一种解酒保肝保健饮料及其制备方法与流程

1.本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及一种解酒保肝保健饮料及其制备方法。


背景技术：

2.中国酒文化始于古代，属于餐饮文化部分之一，深入中国人的血脉深处，在许多重要场合中酒都是不可或缺的交际良方，但是过多饮酒甚至酗酒，会对人体的心脑血管、胃肠道、肝脏以及电解质平衡等方面都造成损害，严重时甚至可能导致性命之虞。长期过量饮酒对健康的威胁和社会的危害，一直是全球范围内重要的公共卫生问题。近年来，成人酒精中毒的发生率相应升高，急性酒精中毒、酒精依赖是当今社会问题之一，因此，寻找解酒的方法或具有天然解酒功效的药(食)物已经成为众多研究者的工作重点，开发出功效明确、成分安全的解酒药物或者保健食品受到了社会各界的普遍重视。
3.目前国内的解酒药则多以中草药成分为主，国内外学者对解酒防醉的方法有不少的研究，解酒方药的研究也取得了一定的进展，但是解酒方药的出发点仍以解酒防醉为目的，保健品虽品种繁多，但却存在着低水平重复、疗效不确切、质量标准不健全的缺点，而对于酒精性肝损伤仍以被动治疗方法为主，缺少主动预防。
4.加州州立大学药物与酒精教育中心主任帕姆
·
麦克拉肯指出，从医学角度上讲不管服用什么药物，过量饮酒都会对身体健康造成伤害。药物组方在解酒防醉的同时，应兼顾酒精中毒的多种并发症，如肝损害、心脑血管病、胃痛、肥胖症、高血脂症等，同时又要注意饮酒伴随症状，以达到标本兼治。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供一种一种解酒保肝保健饮料及其制备方法。
6.为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
7.一种解酒保肝保健饮料，其由以下重量份的原料组成：葛根水提物2.8～3.2份，葛花水提物2.8～3.2份，枳椇子水提物2.8～3.2份，甘草水提物1～1.1份，绿豆水提物1份。
8.进一步地，所述葛根水提物、葛花水提物、枳椇子水提物、甘草水提物、绿豆水提物的质量浓度为1g/ml(以生药计)。
9.优选地，所述解酒保肝保健饮料由以下重量份的原料组成：葛根水提物3份，葛花水提物3份，枳椇子水提物3份，甘草水提物1份，绿豆水提物1份。
10.所述解酒保肝保健饮料的制备方法，包括以下步骤：
11.1)按照料液比为1:20，提取时间70为min，将葛根加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的葛根水提物；
12.2)按照料液比为1:20，提取时间60为min，将葛花加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的葛花水提物；
13.3)按照料液比为1:25，提取时间60为min，将枳椇子加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的枳椇子水提物；
14.4)按照料液比为1:6，提取时间20为min，将甘草加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的甘草水提物；
15.5)按照料液比为1:20，提取时间为150min，将绿豆加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的绿豆水提物；
16.6)将葛根水提物、葛花水提物、枳椇子水提物、甘草水提物、绿豆水提物按重量比混合，即得所述解酒保肝保健饮料。
17.本发明采用枳椇子、葛根、葛花、甘草、绿豆为原材料，优化水提物的提取工艺，筛选五种原材料的配伍比例，最终制备的水提物混合物不仅具有解酒防醉作用，还有肝脏保护作用，区别于现有解酒药的单一解酒防醉作用。另外，五种原材料中，枳椇子、葛根、甘草为药食同源作物，绿豆则是一种粮食作物，由枳椇子、葛根、葛花、甘草、绿豆组成的解酒饮料，是一种安全可靠的饮品，可放心饮用。
附图说明
18.以下结合附图和具体实施方式对本发明做进一步详细说明；
19.图1为水提物对小鼠肝组织匀浆丙二醛的影响；
20.图2为水提物对小鼠肝组织匀浆还原型谷胱甘肽的影响；
21.图3为水提物对小鼠肝组织匀浆甘油三酯的影响；
22.图4为水提物对小鼠肝组织病理学的影响(油红o染色，
×
200)。
具体实施方式
23.实施例1五种原材料的提取工艺优化
24.以清除羟基自由基能力为指标，优化五种原材料水提物制备的料液比、提取时间。
25.水提物清除羟基自由基的测定原理
26.羟基自由基是活性氧化物中化学性质最活泼的自由基，它几乎能与活细胞中任何生物大分子发生反应，而且反应速度极快，是对机体危害最大的自由基。反应如下：
27.h2o2 fe
2
→
·
oh h2o fe
2
28.反应产生的羟基自由基进攻水杨酸分子上的苯环，产生2，3-二羟基苯甲酸，其在510nm处的吸光度值与
·
oh的量成正比。反应体系中若加入
·
oh清除剂时，即可降低吸光度值。因此可通过分光光度计测定羟基自由基的量反应待测物清除羟基自由基的能力。
29.水提物清除羟基自由基的测定方法
30.精密量取1.8mmol/l feso
4 2ml置于10ml塑料离心管中，依次加入1.8mmol/l水杨酸-乙醇1.5ml、水提物溶液1ml、0.03％h2o
2 0.1ml，启动反应，37℃水浴加热0.5h后，在2000r/min下离心0.1h，取上清液，在510nm下测定吸光值。
31.以蒸馏水代替水提物溶液做空白参比，在510nm下测定空白对照液的吸光值。
32.考虑待测液溶液本身的吸光值不同，反应体系中，用蒸馏水取代0.03％h2o2，在510nm下测定水提物溶液的本底吸收值。
33.清除率计算公式为：
34.羟基自由基清除率(％)＝[(ao-(ax-axo))/ao]
×
100
[0035]
ao为空白对照液的吸光值
[0036]
ax为加入水提物溶液的吸光值
[0037]
axo为水提物溶液的本底吸收值
[0038]
水提物制备：固定料液比、提取时间中的一个因素，煎煮，水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml(以生药计)水提物，测定时将葛根、葛花、甘草、绿豆水提物稀释成0.01g/ml，枳椇子水提物稀释成0.006g/ml，测定各水提物对羟基自由基的清除率。
[0039]
1.1葛根提取工艺优化
[0040]
1.1.1料液比的影响
[0041]
固定提取时间为30min，用不同的料液比制备葛根水提物，测定各水提物清除羟基自由基的能力，结果如表1.1.1。料液比为1:15时，清除羟基自由基的能力最强。
[0042]
表1.1.1葛根料液比对羟基自由基清除率的影响
[0043][0044]
1.1.2提取时间的影响
[0045]
固定料液比为1:15，用不同的提取时间制备水提物，测定各水提物清除羟基自由基的能力，结果如表1.1.2。提取时间为60min时，清除羟基自由基的能力最强。
[0046]
表1.1.2葛根提取时间对羟基自由基清除率的影响
[0047][0048]
1.2葛花提取工艺优化
[0049]
1.2.1提取时间的影响
[0050]
固定料液比为1:20，用不同的提取时间制备水提物，测定各水提物清除羟基自由基的能力，结果如表1.2.1。提取时间为60min时，清除羟基自由基的能力最强。
[0051]
表1.2.1葛花提取时间对羟基自由基清除率的影响
[0052][0053]
1.2.2料液比的影响
[0054]
固定提取时间为60min，以不同的料液比制备葛花水提物，测定各水提物清除羟基自由基的能力，结果如表1.2.2。料液比为1:20时，清除羟基自由基的能力最强。
[0055]
表1.2.2葛花料液比对羟基自由基清除率的影响
[0056][0057]
1.3枳椇子提取工艺优化
[0058]
1.3.1料液比的影响
[0059]
固定提取时间60min，以不同的料液比制备枳椇子水提物，测定各水提物清除羟基自由基的能力，结果如表1.3.1。料液比为1:25时，清除羟基自由基的能力最强。
[0060]
表1.3.1枳椇子料液比对羟基自由基清除率的影响
[0061][0062]
1.3.2提取时间的影响
[0063]
料液比为1:25，用不同的提取时间制备水提物，测定各水提物清除羟基自由基的能力，结果如表1.3.2。提取时间为60min时，清除羟基自由基的能力最强。
[0064]
表1.3.2枳椇子提取时间对羟基自由基清除率的影响
[0065][0066]
1.4绿豆提取工艺优化
[0067]
1.4.1料液比的影响
[0068]
固定提取时间150min，以不同的料液比制备绿豆水提物，测定各水提物清除羟基自由基的能力，结果如表1.4.1。料液比为1:15时，清除羟基自由基的能力最强。
[0069]
表1.4.1绿豆料液比对羟基自由基清除率的影响
[0070][0071]
1.4.2提取时间的影响
[0072]
料液比为1:15，用不同的提取时间制备水提物，测定各水提物清除羟基自由基的能力，结果如表1.4.2。提取时间为150min时，清除羟基自由基的能力最强。
[0073]
表1.4.2绿豆提取时间对羟基自由基清除率的影响
[0074][0075]
1.5甘草提取工艺优化
[0076]
1.5.1料液比的影响
[0077]
固定提取时间25min，以不同的料液比制备枳椇子水提物，测定各水提物清除羟基自由基的能力，结果如表1.5.1。料液比为1:5时，清除羟基自由基的能力最强。
[0078]
表1.5.1甘草料液比对羟基自由基清除率的影响
[0079][0080]
1.5.2提取时间的影响
[0081]
料液比为1:5，用不同的提取时间制备水提物，测定各水提物清除羟基自由基的能力，结果如表1.5.2。提取时间为20min时，清除羟基自由基的能力最强。
[0082]
表1.5.2甘草提取时间对羟基自由基清除率的影响
[0083][0084][0085]
1.7五种原材料的最佳提取工艺
[0086]
由上述单因素优化实验，确定提取时间(a1、a2、a3)和料液比(b1、b2、b3)的3个水平，然后按照a1b1、a1b2、a1b3、a2b1、a2b2、a2b3、a3b1、a3b2、a3b3制备水提物，测定各水提物清除羟基自由基的能力，根据水提物对羟基自由基的清除率，得出五种原材料的最佳提取工艺分别是：
[0087]
甘草：料液比1:6，提取时间20min
[0088]
葛根：料液比1:20，提取时间70min
[0089]
葛花：料液比1:20，提取时间60min
[0090]
枳椇子：料液比1:25，提取时间60min
[0091]
绿豆：料液比1:20，提取时间150min
[0092]
1.8五种原材料的配伍筛选
[0093]
用解酒实验(记录小鼠持续醉酒时间：从翻正反射消失到清醒的时间)、防醉实验(记录小鼠醉酒潜伏时间：从灌酒到翻正反射消失的时间)，筛选五种原材料水提物的配伍，结果：
[0094]
按重量计，葛根水提物∶葛花水提物∶枳椇子水提物∶甘草水提物∶绿豆水提物＝3∶3∶3∶1∶1。
[0095]
实施例2五种原材料水提物配伍方剂的解酒防醉试验
[0096]
选取清洁级icr雄性小鼠80只，随机分为4组，空白组，水提物低、中、高剂量组，每组20只。水提物组灌胃相应的不同配伍水提物方剂，空白组灌胃等量的生理盐水，30min后，3组全部灌胃红星二锅头0.15ml/10g，分别记录各组小鼠醉酒潜伏时间及持续醉酒时间。取小鼠醉酒潜伏期时间较长、持续醉酒时间较短的那组配伍方剂为最佳配伍。
[0097]
表2显示，水提物方剂对醉酒小鼠无明显解酒作用，即持续醉酒时间差异不显著，但对小鼠醉酒潜伏时间有显著延长作用，具有防醉作用。
[0098]
表2水提物方剂
[0099][0100]
与空白组比较，*p《0.05
[0101]
实施例3对化学性肝损伤有辅助保护功能试验
[0102]
3.1小鼠分组及给药处理
[0103]
清洁级icr雄性小鼠60只随机分成5组：水提物低剂量组(3.75g/kg)、中剂量组(7.5g/kg)、高剂量组(15g/kg)，空白组，模型组。适应性喂养3d后开始实验，各剂量组每天灌胃一定剂量的水提物，空白组和模型组每天灌胃等量生理盐水，连续试验30d。末次灌胃1h后，各剂量组和模型组均灌胃50％乙醇13ml/kg bw，空白对照组灌胃等量蒸馏水。小鼠禁食自由饮水18h后，称重各小鼠体重，摘眼球取血后，处死小鼠，剖取肝脏并称重。
[0104]
3.2检测指标
[0105]
小鼠血样4℃3500r
·
min-1
离心10min，制备血清，测定血清ast活性；取肝脏相同部位若干，冰冻切片，油红o染色；取肝脏若干，用冷生理盐水制备10％肝组织匀浆，测定丙二醛(mda)、还原型谷胱甘肽(gsh)、甘油三酯(tg)的含量。
[0106]
3.3结果
[0107]
3.3.1水提物对小鼠肝组织匀浆丙二醛的影响
[0108]
图1以及表3.1显示，模型组mda含量显著升高，与空白组比较，差异极显著(p《0.001)，有统计学意义；剂量组mda含量显著降低，与模型组比较，低剂量组差异极显著(p《0.001)，中、高剂量组差异极显著(p《0.01)。
[0109]
表3.1水提物对小鼠肝组织匀浆丙二醛的影响
[0110][0111]
与模型组比较，*p《0.05，**p《0.01，***p《0.001
[0112]
3.3.2水提物对小鼠肝组织匀浆还原型谷胱甘肽的影响
[0113]
图2及表3.2显示，模型组肝组织匀浆还原型谷胱甘肽(gsh)水平，极显著低于空白
组(p《0.001)；与模型组比较，水提物低剂量组肝组织匀浆gsh含量极显著高于模型组(p《0.001)，中剂量组极显著高于模型组(p《0.01)，高剂量组显著高于模型组(p《0.05)。
[0114]
表3.2水提物对小鼠肝组织匀浆还原型谷胱甘肽的影响
[0115][0116]
与模型组比较，*p《0.05，**p《0.01，***p《0.001
[0117]
3.3.3水提物对小鼠肝组织匀浆甘油三酯的影响
[0118]
图3以及表3.3显示，模型组肝组织匀浆甘油三酯(tg)含量，极显著高于空白组(p《0.001)。与模型组比较，水提物低剂量组肝组织匀浆tg含量，极显著低于模型组(p《0.001)，中、高剂量组肝组织匀浆tg含量，显著低于模型组(p《0.05)。
[0119]
表3.3水提物对小鼠肝组织匀浆甘油三酯的影响
[0120][0121]
与模型组比较，*p《0.05，**p《0.01，***p《0.001
[0122]
3.3.4水提物对小鼠肝组织病理学的影响
[0123]
空白组小鼠肝脏颜色暗红，有光泽，质地柔软；模型组小鼠肝脏颜色偏黄，较没光泽，质地较硬；剂量组小鼠肝脏情况介于空白组与模型组之间，尤其是低剂量组，接近于空白组。
[0124]
图4显示，空白组肝细胞内脂滴散在，稀少，模型组肝细胞内几乎被脂滴代替，充满被油红o染成红色的大粒脂滴，剂量组脂滴含量明显减少，脂滴明显比较小粒。
[0125]
结论：根据《保健食品功能评价方法(2020年版)(征求意见稿)》保健食品评价试验项目、试验原则及结果判定中“对化学性肝损伤有辅助保护功能检验方法——酒精肝损伤模型”的结果判定，满足下列任一条件，可判定受试样品具有对酒精性肝损伤有辅助保护作用：(1)肝脏mda、还原型gsh和tg三项检测指标结果阳性；(2)肝脏mda、还原型gsh和tg三项
指标中任两项指标阳性和病理组织学检查结果阳性。
[0126]
实施例显示，水提物对酒精性肝损伤的肝脏mda、还原型gsh和tg三项检测指标结果阳性，病理组织学检查结果阳性，因此可判定本样品具有对酒精性肝损伤有辅助保护作用。
[0127]
基于以上结论，本发明提供了一种解酒保肝保健饮料，由以下重量份的原料组成：葛根水提物2.8～3.2份，葛花水提物2.8～3.2份，枳椇子水提物2.8～3.2份，甘草水提物1～1.1份，绿豆水提物1份。
[0128]
实施例4
[0129]
一种解酒保肝保健饮料的制备方法，包括以下步骤：
[0130]
1)按照料液比为1:20，提取时间70为min，将葛根加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的葛根水提物；
[0131]
2)按照料液比为1:20，提取时间60为min，将葛花加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的葛花水提物；
[0132]
3)按照料液比为1:25，提取时间60为min，，将枳椇子加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的枳椇子水提物；
[0133]
4)按照料液比为1:6，提取时间20为min，将甘草加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的甘草水提物；
[0134]
5)按照料液比为1:20，提取时间为150min，将绿豆加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的绿豆水提物；
[0135]
6)将葛根水提物3份、葛花水提物3份、枳椇子水提物3份、甘草水提物1份、绿豆水提物1份混合，即得所述解酒保肝保健饮料。
[0136]
实施例5
[0137]
一种解酒保肝保健饮料的制备方法，包括以下步骤：
[0138]
1)按照料液比为1:20，提取时间70为min，将葛根加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的葛根水提物；
[0139]
2)按照料液比为1:20，提取时间60为min，将葛花加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的葛花水提物；
[0140]
3)按照料液比为1:25，提取时间60为min，将枳椇子加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的枳椇子水提物；
[0141]
4)按照料液比为1:6，提取时间20为min，将甘草加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的甘草水提物；
[0142]
5)按照料液比为1:20，提取时间为150min，将绿豆加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的绿豆水提物；
[0143]
6)将葛根水提物2.8份、葛花水提物3.2份、枳椇子水提物2.8份、甘草水提物1.1份、绿豆水提物1份混合，即得所述解酒保肝保健饮料。
[0144]
实施例6
[0145]
一种解酒保肝保健饮料的制备方法，包括以下步骤：
[0146]
1)按照料液比为1:20，提取时间70为min，将葛根加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的葛根水提物；
[0147]
2)按照料液比为1:20，提取时间60为min，将葛花加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的葛花水提物；
[0148]
3)按照料液比为1:25，提取时间60为min，将枳椇子加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的枳椇子水提物；
[0149]
4)按照料液比为1:6，提取时间20为min，将甘草加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的甘草水提物；
[0150]
5)按照料液比为1:20，提取时间为150min，将绿豆加水煎煮，所得水煎剂过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩，得质量浓度1g/ml的绿豆水提物；
[0151]
6)将葛根水提物3.2份、葛花水提物2.8份、枳椇子水提物3.2份、甘草水提物1份、绿豆水提物1份混合，即得所述解酒保肝保健饮料。