一种肝素酶I的制作方法

技术特征：
1.一种肝素酶i，其特征在于，所述肝素酶i包括如seq id no：02所示的氨基酸序列。2.一种编码如权利要求1所述的肝素酶i的核苷酸序列。3.根据权利要求2所述的核苷酸序列，其特征在于，所述核苷酸序列如seq id no：03所示。4.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体包含如权利要求2或3所述的核苷酸序列。5.根据权利要求4所述的重组载体，其特征在于，所述重组载体为真核细胞重组表达载体。6.根据权利要求5所述的重组载体，其特征在于，所述真核细胞重组表达载体为选自ppink-hc、ppiczaa、ppicza中的任意一种，优选的，所述真核细胞重组表达载体为ppink-hc。7.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含权利要求4～6任一项所述的重组载体。8.根据权利要求7所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为毕赤酵母或酿酒酵母；优选的，所述宿主细胞为毕赤酵母。9.一种根据权利要求1所述的肝素酶i的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括以下步骤：首先合成编码权利要求1所述的肝素酶i的核苷酸序列，随后将核苷酸序列与真核细胞重组表达载体结合，得到重组载体；将重组载体转入宿主细胞，随后诱导表达，并经过纯化得到所述肝素酶i。10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，还包括：所述纯化是利用脱硫生物素纯化柱进行纯化。

技术总结
本申请公开了一种肝素酶I及其编码核苷酸序列、包括该核苷酸序列的重组载体和宿主细胞以及应用，该肝素酶I通过对现有肝素酶I氨基酸序列进行定点突变，具体地，将现有肝素酶I的氨基酸序列第42、102、209三个位点的谷氨酰胺(Q)定点突变为丙氨酸(A)。经过上述突变后得到的肝素酶I在不影响肝素酶I的活性的条件下，相对于现有肝素酶I具有更好的稳定性。于现有肝素酶I具有更好的稳定性。


技术研发人员：刘颖
受保护的技术使用者：刘颖
技术研发日：2021.08.18
技术公布日：2022/3/15