吡嗪类衍生物及其在抑制SHP2中的应用的制作方法

吡嗪类衍生物及其在抑制shp2中的应用
技术领域
1.本发明属于医药领域，涉及一种吡嗪类衍生物、其制备方法及其在医药中的应用，具体涉及一种吡嗪类衍生物及其作为蛋白酪氨酸磷酸酶2(shp2)抑制剂在预防和/或治疗蛋白酪氨酸磷酸酶2(shp2)活性异常相关疾病中的用途。


背景技术：

2.shp2是ptpn11编码的非受体蛋白酪氨酸磷酸酶，由2个n端sh2结构域、1个蛋白磷酸酶结构域组成。shp2蛋白主要定位于细胞质中，基础状态下为自抑制构象，n端sh2 结构域与磷酸酶结构域相互作用，隐藏其催化位点；接收上游信号后激活为活化构象，暴露出催化位点，发挥磷酸酶功能。
3.shp2是连接细胞内多个重要致癌信号通路的关键节点，如jak/stat、pi3k/akt、 ras/raf/mapk、pd-1/pd-l1等。shp2蛋白突变或过表达与多种疾病和肿瘤相关。
4.shp2突变主要发生在努南综合征(50％)、豹综合征(80％)、单核细胞白血病(35％)、骨髓增生异常综合征(10％)、b细胞急性淋巴细胞白血病(7％)、急性髓性白血病(4％) 等；在实体瘤如肺癌、直结肠癌、黑色素瘤、肝癌、乳腺癌等也发现了shp2的突变；异常活化的生长因子、细胞因子等需要通过shp2将信号传导，野生型的shp2活性在很多类型的肿瘤中也至关重要；shp2还处于pd-1、btla等免疫检查点下游，对肿瘤微环境中的巨噬细胞功能也有一定影响，参与到肿瘤免疫逃逸的机制中，在肿瘤免疫方向也有重要的功能。
5.由于shp2在肿瘤中的重要作用，对shp2催化位点抑制剂的研究已经有数十年，但是 shp2的磷酸酶域高度保守且为正电，一直未有药物推进至临床阶段。


技术实现要素：

6.发明要解决的问题
7.至今尚未有任何一个关于蛋白酪氨酸磷酸酶的药物上市，且现有技术中的化合物抑制 shp2的活性较差(如wo2016/203406a1)。本发明的目的在于提供一种吡嗪类衍生物，此类化合物具有优异的shp2抑制活性，能够用于预防和/或治疗非受体蛋白酪氨酸磷酸酶介导的或依赖的疾病或病症。
8.用于解决问题的方案
9.为了解决上述技术问题，本发明提供了一种式(ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，所述式(ⅰ)化合物的结构为：
[0010][0011]
其中：
[0012]
r1和r2各自相同或不同，其各自独立地选自h、d、卤素原子、-cn、-cooh、-cho、
ꢀ-
oh、-no2、取代或未取代的下列基团：-nh2、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烷氨基、c
1-c
10
烷氧基、 c
3-c
12
环烷基、c
3-c
12
环烷基氧基、3-12元杂环基、c
6-c
10
芳基、5-10元杂芳基；或r1和 r2形成3-8元环烷基、环烯基或杂环基，任选的，所述3-8元环烷基、环烯基或杂环基被选自由-oh、-nh2、-cn、no2、卤素原子、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烷氧基、c
1-c
10
烷氨基、c
3-c
12
环烷基、c
6-c
10
芳基和5-10元杂芳基组成的组中的任意1-3个所取代；
[0013]
x选自化学键、-nh-、-conh-；
[0014]
选自c
6-c
10
芳基、5-10元杂芳基、c
4-c
12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-c
14
桥环基或者螺环基、c
6-c
14
桥杂环基或者螺杂环基；其中所述5-10元杂芳基、3-12元杂环基、c
6-c
14
桥杂环基或者螺杂环基含有1-3个任选自n、nh、o、s、c(o)、s(o)的杂原子或基团；
[0015]
每一个r3各自相同或不同，各自独立地选自h、d、卤素原子、-cn、-cooh、-cho、
ꢀ-
oh、-no2、取代或未取代的下列基团：c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烷氨基、-c
1-c
10
烷基酰胺、c
1-c
10
烷氧基、-nh2、c
3-c
12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-c
10
芳基或5-10元杂芳基，所述取代是被选自c
1-c
10
烷基、c
3-c
12
环烷基、3-12元杂环基、卤素原子、-nh2、-cn、-cooh、-conh2、
ꢀ-
cho、-oh、-no2、羟基-c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烷氧基、c
1-c
10
烷氨基、5-10元杂芳基、c
6-c
10
芳基或3-12元杂环基中的一个或多个取代基所取代；或任意相邻的两个r3形成3-6元饱和或者不饱和的环，任选的，所述3-6元饱和或者不饱和的环被选自由-oh、-nh2、-cn、卤素原子、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烷氧基、c
3-c
12
环烷氨基、c
1-c
10
烷基氨基、c
3-c
12
环烷基、卤代c
1-c
10
烷基氨基、c
6-c
10
芳基和5-10元杂芳基组成的组中的任意1-3个所取代；
[0016]
r4、r5、r6、r7、r8、r9、r
10
、r
11
各自独立地选自h、d、卤素原子、-cn、-cooh、
ꢀ-
cho、-oh、-no2、取代或未取代的下列基团：-nh2、c
1-c
10
烷基、c1-c10烷氨基、c
1-c
10
烷氧基、c
3-c
12
环烷基、c
3-c
12
环烷基氧基、3-12元杂环基、c
6-c
10
芳基、5-10元杂芳基，所述取代是被选自c
1-c
10
烷基、c
3-c
12
环烷基、3-12元杂环基、卤素原子、-nh2、-cn、-cooh、
ꢀ-
cho、-oh、-no2、羟基-c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烷氧基、c
1-c
10
烷氨基、5-10元杂芳基或c
6-c
10
芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0017]
m为0、1、2、3或4；
[0018]
n为0、1或2。
[0019]
本发明还提供了一种药物组合物，其包含上述任一所述的一种式(ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物。
no2、取代或未取代的下列基团：-nh2、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烷氨基、c
1-c
10
烷氧基、 c
3-c
12
环烷基、c
3-c
12
环烷基氧基、3-12元杂环基、c
6-c
10
芳基、5-10元杂芳基；或r1和 r2形成3-8元环烷基、环烯基或杂环基，任选的，所述3-8元环烷基、环烯基或杂环基被选自由-oh、-nh2、-cn、-no2、卤素原子、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烷氧基、c
1-c
10
烷氨基、c
3-c
12
环烷基、c
6-c
10
芳基和5-10元杂芳基组成的组中的任意1-3个所取代；
[0032]
x选自化学键、-nh-、-conh-；
[0033]
选自c
6-c
10
芳基、5-10元杂芳基、c
4-c
12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-c
14
桥环基或者螺环基、c
6-c
14
桥杂环基或者螺杂环基；其中所述5-10元杂芳基、3-12元杂环基、c
6-c1桥环基或者螺环基含有1-3个任选自n、nh、o、s、c(o)、s(o)的杂原子或基团；
[0034]
每一个r3各自相同或不同，各自独立地选自h、d、卤素原子、-cn、-cooh、-cho、-oh、-no2、氨基酰基、取代或未取代的下列基团：c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烷氨基、-c
1-c
10
烷基酰胺、c
1-c
10
烷氧基、-nh2、c
3-c
12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-c
10
芳基或5-10元杂芳基，所述取代是被选自c
1-c
10
烷基、c
3-c
12
环烷基、3-12元杂环基、卤素原子、-nh2、-cn、-cooh、
ꢀ-
conh2、-cho、-oh、-no2、羟基-c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烷氧基、c
1-c
10
烷氨基、5-10元杂芳基或c
6-c
10
芳基中的一个或多个取代基所取代；或任意相邻的两个r3形成3-6元饱和或者不饱和的环，任选的，所述3-6元饱和或者不饱和的环被选自由-oh、-nh2、-cn、卤素原子、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烷氧基、c
3-c
12
环烷氨基、c
1-c
10
烷氨基、c
3-c
12
环烷基、卤代 c
1-c
10
烷氨基、c
6-c
10
芳基和5-10元杂芳基组成的组中的任意1-3个所取代；
[0035]
r4、r5、r6、r7、r8、r9、r
10
、r
11
各自独立地选自h、d、卤素原子、-cn、-cooh、
ꢀ-
cho、-oh、-no2、取代或未取代的下列基团：-nh2、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烷氨基、c
1-c
10
烷氧基、c
3-c
12
环烷基、c
3-c
12
环烷基氧基、3-12元杂环基、c
6-c
10
芳基、5-10元杂芳基、 3-12元杂环基，所述取代是被选自c
1-c
10
烷基、c
3-c
12
环烷基、3-12元杂环基、卤素原子、
ꢀ-
nh2、-cn、-cooh、-cho、-oh、-no2、羟基-c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烷氧基、c
1-c
10
烷氨基、5-10元杂芳基或c
6-c
10
芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0036]
m为0、1、2、3或4；
[0037]
n为0、1或2。
[0038]
为了更为清晰地描述本发明的内容，现将所涉及的全部术语定义如下。此外，一个特定的术语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照本领域普通的含义去理解。
[0039]
术语“被取代”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。
[0040]
术语“任选”、“任选的”或“任选地”是指随后描述的事件或情况可以发生或不发生，该描述包括发生所述事件或情况和不发生所述事件或情况。例如，甲基任选被卤素取代，表示甲基可以是未被取代的、被卤素单取代或多取代的。术语“卤素原子”指单独或者以组合方式表示氟、氯、溴或碘，特别的是氟、氯或溴。
[0041]
本文中的c
a-cb，是该部分具有给定范围中的整数个碳原子。例如，“c
1-c
6”是指该基团可具有1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子、4个碳原子、5个碳原子或6个碳原子。本文中的以“a-b”、“a至b”或“a到b”的形式给出的关于基团个数或原子个数的数值范围，表明给定
三唑基、咪唑基、四氮唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、噻二唑基、噁二唑基、萘基、苯并噻吩基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、吲唑基、吲哚[1,2-a]吡嗪基、4,7-二氮杂吲哚、吡唑并嘧啶基、咪唑并嘧啶基、噁唑并嘧啶基、异噁唑并嘧啶基、咪唑并吡嗪基、吡唑并吡嗪、吡咯并吡嗪基、呋喃并吡嗪基、噻吩并吡嗪基、吡啶并嘧啶酮基、苯并噁唑基或苯并噻唑基等。“杂芳基”上的氢原子独立任选地被一个或多个本发明所描述的取代基所取代。
[0049]
术语“c
6-10
芳基”表示具有6-10个碳原子的芳基，其中芳基表示如以上所定义。
[0050]
术语“5-10元杂芳基”表述具有5-10个碳原子和杂原子的杂芳基，其中杂芳基如以上所定义。
[0051]
术语“3-8元环烷基、环烯基或杂环基”中的“3-8元环烷基”表示具有3-8个碳原子的饱和单环或稠环环烷基，例如，包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等。其中“3-8 元环烯基”具有3-8个碳原子的部分不饱和的单环或稠环基团。其中“3-8元杂环基”表示具有3-8个碳原子和杂原子或杂原子基团的杂环基，所述杂原子或杂原子基团选自n、nh、 o、s(o)m(其中m是0、1、2)；例如氮丙啶基、氮杂环丁基、氧杂环丁基、吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、硫代吗啉基、四氢吡喃基、1,1-二氧硫代吗啉基等；在一些实施方案中“3-8元杂环基”优选“3-6元杂环基”或“5-6元杂环基”。
[0052]
术语
“-
conh
-”
表示-c(＝o)-nh-，具体可以表示c(＝o)与相连或者nh与相连，优选为c(＝o)与相连。
[0053]
术语“氨基”单独或者以组合方式表示伯氨基(-nh2)，仲氨基(-nh-)或叔氨基
[0054]
术语“c
1-c
10
烷氨基”单独或者以组合方式表示如上所定义的氨基基团，其中氨基基团的氢原子被至少一个c
1-c
10
烷基所取代，其中“c
1-c
10
烷基”表示如以上所定义。相应地，“c
1-c
10
烷氨基”例如包括甲基氨基、乙基胺基、丙基氨基、异丙基氨基、正丁基胺基、异丁基氨基、2-丁基氨基、叔丁基氨基、正戊基氨基、2-戊基氨基、3-戊基氨基、2-甲基-2-丁基氨基、3-甲基-2-丁基氨基、3-甲基-1-丁基氨基、2-甲基-1-丁基氨基、正己基氨基、2-己基氨基、3-己基氨基、2-甲基-2-戊基氨基、3-甲基-2-戊基氨基、4-甲基-2-戊基氨基、3-甲基-3
-ꢀ
戊基氨基、2-甲基-3-戊基氨基、2,3-二甲基-2-丁基氨基、3,3-二甲基-2-丁基氨基等。特别的“c
1-c
10
烷氨基”是甲基氨基、乙基氨基、异丙基氨基、叔丁基氨基等。
[0055]
术语“c
3-c
12
环烷氨基”表示单独或者以组合方式表示如上所定义的氨基基团，其中氨基基团的氢原子被至少一个c
3-c
12
环烷基所取代，“c
3-c
12
环烷基”表示如以上所定义。
[0056]
术语“异构体”包含所有的同分异构形式包括对映异构体、非对映异构体、互变异构体和几何异构体(包括顺反异构体)。因此，本发明中所设计的化合物的单个立体化学异构体或其对映异构体、非对映异构体、互变异构体或几何异构体(或顺反异构体)的混合物都属于本发明的范围。
[0057]
术语“药学上可接受的盐”表示本发明的化合物以它们的药用盐的形式存在，包括酸加成盐和碱加成盐。药学上可接受的盐在s.m.berge在j.pharmaceutical sciences(66
卷:1-19 页,1977年)中描述的pharmaceutically salts中有所描述。在本发明中，药学上可接受的无毒的酸加成盐表示本发明中的化合物与有机或无机酸形成的盐。药学上可接受的无毒的碱加成盐表示本发明中的化合物与有机或无机碱所形成的盐。
[0058]
术语“溶剂化物”表示一个或多个溶剂分子与本发明中的化合物所形成的缔合物。形成溶剂化物的溶剂包括但不限于水、甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、n,n-二甲基甲酰胺、二甲亚砜等。“药学上可接受的盐”可通过一般的化学方法合成。
[0059]
术语“酯”用于表示有机酯，例如包括单酯、二酯、三酯、和更通常地多酯。
[0060]
术语“前药”表示作为本发明的化合物的化学衍生物，该衍生物在体内通过发生化学反应转换成通式i所表示的化合物。
[0061]
术语“同位素衍生物”表示通式(i)中的氢原子被1-6个氘原子(d)所取代得到的同位素衍生物、通式(i)中的碳原子被1-3个碳14原子(
14
c)所取代得到的同位素衍生物。
[0062]
词语“包括(comprise)”或“包含(comprise)”及其英文变体例如comprises或comprising 应理解为开放的、非排他性的意义，即“包括但不限于”。
[0063]
以上对本发明的涉及的术语进行了定义，本领域技术人员还可以结合现有技术对以上术语进行理解，以下基于本发明的内容以及对术语的定义进一步进行描述。
[0064]
在一项优选的实施方案中，所述式(ⅰ)化合物具有式(
ⅰ-
1)所示的结构：
[0065][0066]
x选自化学键、-nh-、-conh-；
[0067]
选自c
6-c
10
芳基、5-10元杂芳基、c
4-c
12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-c
14
桥环基或者螺环基、c
6-c
14
桥杂环基或者螺杂环基；其中所述5-10元杂芳基、3-12元杂环基、c
6-c
14
桥杂环基或者螺杂环基含有1-3个任选自n、nh、o、s、c(o)、s(o)的杂原子或基团；
[0068]
每一个r3各自相同或不同，各自独立地选自h、d、卤素原子、-cn、-cooh、-cho、
ꢀ-
oh、-no2、氨基酰基、取代或未取代的下列基团：c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烷氨基、-c
1-c
10
烷基酰胺、c
1-c
10
烷氧基、-nh2、c
3-c
12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-c
10
芳基或5-10元杂芳基，所述取代是被选自c
1-c
10
烷基、c
3-c
12
环烷基、3-12元杂环基、卤素原子、-nh2、-cn、-cooh、
ꢀ-
conh2、-cho、-oh、-no2、羟基-c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烷氧基、c
1-c
10
烷氨基、5-10元杂芳基、c
6-c
10
芳基或3-12元杂环基中的一个或多个取代基所取代；或任意相邻的两个r5形成3-6元饱和或者不饱和的环，任选的，所述3-6元饱和或者不饱和的环被选自由-oh、-nh2、
ꢀ-
cn、卤素原子、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烷氧基、c
3-c
12
环烷氨基、c
1-c
10
烷基氨基、c
3-c
12
环烷基、卤代c
1-c
10
烷基氨基、c
6-c
10
芳基和5-10元杂芳基组成的组中的1-3个所取代；
[0069]
m为0、1、2、3或4；
[0070]
在一项更优选的实施方案中，式(
ⅰ-
1)所示结构中，四氢呋喃环上取代的甲基和氨
基处于四氢呋喃环的同一侧。
[0071]
在一项优选的实施方案中，一种式(ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
[0072]
选自苯基、萘基、5-10元杂芳基或3-12元杂环基；
[0073]
其中所述5-10元杂芳基、3-12元杂环基含有1-3个任选自n、nh、o、s、c(o)杂原子或基团，
[0074]
优选的，所述5-10元杂芳环选自噻吩基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡咯基、吡唑基、噻唑基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、咪唑基、四氮唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、噻二唑基、噁二唑基、苯并噻吩基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、吲唑基、吲哚[1,2-a]吡嗪基、4,7-二氮杂吲哚、吡唑并嘧啶基、咪唑并嘧啶基、噁唑并嘧啶基、异噁唑并嘧啶基、咪唑并吡嗪基、吡唑并吡嗪、吡咯并吡嗪基、呋喃并吡嗪基、噻吩并吡嗪基、吡啶并嘧啶酮基、苯并噁唑基、苯并噻唑基中的任一种；所述3-12元杂环基选自氮丙啶基、氮杂环丁基、氧杂环丁基、吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、硫代吗啉基、四氢吡喃基、1,1-二氧硫代吗啉基、丁内酰胺基、戊内酰胺基、己内酰胺基、丁内酯基基、戊内酯基、己内酯基、丁二酰亚胺或中的任一种；更优选的，所述3-12元杂环基选自丁内酰胺基、吡咯烷基、丁二酰亚胺基或中的任一种；
[0075]
每一个r3各自相同或不同，各自独立地选自h、d、卤素原子、-cn、-cooh、-cho、
ꢀ-
oh、-no2、氨基酰基、取代或未取代的下列基团：c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烷基氨基、-c
1-c6烷基conh2、c
1-c
10
烷氧基、-nh2，所述取代是被选自c
1-c
10
烷基、卤素原子、-nh2、-cn、
ꢀ-
oh、-no2中的一个或多个取代基所取代；或任意相邻的两个r5形成3-6元饱和或者不饱和的环，任选的，所述3-6元饱和或者不饱和的环被1-3个-oh、-nh2、-cn、卤素原子、 c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烷氧基所取代。
[0076]
在一项更优选的实施方案中，所述式(ⅰ)化合物选自表1所示化合物。
[0077]
表1：
[0078]
[0079]
[0080]
[0081]
[0082][0083]
本发明还提供了一种药物组合物，其包含上述任一所述的一种式(ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物。
[0084]
在本发明的一些实施方案中，上述药物组合物还包含药学上可接受的载体。
[0085]
在一项更优选的实施方案中，上述药物组合物还包括：
[0086]-药学上可接受的载体；
[0087]-辅剂；和/或
[0088]-赋形剂。
[0089]
本发明还提供了一种制备上述药物组合物的方法，其包括将包含上述任一所述的一种式(ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物与药学上可接受的载体、辅剂(如稀释剂)和/或赋形剂相混合。
[0090]
本发明还提供了一种药物制剂，其包括上述任一所述的一种式(ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物或者药物组合物，所述制剂可以是适用于口服的形式，例如片剂、糖锭剂、锭剂、水或油混悬液、可分散粉末或颗粒、若叶、硬或软胶囊或糖浆剂。可按照本领域任何已知制备药用组合物的方法制备口服组合物，此类组合物可含有一种或多种选自以下的成分：甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂，以提供悦目和可口的药物制剂。片剂含有活性成分和用于混合的适宜制备片剂的无毒的可药用赋形剂。这些赋形剂可以是惰性赋形剂，造粒剂和崩解剂、以及润滑剂。这些片剂可以不包衣或可通过掩盖药物的味道或在胃肠道中延迟崩解和吸收，因而在较长时间内提供缓释作用的已知技术将其包衣。例如，可使用水溶性味道掩蔽物质。
[0091]
也可以用其中活性成分与惰性固体稀释剂，或其中活性成分与水溶性载体混合的软明胶胶囊提供口服制剂。
[0092]
水悬浮液含有活性物质和用于混合的适宜制备水悬浮液的赋形剂。此类赋形剂是悬浮剂；分散剂或湿润剂可以是天然产生的磷脂。水混悬液也可以含有一种或多重防腐剂、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂和一种或多种甜味剂。
[0093]
油混悬液可通过使活性成分悬浮于植物油或矿物油中配置而成。油混悬液可含有增稠剂，可加入上述的甜味剂和矫味剂，以提供可口的制剂，可通过加入抗氧剂保存这些组
合物。
[0094]
通过加入水可使适用于制备水混悬液的可分散粉末和颗粒提供活性成分和用于混合的分散剂或湿润剂、悬浮剂或一种或多种防腐剂、适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂可说明上述的例子。也可介入其它赋形剂例如甜味剂、矫味剂和着色剂，通过加入抗氧剂例如抗坏血酸保存这些组合物。
[0095]
本发明的药物组合物也可以是水包油乳剂的形式。油相可以是植物油或矿物油或其混合物。适宜的乳化剂可以是天然产生的磷脂。可用的甜味剂。此类制剂也可含有缓和剂、防腐剂、着色剂和抗氧剂。
[0096]
本发明的药物制剂可以是无菌注射水溶液形式，也可以使用的可接受的溶媒或者溶剂有水、格力氏液和等渗氯化钠溶液。无菌注射制剂可以是其中活性成分溶于油相的无菌注射水包油微乳，可通过局部大量注射，将注射液或微乳注入患者的血流中。或者，最好按可保持本发明化合物恒定循环浓度的方式给予溶液和微乳。为保持这种恒定浓度，可使用连续静脉内递药装置，这种装置的实例是deltec cadd-plus.tm.5400型静脉注射泵。
[0097]
本发明的药物制剂可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射水或油混悬液的形式。可按已知技术，用上述那些适宜的分散剂或润湿剂和悬浮剂配制该混悬液。无菌注射制剂也可以是在肠胃外可介绍的无毒稀释剂或制剂汇总制备的无菌注射溶液或混悬液。此外，可方便地用无菌固定油作为溶剂或悬浮介质。此外，脂肪酸也可以制备注射剂。
[0098]
可按用于直肠给药的栓剂形式给予本发明化合物。可通过将药物与在普通温度下为固体但在直肠中为液体，因为在直肠中会溶化而释放药物的适宜的无刺激性赋形剂混合来制备这些药物组合物。
[0099]
如本领域技术人员所熟知的，药物的给药剂量依赖于多种因素，包括但并非限定于以下因素：所用具体化合物的活性、或者患者的年龄、或者患者的体重、或者患者的健康状况、或者患者的饮食、给药时间、给药方式、排泄的速率、药物的组合等；另外，最佳的治疗方式如治疗的模式、通式化合物(ⅰ)的日用量或可药用的盐的种类可以根据传统的治疗方案来验证。
[0100]
本发明还提供了上述具有式(ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，或者所述的药物组合物，或者所述的药物制剂，其用作预防和治疗非受体蛋白酪氨酸磷酸酶(shp2，src homolgy-2phospahtase)介导的或依赖的疾病或病症。
[0101]
本发明还提供了上述具有式(ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，或者所述的药物组合物，或者所述的药物制剂用作预防和/或治疗非受体蛋白酪氨酸磷酸酶介导的或依赖的疾病或病症的用途。
[0102]
本发明还提供了上述具有式(ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，或者所述的药物组合物，或者所述的药物制剂在制备预防和/或治疗非受体蛋白酪氨酸磷酸酶介导的或依赖的疾病或病症的药物中的应用。
[0103]
其中，上述非受体蛋白酪氨酸磷酸酶介导的或依赖的疾病或病症选自癌症、中枢神经系统缺陷、心血管系统缺陷、血液系统缺陷、免疫或炎症疾病、易感染性疾病、代谢缺陷、神经缺陷、精神缺陷和升值缺陷。其中所述癌症可以为乳腺癌、子宫内膜癌、头颈癌、皮肤癌、肺癌、肝癌、白血病、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌、胆管癌、食管癌、胰腺癌、结直肠癌、脑
胶质瘤、平滑肌瘤输卵管肿瘤、肾癌、骨髓瘤、骨癌、甲状腺癌。所述中枢神经系统缺陷可以是酒精中毒或偏头疼；所述心血管系统缺陷可以为主动脉瘤、易感性心肌梗死、主动脉瓣硬化、心血管疾病、冠状动脉疾病、高血压；所述血液系统缺陷可以为深静脉血栓形成；所述免疫及炎症疾病可以为关节炎、多发性硬化症、肝硬化；所述易感染性疾病可以为乙型肝炎、慢性肝炎、骨质减少、骨质疏松症；所述神经缺陷可以为阿尔茨海默症、帕金森病、偏头疼、眩晕；所述精神缺陷可以为神经性厌食、注意力缺陷伴多动障碍、痴呆、严重抑郁障碍、精神病；所述生殖缺陷可以为月经初潮年龄、子宫内膜异位症、不育症等。
[0104]
本发明还提供了一种预防和/或治疗非受体蛋白酪氨酸磷酸酶介导的或依赖的疾病或病症的方法，其包括下列步骤：将治疗有效量的上述具有式(ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，或者所述的药物组合物，或者所述的药物制剂施用于对其有需求的患者。
[0105]
术语“治疗有效量”是指能够诱发细胞、组织、器官或生物体(例如患者)产生生物或医学反应的药物活性成分的剂量。
[0106]
术语“施用”是指将药物活性成分(比如本发明的化合物)或包含药物活性成分的药物组合物(例如本发明的药物组合物)应用于患者或其细胞、组织、器官、生物流体等部位，以便使药物活性成分或药物组合物与患者或其细胞、组织、器官、生物流体等部位接触的过程。常见的施用方式包括(但不限于)口服施用、皮下施用、肌内施用、腹膜下施用、眼部施用、鼻部施用、舌下施用、直肠施用、阴道施用等。
[0107]
术语“对其有需求”是指医生或其他护理人员对患者需要或者将要从预防和/或治疗过程中获益的判断，该判断的得出基于医生或其他护理人员在其专长领域中的各种因素。
[0108]
术语“患者”(或称受试者)是指人类或非人类的动物(例如哺乳动物)。
[0109]
本发明还提供了一种药物联合形式，其包含上述具有式(ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，或者所述的药物组合物，或者所述的药物制剂以及至少一种额外的预防和/或治疗非受体蛋白酪氨酸磷酸酶介导的或依赖的疾病或病症的治疗剂。
[0110]
本发明的上述具有式(ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，或者所述的药物组合物，或者所述的药物制剂可与包括但不限于下述化合物或者抗体进行联合用药或者与抗体药物进行抗体偶联药物。
[0111]
本发明还提供了一种式(ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物的制备方法，以下通过描述了式i所示化合物的几种典型的合成路线，以进一步描述本发明的技术方案，具体说明如下：
[0112]
(1)化合物i-a和化合物i-b在碱的作用下反应得到化合物i-c，其中i-b中a为卤素原子，优选为氯、溴或碘，x为化学键；
[0113]
(2)化合物i-c经脱保护得到化合物i-d；
[0114]
(3)化合物i-d和化合物i-e反应得到化合物i-f，其中化合物i-e中的b为卤素原子，优选为氯、溴或碘；
[0115]
(4)化合物i-f和i-g在碱的作用下反应得到化合物(i)。
[0116]
合成路线如下：
[0117][0118]
在一项优选的实施方案中，步骤(1)中，反应的催化剂为碘化亚铜和碱，碱优选为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钾、碳酸钠、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾或叔丁醇锂。
[0119]
在一项优选的实施方案中，步骤(2)中，脱保护反应的催化剂为质子酸或路易斯酸，优选为三氯化铝。
[0120]
在一项优选的实施方案中，步骤(3)中，反应的催化剂为有机碱或无机碱催化剂，其中无机碱优选为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钾、碳酸钠，有机碱优选为三乙胺、二乙胺、二异丙胺或n,n-二异丙基乙胺。
[0121]
在一项优选的实施方案中，步骤(4)中，反应的催化剂为有机碱或无机碱催化剂，其中无机碱优选为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钾、碳酸钠，有机碱优选为三乙胺、二乙胺、二异丙胺或n,n-二异丙基乙胺。
[0122]
本发明还提供了另一种制备化合物i-c的方法，用化合物i-aa和化合物i-b反应得到化 合物i-c，反应催化剂为偶联反应催化剂，优选为四(三苯基磷)钯。合成路线如下：
[0123]
本发明还提供给了另一种合成化合物(i)的方法，包括
[0124]
(1)化合物i-h和化合物i-i反应得到化合物i-j，化合物i-i中的a为卤素原子，优选为氯、溴或碘；
[0125]
(2)化合物i-j和化合物i-k反应得到化合物i-l，化合物i-l中的x为-conh-；
[0126]
(3)化合物i-l和化合物i-g反应得到化合物(i)。
[0127]
在一项优选的实施方案中，步骤(1)中，反应的催化剂为有机碱或无机碱，其中无
机碱优选为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钾、碳酸钠，碳酸铯，有机碱优选为三乙胺、二乙胺、二异丙胺或n,n-二异丙基乙胺。
[0128]
在一项优选的实施方案中，步骤(2)中，反应催化剂为氯化亚砜和/或有机碱，有机碱优选为三乙胺、二乙胺、二异丙胺或n,n-二异丙基乙胺、吡啶或4-二甲氨基吡啶。
[0129]
在一项优选的实施方案中，步骤(2)中，反应催化剂为有机碱，有机碱优选为三乙胺、二乙胺、二异丙胺、n，n-二异丙基乙胺、吡啶或4-二甲氨基吡啶。
[0130]
合成路线如下：
[0131][0132]
下面的实施例可以对本发明做进一步的描述，然而，这些实施例不应作为对本发明的范围的限制。
[0133]
中间体int-1的制备
[0134][0135]
向int-1a(104g，1.0mol)的二氯甲烷(600ml)溶液中，加入咪唑(102g，1.5mol)，冰
水浴冷却下滴加叔丁基二甲基硅烷(165g，1.1mol)的二氯甲烷(200ml)溶液，室温反应16小时。将反应液用二氯甲烷稀释，水洗3次，有机相用无水硫酸钠干燥。过滤干燥剂，滤液浓缩，得到int-1b粗品(237g，产率100％)，直接用于下一步反应。1h nmr(400 mhz,cdcl3)δ4.32(q,j＝8.0hz,1h),3.71(s,3h),1.39(d,j＝8.0hz 3h),0.89(s,9h),0.09 (s,3h),0.06(s,3h)。
[0136][0137]
冰水浴下，向int-1b(120g，0.55mol)的二氯甲烷(600ml)溶液中，滴加二异丁基氢化铝(367ml，0.55mol，1.5m甲苯溶液)，反应16小时。滴加甲醇(100ml)淬灭反应，加入硅藻土搅拌均匀。过滤，滤液用二氯甲烷稀释，水洗3次，有机相用无水硫酸钠干燥。过滤干燥剂，滤液浓缩，残留物用硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10/1淋洗)得到int-1c(56 g，产率54％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ9.61(s,1h),4.08(q,j＝8.0hz,1h),1.27(d,j＝ 8.0hz 3h),0.91(s,9h),0.10(s,3h),0.09(s,3h)。
[0138][0139]
氮气保护下，将二异丙胺(23.4ml，166mmol)溶解于无水四氢呋喃(220ml)中，降温至-20℃，滴加正丁基锂(64ml，160mmol，2.5m的正己烷溶液)，反应1小时后，滴加 n-叔丁氧羰基-4-哌啶甲酸乙酯(27.5g，107mmol)的无水四氢呋喃(50ml)溶液，升温至0℃反应1小时，加入int-1c(20.5ml，102mmol)，0℃反应3小时。以5％碳酸氢钠溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取3次，无水硫酸钠干燥有机相。过滤，减压浓缩，残留物用硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)得到int-1d(32.6g，产率72％)。ms m/z[m h]

:446.7。
[0140][0141]
冰水浴下，向int-1d(31.7g，71mmol)的四氢呋喃(600ml)溶液中分批加入硼氢化锂(2.3g，107mmol)，加完后，室温反应16小时。冰水浴冷却至0℃，加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取3次，有机相用无水硫酸钠干燥。过滤干燥剂，滤液浓缩，得到int-1e粗品(30.2g，产率100％)，直接用于下一步。ms m/z[m h]

:404.5,[m-h]-:402.4。
[0142][0143]
将int-1e(59.0g，146mmol)溶解于四氢呋喃(600ml)中，加入四丁基氟化铵(35g，
[m-h]-:373.5。
[0150][0151]
将int-1i(12.0g，32.1mmol)溶解于甲醇(150ml)中，加入hcl的二氧六环溶液(15 ml，4m)，升温至40℃，搅拌反应1小时，停止反应。反应液冷却至室温，减压浓缩，得到int-1(7.85g，产率100％)。1h nmr(400mhz,dmso):δ9.25(br,2h),8.38(br,3h), 4.20-4.23(m,1h),3.81(d,j＝8.0hz,1h),3.62(d,j＝8.0hz,1h),3.46(br,1h),3.14-3.23(m, 2h),2.84-2.92(m,2h),1.69-2.01(m,4h),1.22(d,j＝8.0hz,3h)。ms m/z[m h]

:171.2。
[0152]
中间体int-2的制备
[0153][0154]
将1-溴-3-氟-2-三氟甲苯(int-1a,10.0g，41.1mmol)，碳酸铯(26.8g,82.3mmol)，叔丁基硫醇(4.4g,49.3mmol)，n,n-二甲基甲酰胺(100ml)加入反应瓶中，50℃反应过夜。反应完后加水淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相减压浓缩，重结晶得中间体int-2(10.0g，产率 77.6％)。1h nmr(400mhz,cdcl3):δ7.74(d,1h),7.67(d,1h),7.26(t,1h),1.31(s,9h).
[0155]
实施例1
[0156]
[0157][0158]
将int-2(1.5g，4.8mmol)，1-甲基-1h-吡唑-5-硼酸频哪醇酯(1.0g，4.8mmol)，磷酸钾(4.0g,19.1mmol)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(0.7g,0.9mmol)加入水(20 ml)和1,4-二氧六环(80ml)中，氮气置换，回流反应6小时。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱层析分离得到 1a(1.2g，产率79.7％)。1h nmr(400mhz,cdcl3):δ7.23(dd,1h),7.45(m,2h),7.35(d,1h), 6.29(d,1h),3.95(s,3h),1.34(s,9h).
[0159][0160]
将1a(1.0g,3.2mmol)加入25％盐酸(10ml)中，回流反应2小时。冷却至室温，用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩得到1b粗品(0.5g，产率60.8％)。1h nmr(400mhz, cdcl3)δ7.29(m,4h),6.29(d,1h),3.95(s,3h).
[0161][0162]
将1b(0.5g，1.9mmol)，2,5-二氯吡嗪(1.4g，9.6mmol)，碳酸钾(530.3mg，3.8mmol) 加入乙腈(5ml)中，升温至80℃反应过夜。冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱层析分离得到1c(300mg，产率41.8％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.35(d,1h),8.05(d,1h),7.70(m,1h),7.58(m,2h),7.39(d,1h), 6.33(d,1h),3.95(s,3h).
[0163][0164]
向反应瓶中加入1c(100.0mg，0.27mmol)，int-1(138.0mg，0.81mmol)，1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯(164.0mg，1.1mmol)，乙腈(2ml)，回流反应过夜。反应完全后，减压浓缩，粗品经制备，得到1(20.0mg，产率14.7％)。ms m/z[m h]

:505.2；1h nmr(400mhz, cdcl3):δ8.96(d,1h),8.41(d,1h),8.25(d,1h),7.73(d,1h),7.47(t,1h),7.26(d,1h),7.14(d, 1h),6.30(d,1h),4.07(t,1h),3.91(m,6h),3.69(d,1h),3.54(m,2h),2.92(d,1h),1.76(m, 1h),1.64(m,1h),1.57(m,1h),1.51(m,1h),1.08(d,3h).
[0165]
实施例2
[0166][0167][0168]
将三正丁基氢锡(2.8g，9.6mmol)溶于四氢呋喃(20ml)中，0℃滴加lda(2m,4.8 ml,9.6mmol)后反应1小时，降温至-78℃，缓慢加入2a(1.0g,8.7mmol)的四氢呋喃(5 ml)溶液，加完后继续反应4小时，加入饱和氟化钾溶液(20ml)后升至室温搅拌1小时，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱层析分离得到 2b(1.5g，产率46.5％)。1h nmr(400mhz,cdcl3):δ8.71-8.73(m,1h),8.57(d,1h),8.36-8.40 (m,1h),1.54-1.62(m,6h),1.30-1.39(m,6h),1.16-1.20(m,6h),0.90(t,9h).
[0169][0170]
将int-2(1.5g，4.8mmol)，2b(1.5g，4.0mmol)，四三苯基膦钯(0.55g,0.47mmol) 溶于二甲苯(10ml)中，氮气置换，140℃反应过夜。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱层析分离得到2c(0.9g，产率60.2％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.60(m,3h),7.87(d,1h),7.56(m,1h),7.37(m,1h),1.38(s, 9h).
[0171][0172]
将2c(0.9g,2.9mmol)加入25％盐酸(10ml)中，回流反应2小时。冷却至室温，用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩得到2d粗品(0.5g，产率67.7％)。1h nmr(400mhz, cdcl3)δ8.61(m,3h),7.50(d,1h),7.41(t,1h),7.17(d,1h).
[0173][0174]
将2d(0.5g，2.0mmol)，2,5-二氯吡嗪(0.9g，5.8mmol)，碳酸钾(0.8g，5.8mmol) 加入乙腈(10ml)中，升温至80℃反应过夜。冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱层析分离得到2e(300mg，产率41.7％)。 ms m/z[m h]

:368.9.
[0175][0176]
向反应瓶中加入2e(100.0mg，0.27mmol)，int-1(92.3mg，0.54mmol)，1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯(206.4mg，1.36mmol)，乙腈(2ml)，回流反应过夜。反应完全后，减压浓缩，粗品经制备，得到2(5.5mg，产率4.0％)。ms m/z[m h]

:503.2；1h nmr(400mhz, cdcl3)δ8.64(d,2h),8.59(d,1h),8.24(s,1h),8.18(s,1h),7.39(q,2h),7.20(d,1h),5.35(m, 1h),4.19(t,1h),3.93(m,2h),3.82(d,1h),3.69(d,1h),3.48(m,1h),3.36(m,1h),3.27(m, 1h),3.00(s,1h),2.02(m,1h),1.89(m,1h),1.77(m,2h),1.24(d,3h).
[0177]
实施例3
[0178][0179]
将int-2(2.4g，7.7mmol)，1-甲基-1h-吡唑-4-硼酸(1.0g，7.7mmol)，磷酸钾(4.0g, 19.1mmol)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(1.1g,1.5mmol)加入水(20ml)和 1,4-二氧六环(80ml)中，氮气置换，回流反应6小时。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱层析分离得到3a(1.9g，产率78.8％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.68(m,1h),7.51(s,1h),7.41(m,2h),7.31(m,1h),3.95(s,3h), 1.33(s,9h).
[0180][0181]
将3a(1.0g,3.2mmol)加入25％盐酸(10ml)中，回流反应2小时。冷却至室温，用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩得到3b粗品(0.5g，产率60.8％)。1h nmr(400mhz, cdcl3)δ7.45(s,1h),7.42(s,1h),7.20(d,2h),7.02(d,1h),3.88(s,3h).
[0182][0183]
将3b(0.5g，1.9mmol)，2,5-二氯吡嗪(1.4g，9.6mmol)，碳酸钾(530.3mg，3.8mmol) 加入乙腈(5ml)中，升温至80℃反应过夜。冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱层析分离得到3c(300mg，产率41.8％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.36(d,1h),8.09(d,1h),7.63(m,1h),7.53(m,1h),7.49(s,1h), 7.42(m,2h),3.96(s,3h).
[0184][0185]
向反应瓶中加入3c(100.0mg，0.27mmol)，int-1(138.0mg，0.81mmol)，1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯(164.0mg，1.1mmol)，乙腈(2ml)，回流反应过夜。反应完全后，减压浓缩，粗品经制备，得到3(5.0mg，产率3.7％)。ms m/z[m h]

:505.2；1h nmr(400mhz, cdcl3)δ8.22(d,1h),8.17(d,1h),7.50(s,1h),7.41(s,1h),7.26(t,1h),7.10(t,2h),4.21(q, 1h),3.97(m,1h),3.95(m,4h),3.83(d,1h),3.72(d,1h),3.53(m,1h),3.32(m,1h),3.02(d, 1h),2.01(m,1h),1.79(m,1h),1.76(m,1h),1.72(m,1h),1.26(d,3h).
[0186]
实施例4
[0187]
[0188][0189]
将int-2(1.4g，4.5mmol)，1-乙基-1h-吡唑-4-硼酸频那醇酯(1.0g，4.5mmol)，磷酸钾(2.4g,11.2mmol)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(163.5mg,0.2mmol)加入水 (20ml)和1,4-二氧六环(80ml)中，氮气置换，回流反应6小时。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱层析分离得到4a(1.2g，产率81.7％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.67(m,1h),7.52(s,1h),7.43(s,1h), 7.39(m,1h),7.32(m,1h),4.21(q,2h),1.53(t,3h),1.33(s,9h).
[0190][0191]
将4a(1.2g,3.7mmol)加入25％盐酸(10ml)中，回流反应2小时。冷却至室温，用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩得到4b粗品(0.6g，产率60.3％)。ms m/z[m h]

:273.2.
[0192][0193]
将4b(0.6g，2.2mmol)，2,5-二氯吡嗪(1.0g，6.6mmol)，碳酸钾(910.3mg，6.6mmol) 加入乙腈(5ml)中，升温至80℃反应过夜。冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱层析分离得到4c(300mg，产率35.4％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.36(d,1h),8.08(d,1h),7.63(dd,1h),7.55(s,1h),7.51(m,1h), 7.44(m,2h),4.23(q,3h),1.54(t,3h).
[0194][0195]
向反应瓶中加入4c(100.0mg，0.26mmol)，int-1(88.5mg，0.52mmol)，1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯(200.0mg，1.3mmol)，乙腈(2ml)，回流反应过夜。反应完全后，减压浓缩，粗品经制备，得到4(34.6mg，产率25.7％)。ms m/z[m h]

:519.3；1h nmr(400mhz, cdcl3):δ8.42(d,1h),8.25(d,1h),7.88(s,1h),7.49(s,1h),7.43(t,1h),7.21(d,1h),7.04(d, 1h),4.17(q,2h),4.11(t,1h),3.96(m,2h),3.74(d,1h),3.54(d,1h),3.39(m,2h),3.04(d, 1h),1.73(m,2h),1.54(m,2h),1.38(t,3h),1.11(d,3h).
[0196]
实施例5
[0197][0198][0199]
将int-2(1.3g，4.2mmol)，1-(2-羟基乙基)-1h-吡唑-4-硼酸频哪醇酯(1.0g，
4.2mmol)，磷酸钾(2.2g,10.5mmol)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(153.0mg,0.2mmol)加入水(10ml)和1,4-二氧六环(40ml)中，氮气置换，回流反应6小时。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱层析分离得到5a(1.2g，产率82.9％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm)7.69(dd,1h),7.55(s, 1h),7.48(s,1h),7.42(m,1h),7.31(m,1h),4.28(t,2h),4.05(t,2h),1.33(s,9h).
[0200][0201]
将5a(1.0g,2.9mmol)溶于25％盐酸(10ml)中，回流反应2小时。冷却至室温，用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩得到5b粗品(0.5g，产率59.7％)。1h nmr(400mhz, cdcl3)δ(ppm)7.83(d,1h),7.56(s,1h),7.51(s,1h),7.44(t,1h),7.21(d,1h),4.31(t,2h), 4.05(t,2h).
[0202][0203]
将5b(0.5g，1.7mmol)，2,5-二氯吡嗪(1.4g，9.6mmol)，碳酸钾(530.3mg，3.8mmol) 加入乙腈(5ml)中，升温至80℃反应过夜。冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱层析分离得到5c(280mg，产率40.3％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm)8.33(s,2h),7.75(d,1h),7.49(s,2h),7.37(t,1h),7.15(d, 1h),4.24(t,2h),3.96(s,2h).
[0204][0205]
向反应瓶中加入5c(100.0mg，0.25mmol)，int-1(85.0mg，0.5mmol)，1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯(266.0mg，1.7mmol)，乙腈(2ml)，回流反应过夜。反应完全后，减压浓缩，粗品经制备，得到5(5.1mg，产率3.8％)。ms m/z[m h]

:535.2；1h nmr(400mhz,cdcl3): δ(ppm)8.39(s,1h),8.22(s,1h),7.80(s,1h),7.48(s,1h),7.41(t,1h),7.19(d,1h),7.03(d, 1h),4.18(t,2h),4.09(m,1h),4.02(m,1h),3.94(m,2h),3.77(t,2h),3.72(d,2h),3.53(d, 1h),3.01(d,1h),2.02(m,1h),1.71(m,1h),1.68(m,1h),1.56(m,1h),1.12(d,
3h).
[0206]
实施例6
[0207][0208][0209]
将int-2(5.0g，15.9mmol)，联硼酸频哪醇酯(8.0g，31.9mmol)，醋酸钾(6.3g,63.9 mmol)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(1.1g,1.6mmol)加入1,4-二氧六环(100ml) 中，氮气置换，80℃反应过夜。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱层析分离得到6a(3.6g，产率62.6％)。1h nmr (400mhz,cdcl3)δ(ppm)7.72(t,1h),7.44(t,2h),1.34(s,12h),1.33(s,9h).
[0210][0211]
将6a(2.5g，6.9mmol)，2-溴嘧啶(1.0g，6.3mmol)，磷酸钾(4.0g,18.9mmol)，[1,1'
-ꢀ
双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(460.0mg,0.6mmol)加入水(10ml)和1,4-二氧六环(50ml) 中，氮气置换，回流反应过夜。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱层析分离得到6b(1.3g，产率66.2％)。ms m/z [m h]

:313.1。
[0212][0213]
将6b(1.0g,3.2mmol)加入25％盐酸(10ml)中，回流反应2小时。冷却至室温，用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩得到6c粗品(0.5g，产率60.9％)。ms m/z[m h]

:256.9。
[0214][0215]
将6c(0.5g，1.9mmol)，2,5-二氯吡嗪(1.4g，9.6mmol)，碳酸钾(560.3mg，3.8mmol) 加入乙腈(5ml)中，升温至80℃反应过夜。冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱层析分离得到6d(300mg，产率41.7％)。 ms m/z[m h]

:368.9。
[0216][0217]
向反应瓶中加入6d(100.0mg，0.27mmol)，int-1(138.0mg，0.81mmol)，1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯(164.0mg，1.1mmol)，乙腈(2ml)，回流反应过夜。反应完全后，减压浓缩，粗品经制备，得到6(40.0mg，产率29.3％)。1h nmr(400mhz,cdcl3):δ(ppm)8.82 (d,2h),8.17(d,2h),7.73(m,4h),4.23(s,1h),4.07(m,2h),3.91(s,1h),3.74(d,1h),3.23(m, 2h),3.13(s,1h),1.89(s,1h),1.75(s,3h),1.28(d,3h)；ms m/z[m h]

:503.1。
[0218]
实施例7
[0219]
[0220][0221]
将7a(500mg，1.80mmol)，噁唑(149mg，2.16mmol)，醋酸钯(40.4mg，0.18mmol)， xantphos(4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽)(208mg,0.36mmol)，叔丁醇钾(403.4 mg，3.60mmol)加入甲苯(8ml)中，氮气置换，110℃反应16小时。反应完全后，加入 50ml水，乙酸乙酯萃取三次，有机相合并，饱和氯化钠水溶液洗涤一遍，无水硫酸钠干燥，有机相浓缩后柱层析得到7b(83mg，产率：15.1％)。1h nmr(400mhz,cdcl3):δ7.85 (s,1h),7.70-7.63(m,2h),7.42-7.33(m,2h)。
[0222][0223]
向反应瓶中加入7b(250.0mg，1.08mmol)，叔丁基硫醇(300.0mg，3.27mmol)，碳酸铯(703.4mg，2.16mmol)，n,n-二甲基甲酰胺(10ml)，130℃反应16小时。反应完全后，先将反应液冷却到室温，加入50ml水，乙酸乙酯萃取三次，有机相合并，饱和氯化钠水溶液洗涤一遍，无水硫酸钠干燥，有机相浓缩后柱层析得到7c(300mg，产率：82.4％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.92-7.90(m,1h),7.82(s,1h),7.70-7.68(m,1h),7.61-7.57(m, 1h),7.31(s,1h),1.39(m,9h)。
[0224][0225]
7c(300mg，0.99mmol)加入盐酸(12m,12ml)和乙腈(4ml)中，90℃反应6小时，加水和乙酸乙酯萃取2次，饱和食盐水洗一次，硫酸钠干燥，过滤干燥剂，减压浓缩干，将得到的7d直接用于下一步反应。
[0226][0227]
将7d(211mg，1.09mmol)，2-溴-5-氯吡嗪(19mg,0.1mmol),pd2(dba)3(91.2mg， 0.09mmol)，xantphos(57mg，0.09mmol),二乙基异丙胺(39mg，0.29mmol)加入1,4
-ꢀ
二氧六环(10ml),氮气保护，100℃反应16小时。反应结束后，加入水，乙酸乙酯萃取，硫酸钠干燥，有机相浓缩后柱层析得到7e(90mg，产率：25.2％)。
[0228][0229]
向反应瓶中加入7e(90.0mg，0.25mmol)，int-1(73.0mg，0.30mmol)，磷酸钾(320.0 mg，1.51mmol)，n,n-二甲基甲酰胺(5ml)，90℃反应4小时。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取，硫酸钠干燥。有机相浓缩后柱层析得到7(36mg，产率：29.1％)。1h nmr(400 mhz,cdcl3)δ8.45(s,1h),8.34-8.32(m,2h),7.67-7.55(m,2h),7.45(s,1h),7.39-7.36(m,1h), 4.12-4.09(m,1h),3.96-3.90(m,2h),3.71-3.66(m,1h),3.53-3.51(m,2h),3.46-3.43(m,1h), 2.96-2.94(m,1h),1.82-1.49(m,4h),1.12-1.10(m,3h)；ms m/z[m h]

:492.3。
[0230]
实施例8
[0231][0232]
将int-2(108mg，0.3mmol)，1-苄基-1h-吡唑-4-硼酸频哪醇酯(34.6mg，0.3mmol)，四(三苯基膦)钯(34.6mg,0.03mmol)，碳酸钾(83mg，0.6mmol)加入1,4-二氧六环 (1.5ml)和水(1.5ml)中，氮气置换，100-105℃反应16小时。反应完全后，浓缩后柱层析得到8a(75mg，产率：64％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.67(d,j＝8.0hz,1h), 7.57(s,1h),7.42(s,1h),7.39-7.37(m,2h),7.35-7.30(m,3h),7.25-7.23(m,3h),5.36(s,2h), 1.32(s,9h)。
[0233][0234]
8a(90mg，0.23mmol)加入盐酸(12m,3ml)中，80-90℃反应2小时，tlc检测，反应结束后浓缩，加入2-溴-5-氯吡嗪(43mg,0.23mmol),pd2(dba)3(21mg，0.023mmol)， xantphos(26mg，0.046mmol),二乙基异丙胺(89mg，0.63mmol)和1,4-二氧六环(2.3 ml),氮气保护，
100℃反应16小时。反应结束后，直接浓缩后柱层析得到8c(30mg，产率：29％)。1h nmr(400mhz,cdcl3):δ8.35(m,1h),8.08(m,1h),7.62(d,j＝8.0hz,1h), 7.60(s,1h),7.49(t,j＝8.0hz,1h),7.45(s,1h),7.42(d,j＝8.0hz,1h),7.36(d,j＝8.0hz, 1h),7.34(d,j＝4.0hz,1h),7.24(m,1h),7.23(m,1h),5.36(s,2h)。
[0235][0236]
向反应瓶中加入8c(110.0mg，0.25mmol)，int-1(72.0mg，0.3mmol)，磷酸钾(159 mg，0.75mmol)，异丙醇(2.5ml)，80-85℃反应16小时。反应完全后，直接浓缩后柱层析得到8(90mg，产率：62％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.24(m,1h),8.20(m,1h),7.60 (s,1h),7.46(m,1h),7.42-7.33(m,3h),7.28-7.26(m,3h),7.16(s,1h),7.14(s,1h),5.39(s, 2h),4.24-4.21(m,1h),4.00-3.90(m,2h),3.85(d,j＝8.0hz,1h),3.73(d,j＝12.0hz,1h), 3.53-3.47(m,1h),3.43-3.36(m,1h),3.04(d,j＝4.0hz,1h),1.96-1.89(m,1h),1.81-1.71(m, 3h),1.27(d,j＝4.0hz,3h)；ms m/z[m h]

:581.6。
[0237]
实施例9
(251mg，3.34mmol)，dmf(8ml)。在130℃下反应16h。后处理，先将反应液冷却到室温，加入50ml水，乙酸乙酯萃取三次，有机相合并，饱和氯化钠水溶液洗涤一遍，无水硫酸钠干燥，过柱纯化得9c(90mg产率70.4％)。1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.26-8.25 (m,2h),7.26-7.43(m,3h),6.72-6.71(m,1h),1.23(m,9h).
[0242][0243]
将9c(90mg，0.50mmol)溶解于乙腈(2ml)中，浓盐酸(12m，6ml)，120℃反应5小时。加水和乙酸乙酯萃取2次，饱和食盐水洗一次，硫酸钠干燥，过滤干燥剂，减压浓缩干，直接用于下一步反应。
[0244][0245]
将9d-2(58.4mg，0.3mmol)，xantphos(16mg，0.02mmol)，pd2(dba)3(25mg，0. 02mmol)，diea(106.7mg，0.82mmol)，dioxane(8ml)加入上一步的瓶子中，氮气保护，100℃反应16小时。加入水，乙酸乙酯萃取，硫酸钠干燥，过滤干燥剂，减压浓缩干，柱层析纯化得9e(100mg，产率76％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.49-8.48(m, 2h),8.39-8.37(m,2h),8.12(s,1h),7.51-7.46(m,2h),6.89-6.86(m,1h).
[0246][0247]
向100ml单口瓶中加入化合物9e(80mg，0.20mmol)，再加入int-1(61mg，0.25mmol)， dmf(5ml)，再加入磷酸钾(256mg，1.25mmol)，加热至110℃,反应2小时。加入水，乙酸乙酯萃取，硫酸钠干燥，过滤干燥剂，减压浓缩干，柱层析纯化得9(4mg，收率 44％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.39-8.38(m,2h),8.31(s,1h),8.25(s,1h),7.54-7.52(m, 1h),7.45-7.42(m,1h),7.04-7.02(m,1h),6.85-6.83(m,1h),4.33-4.27(m,1h),4.21-4.12(m, 2h),3.96-3.93(m,1h),3.81-3.79(m,1h),3.45-3.30(m,2h),3.16-3.14(m,2h),1.92-1.69(m, 4h),1.29-1.27(m,3h)；ms m/z[m h]

:518.2。
[0248]
实施例10
[0249][0250]
将int-2(5.0g，15.9mmol)，联硼酸频哪醇酯(8.0g，31.9mmol)，醋酸钾(6.3g,63.9 mmol)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(1.1g,1.6mmol)加入1,4-二氧六环(100ml) 中，氮气置换，80℃反应过夜。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱层析分离得到10a(3.6g，产率62.6％)。1h nmr (400mhz,cdcl3)δ7.72(t,1h),7.44(t,2h),1.34(s,12h),1.33(s,9h).
[0251][0252]
将10a(2.0g，5.5mmol)，5-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶(1.0g，5.1mmol)，磷酸钾(3.5g,16.7 mmol)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(400.0mg,0.5mmol)加入水(10ml)和 1,4-二氧六环(50ml)中，氮气置换，回流反应过夜。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱层析分离得到10b(1.4g，产率71.7％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.69(dd,1h),8.17(d,1h),7.85(d,1h),7.56(t,1h), 7.45(d,1h),6.83(d,1h),6.73(dd,1h),1.38(s,9h).
[0253][0254]
将10b(1.4g,3.9mmol)加入25％盐酸(10ml)中，回流反应2小时。冷却至室温，用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩得到10c粗品(0.8g，产率68.0％)。1h nmr(400mhz, cdcl3)δ8.85(s,1h),8.16(s,1h),7.38(d,2h),7.16(s,1h),6.83(s,1h),6.70(s,1h).
[0255][0256]
将10c(0.8g，2.7mmol)，2,5-二氯吡嗪(1.2g，8.1mmol)，碳酸钾(1.1g，8.1mmol) 加入乙腈(10ml)中，升温至80℃反应过夜。冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱层析分离得到10d(300mg，产率 27.1％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.65(dd,1h),8.30(d,1h),8.11(m,2h),7.74(d,1h), 7.59(t,1h),7.51(d,1h),6.81(d,1h),6.68(dd,1h).
[0257][0258]
向反应瓶中加入10d(100.0mg，0.24mmol)，int-1(83.5mg，0.5mmol)，1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯(186.8mg，1.23mmol)，乙腈(2ml)，回流反应过夜。反应完全后，减压浓缩，粗品经制备，得到10(10.0mg，产率7.5％)。ms m/z[m h]

:542.2；1h nmr(400mhz, cdcl3)δ(ppm)8.96(d,1h),8.29(s,1h),8.24(s,1h),8.22(d,1h),7.53(t,1h),7.36(m,2h), 7.04(d,1h),6.71(d,1h),4.30(m,1h),4.23(d,1h),3.97(d,1h),3.85(d,1h),3.61(d,1h), 3.55(t,1h),3.35(m,1h),3.23(m,1h),2.05(m,1h),1.86(m,1h),1.81(m,1h),1.73(m,1h), 1.30(d,3h).
[0259]
实施例11
[0260]
[0261][0262]
向100ml单口瓶中依次加入2-氨基吡啶(500mg，5.31mmol)，甲烷三羧酸三乙酯 (2.5g，11.68mmol)和二甲苯(500mg，0.18mmol)，在140℃下3h。后处理，分别用乙醚、乙酸乙酯、甲醇打浆，得11a(1g，收率74％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.93-8.91 (m,1h),8.20-8.15(m,1h),7.70-7.37(m,2h),4.16-4.11(m,2h),1.24-1.20(m,3h).
[0263][0264]
将11b(3.0g，16.75mmol)加入n-n二甲基甲酰胺(30ml)中，然后加入叔丁基硫醇(3.0g，33.50mmol)，碳酸铯(10.9g，33.50mmol)，氮气保护下，升温至130℃反应24 小时。冷却到室温，加入水，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗2次，无水硫酸钠干燥，过滤干燥剂，减压浓缩，过柱得到粗品11c(4.2g，收率100％)。1h nmr(400mhz,dmso) δ7.24(d,j＝8.0hz,1h),6.93-6.88(m,2h).
[0265][0266]
将11c(4.2g，16.75mmol)分散在浓盐酸(30ml)中，氮气保护，升温至85℃搅拌反应 1.5小时，冷却到室温，继续搅拌1.5小时。过滤，滤饼用正己烷洗涤2次，得到粗品11d(1.6 g，收率50％)，直接用于下一步反应。
[0267][0268]
将11d(1.3g，6.67mmol)溶解在二氧六环(15ml)中，然后加入n-二异丙基乙胺(1.4g， 11.1mmol)，三[二亚苄基丙酮]二钯(512mg，0.56mmol)，4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(642mg，1.11mmol)，氮气保护下，升温至100℃反应16小时。冷却至室温，减压浓缩，柱纯化得11e(1.1g，收率54％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.39(s,1h),7.98(s,1h), 7.34-7.30(m,1h),7.08(d,j＝8.0hz,1h),6.86(d,j＝8.0hz,1h).
[0269][0270]
向氯苯(5ml)中加入11e(210mg，0.69mmol)，11a(150mg，0.63mmol)，氮气置换，升温135℃搅拌24小时。加石油醚析出固体，过滤得到固体11f(240mg，收率76％)，直接用于下一步反应。
[0271][0272]
向二甲基亚砜(13ml)中加入11f(240mg，0.49mmol)，int-1(132mg，0.54mmol)，磷酸钾(612mg，2.89mmol)，氮气置换，升温85℃搅拌16小时。加水析出固体，过滤得到固体，经硅胶柱层析得目标产物11(110mg，收率36％)。ms m/z[m h]

628.1；1h nmr (400mhz,dmso)δ12.61(s,1h),8.87(d,j＝4.0hz,1h),8.47(s,1h),8.27(s,1h),7.95(s, 1h),7.89(d,j＝8.0hz,2h),7.45(t,j＝8.0hz,2h),7.33(d,j＝8.0hz,2h),7.7.17(s,1h), 6.85(d,j＝8.0hz,2h),4.15-4.02(m,3h),3.80(d,j＝4.0hz,1h),3.61(d,j＝8.0hz,1h), 3.36-3.30(m,2h),3.18(s,1h),1.78-1.55(m,4h),1.26(s,2h),1.17(d,j＝8.0hz,3h).
[0273]
实施例12
[0274][0275]
50ml单口瓶中加入嘧啶-2-羧酸(400mg，3.2mmol)和二氯亚砜(2ml)。在80℃下反应3小时。后处理，减压浓缩得12a，直接用于下一步。
[0276][0277]
将11e(100mg，0.37mmol)溶解于无水四氢呋喃(5ml)中，将12a的四氢呋喃滴加入反应液中，室温过夜反应。减压浓缩，过柱得12b(90mg，收率60％)。1h nmr(400mhz,cdcl3) δ10.80(s,1h),8.98(d,j＝4.8hz,2h),8.67(d,j＝8.4hz,1h),8.33(d,j＝1.2hz,1h),8.11(d, j＝1.2hz,1h),7.64(t,j＝8.0hz,1h),7.59
–
7.47(m,2h).
[0278][0279]
100ml单口瓶中加入化合物12b(90mg，0.22mmol)，再加入int-1(41mg，0.24mmol)， n,n-二甲基甲酰胺(3ml)，再加入磷酸钾(280mg，1.32mmol)，加热至80℃,反应3 小时。反应
(m,4h).
[0286][0287]
向二甲基亚砜(5ml)中加入13c(200mg，0.40mmol)，int-1(147mg，0.60mmol)，磷酸钾(509mg，2.40mmol)，氮气置换，升温85℃搅拌16小时。加水析出固体，过滤得到固体，过柱得到目标产物13(140mg，收率55％)。ms m/z[m h]

:632.2；1h nmr(400mhz, dmso)δ8.49(s,1h),8.29(s,1h),7.68(m,1h),7.49(m,1h),6.93(m,1h),4.17-4.05(m,3h), 3.83-3.78(m,3h),3.60(d,j＝8.0hz,1h),3.14(s,1h),2.84(s,2h),1.91-1.57(m,9h),1.26(s, 3h),1.16(d,j＝8.0hz,3h).
[0288]
实施例14
[0289][0290]
14a-1(290mg,1.0mmol),14a-2(220mg,1.0mmol),pd(pph3)4(115mg,0.1mmol), k2co3(238mg,2.0mmol)加入至dmf(1ml),100-105℃下搅拌16小时。反应液倒入乙酸乙酯(100ml)。10％食盐水(50ml)洗三次。有机相浓缩后柱层析得到14b(190mg，产率：81.8％)。
ms m/z[m h]

:259.3；1h nmr(400mhz,dmso)δ7.55(s,1h),7.46(s,1h), 7.45-7.44(m,1h),7.16-7.14(m,1h),7.12-7.09(m,1h),4.22(q,j＝8.0hz,1h),1.53(t,j＝8.0 hz,1h)。
[0291][0292]
14b(190mg,0.74mmol),14b-2(480mg,2.2mmol),碳酸铯(715mg,2.2mmol),加入n,n-二甲基甲酰胺(2ml),130℃条件下搅拌16小时。反应液倒入乙酸乙酯(100ml)。 10％食盐水(50ml)洗三次。有机相浓缩后柱层析得到14c(70mg，产率：33.8％)。1h nmr(400mhz,dmso)δ7.51(s,1h),7.43(s,1h),7.26-7.25(m,2h),7.11-7.10(m,1h), 7.12-7.09(m,1h),4.21(q,j＝8.0hz,1h),1.52(t,j＝8.0hz,1h)。
[0293][0294]
14c(70mg,0.25mmol),14c-2(52mg,0.28mmol),pd(dba)3(11mg,0.01mmol), xantphos(15mg,0.02mmol),二乙基异丙胺(96mg,0.75mmol)加入1，4-二氧六环(5ml), 氮气保护，100-105℃条件下搅拌16小时。反应液浓缩后柱层析得到14d(50mg，产率： 52％)。ms m/z[m h]

:385.0；1h nmr(400mhz,dmso)δ8.36(s,1h),8.08(s,1h),7.63(d, j＝8.0hz,1h),7.55(s,1h),7.51(t,j＝8.0hz,1h),7.47(s,1h),7.44(d,j＝8.0hz,1h)。
[0295][0296]
将14d(50mg,0.13mmol),int-1(38mg,0.16mmol),磷酸钾(82mg,0.39mmol)，加入二甲亚砜(5ml),80-90℃条件下搅拌5小时。反应液倒入乙酸乙酯(100ml)。10％食盐水(50ml)洗三次。有机相浓缩后柱层析得到14(60mg，产率：88.9％),纯度99.1a％ (254nm)。1h nmr(400mhz,dmso)δ8.23(m,1h),8.19(m,1h),7.53(s,1h),7.44(s,1h), 7.29-7.25(m,1h),7.15-7.09(s,1h),4.25-4.20(m,3h),3.95-3.92(m,1h),3.84(d,j＝8.0 hz,1h),3.72(d,j＝12.0hz,1h),3.49-3.47(m,1h),3.39-3.34(m,1h),3.03(d,j＝8.0hz,1h), 1.93-1.88(m,1h),1.79-1.74(m,3h),1.54(t,j＝8.0hz,3h),1.26(d,j＝4.0hz,3h)。ms m/z [m h]

:519.2。
[0297]
实施例15
[0298][0299]
将15a(92.4mg，0.4mmol)，4-溴-1-(四氢-2h-吡喃-4-基)-1h-吡唑(111.0mg，0.4mmol)，碳酸钠(85.0mg,0.8mmol)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(29mg,0.04mmol)加入水(1ml)和n,n-二甲基甲酰胺(1ml)中，氮气置换，100-105℃反应16小时。反应完全后，反应液倒入乙酸乙酯(100ml)，10％食盐水(50ml)洗三次。有机相浓缩后柱层析得到15b(70mg，产率：45％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.74-7.63(m,1h),7.54-7.52 (m,1h),7.47-7.44(m,1h),7.40-7.32(m,1h),7.24(m,1h),4.41-4.35(m,1h),4.13-4.10(m, 2h),3.60-3.51(m,2h),2.24-2.20(m,4h),1.33(s,9h)。ms m/z[m h]

:385.3
7.2,75mm nacl,75mm kcl,1mm edta,0.05％p-20,5mm dtt。
[0309]
采用如下实验监测了本发明的化合物(浓度为0.0003-100μm不等)对shp2的抑制：
[0310]
其中，将0.5nm shp2与0.5μm肽irs1_py1172(dpeg8)py1222(序列：h2n-ln(py) idldlv(dpeg8)lst(py)asinfqk-酰胺)(seq id no:1)(wo2016/203406a1)一起温育。于25℃温育30-60分钟后，将替代底物difmup(invitrogen,cat#d6567)加入反应物中，于25℃温育30分钟。然后通过添加5μl的160μm bpv(phen)溶液(enzo life sciences cat#alx-270-204)，将反应物小心稀释。采用微量板读数器(varioskan lux,thermo)，采用分别是340nm和450nm的激发波长和发射波长，监测了荧光信号。采用基于对照的标准化进行了标准化的ic
50
回归曲线，分析了抑制剂剂量响应曲线。本发明的实施例所列化合物的ic
50
列于表2中。
[0311]
表2化合物抑制shp2的ic
50
值
[0312]
[0313]
[0314]
[0315][0316]
q注；a≤10nm；10nm＜b≤50nm。