一种人类卵母细胞体外受精前培养方法和系列培养液与应用与流程

技术特征：
1.一种卵子体外成熟培养液，其特征在于，所述卵子体外成熟培养液的组成成分包括：a液：包括5.5～8.5g/l氯化钠、0.25～0.7g/l氯化钾、0.02～0.06g/l七水硫酸镁、0.03～0.08g/l磷酸二氢钠、2.1～5g/l碳酸氢钠、1～3g/ld-( )-葡萄糖、0.15～0.5g/l丙酮酸钠、0.15～0.5g/l二水氯化钙、1.5～3g/l的dl-乳酸钠、0.1～0.3g/l丙氨酰谷氨酰胺、0.01～0.04g/l的l-天门冬酰胺、0.01～0.03g/l的l-天门冬氨酸、0.006～0.02g/l甘氨酸、0.01～0.04g/l的l-脯氨酸、0.01～0.05g/l的l-丝氨酸、0.1～0.4g/l的l-盐酸精氨酸、0.02～0.05g/l的l-盐酸胱氨酸、0.02～0.05g/l的l-组氨酸盐酸盐一水合物、0.05～0.2g/l的l-异亮氨酸、0.05～0.2g/l的l-亮氨酸、0.07～0.3g/l赖氨酸盐酸盐、0.01～0.05g/l的l-蛋氨酸、0.03～0.09g/l的l-苯丙氨酸、0.04～0.09g/l苏氨酸、0.01～0.03g/l的l-色氨酸、0.02～0.05g/l的l-酪氨酸、0.02～0.05g/l的l-缬氨酸、0.001～0.003g/l的d-泛酸钙、0.001～0.004g/l氯化胆碱、0.001～0.002g/l叶酸、0.002～0.005g/l肌醇、0.001～0.003g/l烟酰胺、0.001～0.004g/l盐酸吡哆醇、0.0001～0.0005g/l核黄素、0.001～0.005g/l盐酸硫胺素、0.01～0.05g/l庆大霉素和1～5g/l人血清白蛋白；b液：7～8iu/ml hmg。2.一种受精培养液，其特征在于，所述受精培养液的组成成分包括：5.5～8.5g/l氯化钠、0.2～0.5g/l氯化钾、0.02～0.06g/l七水硫酸镁、0.03～0.07g/l磷酸二氢钠、2.1～5.2g/l碳酸氢钠、0.5～2g/l d-( )-葡萄糖、0.02～0.05g/l丙酮酸钠、0.2～0.5g/l二水氯化钙、2～4g/l的dl-乳酸钠，0.01～0.05g/l庆大霉素和1～5g/l人血清白蛋白。3.一种胚胎发育培养液，其特征在于，所述胚胎发育培养液的组成成分包括：5～8g/l氯化钠、0.2～0.5g/l氯化钾、0.01～0.05g/l六水氯化镁、0.04～0.09g/l磷酸二氢钠、2.1～6.2g/l碳酸氢钠、0.04～0.5g/l的d-( )-葡萄糖、0.05～0.15g/l丙酮酸钠、0.2～0.5g/l二水氯化钙、1.5～5g/l的dl-乳酸钠、0.003～0.008g/l的edta四钠盐二水合物、0.004～0.09g/l丙氨酰谷氨酰胺、0.003～0.007g/l的l-天门冬酰胺、0.005～0.02g/l的l-天门冬氨酸、0.004～0.009g/l甘氨酸、0.004～0.009g/l的l-脯氨酸、0.003～0.008g/l的l-丝氨酸、0.003～0.007g/l的l-盐酸精氨酸、0.005～0.02g/l的l-盐酸胱氨酸、0.01～0.03g/l的l-半胱氨酸、0.005～0.02g/l的l-组氨酸盐酸盐一水合物、0.02～0.05g/l的l-异亮氨酸、0.02～0.06g/l的l-亮氨酸、0.03～0.09g/l的赖氨酸盐酸盐、0.005～0.02g/l的l-蛋氨酸、0.01～0.03g/l的l-苯丙氨酸、0.015～0.04g/l的苏氨酸、0.025～0.07g/l的l-色氨酸、0.005～0.02g/l得到l-酪氨酸、0.007～0.02g/l的l-缬氨酸、0.01～0.05g/l庆大霉素和1～5g/l人血清白蛋白。4.权利要求1所述的卵子体外成熟培养液在卵丘细胞-卵子-复合体的体外成熟培养中的应用。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述卵子体外成熟培养液在使用前包括：在37℃，5％二氧化碳浓度条件下至少平衡30分钟以上。6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述体外成熟培养中，所述卵丘细胞-卵子-复合体与所述卵子体外成熟培养液中的比值为：10～15个/ml。7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，在取卵后授精前，把获取的卵丘细胞-卵子-复合体在所述卵子体外成熟培养液中培养3～6h。
8.一种人类卵母细胞体外受精前培养的系列培养液，其特征在于，所述系列培养液包括权利要求1所述的卵子体外成熟培养液、权利要求2所述的受精培养液和权利要求3所述的胚胎发育培养液。9.一种获卵后体外受精前培养的方法，其特征在于，所述方法包括：在取卵后授精前，把获取的卵丘细胞-卵子-复合体在权利要求1所述卵子体外成熟培养液中前培养3～6h；将所述卵丘细胞-卵子-复合体转移到权利要求2所述受精培养液中进行加精授精，获得受精卵；将所述受精卵转移到权利要求3所述胚胎发育培养液中进行胚胎发育培养，获得卵裂期胚胎和囊胚。

技术总结
本发明公开了一种人类卵母细胞体外受精前培养方法和系列培养液与应用，获卵后体外受精前培养方法包括：获取的卵丘细胞-卵子-复合体(Cumulus-oocyte complex，COC)在本发明的“卵子体外成熟培养液”中进行前培养3～6小时，获卵后体外受精前培养3～6小时可以进一步促进卵子细胞核和细胞质的同步成熟，提高卵子质量、继而配合使用本发明的“受精培养液”和“胚胎发育培养液”，可以提高正常受精率、优质卵裂期胚胎发育率、囊胚形成率和优质囊胚率。囊胚形成率和优质囊胚率。囊胚形成率和优质囊胚率。


技术研发人员：千日成
受保护的技术使用者：艾尔斯（浙江）医学科技有限公司
技术研发日：2021.11.25
技术公布日：2022/3/8