfu的范围内，更优选在1
×
105～1
×
10
12
cfu的范围内，进一步优选在1
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106～1
×
10
10
cfu的范围内，进一步优选1
×
106～1
×
109cfu的范围内。
81.需要说明的是，本发明的饮食品组合物可以1天摄取1次或分成多次来摄取。另外，可以数天或数周进行1次摄取，但优选每天给予。另外，给予期间优选7天以上。
82.本发明的饮食品组合物可以单独摄取，也可以与其它饮食品组合物或饮食品或药物组合物或药物一起摄取。例如，可以与用于改善学龄期的记忆能力的、其它婴幼儿用饮食品组合物或婴幼儿用饮食品或婴幼儿用药物组合物或婴幼儿用药物等一起摄取。
83.本发明的饮食品组合物可以标示为婴幼儿用、且用于改善成长后的学龄期的记忆能力等的用途的饮食品组合物或饮食品而销售。另外，除此以外，不用说也可以使用通过上述用途而显示出次要产生的效果的措辞。
84.前述“标示”是指用于使需要者知悉上述用途的全部行为，只要是可想起或类推上述用途的标示则不论标示目的、标示内容、标示对象物和介质等如何，均相当于本发明的“标示”然而，“标示”优选通过需要者直接意识到上述用途的表现方式来标示。
85.具体而言，可示例出对在本发明的饮食品组合物或饮食品的商品或商品的包装上记载了上述用途的物品进行转让、交货、为了转让或交货而进行展示、进口的行为；在与商品有关的广告、价格表或交易文件中记载上述用途并展示或发布、或在以这些为内容的信息中记载上述用途并通过电磁方法(互联网等)进行提供的行为，特别优选将这样的标示内容标示在包装、容器、商品目录、宣传手册、pop等销售现场的宣传材料、其他文件等中。
86.另外，作为标示，优选为得到行政等许可的标示(例如，基于行政规定的各种制度而得到许可、并以基于这样的许可的形态进行的标示)。例如可以示例出作为保健功能食品等更具体而言保健功能食品、健康食品、功能性食品、经肠营养食品、特殊用途食品、营养功能食品、药物用准药物等的标示，可以示例出经其它消费厅许可的标示、例如特定保健用食品、营养功能食品、功能性标示食品、与这些类似的制度许可的标示。作为后者的例子，可以示例出作为特定保健用食品的标示、作为附加条件的特定保健用食品的标示、主旨为对身
体的结构、功能带来影响的标示、降低疾病风险的标示、基于科学根据的功能性的标示等。更详细而言，可以示例出作为关于健康增进法中规定的特别用途标示的许可等的内阁府令(平成二十一年八月三十一日内阁府令第五十七号)所确定的特定保健用食品的标示(特别是保健用途的标示)及与其类似的标示等。
87.进而，作为对象为人且对象在婴幼儿期摄取时的本发明的饮食品组合物的一例，可列举婴儿用奶粉(例如，婴儿用配方奶粉等)、幼儿用奶粉(例如，幼儿用配方奶粉等)。可以含有本发明中的乳铁蛋白；母乳低聚糖、低聚果糖和低聚半乳糖等益生元；酪蛋白、大豆、乳清或脱脂乳来源的蛋白质；乳糖、蔗糖、麦芽糊精、淀粉或它们的混合物等碳水化合物；脂质(例如，棕榈油精、葵花油、葵花油)；和日常食物中不可或缺的维生素类和矿物质等，另外，可以含有选自由这些组成的组中的1种或2种以上。特别是，该“婴儿用奶粉”是指：试图为了让优选出生后4～12个月、更优选出生后4～6个月的婴儿饮用来代替母乳且仅此即可满足婴儿的营养需求的食品。
88.作为本发明的饲料组合物，可示例出宠物食品、家畜饲料、和养鱼饲料等。本发明的饲料组合物可以通过在一般的饲料或其原料、例如谷类、粕类、糠类、鱼粉、骨粉、油脂类、脱脂奶粉、乳清、矿物质饲料或酵母类等中混合本发明的细菌而制造。制得的饲料组合物可以向一般的哺乳动物、家畜类、养鱼类和宠物动物等给予。
89.本发明的饲料组合物中的本发明的细菌的含量可根据饲料组合物的方式进行适宜设定，但总量优选在1
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104～1
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10
13
cfu/g或1
×
104～1
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10
13
cfu/ml的范围内，更优选在1
×
105～1
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10
12
cfu/g或1
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105～1
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10
12
cfu/ml的范围内，进一步优选在1
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106～1
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10
10
cfu/g或1
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106～1
×
10
10
cfu/ml的范围内，进一步优选1
×
106～1
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109cfu/g或1
×
106～1
×
109cfu/ml的范围内。
90.对对象给予的本发明的饲料组合物的给予量可根据饲料组合物的形态、用法、对象、对象的年龄、性别、和其它条件等进行适宜设定，但只要在婴幼儿期被给予了该组合物的对象的成长期发挥改善该对象的记忆能力的作用就没有特别限制。作为本发明的细菌的总量，每1天且每100g体重、优选在1
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104～1
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10
13
cfu的范围内，更优选在1
×
105～1
×
10
12
cfu的范围内，进一步优选在1
×
106～1
×
10
10
cfu的范围内，进一步优选在1
×
106～1
×
109cfu的范围内。
91.需要说明的是，本发明的饲料组合物可以1天给予1次或分成多次向对象给予，另外，可以数天或数周进行1次摄取或给予，但优选每天给予。另外，给予期间优选7天以上。
92.本发明的饲料组合物可以单独向对象给予，也可以与其它饲料组合物或饲料或药物组合物或药物一起给予。例如，可以与用于改善成长期的记忆能力的、其它婴幼儿用饲料组合物或婴幼儿用饲料或婴幼儿用药物组合物或婴幼儿用药物等一起给予。
93.本发明的药物组合物只要含有本发明的细菌就没有特别限制。作为本发明的药物组合物，可以直接使用本发明的细菌，也可以配混生理上可接受的液体或固体的制剂载体进行制剂化而使用。
94.本发明的药物组合物的剂型没有特别限制，具体而言，可以示例出片剂、丸剂、散剂、液体制剂、悬浮剂、乳剂、颗粒剂、胶囊剂、糖浆剂、栓剂、注射剂、软膏剂、贴剂、滴眼剂、和滴鼻剂等。另外，进行制剂化时，可以使用通常用作制剂载体的赋形剂、粘结剂、崩解剂、润滑剂、稳定剂、矫味矫臭剂、稀释剂、表面活性剂或注射剂用溶剂等添加剂。
95.另外，作为前述制剂载体，根据剂型可以使用各种有机或无机的载体。作为固体制剂时的载体，可列举例如：赋形剂、粘结剂、崩解剂、润滑剂、稳定剂、矫味矫臭剂等。
96.作为赋形剂，可列举例如：乳糖、白糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇等糖衍生物；玉米淀粉、马铃薯淀粉、α-淀粉、糊精、羧甲基淀粉等淀粉衍生物；结晶纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙等纤维素衍生物；阿拉伯胶；葡聚糖；普鲁兰多糖；轻质无水硅酸、合成硅酸铝、偏硅酸铝酸镁等硅酸盐衍生物；磷酸钙等磷酸盐衍生物；碳酸钙等碳酸盐衍生物；硫酸钙等硫酸盐衍生物等。
97.作为结合剂，例如除了上述赋形剂以外还可列举：明胶；聚乙烯基吡咯烷酮；macrogol等。
98.作为崩解剂，例如除了上述赋形剂以外还可列举：交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯基吡咯烷酮等经化学修饰的淀粉或纤维素衍生物等。
99.作为润滑剂，可列举例如：滑石；硬脂酸；硬脂酸钙、硬脂酸镁等硬脂酸金属盐；硅胶；胶状硅酸镁铝(veegum)、鲸蜡等蜡类；硼酸；甘醇；富马酸、己二酸等羧酸类；苯甲酸钠等羧酸钠盐；硫酸钠等硫酸盐类；亮氨酸；月桂基硫酸钠、月桂基硫酸镁等月桂基硫酸盐；硅酸酐、硅酸水合物等硅酸类；淀粉衍生物等。
100.作为稳定剂，可列举例如：对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯等对羟基苯甲酸酯类；氯代丁醇、苯甲醇、苯乙醇等醇类；苯扎氯铵；乙酸酐；山梨酸等。
101.作为矫味矫臭剂，可列举例如：甜味剂、酸味剂、香料等。
102.需要说明的是，作为经口给药用的液体制剂所使用的载体，可列举水等溶剂、矫味矫臭剂等。
103.本发明的药物组合物中的本发明的细菌的含量可根据剂型、用法、对象、对象的年龄、性别、疾病等的种类、其程度、和其它条件等进行适宜设定，但总量优选在1
×
104～1
×
10
13
cfu/g或1
×
104～1
×
10
13
cfu/ml的范围内，更优选在1
×
105～1
×
10
12
cfu/g或1
×
105～1
×
10
12
cfu/ml的范围内，进一步优选在1
×
106～1
×
10
10
cfu/g或1
×
106～1
×
10
10
cfu/ml的范围内，进一步优选在1
×
106～1
×
109cfu/g或1
×
106～1
×
109cfu/ml的范围内。
104.对对象给予的本发明的药物组合物的给予量可根据剂型、用法、对象、对象的年龄、性别、疾病等的种类、其程度、和其它条件等进行适宜设定，只要在婴幼儿期给予了其的对象的学龄期发挥改善该对象的记忆能力的作用就没有特别限制。作为本发明的细菌的总量，每1天且每100g体重、优选在1
×
104～1
×
10
13
cfu的范围内，更优选在1
×
105～1
×
10
12
cfu的范围内，进一步优选在1
×
106～1
×
10
10
cfu的范围内，进一步优选在1
×
106～1
×
109cfu的范围内。
105.本发明的药物组合物的给予时期只要是对象的婴幼儿期就没有特别限定，可以适宜选择给予时期。另外，也可以预防性地给予。另外，给予形态优选根据制剂形态、对象、对象的年龄、性别、疾病等的种类、其程度、其它条件等来确定。需要说明的是，本发明的药物组合物可以在任何情况下进行1天给予1次或分成多次给予。另外，可以数天或数周进行1次给予，但优选每天给予。另外，给予期间优选7天以上。
106.本发明的药物组合物可以单独给予，也可以与其它药物组合物或药物、饮食品组合物或饮食品或饲料组合物或饲料一起给予。例如，可以与用于改善学龄期的记忆能力的、其它婴幼儿用药物组合物或婴幼儿用药物、婴幼儿用饮食品组合物或婴幼儿用饮食品或婴
幼儿用饲料组合物或婴幼儿用饲料等一起给予。
107.进而，本发明也可以采用以下的构成。
108.〔1〕一种长双歧杆菌婴儿亚种在制造用于改善学龄期的记忆能力的婴幼儿用组合物中的应用。
109.〔2〕一种用于改善学龄期的记忆能力的、婴幼儿用的长双歧杆菌婴儿亚种。
110.〔3〕一种通过改善学龄期的记忆能力而能够预防或改善的疾病等的预防方法或改善方法，其包括：向需要预防或改善的婴幼儿给予预防或改善有效量的长双歧杆菌婴儿亚种的阶段。
111.〔4〕一种婴幼儿用的长双歧杆菌婴儿亚种的、用于改善学龄期的记忆能力的应用。
112.〔5〕用于改善学龄期的记忆能力的、婴幼儿用的长双歧杆菌婴儿亚种。
113.〔6〕一种预防或改善通过改善学龄期的记忆能力而能够预防或改善的疾病等的方法，其包括向婴幼儿给予长双歧杆菌婴儿亚种或本发明的组合物的阶段。
114.〔7〕一种改善学龄期的记忆能力的方法，其包括向婴幼儿给予长双歧杆菌婴儿亚种的阶段；或者，一种改善对象在学龄期的记忆能力的方法，其包括向对象给予长双歧杆菌婴儿亚种的阶段，所述对象为婴幼儿。
115.实施例
116.以下使用实施例对本发明进行具体地说明，但本发明不限定于这些实施例。
117.以下的实施例中，作为待检动物，使用sprague-dawley(sd)系大鼠(东京实验动物株式会社)。将该大鼠在室温(22
±
3℃)、12小时的明暗周期(明期7:00-19:00)的喂养室中喂养，使其自由进食(ce-2、clea japan,inc.)和饮水。
118.〔实施例1〕
119.(待检动物的准备)
120.本实施例中，对于初次妊娠第16天的雌性(f0)，每只在外部看不到的一个塑料制的喂养笼子(410mm
×
260mm)中喂养至新生幼崽出生为止。分娩后，对于新生幼崽(f1)，将出生日作为日龄(pnd)0，在pnd1将同胞幼崽减少至雄性和雌性几乎各一半的最多10只。
121.本实施例中，仅使用f1的雄性。在母子分离(maternal separation,ms)治疗前进行了体重测定和基于仔犬标记技术(室町机械株式会社)的标识。ms治疗进行从pnd5到pnd21的从15点到18点的3个小时。
122.ms治疗的步骤如下。在ms治疗开始前1小时，将家笼移到实验室(室温25℃)，使其适应环境，将母亲从家笼至移到其它笼子后，将幼崽(仅雄性隔离)从家笼至移到塑料制的什么也没有的单独笼子(245mm
×
160mm)中，使母亲再次返回至家笼。单独笼子是位于丙烯酸制的5级干燥器(内尺寸430mm
×
1330mm
×
500mm)内的单独笼子，各笼子的地板下放置保温垫并使笼子的温度为25～27℃。未进行ms治疗的幼崽始终与母亲同居。
123.(八方向放射状迷宫试验)
124.从pnd5到pnd21，对于试验组，作为待检物质1天经口给予1次5
×
108cfu/100g体重(以溶液的形式、0.5ml/100g体重)悬浮于生理盐水中的长双歧杆菌婴儿亚种nite bp-02623(森永乳业株式会社)溶液，对于对照组，作为对照物质1天经口给予1次等量的悬浮了st淀粉(日淀化学株式会社)的溶液。使用pnd42(6周龄)至pnd49(7周龄)的大鼠进行了八方向放射状迷宫试验。
125.本试验中，使用由8个臂(55cm
×
10cm)和中心区(直径30cm的八角形)构成、各臂被透明的丙烯酸制的壁包围的装置。所有臂的顶端设置有小且碎的食物(ce-2、clea japan,inc.)。
126.对于动物，在试验前3天、试验前2天和试验前1天进行了1天45分钟的限制喂食。另外，在该试验前1天中，将动物放入装置中还进行了使其自由活动的习惯处置。将第二天作为试验开始日(试验第1天)，直至试验第6天为止每天实施了1次试验。在各次试验实施的1个多小时前将大鼠移动至试验室进行适应。试验中，将动物放入装置的中心区，测量设置于所有臂的顶端的食物被全部摄取所需时间(任务完成时间)，并测量再次侵入摄取了全部食物的臂中错误次数。用摄像机拍摄了动物的行动。
127.将结果示于图1。对于任务完成时间，在试验第3天及之后，与对照组相比试验组显示出低值。该结果显示出能够更有效地执行任务这样的工作记忆能力得到改善。