开心散生药材口服散剂的灭菌方法与流程

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1.本发明涉及一种中药材以及中药制剂的灭菌方法，特别涉及一种开心散生药材口服散剂的灭菌方法。


背景技术：

2.经典名方开心散，是中药传统剂型中的“服散”，即《中国药典》中的口服散剂。市场上常用口服散剂通常是中药材提取浓缩干燥后的干粉，而开心散是中药原生药细粉。作为古代“服散”，开心散一般随用随制，其自身含有的微生物菌群，通常不会对人体产生危害；作为产业化批量生产的中药原生药细粉类口服散剂，在长期(6-12个月)的储存过程中，会存在微生物千万数量级的增加的风险。
3.在此情况下，部分中药药材和制剂需要通过灭菌来保证其储存的安全性。
4.目前的中药灭菌方法主要有干热灭菌法、辐射灭菌法、气体灭菌法、微波干燥灭菌法、湿热灭菌法。由于中药材具有品种繁多、性质复杂、微生物含量差异大等特点，在选择灭菌方式时，要根据不同灭菌方式的优缺点进行灵活选择，综合利用。
5.本发明在研究中发现，开心散是由人参、茯苓、石菖蒲和远志四味药组成，其主要成分包含人参中的人参皂苷和多糖类；茯苓所含的茯苓多糖和茯苓酸等；石菖蒲中所含的挥发油成分以及远志所含的远志皂苷和寡糖类等，包含了易水解成分和易挥发成分，需根据开心散中这些药材的特性，进行灭菌方法的筛选，以获得最佳效果。


技术实现要素：

6.本发明人在进行经典名方开心散开发的过程中，对开心散口服散剂的灭菌方法进行考察，研究结果发现，采用过饱和蒸汽灭菌法，从药材开始到制剂成型后分别进行灭菌，可以完全灭菌，并最大程度保留有效成分。
7.为此，本发明提供一种开心散的制备方法，所述方法，包括以下步骤：
8.步骤1，
9.人参、茯苓、石菖蒲和远志四味饮片，分别按配方称重，各自或混合后置于蒸煮袋中，置于高温高压调理灭菌机中，温度控制在110-130℃，持续50-70秒；步骤2，
10.步骤1得到的人参、茯苓、石菖蒲和远志四味饮片，混合后置于捣药罐中捣碎，过六号筛，粒径控制在100目以上，混合均匀即得开心散。
11.优选的，本发明开心散的制备方法，所述方法，包括以下步骤：
12.步骤1，
13.人参、茯苓、石菖蒲和远志四味药材，分别按配方称重，各自或混合后置于蒸煮袋中，置于高温高压调理灭菌机中，温度控制在110-130℃，持续60秒；
14.步骤2，
15.步骤1得到的人参、茯苓、石菖蒲和远志四味饮片，各自或混合后置于多功能粉碎机中粉碎成细粉，过六号筛，粒径控制在100目以上，混合均匀即得开心散。
16.其中，所述开心散，配方为：
17.人参、远志、茯苓、石菖蒲四味生药材重量比为1:1:2:1。
18.其中，所述的高温高压调理灭菌机，压力设置在1-6个大气压，转速为每分钟1-35转。
19.其中，所述的高温高压调理灭菌机，通入高温饱和蒸汽。
20.经过本发明方法得到的开心散，可以完全灭菌，并最大程度保留有效成分。此方法较常用的干热灭菌法、辐射灭菌法、气体灭菌法、微波干燥灭菌法和湿热灭菌法等灭菌方法，—种或多种方法组合的灭菌方法，在中药原生药上灭菌有绝对的优势，如灭菌效果佳、用时短、操作简单易行，对有效成分影响小，适合产业化生产等特点。
21.采用本发明的方法供试品可以均匀而迅速的升温至灭菌温度，而达到快速灭菌(60s)的目的，可以最大程度保留供试品饮片的生药特性；由于蒸煮袋的物理隔离，供试品不直接接触蒸汽，供试品的含水量影响很小，粉末供试品不会因为吸潮而粘连结块，不必进行二次干燥粉碎操作。
22.本发明方法，是经过筛选获得的，筛选过程如下：
23.1.1干热灭菌法
24.干热灭菌法可利用干热空气作为导热介质作用于中药生药粉，通过破坏微生物dna来杀灭微生物，达到灭菌目的。由于导热介质是空气，能避免湿热灭菌导致的中药生药粉灭菌吸潮板结、干燥粉碎2次污染等问题，适用于耐高温极易吸潮的中药生药粉。然而空气的比热容较低，穿透力弱，加上粉体间隙小，可能导致灭菌效果不理想。干热灭菌法温度高、时间长、浮尘大、易污染，容易使活性成分损失率达25％～40％。因此，含有挥发油、生物碱类、醌类、黄酮类等不同类型的热敏性成分和对外观色泽要求高的中药生药粉不适用干热灭菌法得药粉颜色变深，外观性状改变，中药生药粉挥发[1]。
[0025]
开心散中石菖蒲含有大量挥发油，是开心散的主要活性成分之一，为了保证活性成分不大量损失，因此不选用此方法。
[0026]
1.2辐射灭菌法
[0027]
辐射灭菌法利用辐照破坏微生物dna来杀灭微生物，以达到灭菌目的。本法最常用的为60co-γ射线辐射灭菌[2]，辐射灭菌剂量一般是
[0028]
25000gy(1gy＝1j/kg)。
[0029]
辐射灭菌的特点是不升高产品的温度，穿透力强，被照射物品只要按世界卫生组织制定的标准，控制一定辐射量，就能达到杀灭所有微生物。
[0030]
由于此方法费用高，设备操作危险系数大，不易获取，可能诱发各种癌变，对人体危害大，不适用于常规产业化灭菌，因此不选用此方法。
[0031]
1.3气体灭菌法
[0032]
气体灭菌法指用化学消毒剂形成的气体或者蒸汽杀灭微生物的方法。亦称冷菌法，常用的化学消毒剂为环氧乙烷、气态过氧化氢、甲醛臭氧(o3)、丙二醇、8-丙内酯等。
[0033]
具有在室温下进行，不加热灭菌物品，穿透力强，灭菌作用快等优点。由于常用化学消毒剂存在可燃可爆性、致畸性和残留毒性，不适于口服散剂的灭菌，因此不选用此方法。
[0034]
1.4微波干燥灭菌法
[0035]
微波干燥灭菌法基于原生药粉在高频率电磁场中被加热的原理，微波与药材摩擦产生高热，使蛋白质、核糖核酸和酶失活而达到灭菌的目的。通常微波是指频率在3.0
×
102～3.0
×
105mhz之间的电磁波。经微波处理后的原生药粉，其有效成分基本上没有被破坏，一般灭菌时间为3～6min。微波灭菌对药效的影响较小，但对物料的厚度、含水量及有效成分热稳定性有一定要求，当含湿率和灭菌时间在一定范围内，含湿率越高，微波灭菌时间越长，杀菌效果越好。其缺点是不适用于含水量低的药粉[3]。
[0036]
由于中国药典四部中规定散剂的水分含量不得过9.0％，水分含量较低，因此不选用此方法。
[0037]
1.5湿热灭菌法
[0038]
湿热灭菌法是将物品置于灭菌柜内利用高压饱和蒸汽、过热水喷淋等手段从而将微生物菌体中的蛋白质、核酸发生变性杀灭微生物而达到灭菌的目的[4]。湿热灭菌法灭菌能力强、简便易行，目前企业普遍使用湿热灭菌法。但灭菌时需要经高温、高压作用，且灭菌时间长，易导致中药药性的转变，将生药粉转化为熟药粉，不符合中药生熟异用的用药原则。湿热灭菌条件通常采用121℃
×
15min、121℃
×
30min或116℃
×
40min的程序，但开心散中有效成分以水溶性为主，易水解，在现行条件下，不适合开心散的灭菌。
[0039]
1.6过饱和蒸汽灭菌方法
[0040]
过饱和蒸汽灭菌方法在湿热灭菌法的基础上，增加强力搅拌操作，使液体和蒸汽瞬间混合，加强蒸汽与液体的接触速率，实现快速灭菌，可以解决湿热灭菌法的用时过长的缺点。
[0041]
过饱和蒸汽灭菌方法目前主要用于液体灭菌，本发明人对过饱和蒸汽湿热灭菌法进行开心散灭菌处理的考察，确认过饱和蒸汽灭菌方法可以对开心散进行灭菌，并计划用于产业化生产。
[0042]
2.过饱和蒸汽灭菌方法的考察
[0043]
实验方法：将供试品用蒸煮袋包裹，摊平，放入高温高压灭菌装置，压力设置在1-6个大气压，转速设置在每分钟1-35转，通入高温蒸汽，进行灭菌操作。
[0044]
通过实验验证，过饱和蒸汽灭菌方法不仅可以用于液体灭菌，也可以用于散剂和饮片的灭菌，并通过灭菌前后的数据分析，得到相应的灭菌条件。
[0045]
2.1灭菌有效性的考察
[0046]
从实验数据可以看出，在111-131℃,60sec的灭菌条件下，使用饱和蒸汽方法灭菌后，开心散的散剂和饮片可以符合《中国药典》0115散剂项下的微生物限度标准
[5]
，饱和蒸汽方法灭菌可以用于开心散的散剂和饮片的灭菌。开心散散剂和饮片的菌检结果如表1所示。
[0047]
表1:微生物限度检查结果(单位:cfu)
[0048]
[0049][0050]
2.2灭菌参数筛选
[0051]
2.2.1药材饮片的考察
[0052]
2.2.1.1远志
[0053]
远志饮片灭菌后，颜色稍变红。远志饮片灭菌前后性状对比结果如表2，图3所示。
[0054]
在灭菌条件为“131℃，60sec”时，水分增加较多，增加率为0.37％。
[0055]
在灭菌条件为“111-121℃，60sec”时，水分略有增多，最大增加率为0.18％，应将灭菌前远志饮片的水分控制在10.17％以下。
[0056]
在灭菌条件为“111-121℃，60sec”时，有效成分略有损失，远志酮最大损失率为0.18％，3,6’二芥子酰基蔗糖最大损失率为0.33％，3,6’二芥子酰基蔗糖最大损失率为0.19％，应将灭菌前远志饮片的指标性成分控制在远志酮不得少于0.12％，3,6’二芥子酰基蔗糖不得少于0.45％，细叶远志皂苷不得少于2.46％。远志饮片灭菌前后检测结果如表3，图1和图2所示。
[0057]
表2：远志饮片灭菌前后性状对比
[0058]
[0059][0060]
表3：远志饮片灭菌前后检测结果
[0061][0062]
2.2.1.2人参
[0063]
人参饮片灭菌后表面颜色加深。人参饮片灭菌前后性状对比结果如表4，图6所示。
[0064]
在灭菌条件为“131℃，60sec”时，水分增加较多，增加率为0.23％。
[0065]
在灭菌条件为“111-1121℃，60sec”时，水分变化不大略有损失，有效成分略有损失，人参皂苷rg1、re总量最大损失率为0.03％，人参皂苷rb1最大损失率为0.06％，应将灭菌前人参饮片的指标性成分控制在人参皂苷rg1、re总量不得少于0.28％，人参皂苷rb1不得少于0.21％。人参饮片灭菌前后检测结果如表5，图4和图5所示。
[0066]
表4：人参饮片灭菌前后性状对比
[0067][0068]
[0069][0070]
表5：人参饮片灭菌前后检测结果
[0071]
2.2.1.3茯苓
[0072]
茯苓饮片灭菌后药材性状无明显变化。茯苓饮片灭菌前后性状对比结果如表6，图7所示。
[0073]
在灭菌条件为“131℃，60sec”时，水分有所增加，增加率为0.03％。
[0074]
在灭菌条件为“111-121℃，60sec”时，水分变化不大略有损失，浸出物略有损失，浸出物最大损失率为0.05％，应将灭菌前茯苓饮片的指标性成分控制浸出物不得少于2.62％。茯苓饮片灭菌前后检测结果如表7所示。
[0075]
表6：茯苓饮片灭菌前后性状对比
[0076][0077]
表7：茯苓饮片灭菌前后检测结果
[0078][0079][0080]
2.2.1.4石菖蒲
[0081]
石菖蒲饮片灭菌后颜色加深。石菖蒲饮片灭菌前后性状对比结果如表8，图8所示。
[0082]
在灭菌条件为“131℃，60sec”时，水分增加较多，增加率为0.37％。
[0083]
在灭菌条件为“111-121℃，60sec”时，水分略有增多，最大增加率为0.18％，应将灭菌前远志饮片的水分控制在不得过11.02％。
[0084]
在灭菌条件为“111-121℃，60sec”时，挥发油含量略有损失，挥发油含量最大损失率为0.32％，应将灭菌前石菖蒲饮片的指标性成分控制在挥发油含量不得少于1.03％。石菖蒲饮片灭菌前后检测结果如表9所示。
[0085]
表8：石菖蒲饮片灭菌前后性状对比
[0086][0087]
表9：石菖蒲饮片灭菌前后检测结果
[0088][0089][0090]
2.2.2开心散散剂的考察
[0091]
开心散散剂灭菌后颜色变浅，吸湿性增强，成团状。开心散散剂灭菌前后的形状比较结果如表10，图9所示。
[0092]
在灭菌条件为“121-131℃，60sec”时，水分增加较多，最大增加率为0.28％。
[0093]
在灭菌条件为“111℃，60sec”时，水分略有增多，最大增加率为0.14％，应将灭菌前开心散散剂的水分控制在不得过7.89％。开心散散剂不同灭菌方法堆密度及水分测定结果如表11所示。
[0094]
表10：开心散散剂灭菌前后的形状比较
[0095][0096]
表11：开心散散剂不同灭菌方法堆密度及水分测定结果
[0097]
[0098][0099]
3.不同灭菌法用于开心散的比较研究
[0100]
[0101]
通过实验结果可以得出结论，应用本发明的过饱和蒸汽灭菌法，将灭菌参数控制在“111-130℃，60sec”，可以有效的杀灭远志、人参、石菖蒲、茯苓四味饮片和开心散口服散剂中的微生物，同时保证有效成分挥发油的不丧失，并保留生药特征。
[0102]
当灭菌参数在“110-130℃，60sec”，对样品中的水分和有效成分影响较小，并可以通过企业内控标准对未灭菌的药材或散剂粉末进行质量控制。
[0103]
通过对饮片和散剂粉末的灭菌前后的水分损失率比较，灭菌方法对饮片水分的影响比对散剂粉末的影响小，选择在饮片端进行开心散口服散剂的灭菌。
[0104]
综上所述，在“110-130℃，60sec”的条件下，利用过饱和蒸汽灭菌法，可以有效的杀灭，开心散处方中远志、人参、石菖蒲、茯苓四味饮片中的微生物，并且可以确保各项指标符合药典要求，稳定可控。
附图说明：
[0105]
图1：远志饮片灭菌前样品检测
[0106]
图2：远志饮片灭菌后样品检测
[0107]
图3：远志饮片灭菌前后性状对比
[0108]
图4：人参灭菌前样品检测
[0109]
图5：人参灭菌后样品检测
[0110]
图6：人参灭菌前后性状对比
[0111]
图7：茯苓饮片灭菌前后性状对比
[0112]
图8：石菖蒲饮片灭菌前后性状对比
[0113]
图9：散剂灭菌前后性状对比
具体实施方式：
[0114]
以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。
[0115]
实施例1开心散灭菌(饮片阶段灭菌)
[0116]
1.1药材炮制
[0117]
1.1.1人参：取原药材500g，捣碎后过1号筛，得到不小于10目的碎块。
[0118]
1.1.2远志：取原药材500g，手选除去杂质，洗净，将洗净的远志堆成一堆，物料下面铺湿润纱布，上面覆盖湿润纱布，每30min向药材喷洒10ml清水，保持湿润状态，堆润至柔软程度后，用小型切药机，切制为10-15mm的远志段，50℃干燥8小时，冷却至室温。
[0119]
1.1.3茯苓：取产地趁鲜加工为茯苓块500g，手选除去杂质。
[0120]
1.1.4石菖蒲：取原药材500g，手选除去杂质，洗净，将洗净的石菖蒲堆成一堆，物料下面铺湿润纱布，上面覆盖湿润纱布，每30min向药材喷洒10ml清水，保持湿润状态，堆润至柔软程度后，用小型切药机，切制为2-4mm的厚片，60℃干燥3小时，冷却至室温。
[0121]
1.2饮片灭菌
[0122]
将得到的四味药材，分别置于蒸煮袋中，置于高温高压调理灭菌机中，温度维持在121℃，持续60秒，压力设置在1-6个大气压，转速为每分钟1-35转，通入高温饱和蒸汽，得到符合《中国药典(2015版)》要求的固体口服饮片。
[0123]
1.3饮片粉碎、过筛、混合
[0124]
以下操作，在洁净区内操作。
[0125]
取灭菌后的人参50g、远志50g、茯苓100g、石菖蒲50g，混合，置于捣药罐中捣碎，过六号筛，得到不小于100目的药粉，再将全部药粉混合至纹理均匀，无色差，即得开心散。
[0126]
实施例2开心散灭菌(散剂阶段灭菌)
[0127]
2.1药材炮制
[0128]
2.1.1人参：取原药材500g，捣碎后过1号筛，得到不小于10目的碎块。
[0129]
2.1.2远志：取原药材500g，手选除去杂质，洗净，将洗净的远志堆成一堆，物料下面铺湿润纱布，上面覆盖湿润纱布，每30min向药材喷洒10ml清水，保持湿润状态，堆润至柔软程度后，用小型切药机，切制为10-15mm的远志段，50℃干燥8小时，冷却至室温。
[0130]
2.1.3茯苓：取产地趁鲜加工为茯苓块500g，手选除去杂质。
[0131]
2.1.4石菖蒲：取原药材500g，手选除去杂质，洗净，将洗净的石菖蒲堆成一堆，物料下面铺湿润纱布，上面覆盖湿润纱布，每30min向药材喷洒10ml清水，保持湿润状态，堆润至柔软程度后，用小型切药机，切制为2-4mm的厚片，60℃干燥3小时，冷却至室温。
[0132]
2.2饮片粉碎、过筛、混合
[0133]
取人参50g、远志50g、茯苓100g、石菖蒲50g，混合，置于捣药罐中捣碎，过六号筛，得到不小于100目的药粉，再将全部药粉混合至纹理均匀，无色差，即可。
[0134]
2.3灭菌
[0135]
将得到的开心散粉末，置于蒸煮袋中，置于高温高压调理灭菌机中，温度控制在121℃，持续60秒，压力设置在1-6个大气压，转速为每分钟1-35转，通入高温饱和蒸汽，即得开心散。
[0136]
实施例3开心散灭菌(饮片阶段灭菌)
[0137]
3.1药材炮制
[0138]
3.1.1人参：取原药材500g，捣碎后过1号筛，得到不小于10目的碎块。
[0139]
3.1.2远志：取原药材500g，手选除去杂质，洗净，将洗净的远志堆成一堆，物料下面铺湿润纱布，上面覆盖湿润纱布，每30min向药材喷洒10ml清水，保持湿润状态，堆润至柔软程度后，用小型切药机，切制为10-15mm的远志段，50℃干燥8小时，冷却至室温。
[0140]
3.1.3茯苓：取产地趁鲜加工为茯苓块500g，手选除去杂质。
[0141]
3.1.4石菖蒲：取原药材500g，手选除去杂质，洗净，将洗净的石菖蒲堆成一堆，物料下面铺湿润纱布，上面覆盖湿润纱布，每30min向药材喷洒10ml清水，保持湿润状态，堆润至柔软程度后，用小型切药机，切制为2-4mm的厚片，60℃干燥3小时，冷却至室温。
[0142]
3.2饮片灭菌
[0143]
将得到的四味药材，分别置于蒸煮袋中，置于高温高压调理灭菌机中，温度维持在130℃，持续50秒，压力设置在1-6个大气压，转速为每分钟1-35转，通入高温饱和蒸汽，得到符合《中国药典(2015版)》要求的固体口服饮片。
[0144]
3.3饮片粉碎、过筛、混合
[0145]
以下操作，在洁净区内操作。