BCL-2蛋白抑制剂的制作方法

bcl-2蛋白抑制剂
1.以引用方式并入任何优先权申请
2.本技术要求于2019年7月10日提交的美国临时申请序列号62/872,593的优先权，其全文据此以引用方式并入。


背景技术：
技术领域
3.本专利申请涉及抑制和/或降解bcl-2家族中的蛋白质来治疗以过度细胞增殖为特征的病症诸如癌症和肿瘤的化合物。
4.技术领域
5.bcl-2家族中的蛋白质含有bcl-2同源(bh)结构域并且通过调节线粒体外膜通透性(momp)来调节细胞凋亡。bcl-2家族的成员具有至多四个bh结构域，称为bh1、bh2、bh3和bh4。所有四个结构域在抗凋亡bcl-2家族成员bcl-2、bcl-xl、bcl-w、mcl-1和a1/bfl-1中均是保守的。
6.已经评估了许多抑制抗凋亡bcl-2蛋白的化合物治疗淋巴瘤和其他类型癌症的能力。一种双重bcl-2/xl抑制剂纳维托克(navitoclax)已在用于治疗慢性淋巴细胞性白血病(cll)的i/ii期临床试验中进行评估。然而，由于血小板减少症(抑制bcl-xl的副作用)的发生，其在研究群体中的功效因剂量限制而降低。
7.维奈托克(venetoclax)是fda批准的第一种bcl-2抑制剂。其可以商品名venclexta从艾伯维公司(abbvie inc.)商购获得。其目前被指示为患有cll或小淋巴细胞性淋巴瘤(sll)的患者的二线治疗。
8.维奈托克的fda批准代表了开发bcl-2蛋白抑制剂的里程碑。然而，仍然需要抑制和/或降解bcl-2家族中的蛋白质的改善的化合物。


技术实现要素：

9.各种实施方案提供了如以下权利要求书中所汇总的式(i)的化合物及其使用方法。
附图说明
10.图1示出了用于制备式(i)的化合物的一般合成方案。
11.图2示出了用于制备式(i)的化合物的一般多步合成方案。
12.图3示出了用于制备式(i)的化合物的一般多步合成方案。
13.图4示出了表明实施例2、4、5、6、9和10的化合物在molt-4细胞中以100nm浓度诱导bcl-xl降解的结果。
14.图5示出了表明实施例2、4、5、6、9和10的化合物在molt-4细胞中以100nm浓度诱导bcl-xl降解的结果。
15.图6示出了表明实施例2和3的化合物可以剂量依赖性方式在molm-13细胞中诱导bcl-xl降解的结果。
16.图7示出了表明由实施例2、3和4的化合物诱导的bcl-xl降解可在molm-13细胞中被蛋白酶体抑制剂mg132抑制的结果。
具体实施方式
17.bcl-2是程序性细胞死亡(细胞凋亡)的关键调节因子。bcl-2属于b细胞淋巴瘤2(bcl-2)，bcl-2是一种包括促凋亡蛋白(诸如bak、bax、bim、bid、tbid、bad、bik、puma、bnip-1、hrk、bmf和noxa)和抗凋亡蛋白(诸如bcl-2、bcl-x
l
、bcl-w、mcl-1和bcl-2a1)的蛋白家族。例如，在正常条件下，bcl-2部分通过阻止bak和bax的活化来抑制细胞凋亡。固有细胞凋亡途径的激活(例如，通过细胞应激)会抑制bcl-2，从而激活bak和bax。这些蛋白会促进线粒体外膜通透性，从而释放细胞色素c和smac。这会启动半胱天冬酶信号传导途径，最终导致细胞死亡。bcl-2的失调会导致螯合促进细胞死亡的蛋白，从而导致逃避细胞凋亡。该过程有助于恶性肿瘤，并且在其他不利条件下(诸如在病毒感染期间)会促进细胞存活。抑制bcl-2(例如通过降解bcl-2蛋白和/或通过抑制结合)会破坏促凋亡蛋白的螯合，从而恢复凋亡信号传导，并促进受损细胞经历程序性细胞死亡。因此，抑制bcl-2家族中的蛋白质(例如通过抑制和/或降解bcl-2蛋白和/或bcl-x
l
蛋白)具有改善或治疗癌症和肿瘤的潜力。
18.定义
19.除非另有定义，否则本文所用的所有技术和科学术语均具有与本领域的普通技术人员通常所理解的含义相同的含义。除非另有说明，否则本文引用的所有专利、申请、公开申请和其他公开全文均以引用方式并入。在本文的术语存在多个定义的情况下，除非另有说明，否则以该部分中的术语为准。
20.每当基团被描述为“任选地取代的”时，该基团可以是未取代的，或者被所指示的取代基中的一个或多个取代。同样，当基团被描述为“未取代的或取代的”时，如果是取代的，则取代基可选自所指示的取代基中的一个或多个。如果没有指示取代基，则意指所指示的“任选地取代的”或“取代的”基团可被一个或多个基团取代，所述基团单独地且独立地选自：烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、芳基(烷基)、环烷基(烷基)、杂芳基(烷基)、杂环基(烷基)、羟基、烷氧基、酰基、氰基、卤素、硫代羰基、o-氨基甲酰基、n-氨基甲酰基、o-硫代氨基甲酰基、n-硫代氨基甲酰基、c-酰氨基、n-酰氨基、s-磺酰氨基、n-磺酰氨基、c-羧基、o-羧基、硝基、亚氧硫基、亚硫酰基、磺酰基、卤代烷基、卤代烷氧基、氨基、单取代氨基基团、二取代氨基基团、单取代胺(烷基)和二取代胺(烷基)。
21.如本文所用，“ca至c
b”，其中“a”和“b”为指示基团中碳原子数量的整数。所指出的基团可含有“a”至“b”(包括端值在内)个碳原子。因此，例如，“c1至c4烷基”基团是指具有1至4个碳的所有烷基基团，即ch
3-、ch3ch
2-、ch3ch2ch
2-、(ch3)2ch-、ch3ch2ch2ch
2-、ch3ch2ch(ch3)-和(ch3)3c-。如果未指定“a”和“b”，则假定为这些定义中所述的最宽范围。
22.如果两个“r”基团被描述为“合在一起”，则r基团和它们所连接的原子可形成环烷基、环烯基、芳基、杂芳基或杂环。例如但不限于，如果nrarb基团的ra和rb被指示为“合在一起”，则意指它们彼此共价键合以形成环：
[0023][0024]
如本文所用，术语“烷基”是指完全饱和脂族烃基团。烷基部分可以是支链或直链。支链烷基基团的示例包括但不限于异丙基、仲丁基、叔丁基等。直链烷基基团的示例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正庚基等。烷基基团可具有1至30个碳原子(每当它在本文中出现，数值范围诸如“1至30”是指给定范围内的每个整数；例如，“1至30个碳原子”意指烷基基团可由1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子等组成，至多并且包含30个碳原子，但本发明的定义还涵盖在未指定数值范围的情况下出现的术语“烷基”)。烷基基团也可为具有1至12个碳原子的中等大小的烷基。烷基基团也可为具有1至6个碳原子的低级烷基。烷基基团可以是取代的或未取代的。
[0025]
如本文所用，术语“亚烷基”是指二价完全饱和直链脂族烃基团。亚烷基基团的示例包括但不限于亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基、亚戊基、亚己基、亚庚基和亚辛基。亚烷基基团可用表示，其后是碳原子数，然后是“*”。例如，表示亚乙基。亚烷基基团可具有1至30个碳原子(每当它在本文中出现，数值范围诸如“1至30”是指给定范围内的每个整数；例如，“1至30个碳原子”意指烷基基团可由1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子等组成，至多并且包含30个碳原子，但本发明的定义还涵盖在未指定数值范围的情况下出现的术语“亚烷基”)。亚烷基基团也可为具有1至12个碳原子的中等大小的烷基。亚烷基基团也可为具有1至4个碳原子的低级烷基。亚烷基基团可以是取代的或未取代的。例如，低级亚烷基基团可通过替代低级亚烷基基团的一个或多个氢和/或通过用c
3-6
单环环烷基基团(例如，)取代同一碳上的两个氢来取代。
[0026]
本文所用的术语“烯基”是指包含一个或多个碳双键的具有两至二十个碳原子的一价直链或支链基团，其包括但不限于1-丙烯基、2-丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基等。烯基基团可以是未取代的或取代的。
[0027]
本文所用的术语“炔基”是指包含一个或多个碳三键的具有两至二十个碳原子的一价直链或支链基团，其包括但不限于1-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基等。炔基基团可以是未取代的或取代的。
[0028]
如本文所用，“环烷基”是指完全饱和(无双键或三键)单环或多环(诸如双环)烃环体系。当由两个或更多个环构成时，这些环可以稠合、桥接或螺旋的方式结合在一起。如本文所用，术语“稠合”是指共有两个原子和一个键的两个环。如本文所用，术语“桥连环烷基”是指其中环烷基包含连接非相邻原子的一个或多个原子的键的化合物。如本文所用，术语“螺”是指共有一个原子的两个环并且所述两个环不通过桥连接。环烷基基团可在一个或多个环中含有3至30个原子，在一个或多个环中含有3至20个原子，在一个或多个环中含有3至10个原子，在一个或多个环中含有3至8个原子，或者在一个或多个环中含有3至6个原子。环烷基基团可以是未取代的或取代的。单环烷基基团的示例包括但不绝限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。稠合环烷基基团的示例为十氢化萘基、十二氢-1h-苯并噻吩基和十四氢蒽基；桥连的环烷基基团的示例为二环[1.1.1]戊基、金刚烷基和降冰片基；并且螺环烷基基团的示例包括螺[3.3]庚烷和螺[4.5]癸烷。
[0029]
如本文所用，“环烯基”是指在至少一个环中含有一个或多个双键的单环或多环(诸如双环)烃环体系；但是，如果存在不止一个双键，则该双键无法形成遍及所有环的完全离域的π电子体系(否则该基团将为如本文所定义的“芳基”)。环烯基基团可在一个或多个环中含有3至10个原子，在一个或多个环中含有3至8个原子，或者在一个或多个环中含有3至6个原子。当环由两个或更多个环构成时，这些环可以稠合、桥接或螺旋的方式连接在一起。环烯基基团可以是未取代的或取代的。
[0030]
如本文所用，“芳基”是指在所有环中具有完全离域π电子体系的碳环(所有碳)单环或多环(诸如双环)芳环体系(包括其中两个碳环共享化学键的稠环体系)。芳基基团中的碳原子数可变化。例如，芳基基团可为c
6-c
14
芳基基团、c
6-c
10
芳基基团或c6芳基基团。芳基基团的示例包括但不限于苯、萘和薁。芳基基团可以是取代的或未取代的。
[0031]
如本文所用，“杂芳基”是指含有一个或多个杂原子(例如，1、2或3个杂原子)的单环或多环(诸如双环)芳环体系(具有完全离域π电子体系的环体系)，所述杂原子是除碳之外的元素，包括但不限于氮、氧和硫。杂芳基基团的环中的原子数可变化。例如，杂芳基基团可在一个或多个环中含有4至14个原子，在一个或多个环中含有5至10个原子，或者在一个或多个环中含有5至6个原子，诸如九个碳原子和一个杂原子；八个碳原子和两个杂原子；七个碳原子和三个杂原子；八个碳原子和一个杂原子；七个碳原子和两个杂原子；六个碳原子和三个杂原子；五个碳原子和四个杂原子；五个碳原子和一个杂原子；四个碳原子和两个杂原子；三个碳原子和三个杂原子；四个碳原子和一个杂原子；三个碳原子和两个杂原子；或两个碳原子和三个杂原子。此外，术语“杂芳基”包括其中两个环，诸如至少一个芳基环和至少一个杂芳基环或至少两个杂芳基环共享至少一个化学键的稠环体系。杂芳基环的示例包括但不限于呋喃、呋咱、噻吩、苯并噻吩、酞嗪、吡咯、噁唑、苯并噁唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、噻唑、1,2,3-噻二唑、1,2,4-噻二唑、苯并噻唑、咪唑、苯并咪唑、吲哚、吲唑、吡唑、苯并吡唑、异噁唑、苯并异噁唑、异噻唑、三唑、苯并三唑、噻二唑、四唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、嘌呤、蝶啶、喹啉、异喹啉、喹唑啉、喹喔啉、噌啉和三嗪。杂芳基基团可以是取代的或未取代的。
[0032]
如本文所用，“杂环基”或“杂脂环基”是指三元、四元、五元、六元、七元、八元、九元、十元、至多18元单环、双环和三环环体系，其中碳原子连同1至5个杂原子一起构成所述环体系。杂环可任选地含有一个或多个以完全离域π电子体系不会遍及所有环发生的这种方式定位的不饱和键。杂原子是除碳之外的元素，包括但不限于氧、硫和氮。杂环还可含有一个或多个羰基或硫代羰基官能团，以便使该定义包括氧代-体系和硫代-体系，诸如内酰胺、内酯、环状酰亚胺、环状硫代酰亚胺和环状氨基甲酸酯。当由两个或更多个环构成时，这些环可以稠合、桥接或螺旋的方式结合在一起。如本文所用，术语“稠合”是指共有两个原子和一个键的两个环。如本文所用，术语“桥连杂环基”或“桥连杂脂环基”是指其中杂环基或杂脂环基包含连接非相邻原子的一个或多个原子的键的化合物。如本文所用，术语“螺”是指共有一个原子的两个环并且所述两个环不通过桥连接。杂环基或杂脂环基基团可在一个或多个环中含有3至30个原子，在一个或多个环中含有3至20个原子，在一个或多个环中含有3至10个原子，在一个或多个环中含有3至8个原子，或者在一个或多个环中含有3至6个原子。例如，五个碳原子和一个杂原子；四个碳原子和两个杂原子；三个碳原子和三个杂原子；四个碳原子和一个杂原子；三个碳原子和两个杂原子；两个碳原子和三个杂原子；一个碳原
子和四个杂原子；三个碳原子和一个杂原子；或两个碳原子和一个杂原子。另外，杂脂环中的任何氮可以是季铵化的。杂环基或杂脂环基团可以是未取代的或取代的。此类“杂环基”或“杂脂环基”基团的示例包括但不限于1,3-二噁英、1,3-二氧杂环己烷、1,4-二氧杂环己烷、1,2-二氧戊环、1,3-二氧戊环、1,4-二氧戊环、1,3-氧硫杂环己烷、1,4-氧硫杂环己二烯、1,3-氧硫杂环戊烷、1,3-二硫杂环戊二烯、1,3-二硫戊环、1,4-氧硫杂环己烷、四氢-1,4-噻嗪、2h-1,2-噁嗪、马来酰亚胺、琥珀酰亚胺、巴比妥酸、硫代巴比妥酸、二氧代哌嗪、乙内酰脲、二氢尿嘧啶、三氧杂环己烷、六氢-1,3,5-三嗪、咪唑啉、咪唑烷、异噁唑啉、异噁唑烷、噁唑啉、噁唑烷、噁唑烷酮、噻唑啉、噻唑烷、吗啉、环氧乙烷、哌啶n-氧化物、哌啶、哌嗪、吡咯烷、氮杂环庚烷、吡咯烷酮、吡咯烷二酮、4-哌啶酮、吡唑啉、吡唑啶、2-氧代吡咯烷、四氢吡喃、4h-吡喃、四氢噻喃、硫代吗啉、硫代吗啉亚砜、硫代吗啉砜以及它们的苯并稠合类似物(例如，苯并咪唑啉酮、四氢喹啉和/或3,4-亚甲基二氧基苯基)。螺杂环基基团的示例包括2-氮杂螺[3.3]庚烷、2-氧杂螺[3.3]庚烷、2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚烷、2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷、2-氧杂螺[3.4]辛烷和2-氮杂螺[3.4]辛烷。
[0033]
如本文所用，“芳烷基”和“芳基(烷基)”是指经由低级亚烷基基团连接作为取代基的芳基基团。芳烷基的低级亚烷基和芳基基团可以是取代的或未取代的。示例包括但不限于苄基、2-苯基烷基、3-苯基烷基和萘基烷基。
[0034]
如本文所用，“杂芳烷基”和“杂芳基(烷基)”是指经由低级亚烷基基团连接作为取代基的杂芳基基团。杂芳烷基的低级亚烷基和杂芳基基团可以是取代的或未取代的。示例包括但不限于2-噻吩基烷基、3-噻吩基烷基、呋喃基烷基、噻吩基烷基、吡咯基烷基、吡啶基烷基、异噁唑基烷基、和咪唑基烷基以及它们的苯并稠合类似物。
[0035]“杂脂环基(烷基)”和“杂环基(烷基)”是指经由低级亚烷基基团连接作为取代基的杂环或杂脂环基团。(杂脂环基)烷基的低级亚烷基和杂环基可以是取代的或未取代的。示例包括但不限于四氢-2h-吡喃-4-基(甲基)、哌啶-4-基(乙基)、哌啶-4-基(丙基)、四氢-2h-噻喃-4-基(甲基)和1,3-噻嗪烷-4-基(甲基)。
[0036]
如本文所用，术语“羟基”是指-oh基团。
[0037]
如本文所用，“烷氧基”是指式
–
or，其中r为本文所定义的烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)。烷氧基的非限制性列表为甲氧基、乙氧基、正丙氧基、1-甲基乙氧基(异丙氧基)、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、苯氧基和苯甲酰氧基。烷氧基可以是取代的或未取代的。
[0038]
如本文所用，“酰基”是指经由羰基基团连接作为取代基的氢、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、杂环基、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)和杂环基(烷基)。示例包括甲酰基、乙酰基、丙酰基、苯甲酰基和丙烯酰基。酰基可以是取代的或未取代的。
[0039]“氰基”基团是指
“‑
cn”基团。
[0040]
如本文所用，术语“卤素原子”或“卤素”意指元素周期表第7列中放射性稳定的原子中的任一者，诸如氟、氯、溴和碘。
[0041]“硫代羰基”基团是指其中r可与相对于o-羧基所定义的相同的
“‑
c(＝s)r”基团。硫代羰基可以是取代的或未取代的。
[0042]“o-氨甲酰基”基团是指其中ra和rb可独立地为氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯
基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)的
“‑
oc(＝o)n(rarb)”基团。o-氨甲酰基可以是取代的或未取代的。
[0043]“n-氨甲酰基”基团是指其中r和ra可独立地为氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)的“roc(＝o)n(ra)
‑”
基团。n-氨甲酰基可以是取代的或未取代的。
[0044]“o-硫代氨甲酰基”基团是指其中ra和rb可独立地为氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)的
“‑
oc(＝s)-n(rarb)”基团。o-硫代氨甲酰基可以是取代的或未取代的。
[0045]“n-硫代氨甲酰基”基团是指其中r和ra可独立地为氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)的“roc(＝s)n(ra)
‑”
基团。n-硫代氨甲酰基可以是取代的或未取代的。
[0046]“c-酰氨基”基团是指其中ra和rb可独立地为氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)的
“‑
c(＝o)n(rarb)”基团。c-酰氨基可以是取代的或未取代的。
[0047]“n-酰氨基”基团是指其中r和ra可独立地为氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)的“rc(＝o)n(ra)
‑”
基团。n-酰氨基可以是取代的或未取代的。
[0048]“s-磺酰氨基”基团是指其中ra和rb可独立地为氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)的
“‑
so2n(rarb)”基团。s-磺酰氨基可以是取代的或未取代的。
[0049]“n-磺酰氨基”基团是指其中r和ra可独立地为氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)的“rso2n(ra)
‑”
基团。n-磺酰氨基可以是取代的或未取代的。
[0050]“o-羧基”基团是指其中r可为如本文所定义的氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)的“rc(＝o)o
‑”
基团。o-羧基可以是取代的或未取代的。
[0051]
术语“酯”和“c-羧基”是指其中r可与相对于o-羧基所定义的相同的
“‑
c(＝o)or”基团。酯和c-羧基可以是取代的或未取代的。
[0052]“硝基”基团是指
“–
no
2”基团。
[0053]“亚氧硫基”基团是指其中r可为氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)的
“‑
sr”基团。亚氧硫基可以是取代的或未取代的。
[0054]“亚磺酰基”基团是指其中r可与相对于亚氧硫基所定义的相同的
“‑
s(＝o)-r”基团。亚磺酰基可以是取代的或未取代的。
[0055]“磺酰基”基团是指其中r可与相对于亚氧硫基所定义的相同的“so2r”基团。磺酰基可以是取代的或未取代的。
[0056]
如本文所用，“卤代烷基”是指其中氢原子中的一个或多个被卤素替代的烷基基团(例如，单卤代烷基、二卤代烷基、三卤代烷基和多卤代烷基)。此类基团包括但不限于氯甲基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、1-氯-2-氟甲基、2-氟异丁基和五氟乙基。卤代烷基可以是
取代的或未取代的。
[0057]
如本文所用，“卤代烷氧基”是指其中氢原子中的一个或多个被卤素替代的烷氧基基团(例如，单卤代烷氧基、二卤代烷氧基和三卤代烷氧基)。此类基团包括但不限于氯甲氧基、氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、1-氯-2-氟甲氧基和2-氟异丁氧基。卤代烷氧基可以是取代的或未取代的。
[0058]
如本文所用，术语“氨基”和“未取代的氨基”是指-nh2基团。
[0059]“单取代的胺”基团是指其中ra可为如本文所定义的烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)的
“‑
nhr
a”基团。ra可以为取代或未取代的。单取代的胺基团可包括例如单烷基胺基团、单-c
1-c6烷基胺基团、单芳基胺基团、单-c
6-c
10
芳基胺基团等。单取代的胺基团的示例包括但不限于-nh(甲基)、-nh(苯基)等。
[0060]“二取代的胺”基团是指其中ra和rb可独立地为如本文所定义的烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)的
“‑
nrar
b”基团。ra和rb可独立地为取代或未取代的。二取代的胺基团可包括例如二烷基胺基团、二-c
1-c6烷基胺基团、二芳基胺基团、二-c
6-c
10
芳基胺基团等。二取代的胺基团的示例包括但不限于-n(甲基)2、-n(苯基)(甲基)、-n(乙基)(甲基)等。
[0061]
如本文所用，“单取代的胺(烷基)”基团是指经由低级亚烷基基团作为取代基连接的如本文所提供的单取代的胺。单取代的胺(烷基)可以为取代或未取代的。单取代的胺(烷基)基团可包括例如单烷基胺(烷基)基团、单-c
1-c6烷基胺(c
1-c6烷基)基团、单芳基胺(烷基)基团、单-c
6-c
10
芳基胺(c
1-c6烷基)基团等。单取代的胺(烷基)基团的示例包括但不限于-ch2nh(甲基)、ch2nh(苯基)、-ch2ch2nh(甲基)、-ch2ch2nh(苯基)等。
[0062]
如本文所用，“二取代的胺(烷基)”基团是指经由低级亚烷基基团作为取代基连接的如本文所提供的二取代的胺。二取代的胺(烷基)可以为取代或未取代的。二取代的胺(烷基)基团可包括例如二烷基胺(烷基)基团、二-c
1-c6烷基胺(c
1-c6烷基)基团、二芳基胺(烷基)基团、二-c
6-c
10
芳基胺(c
1-c6烷基)基团等。二取代的胺(烷基)基团的示例包括但不限于，-ch2n(甲基)2、-ch2n(苯基)(甲基)、-nch2(乙基)(甲基)、-ch2ch2n(甲基)2、-ch2ch2n(苯基)(甲基)、-nch2ch2(乙基)(甲基)等。
[0063]
当未指定取代基的数量(例如，卤代烷基)时，可存在一个或多个取代基。例如，“卤代烷基”可包含相同或不同的卤素中的一个或多个。又如，“c1至c3烷氧基苯基”可包括相同或不同的含有一个、两个或三个原子的烷氧基基团中的一个或多个。
[0064]
如本文所用，自由基指具有单个未成对电子的物质，使得含有自由基的物质可共价键合到另一种物质。因此，在该上下文中，自由基不一定是游离的自由基。相反，自由基指较大分子的特定部分。术语“自由基”可与术语“基团”互换使用。
[0065]
术语“药学上可接受的盐”是指不会对其施用到的生物体引起显著刺激并且不会消除化合物的生物活性和特性的化合物的盐。在一些实施方案中，该盐为化合物的酸加成盐。药物盐可通过使化合物与无机酸(诸如，氢卤酸(例如盐酸或氢溴酸)、硫酸、硝酸和磷酸(诸如，2,3-二羟丙基二氢磷酸盐))反应来获得。药物盐还可通过使化合物与有机酸诸如脂族或芳族羧酸或磺酸(例如，甲酸、乙酸、琥珀酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、烟碱酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、三氟乙酸、苯甲酸、水杨酸、2-氧代戊二酸或萘磺酸)
反应来获得。药物盐还可通过使化合物与碱反应以形成盐来获得，诸如铵盐、碱金属盐(诸如，钠、钾或锂盐)、碱土金属盐(诸如，钙或镁盐)、碳酸盐、碳酸氢盐、有机碱(诸如，二环己基胺、n-甲基-d-葡糖胺、三(羟甲基)甲胺、c
1-c7烷基胺、环己胺、三乙醇胺、乙二胺)的盐以及与氨基酸(诸如，精氨酸和赖氨酸)反应形成的盐。对于式(i)的化合物，本领域技术人员理解，当盐由基于氮的基团(例如，nh2)的质子化形成时，基于氮的基团可与正电荷缔合(例如，nh2可变成nh
3
)并且该正电荷可由带负电的抗衡离子(诸如，cl-)平衡。
[0066]
术语“bcl蛋白抑制”和类似术语是指抑制bcl蛋白的活性或功能，例如通过降解bcl蛋白和/或通过抑制抗凋亡bcl蛋白(诸如bcl-2、bcl-x
l
、bcl-w、mcl-1和bcl-2a1)与促凋亡bcl蛋白(诸如bak、bax、bim、bid、tbid、bad、bik、puma、bnip-1、hrk、bmf和noxa)的结合。类似地，术语“bcl蛋白抑制剂”是指抑制抗凋亡bcl蛋白(诸如bcl-2、bcl-x
l
、bcl-w、mcl-1和bcl-2a1)与促凋亡bcl蛋白(诸如bak、bax、bim、bid、tbid、bad、bik、puma、bnip-1、hrk、bmf和noxa)结合的药剂(包括小分子和蛋白)。除了其结合抑制功能之外，bcl蛋白抑制剂还可以具有降解bcl蛋白质的功能。这种bcl蛋白抑制剂在本文中可以称为bcl蛋白降解剂，特别是当降解是bcl蛋白抑制的主要机制时。参见例如wo 2019144117(公开了bcl蛋白降解剂，其是将bcl-2小分子抑制剂或配体与e3连接酶结合部分连接的二价化合物)。bcl蛋白抑制剂包括但不限于维奈托克(venetoclax)、纳维托克(navitoclax)、奥巴托克(obatoclax)、s55746、apg-2575、abt-737、amg176、azd5991和apg-1252。另外的bcl蛋白抑制剂包括但不限于在以下文献中公开的化合物：pct申请公开号wo2017/132474、wo 2014/113413和wo 2013/110890，美国专利申请公开号2015/0051189，以及中国专利申请号cn 106565607，这些文献各自以引用方式并入本文用于公开另外的bcl蛋白抑制剂的有限目的。如本领域技术人员将理解的，存在许多评估蛋白结合相互作用的方法，包括但不限于免疫共沉淀、荧光共振能量转移(fret)、表面等离子体共振(spr)和荧光偏振/各向异性。
[0067]
应当理解，在本文所述的具有一个或多个手性中心的任何化合物中，如果未明确地指出绝对立体化学，则每个中心可独立地为r构型或s构型或它们的混合物。因此，本文所提供的化合物可为对映体纯的对映体富集的外消旋混合物或非对映体纯的非对映体富集的立体异构混合物。此外，应当理解，在本文所述的具有生成可被定义为e或z的几何异构体的一个或多个双键的任何化合物中，每个双键可独立地为e或z或它们的混合物。同样，应当理解，在所述的任何化合物中，也旨在包括所有互变异构形式。
[0068]
应当理解，在本文所公开的化合物具有未满价化合价的情况下，用氢或其同位素(例如，氢-1(氕)和氢-2(氘))来补满。
[0069]
应当理解，本文所述的化合物可同位素标记。用同位素诸如氘取代可得到因代谢稳定性提高而得到的某些治疗优势，诸如例如，体内半衰期增大或者剂量需求降低。如在化合物结构中表示的每种化学元素可包括所述元素的任何同位素。例如，在化合物结构中，可明确地公开或理解氢原子存在于化合物中。在化合物的可能存在氢原子的任何位置处，氢原子可为氢的任何同位素，包括但不限于氢-1(氕)和氢-2(氘)。因此，除非上下文中另有明确规定，否则本文提及的化合物涵盖所有可能的同位素形式。
[0070]
应当理解，本文所述的方法和组合包括晶体形式(也称为多晶型体，其包括化合物的相同元素组成的不同晶体堆积排列)、非晶相、盐、溶剂化物和水合物。在一些实施方案中，本文所述的化合物与药学上可接受的溶剂(诸如，水、乙醇等)以溶剂化形式存在。在其
他实施方案中，本文所述的化合物以非溶剂化形式存在。溶剂化物含有化学计量或非化学计量的量的溶剂，并且可在与药学上可接受的溶剂(诸如，水、乙醇等)的结晶过程期间形成。溶剂为水时形成水合物，或者当溶剂为醇时形成醇化物。此外，本文所提供的化合物可以非溶剂化形式和溶剂化形式存在。一般来讲，溶剂化形式被认为等同于用于本文所提供的化合物和方法的目的的非溶剂化形式。
[0071]
对于所提供的范围值，应当理解，上限和下限以及范围的上限和下限之间的每个居间值均涵盖在实施方案内。
[0072]
对于本技术中尤其是所附权利要求书中所用的术语和短语及其变型，除非另有明确说明，否则应理解为开放式的而非限制性的。对于前述示例，术语“包括”应被理解为“包括但不受限制”、“包括但不限于”等；如本文所用，术语“包括”与“包含”、“含有”或“被表征为”同义且是包容性的或开放式的，并且不排除另外的未列出的元素或方法步骤；术语“具有”应解释为“至少具有”；术语“包括”应解释为“包括但不限于”；术语“示例”用于提供所讨论的项目的示例性实例，而不是其详尽的或限制性的列表；以及术语如“优选地”、“优选”、“期望”和“期望的”和类似语义的词语的使用不应被理解为暗指某些特征对于结构或功能是关键性的、必需的或甚至是重要的，而是仅旨在突出可用于或不可用于特定实施方案中的替代或另外的特征。此外，术语“包括”应被解释为与短语“至少具有”或“至少包括”同义。当用于化合物、组合物或装置的上下文中时，术语“包括”意指化合物、组合物或装置至少包括所述的特征或组分，但也可包括另外的特征或组分。
[0073]
对于本文中使用的基本上任何复数和/或单数术语，本领域技术人员可从复数转换成单数和/或从单数转换成复数，只要适合于上下文和/或应用即可。为清楚起见，可在本文中明确地表述各种单数/复数置换。不定冠词“一”或“一个”不排除多个。在相互不同的从属权利要求中提及某些措施的这一事实并不指示这些措施的组合不能被用于使得优点更加突出。权利要求书中的任何参考标记不应被理解为限制其范围。
[0074]
化合物
[0075]
本文所公开的一些实施方案涉及式(i)的化合物或其药学上可接受的盐，其具有以下结构：
[0076][0077]
在各种实施方案中，式(i)中的变量定义如下：
[0078]
r1可选自氢、卤素、取代或未取代的c
1-c6烷基、取代或未取代的c
1-c6卤代烷基、取代或未取代的c
3-c6环烷基、取代或未取代的c
1-c6烷氧基、未取代的单-c
1-c6烷基胺和未取
代的二-c
1-c6烷基胺。
[0079]
每个r2可独立地选自卤素、取代或未取代的c
1-c6烷基、取代或未取代的c
1-c6卤代烷基和取代或未取代的c
3-c6环烷基；或者当m为2或3时，每个r2可独立地选自卤素、取代或未取代的c
1-c6烷基、取代或未取代的c
1-c6卤代烷基和取代或未取代的c
3-c6环烷基，或者两个r2基团与它们所附接的原子结合在一起可形成取代或未取代的c
3-c6环烷基或取代或未取代的3至6元杂环基。
[0080]
r3可为氢或卤素。
[0081]
r4可选自no2、s(o)r6、so2r6、卤素、氰基和未取代的c
1-c6卤代烷基。
[0082]
r5可为取代或未取代的c
1-c6亚烷基、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-het
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-o
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-het
–
o-、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-het-nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-n(c
1-c6烷基)
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-het-n(c
1-c6烷基)
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)-o-或取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-het-(c＝o)-o-，其中het为取代或未取代的3至10元杂环基。
[0083]
r6可为取代或未取代的c
1-c6烷基、取代或未取代的c
1-c6卤代烷基或取代或未取代的c
3-c6环烷基。
[0084]
r7可不存在，为取代或未取代的c
1-c6亚烷基、
–
(c＝o)
–
、
–
(c＝s)
–
、
–
(c＝o)-nh
–
、
–
(c＝o)-o
–
、
–
(c＝s)-nh
–
、取代或未取代的(c
1-c6亚烷基)-o
–
或取代或未取代的(c
1-c6亚烷基)-nh
–
。
[0085]
r8可不存在，为取代或未取代的c
1-c6亚烷基、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c
6-c
12
芳基)
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c
3-c
10
环烷基)
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c
3-c
10
杂环基)
–
或取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(5至10元杂芳基)
–
。
[0086]
x1可为
–o–
或
–
nh
–
；m可为0、1、2或3；并且n可为0、1、2、3、4或5。
[0087]
r9可为取代或未取代的c
1-c
10
亚烷基、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-o
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-o
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)-nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)-o
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)
–
nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)-o
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh-(c
1-c6亚烷基)
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh-(c
1-c6亚烷基)
–
nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh-(c
1-c6亚烷基)
–o–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh
–
或取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh-(c
1-c6亚烷基)
–
。
[0088]r10
可选自以下：
[0089][0090][0091]
在一些实施方案中，r1可为卤素，例如氟、氯、溴或碘。在一些实施方案中，r1可为
氟。在一些实施方案中，r1可为氯。在一些实施方案中，r1可为氢。
[0092]
在一些实施方案中，r1可为取代或未取代的c
1-c6烷基。例如，在一些实施方案中，r1可为取代的c
1-c6烷基。在其他实施方案中，r1可为未取代的c
1-c6烷基。合适的c
1-c6烷基基团的示例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基(支链和直链)和己基(支链和直链)。在一些实施方案中，r1可为未取代的甲基或未取代的乙基。
[0093]
在一些实施方案中，r1可为取代或未取代的c
1-c6卤代烷基，例如取代或未取代的单卤代c
1-c6烷基、取代或未取代的二卤代c
1-c6烷基、取代或未取代的三卤代基c
1-c6烷基、取代或未取代的四卤代c
1-c6烷基或者取代或未取代的五卤代c
1-c6烷基。在一些实施方案中，r1可为未取代的
–
chf2、
–
cf3、
–
ch2cf3、
–
cf2cf3或
–
cf2ch3。在一些实施方案中，r1为-ch2f、-chf2或-cf3。
[0094]
在一些实施方案中，r1可为取代或未取代的单环或双环c
3-c6环烷基。例如，在一些实施方案中，r1可为取代的单环c
3-c6环烷基。在一些实施方案中，r1可为未取代的单环c
3-c6环烷基。合适的单环或双环c
3-c6环烷基基团的示例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、[1.1.1]双环戊基和环己基。
[0095]
在一些实施方案中，r1可为取代或未取代的c
1-c6烷氧基。例如，在一些实施方案中，r1可为取代的c
1-c6烷氧基。在其他实施方案中，r1可为未取代的c
1-c6烷氧基。合适的c
1-c6烷氧基基团的示例包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、戊氧基(支链和直链)和己氧基(支链和直链)。在一些实施方案中，r1可为未取代的甲氧基或未取代的乙氧基。
[0096]
在一些实施方案中，r1可为未取代的单-c
1-c6烷基胺，例如甲胺、乙胺、正丙胺、异丙胺、正丁胺、异丁胺、叔丁胺、戊胺(支链和直链)和己胺(支链和直链)。在一些实施方案中，r1可为甲胺或乙胺。
[0097]
在一些实施方案中，r1可为未取代的二-c
1-c6烷基胺。在一些实施方案中，二-c
1-c6烷基胺中的每个c
1-c6烷基是相同的。在其他实施方案中，二-c
1-c6烷基胺中的每个c
1-c6烷基是不同的。合适的二-c
1-c6烷基胺基团的示例包括但不限于二甲胺、二乙胺、(甲基)(乙基)胺、(甲基)(异丙基)胺和(乙基)(异丙基)胺。
[0098]
在一些实施方案中，m可为0。当m为0时，本领域技术人员应当理解，r2所附接的环是未取代的。在一些实施方案中，m可为1。在一些实施方案中，m可为2。在一些实施方案中，m可为3。
[0099]
在一些实施方案中，一个r2可为未取代的c
1-c6烷基(例如，甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基(支链和直链)和己基(支链和直链))，并且任何其他r2(如果存在)可独立地选自卤素(例如，氟或氯)、取代或未取代的c
1-c6烷基(诸如本文所述的那些)、取代或未取代的c
1-c6卤代烷基(诸如本文所述的那些)和取代或未取代的单环或双环c
3-c6环烷基(诸如本文所述的那些)。在一些实施方案中，每个r2可独立地选自未取代的c
1-c6烷基，诸如本文所述的那些。
[0100]
在一些实施方案中，m可为2；并且每个r2可以是成对的。在一些实施方案中，m可为2；并且每个r2可以是相邻的。在一些实施方案中，m可为2；并且每个r2可以是未取代的甲基。在一些实施方案中，m可为2；并且每个r2可以是成对未取代的甲基。
[0101]
在一些实施方案中，两个r2基团可与它们所附接的原子结合在一起形成取代或未
取代的单环c
3-c6环烷基。例如，在一些实施方案中，两个r2基团可与它们所附接的原子结合在一起形成取代的单环c
3-c6环烷基，诸如本文所述的那些。在其他实施方案中，两个r2基团可与它们所附接的原子结合在一起形成未取代的单环c
3-c6环烷基，诸如本文所述的那些。在一些实施方案中，两个r2基团可与它们所附接的原子结合在一起形成未取代的环丙基。在一些实施方案中，两个r2基团可与它们所附接的原子结合在一起形成未取代的环丁基。
[0102]
在一些实施方案中，两个r2基团可与它们所附接的原子结合在一起形成取代或未取代的单环3至6元杂环基。例如，在一些实施方案中，两个r2基团可与它们所附接的原子结合在一起形成取代的单环3至6元杂环基。在其他实施方案中，两个r2基团可与它们所附接的原子结合在一起形成未取代的单环3至6元单环杂环基。在一些实施方案中，取代的单环3至6元杂环基可在一个或多个氮原子上被取代。合适的取代或未取代的单环3至6元杂环基基团的示例包括但不限于氮杂环丙烷、环氧乙烷、氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、吡咯烷、四氢呋喃、咪唑啉、吡唑烷、哌啶、四氢吡喃、哌嗪、吗啉、硫代吗啉和二氧杂环己烷。
[0103]
在一些实施方案中，r3可为氢。在一些实施方案中，r3可为卤素。在一些实施方案中，r3可为氟或氯。
[0104]
在一些实施方案中，r4可为no2。在一些实施方案中，r4可为氰基。在一些实施方案中，r4可为卤素。
[0105]
在一些实施方案中，r4可为未取代的c
1-c6卤代烷基，诸如本文所述的那些。在一些实施方案中，r4可为
–
cf3。
[0106]
在一些实施方案中，r4可为s(o)r6。在一些实施方案中，r4可为so2r6。在一些实施方案中，r4可为so2cf3。
[0107]
在一些实施方案中，r6可为取代或未取代的c
1-c6烷基。例如，在一些实施方案中，r6可为取代的c
1-c6烷基，诸如本文所述的那些。在其他实施方案中，r6可为未取代的c
1-c6烷基，诸如本文所述的那些。
[0108]
在一些实施方案中，r6可为取代或未取代的单环或双环c
3-c6环烷基。例如，在一些实施方案中，r6可为取代的单环或双环c
3-c6环烷基。在其他实施方案中，r6可为未取代的单环或双环c
3-c6环烷基。合适的单环或双环c
3-c6环烷基基团的示例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、[1.1.1]双环戊基和环己基。
[0109]
在一些实施方案中，r6可为取代或未取代的c
1-c6卤代烷基，诸如本文所述的那些。在一些实施方案中，r6可为
–
cf3。
[0110]
在一些实施方案中，r5可为取代或未取代的c
1-c6亚烷基。例如，在一些实施方案中，r5可为
–
(ch2)
p1
–
基团，其中p1为1、2、3、4、5或6。在一些实施方案中，r5可为取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-het
–
，其中het为取代或未取代的3至10元杂环基。例如，在一些实施方案中，r5可为
–
(ch2)
p
–
het基团，其中p为1、2、3、4、5或6。合适的het基团的示例包括4至6元杂环基基团，诸如氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基或哌嗪基。在一些实施方案中，r5可为取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-o
–
或取代或未取代的c6亚烷基)-het
–
o-。例如，在一些实施方案中，r5可为
–
(ch2)
p1
–o–
基团或
–
(ch2)
p1
–
het-o
–
基团，其中p1为1、2、3、4、5或6。在一些实施方案中，r5可为取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh
–
或取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-het-nh
–
。例如，在一些实施方案中，r5可为
–
(ch2)
p1
–
nh
–
基团或
–
(ch2)
p1
–
het-nh
–
基团，其中p1为1、2、3、4、5或6。在一些实施方案中，r5可为取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-n(c
1-c6烷基)
–
或取代或未取代的(c
1-c6亚烷基)-het-n(c
1-c6烷基)
–
。例如，在一些实施方案中，r5可为
–
(ch2)
p1
–
n(c
1-c6烷基)
–
基团或
–
(ch2)
p1
–
het-n(c
1-c6烷基)
–
基团，其中p1为1、2、3、4、5或6。在一些实施方案中，r5可为取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)-o
–
或取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-het-(c＝o)-o
–
。例如，在一些实施方案中，r5可为
–
(ch2)
p1-(c＝o)-o
–
或
–
(ch2)
p1-het-(c＝o)-o
–
基团，其中p1为1、2、3、4、5或6。
[0111]
在一些实施方案中，r7可不存在，在这种情况下，r5可直接与r8接合，或者如果r8不存在，则直接与邻接r8的下一个原子接合。在其他实施方案中，r7可为取代或未取代的c
1-c6亚烷基。例如，在一些实施方案中，r7可为
–
(ch2)
p1
–
基团，其中p1为1、2、3、4、5或6。在其他实施方案中，r7可为
–
(c＝o)
–
、
–
(c＝s)
–
、
–
(c＝o)-nh
–
、
–
(c＝o)-o
–
或
–
(c＝s)-nh
–
。在其他实施方案中，r7可为取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-o
–
或取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh
–
。例如，r7可为
–
(ch2)
p1
–o–
或
–
(ch2)
p1
–
nh
–
，其中p1为1、2、3、4、5或6。
[0112]
在各种实施方案中，一起选择r5和r7，使得
–r5-r7–
选自：
[0113][0114][0115]
例如，在一些实施方案中，一起选择r5和r7，使得
–r5-r7–
选自：
[0116][0117]
在其他实施方案中，一起选择r5和r7，使得
–r5-r7–
选自：
[0118][0119]
在其他实施方案中，一起选择r5和r7，使得
–r5-r7–
选自：
[0120][0121]
在一些实施方案中，r8可不存在，在这种情况下，r7(如果存在；如果不是，则r5)可直接与邻接r8的下一个原子接合。在其他实施方案中，r8可为取代或未取代的c
1-c6亚烷基。例如，在一些实施方案中，r8可为
–
(ch2)
p1
–
基团，其中p1为1、2、3、4、5或6。在其他实施方案中，r8可为取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c
6-c
12
芳基)
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c
3-c
10
环烷基)
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c
3-c
10
杂环基)
–
或取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(5至10元杂芳基)
–
。例如，r8可为取代或未取代的
–
(ch2)
p1
–
(c
6-c
12
芳基)
–
、取代或未取代的
–
(ch2)
p1
–
(c
3-c
10
环烷基)
–
、取代或未取代的
–
(ch2)
p1
–
(c
3-c
10
杂环基)
–
或取代或未取代的
–
(ch2)
p1
–
(5至10元杂芳基)
–
，其中p1为1、2、3、4、5或6。
[0122]
在各种实施方案中，x1可为
–o–
。在其他实施方案中，x1可为
–
nh
–
。
[0123]
在一些实施方案中，n为零，在这种情况下，式(i)中式
–
(ch2ch2o)n–
的乙烯氧基不存在，并且r9基团直接与邻接乙烯氧基的氧原子接合。在其他实施方案中，n为1、2、3、4或5，在这种情况下，存在式(i)中式
–
(ch2ch2o)n–
的乙烯氧基。
[0124]
在各种实施方案中，r9可为取代或未取代的c
1-c
10
亚烷基、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-o
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-o
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)-nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)-o
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)
–
nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)-o
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh-(c
1-c6亚烷基)
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh-(c
1-c6亚烷基)
–
nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh-(c
1-c6亚烷基)
–o–
、取代或
未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh
–
或取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh-(c
1-c6亚烷基)
–
。
[0125]
例如，在各种实施方案中，r9可为取代或未取代的c
1-c
10
亚烷基、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-o
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)
–
或取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh
–
。在其他实施方案中，r9可为取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-o
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)-nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)-o
–
或取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)
–
。
[0126]
在其他实施方案中，r9可为取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)
–
nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)-o
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh-(c
1-c6亚烷基)
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh-(c
1-c6亚烷基)
–
nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh-(c
1-c6亚烷基)
–o–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh(c＝o)-(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh
–
、取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh
–
或取代或未取代的
–
(c
1-c6亚烷基)-nh-(c
1-c6亚烷基)-(c＝o)nh-(c
1-c6亚烷基)
–
。
[0127]
在各种实施方案中，本文描述了包含c
1-c6亚烷基基团或包含一个或多个c
1-c6亚烷基基团的基团的变量，诸如r9。如本文所述的此类c
1-c6亚烷基基团可为
–
(ch2)
p1
–
基团，其中p1为1、2、3、4、5或6。
[0128]
在各种实施方案中，r
10
可为选自以下项的基团：可为选自以下项的基团：
[0129]
在其他实施方案中，r
10
可为选自以下项的基团：
[0130][0131]
在各种实施方案中，式(i)的化合物选自下文权利要求书中所述的那些。
[0132]
合成
[0133]
式(i)的化合物或其药学上可接受的盐可由技术人员使用已知技术以各种方式制备，如由本文提供的详细教导内容所指导的，包括下文提供的实施例。例如，在一个实施方案中，根据图1所示的一般方案制备式(i)的化合物。例如，可在如图2和图3中所示的多个步骤中制备式(i)的化合物。在各种实施方案中，可如pct公开号wo 2019/139899、wo 2019/139900、wo 2019/139902和wo 2019/139907中所述制备可用于制备式(i)的化合物或其药
学上可接受的盐的中间体化合物，这些专利中的每一者据此以引用方式并入本文，并且特别是为了描述可用于制备式(i)的化合物、其药学上可接受的盐的中间体化合物及其制备方法的目的。用于形成起始化合物或其他前体所需的任何预备反应步骤可由本领域技术人员进行。在图1-图3中，考虑到如本领域技术人员所理解的所涉及的合成转化，变量r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、r8、r9、r
10
、x1、m和n可如本文别处所述。本领域技术人员将r
5a
和r
7a
理解为分别为r5和r7的合成前体，如下文实施例中进一步示出。可由r
5a
和r
7a
表示的各种化学基团的描述通常分别与r5和r7相同，如本文别处所述。
[0134]
药物组合物
[0135]
本文所述的一些实施方案涉及药物组合物，该药物组合物可包含有效量的本文所述的一种或多种化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)以及药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂、或它们的组合。
[0136]
术语“药物组合物”是指本文所公开的一种或多种化合物和/或盐与其他化学组分(诸如，稀释剂或载体)的混合物。药物组合物有利于向生物体施用化合物。药物组合物还可通过使化合物与无机酸或有机酸(诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸和水杨酸)反应来获得。药物组合物通常将根据特定的预期施用途径进行调制。
[0137]
术语“生理上可接受的”定义不会消除化合物的生物活性和特性且不会引起对该组合物旨在递送到的动物的明显的损伤或伤害的载体、稀释剂或赋形剂。
[0138]
如本文所用，“载体”是指有利于将化合物结合到细胞或组织中的化合物。例如但不限于，二甲基亚砜(dmso)是有利于将许多有机化合物摄取到受试者的细胞或组织中的常用载体。
[0139]
如本文所用，“稀释剂”是指药物组合物中不具有明显药物活性但在药学上可能是必须的或期望的成分。例如，稀释剂可用于增大其质量太小而无法制造和/或施用的强效药品的体积。它也可为用于待通过注射、摄取或吸入施用的药品的溶解的液体。本领域中稀释剂的常见形式为缓冲水溶液，诸如但不限于模仿人类血液的ph和等渗性的磷酸盐缓冲盐水。
[0140]
如本文所用，“赋形剂”是指添加到药物组合物中以向组合物提供但不限于体积、稠度、稳定性、结合能力、润滑、崩解能力等的基本上惰性的物质。例如，稳定剂诸如抗氧化剂和金属螯合剂是赋形剂。在一个实施方案中，药物组合物包含抗氧化剂和/或金属螯合剂。“稀释剂”是一种类型的赋形剂。
[0141]
本文所述的药物组合物可施用于人类患者本身，或者施用到组合物中，其中该药物组合物与其他活性成分混合(如在组合疗法中)，或者与载体、稀释剂、赋形剂、或它们的组合混合。正确的制剂取决于所选的施用途径。用于制剂和施用本文所述的化合物的技术是本领域技术人员已知的。
[0142]
本文所公开的药物组合物可以本身已知的方式制造，例如，通过常规混合、溶解、制粒、糖衣丸制备、研磨、乳化、封装、包埋或制片工艺的方式。另外，以有效实现其预期用途的量含有活性成分。用于本文所公开的药物组合中的许多化合物可作为具有药学上相容的抗衡离子的盐来提供。
[0143]
本领域中存在施用化合物、盐和/或组合物的多种技术，包括但不限于口服、直肠、肺部、局部、气溶胶、注射、输注和肠胃外递送(包括肌内、皮下、静脉内、髓内注射、鞘内、直
接心室内、腹腔内、鼻内和眼内注射)。在一些实施方案中，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐可口服施用。
[0144]
也可以局部方式而非系统方式施用化合物、盐和/或组合物，例如，经由通过以贮库或缓释制剂的形式将该化合物直接注射或植入到受影响区域中。此外，可将化合物施用于靶向药品递送体系中，例如，施用于涂覆有组织特异性抗体的脂质体中。脂质体将靶向到器官并且由器官选择性地摄取。例如，鼻内或肺部递送以靶向呼吸道疾病或病症可能是期望的。
[0145]
组合物可(如果期望)存在于包装或分配器装置中，该包装或分配器装置可包括含有活性成分的一个或多个单位剂量形式。包装可例如包括金属或塑料箔，诸如泡罩包装。包装或分配器装置可附随施用说明。包装或分配器还可附随调节药物的制造、使用或销售的政府机构所规定的与容器形式相关联的通知，该通知反映该机构对用于人类或兽医施用的药品的形式的批准。例如，此类通知可为美国食品和药品管理局批准的用于处方药品的标签或经批准的产品插页。可包含本文所述的在相容药物载体中配制的化合物和/或盐的组合物也可在适当的容器中制备、放置，并且被标记用于治疗所指示的病症。
[0146]
用途和治疗方法
[0147]
本文所述的一些实施方案涉及一种用于治疗本文所述的癌症或肿瘤的方法，该方法可包括将有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物施用于患有本文所述的癌症的受试者。本文所述的其他实施方案涉及有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物在制造用于治疗本文所述的癌症或肿瘤的药物中的用途。本文所述的其他实施方案涉及用于治疗本文所述的癌症或肿瘤的有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物。
[0148]
本文所述的一些实施方案涉及一种用于抑制本文所述的恶性生长物或肿瘤的复制的方法，该方法可包括使所述生长物或肿瘤与有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)接触。本文所述的其他实施方案涉及有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)在制造用于抑制本文所述的恶性生长物或肿瘤的复制的药物中的用途。在一些实施方案中，所述用途可包括使所述生长物或肿瘤与所述药物接触。本文所述的其他实施方案涉及用于抑制本文所述的恶性生长物或肿瘤的复制的有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)。
[0149]
本文所述的一些实施方案涉及一种用于治疗本文所述的癌症的方法，该方法可包括使本文所述的恶性生长物或肿瘤与有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)接触。本文所述的其他实施方案涉及有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)在制造用于治疗本文所述的癌症的药物中的用途。在一些实施方案中，所述用途可包括使本文所述的恶性生长物或肿瘤与所述药物接触。本文所述的其他实施方案涉及用于接触本文所述的恶性生长物或肿瘤的有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)，其中所述生长物或肿瘤是由本文所述的癌症引起的。
[0150]
合适的恶性生长物、癌症和肿瘤的示例包括但不限于：膀胱癌、脑癌、乳腺癌、骨髓癌、宫颈癌、结直肠癌、食道癌、肝细胞癌、成淋巴细胞性白血病、滤泡性淋巴瘤、t细胞或b细胞起源的淋巴样恶性肿瘤、黑素瘤、骨髓性白血病、霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、头颈癌(包括口腔癌)、卵巢癌、非小细胞肺癌、慢性淋巴细胞性白血病、骨髓瘤(包括多发性骨髓瘤)、前列腺癌、小细胞肺癌、脾癌、真性红细胞增多症、甲状腺癌、子宫内膜癌、胃癌、胆囊癌、胆管癌、睾丸癌、成神经细胞瘤、骨肉瘤、尤文氏肿瘤和威尔姆氏肿瘤。
[0151]
如本文所述，恶性生长物、癌症或肿瘤可变得对一种或多种抗增殖剂具有抗性。在一些实施方案中，本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物可用于治疗和/或改善已经变得对一种或多种抗增殖剂(诸如一种或多种bcl-2抑制剂)具有抗性的恶性生长物、癌症或肿瘤。受试者可能已经对其产生抗性的抗增殖剂的示例包括但不限于bcl-2抑制剂(诸如维奈托克、纳维托克、奥巴托克、s55746、apg-1252、apg-2575和abt-737)。在一些实施方案中，已经变得对一种或多种抗增殖剂具有抗性的恶性生长物、癌症或肿瘤可为本文所述的恶性生长物、癌症或肿瘤。
[0152]
本文所述的一些实施方案涉及一种用于抑制bcl-2的活性(诸如通过例如抑制bcl-2蛋白和/或bcl-xl蛋白的活性)的方法，该方法可包括将有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物施用于受试者，并且还可包括使表达bcl-2的细胞与有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物接触。本文所述的其他实施方案涉及有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)在制造用于抑制受试者中bcl-2的活性(诸如通过例如抑制bcl-2蛋白和/或bcl-xl蛋白的活性)的药物中的用途，或者在制造用于抑制bcl-2的活性(诸如通过例如抑制bcl-2蛋白和/或bcl-xl蛋白的活性)的药物中的用途，其中所述用途包括接触表达bcl-2的细胞。本文所述的其他实施方案涉及用于抑制受试者中bcl-2的活性(诸如通过例如抑制bcl-2蛋白和/或bcl-xl蛋白的活性)；或者用于通过接触表达bcl-2的细胞来抑制bcl-2的活性(诸如通过例如抑制bcl-2蛋白和/或bcl-xl蛋白的活性)的有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)。
[0153]
在一些实施方案中，式(i)的bcl蛋白抑制剂可为选择性bcl-2抑制剂、选择性bcl-x
l
抑制剂、选择性bcl-w抑制剂、选择性mcl-1抑制剂或选择性bcl-2a1抑制剂。在一些实施方案中，式(i)的bcl蛋白抑制剂可抑制一种以上的bcl蛋白。在一些实施方案中，bcl蛋白抑制剂可为bcl-2以及bcl-x
l
、bcl-w、mcl-1和bcl-2a1中的一种、两种或三种的活性的抑制剂。在一些实施方案中，bcl蛋白抑制剂可为bcl-x
l
以及bcl-w、mcl-1和bcl-2a1中的一种、两种或三种的活性的抑制剂。在一些实施方案中，式(i)的bcl蛋白抑制剂可抑制bcl-2和/或bcl-x
l
。在一些实施方案中，式(i)的bcl蛋白抑制剂可同时抑制bcl-2和bcl-x
l
。
[0154]
几种已知的bcl-2抑制剂可在被治疗的受试者中引起一种或多种不期望的副作用。不期望的副作用的示例包括但不限于血小板减少症、中性粒细胞减少症、贫血、腹泻、恶心和上呼吸道感染。在一些实施方案中，本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)可降低与已知bcl-2抑制剂相关联的一种或多种副作用的数量和/或严重程
度。在一些实施方案中，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐可使得副作用(诸如本文所述的那些中的一种)的严重程度相比于接受已知bcl-2抑制剂(诸如维奈托克、纳维托克、奥巴托克、abt-737、s55746、at-101、apg-1252和apg-2575)的受试者所经历的相同副作用的严重程度低25％。在一些实施方案中，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐使得副作用的数量相比于接受已知bcl-2抑制剂(例如维奈托克、纳维托克、奥巴托克、abt-737、s55746、at-101、apg-1252和apg-2575)的受试者所经历的副作用数量少25％。在一些实施方案中，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐使得副作用(诸如本文所述的那些中的一种)的严重程度相比于接受已知bcl-2抑制剂(例如维奈托克、纳维托克、奥巴托克、abt-737、s55746、at-101、apg-1252和apg-2575)的受试者所经历的相同副作用的严重程度低约10％至约30％的范围。在一些实施方案中，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐使得副作用的数量相比于接受已知bcl-2抑制剂(例如维奈托克、纳维托克、奥巴托克、abt-737、s55746、apg-1252和apg-2575)的受试者所经历的副作用的数量少约10％至约30％的范围。
[0155]
在上文标题为“化合物”下所述的任何实施方案中提供了一种或多种式(i)的化合物或其药学上可接受的盐，其可用于治疗、改善和/或抑制癌症、恶性生长物或肿瘤的复制，其中抑制bcl-2的活性是有益的。例如，在各种实施方案中，使用式(i)的化合物或其药学上可接受的盐以所述的方式(通常涉及癌症、恶性生长物和/或肿瘤)进行上文在本公开的“用途和治疗方法”部分中所述的方法和用途。
[0156]
如本文所用，“受试者”是指动物，其为治疗、观察或实验的对象。“动物”包括冷血和温血脊椎动物和无脊椎动物，诸如鱼、贝类、爬行动物以及特别是哺乳动物。“哺乳动物”包括但不限于小鼠、大鼠、兔子、豚鼠、狗、猫、绵羊、山羊、牛、马、灵长类(例如，猴子、黑猩猩和猿类)以及特别是人。在一些实施方案中，受试者可为人。在一些实施方案中，受试者可为儿童和/或婴儿，例如，发烧的儿童或婴儿。在其他实施方案中，受试者可为成人。
[0157]
如本文所用，术语“治疗”(“treat,”“treating,”“treatment,”“therapeutic,”)和“疗法”不一定意指完全治愈或消除疾病或病症。对疾病或病症的任何非期望迹象或症状的任何程度的减轻均可被认为是治疗和/或疗法。此外，治疗可包括可使受试者的总体健康感觉或外观恶化的行为。
[0158]
术语“治疗有效量”和“有效量”用于指示引起所指示的生物或药物响应的活性化合物或药剂的量。例如，治疗有效量的化合物、盐或组合物可为预防、减轻或改善疾病或病症的症状，或延长被治疗的受试者的存活率所需的量。该响应可在组织、系统、动物或人类中发生，并且包括减轻被治疗的疾病或病症的迹象或症状。根据本文所提供的公开内容，有效量的确定完全在本领域技术人员的能力范围内。本文所公开的化合物的治疗有效量(被要求为剂量)将取决于施用途径、被治疗的动物类型(包括人)以及考虑的特定动物的物理特性。可调制该剂量以实现期望作用，但该剂量将取决于以下因素：如体重、饮食、并存的药物治疗以及医学领域技术人员将认识到的其他因素。
[0159]
例如，有效量的化合物是产生以下效果的量：(a)癌症引起的一种或多种症状减少、减轻或消失，(b)肿瘤尺寸减小，(c)肿瘤消除，以及/或者(d)肿瘤长期疾病稳定(生长停滞)。在肺癌(诸如非小细胞肺癌)的治疗中，治疗有效量是减轻或消除咳嗽、呼吸短促和/或疼痛的量。又如，有效量或治疗有效量的bcl-2抑制剂是使得bcl-2活性降低和/或细胞凋亡增加的量。测量bcl-2活性降低的方法是本领域技术人员已知的，并且可通过分析bcl-2结
合和/或降解，和/或经历细胞凋亡的细胞的相对水平来确定。
[0160]
用于治疗所需的式(i)的化合物或其药学上可接受的盐的量将不仅随所选择的具体化合物或盐而有所不同，而且随施用途径、所治疗的疾病或病症的性质和/或症状以及患者的年龄和病症而有所不同，并且最终将由主治医师或临床医生决定。在施用药学上可接受的盐的情况下，可以游离碱来计算剂量。如本领域技术人员将理解的那样，在某些情况下，可能有必要以超过或甚至远远超过本文所述的剂量范围的量施用本文所公开的化合物，以便有效地且侵袭性地治疗特别具有侵袭性的疾病或病症。
[0161]
然而，一般来讲，合适的剂量将通常在约0.05mg/kg至约10mg/kg的范围内。例如，合适的剂量可以在约0.10mg/kg体重/天至约7.5mg/kg体重/天的范围内，诸如约0.15mg/kg受体体重/天至约5.0mg/kg受体体重/天、约0.2mg/kg受体体重/天至4.0mg/kg受体体重/天，或介于其间之间的任何量。所述化合物可以单位剂型施用；例如，包含1mg至500mg、10mg至100mg、5mg至50mg或介于其间的任何量的活性成分/单位剂型。
[0162]
所需剂量可方便地以单剂量形式或以适当间隔施用的分剂量形式(例如，以每天两次、三次、四次或更多次的亚剂量形式)提供。亚剂量自身可进一步分成(例如)多个离散的松散间隔开的施用。
[0163]
如对本领域技术人员而言将是显而易见的，待施用的可用体内剂量和具体的施用模式将根据年龄、体重、痛苦的严重程度、接受治疗的哺乳动物的物种、采用的具体化合物以及采用这些化合物的特定用途而变化。有效剂量水平的确定(即实现期望结果所必需的剂量水平)可由本领域技术人员使用常规方法来完成，例如，人临床试验、体内研究和体外研究。例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐的可用剂量可通过在动物模型中比较它们的体外活性和体内活性来确定。此类比较可通过与已确立的药物(诸如顺铂和/或吉西他滨)进行比较来完成。
[0164]
可单独地调整剂量和间隔时间，以提供活性部分足以维持调节作用或最小有效浓度(mec)的血浆水平。每种化合物的mec将变化，但可根据体内数据和/或体外数据来估计。实现mec所必需的剂量将取决于个体特性和施用途径。然而，hplc测定或生物测定可用于确定血浆浓度。还可使用mec值来确定剂量间隔时间。应使用将血浆水平保持为比mec高10％至90％、优选地介于30％至90％之间、最优选地介于50％至90％之间的时间的方案来施用组合物。在局部施用或选择性摄取的情况下，药品的有效局部浓度可不与血浆浓度相关。
[0165]
应注意，在出现起因于毒性或器官功能障碍的情况下，主治医师将会知道如何和何时终止、中断或调整施用。相反地，在临床响应不够充分的情况下(排除毒性)，主治医师也将知道将治疗调整到更高水平。在感兴趣的障碍的管理中施用剂量的量值将根据待治疗疾病或病症的严重程度和施用途径而变化。例如，疾病或病症的严重程度可部分地通过标准预后评估方法来评估。此外，剂量和可能的剂量频率也将根据年龄、体重和个体患者的响应而变化。与上文所讨论的程序相当的程序可用于兽医医学。
[0166]
可使用已知方法来评估本文所公开的化合物、盐和组合物的功效和毒性。例如，特定化合物或该化合物的子集(共享某些化学部分)的毒理学可通过确定其对细胞系(诸如，哺乳动物并且优选地人类细胞系)的体外毒性来建立。此类研究的结果通常预测在动物(诸如，哺乳动物或更特别地人类)中的毒性。另选地，可使用已知方法来确定特定化合物在动物模型(诸如小鼠、大鼠、兔子、狗或猴子)中的毒性。可使用几种公认的方法(诸如体外方
法、动物模型或人临床试验)来建立特定化合物的功效。在选择模型来确定功效时，技术人员可遵循现有技术来选择适当的模型、剂量、施用途径和/或方案。
[0167]
实施例
[0168]
在以下实施例中更详细地公开了另外的实施方案，其不旨在以任何方式限制权利要求的范围。
[0169]
中间体1
[0170]
2-(二乙氧基甲基)-5,5-二甲基环己-1-酮
[0171][0172]
在-30℃下，在30分钟内向原甲酸三乙酯(1.32l，7.923mol)在dcm(8.0l)中的溶液中逐滴添加bf3oet2(1.244l，9.9mmol)。将反应混合物温热至0℃并搅拌30分钟。然后将反应混合物冷却至-78℃，并逐滴添加3,3-二甲基环己酮(500g，3.96mol)和n,n-二异丙基乙胺(2.08l，11.9mol)，并将反应在相同的温度下搅拌2小时。然后将反应小心地倒入饱和nahco3水溶液(25l)和dcm(10l)的混合物中。将所得混合物在室温下搅拌15分钟，并分离有机层。将水层用dcm(2
×
10l)萃取，并将合并的有机层用10％nacl(水溶液)(5l)洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过柱色谱法(sio2，etoac/石油醚)纯化，得到中间体1(750g，83％产率)，为淡黄色油状物。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ4.83(d,j＝6.0hz,1h),3.73-3.57(m,4h),2.56-2.53(m,1h),2.20-2.14(m,2h),2.11-2.10(m,1h),1.81(m,1h),1.62-1.56(m,2h),1.21-1.17(m,6h),1.01(s,3h),0.91(s,3h)。
[0173]
中间体2
[0174]
4,4-二甲基-2-(3-甲基双环[1.1.1]戊烷-1-基)环己-1-烯-1-甲醛
[0175][0176]
步骤1：将1-碘-3-甲基双环[1.1.1]戊烷(30g，144.20mmol)在thf(225ml)中的溶液冷却至-78℃，然后在1小时内逐滴添加仲丁基锂(1.4m的环己烷溶液，154.50ml，216.30mmol)。将所得淡黄色悬浮液在-78℃下搅拌10分钟，然后温热至0℃并搅拌80分钟。然后将反应混合物冷却至-78℃，并在20分钟内逐滴添加中间体1(24.67g，108.15mmol)在thf(75ml)中的溶液。10分钟后，将反应温热至0℃保持1小时。然后将反应混合物用饱和nh4cl水溶液(300ml)淬灭，并用et2o(2
×
450ml)萃取。将合并的有机层经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到2-(二乙氧基甲基)-5,5-二甲基-1-(3-甲基双环[1.1.1]戊烷-1-基)环己烷-1-醇(中间体2-1)(31g，粗品)，为淡黄色油状物。其无需进一步纯化即可用于下一步骤。
[0177]
步骤2：在室温下，将中间体2-1(62g，199.69mmol)在1,4-二氧杂环己烷(1.24l)中的溶液用2n hcl(水溶液)(299.5ml，599.2mmol)处理，然后加热至70℃。16小时后，将反应冷却至室温，倒入水(1.24l)中，并用et2o(2
×
750ml)萃取。将合并的有机层经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过柱色谱法(sio2，etoac/石油醚)纯化，得到中间体2(23g，经2个步骤得到36％产率)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,cdcl3):δ10.28(s,1h),2.25-2.22(m,
2h),1.94(s,6h),1.92(br s,2h),1.35-1.32(m,2h),1.19(s,3h),0.90(s,6h)。
[0178]
中间体3
[0179]
2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-甲醛
[0180][0181]
步骤1：cf2hi的制备(基于cao,p.等人的程序，j.chem.soc.,chem.commun.1994,737-738)：分两个平行批次进行：将ki(94g，568mol)、mecn(228ml)和水(18ml)的混合物加热至45℃，并在4小时内用2,2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸(50g，284mmol)在mecn(50ml)中的溶液逐滴处理。然后将反应混合物冷却至0℃，并用戊烷(150ml)和水(125ml)稀释。将水层用戊烷(150ml)洗涤，并将来自两个反应的合并的有机层用饱和nahco3水溶液(200ml)洗涤，并经na2so4干燥，得到500ml二氟甲基碘溶液。将溶液用另外的水(2
×
200ml)洗涤以去除残留的乙腈，并经na2so4干燥，得到二氟碘甲烷(中间体3-1)(0.15m的戊烷溶液，400ml，11％产率)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.67(t,j＝56.0hz,1h)。
[0182]
步骤2：在-40℃下，向[1.1.1]螺桨烷(0.53m的et2o溶液，52ml，27.56mmol)的搅拌溶液中添加中间体3-1(0.15m的戊烷溶液，200ml，30mmol)。将反应混合物温热至室温，避光，并搅拌2天。然后将反应在0-10℃下浓缩，得到1-(二氟甲基)-3-碘双环[1.1.1]戊烷(中间体3-2)(5g，20.5mmol，74％产率)，为白色固体。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ5.65(t,j＝56.0hz,1h),2.40(s,6h)。
[0183]
步骤3：将中间体3-2(30g，122.94mmol)在thf(225ml)中的溶液冷却至-78℃，并在1小时内逐滴添加仲丁基锂(1.4m的环己烷溶液，219ml，306.7mmol)。将所得淡黄色悬浮液在-78℃下搅拌10分钟，并将温度升至0℃并搅拌80分钟。然后将反应混合物冷却至-78℃，并在20分钟内将中间体1(21g，92.20mmol)在thf(75ml)中的溶液逐滴添加到反应中。10分钟后，将反应温热至0℃保持1小时。将反应混合物用饱和nh4cl水溶液(450ml)淬灭，并用et2o(2
×
300ml)萃取。将合并的有机层经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到2-(二乙氧基甲基)-1-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-5,5-二甲基环己-1-醇(中间体3-3)(31g，粗品)，为淡黄色油状物。粗产物无需进一步纯化即可用于下一步骤。
[0184]
步骤4：按照针对中间体2的步骤2中所述的程序，使用中间体3-3代替中间体2-1(经2个步骤得到38％)，制备中间体3。1h nmr(400mhz,cdcl3):δ10.26(s,1h),5.73(t,j＝56.0hz,1h),2.29-2.25(m,2h),2.18(s,6h),1.94-1.93(m,2h),1.37(t,j＝6.8hz,2h),0.91(s,6h)。
[0185]
中间体4
[0186]
2-(3-乙基双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-甲醛
[0187][0188]
步骤1：在-78℃下，向[1.1.1]螺桨烷(0.19m的et2o/戊烷溶液，128.6mmol)的搅拌溶液中添加eti(18.7g，257.38mmol)。将反应温热至室温，并在黑暗中搅拌3天。然后将反应
在0℃下浓缩，得到1-乙基-3-碘双环[1.1.1]戊烷(中间体4-1)(21.2g，74％产率)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ2.17(s,6h),1.52(q,j＝8.0hz,2h),0.84(t,j＝7.2hz,3h)。
[0189]
步骤2：在-78℃下，向中间体4-1(10.90g，49.1mmol)在et2o(75ml)中的搅拌溶液中添加仲丁基锂(1.4m的环己烷溶液，50ml，70.0mmol)。10分钟后，将反应温热至室温并搅拌1小时。然后将反应混合物冷却至-78℃，并用2-(二乙氧基甲基)-5,5-二甲基环己-1-酮(8g，35.0mmol)在et2o(25ml)中的溶液处理。1小时后，将反应温热至0℃并搅拌2小时。将反应用饱和nh4cl水溶液(20ml)淬灭，并用etoac(3
×
70ml)萃取。然后将合并的有机层经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到8.5g粗品2-(二乙氧基甲基)-1-(3-乙基双环[1.1.1]戊烷-1-基)-5,5-二甲基环己-1-醇(中间体4-2)。其无需进一步纯化即可用于下一步骤。
[0190]
步骤3：在室温下，将中间体4-2(8.5g，粗品)在丙酮(80ml)中的溶液用2n hcl(水溶液)(20ml)处理，然后温热至75℃。24小时后，将反应浓缩，然后用水(50ml)稀释，并用et2o(3
×
250ml)萃取。将合并的有机层用饱和nahco3水溶液洗涤，经na2so4干燥并浓缩。将粗产物通过柱色谱法(sio2，et2o/石油醚)纯化，得到中间体4(3.9g，经2个步骤得到48％产率)，为棕色油状物。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ10.30(s,1h),2.26-2.22(m,2h),1.93-1.92(m,2h),1.89(s,6h),1.49(q,j＝7.2hz,2h),1.33(t,j＝6.4hz,2h),0.89(s,6h),0.87(t,j＝7.6hz,3h)。
[0191]
中间体5
[0192]
4-(4-((4,4-二甲基-2-(3-甲基双环[1.1.1]戊烷-1-基)环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸
[0193][0194]
步骤1：在室温下，向4-(哌嗪-1-基)苯甲酸甲酯(1.68g，7.6mmol)和中间体2(2.0g，9.15mmol)在thf(20ml)中的搅拌溶液中添加na(oac)3bh(4.8g，22.8mmol)。16小时后，将反应物放入冰浴中，并用饱和nahco3水溶液(25ml)淬灭。将反应混合物用etoac(3
×
50ml)萃取，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过柱色谱法(sio2，etoac/石油醚)纯化，得到4-(4-((4,4-二甲基-2-(3-甲基双环[1.1.1]戊烷-1-基)环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸甲酯(中间体5-1)，为白色固体(1.5g，46％产率)。lc/ms(esi)m/z 423.2[m h]

。
[0195]
步骤2：步骤2：在室温下，向中间体5-1(500mg，1.18mmol)在meoh:thf:h2o(1:1:1)(6ml)中的搅拌溶液中添加lioh
·
h2o(148mg，3.4mmol)。将反应加热至30℃，并搅拌16小时。然后去除挥发性溶剂，并将反应用1n hcl中和，并用95:5dcm:meoh(3
×
25ml)萃取。将合并的有机层经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到中间体5(350mg，73％产率)，为白色固体。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ12.25(br s,1h),7.75(d,j＝9.0hz,2h),6.95(d,j＝9.0hz,2h),3.32-3.25(m,4h),3.03(s,2h),2.45-2.35(m,4h),2.06-2.04(m,2h),1.79(s,6h),1.68(s,
2h),1.26(t,j＝6.3hz,2h),1.12(s,3h),0.85(s,6h)；lc/ms(esi)m/z 409.5[m h]

。
[0196]
中间体6
[0197]
4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸
[0198][0199]
步骤1：按照针对中间体5的步骤1中所述的程序，使用中间体3代替中间体2，制备4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸甲酯(中间体6-1)。lc/ms(esi)m/z459.6[m h]

。
[0200]
步骤2：按照针对中间体5的步骤2中所述的程序，使用中间体6-1代替中间体5-1，制备中间体6。lc/ms(esi)m/z 445.6[m h]

。
[0201]
中间体7
[0202]
4-(4-((2-(3-乙基双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸
[0203][0204]
步骤1：按照针对中间体5的步骤1中所述的程序，使用中间体4代替中间体2，制备4-(4-((2-(3-乙基双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸甲酯(中间体7-1)。lc/ms(esi)m/z 437.3[m h]

。
[0205]
按照针对中间体5的步骤2中所述的程序，使用中间体7-1代替中间体5-1，制备中间体7。lc/ms(esi)m/z 423.3[m h]

。
[0206]
中间体8
[0207]
(r)-4-(4-(4-羟基哌啶-1-基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基氨基)-3-(三氟甲基磺酰基)苯磺酰胺
[0208]
[0209]
步骤1：在0℃下，向(r)-3-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-4-(苯硫基)丁酸(6.8g，15.7mmol)在dcm(70ml)和dmf(10ml)中的搅拌溶液中先后添加hatu(9.5g，25.12mmol)和dipea(8.3ml，47.1mmol)。10分钟后，添加4-羟基哌啶(2.4g，23.55mmol)，并将温度升至室温。16小时后，将反应用水稀释，并用etoac萃取。将合并的有机层经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过柱色谱法(sio2，meoh/dcm)纯化，得到(r)-(9h-芴-9-基)甲基-4-(4-羟基哌啶-1-基)-4-氧代-1-(苯硫基)丁烷-2-基氨基甲酸酯(中间体8-1)(5.5g，68％产率)，为棕色油状物。lc/ms(esi)m/z 517.6[m h]

。
[0210]
步骤2：在室温下，向中间体8-1(2.75g，5.32mmol)在ch3cn(20ml)中的搅拌溶液中添加二乙胺(3.3ml，31.92mmol)，并在室温下搅拌。16小时后，将反应浓缩并通过柱色谱法(中性氧化铝，meoh/dcm)纯化，得到(r)-3-氨基-1-(4-羟基哌啶-1-基)-4-(苯硫基)丁烷-1-酮(中间体8-2)(900mg，57％产率)，为棕色液体。lc/ms(esi)m/z295.1[m h]

。
[0211]
步骤3：在0℃下，向中间体8-2(0.9g，3.06mmol)在无水thf(12ml)中的搅拌溶液中添加bh3(1m的thf溶液，9.18ml，9.18mmol)，并将温度升至45℃。16小时后，将反应冷却至0℃，并添加meoh(30ml)。1小时后，将反应浓缩并通过柱色谱法(c18，ch3cn/水)纯化，得到(r)-1-(3-氨基-4-(苯硫基)丁基)哌啶-4-醇(中间体8-3)(305mg，36％产率)，为灰白色半固体。lc/ms(esi)m/z 281.2[m h]

。
[0212]
步骤4：在室温下，向中间体8-3(100mg，0.357mmol)在dmf(1ml)中的搅拌溶液中先后添加4-氟-3-(三氟甲基磺酰基)苯磺酰胺(99mg，0.32mmol)和dipea(140mg，1.07mmol)，并将所得反应混合物在室温下搅拌。16小时后，将反应浓缩，用水稀释，并用9:1dcm:meoh(2
×
10ml)萃取。将合并的有机层经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过用etoac/et2o研磨来纯化，得到中间体8(105mg，51％产率)，为白色固体。lc/ms(esi)m/z 568.1[m h]

。
[0213]
中间体9
[0214]
(r)-4-(4-(苯硫基)-3-((4-氨磺酰基-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)丁基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[0215][0216]
步骤1：在室温下，向(r)-4-(苯硫基)-3-((4-氨磺酰基-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)丁酸(按照专利wo2012017251a1中所述的程序制备)(500mg，1.0mmol)、dmap(122mg，1.0mmol)和edc
·
hcl(288mg，1.50mmol)在dcm(10ml)中的搅拌溶液中添加哌嗪-1-羧酸叔丁酯(220mg，1.20mmol)和et3n(0.28ml，2.00mmol)。15分钟后，将反应加热至35℃并搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温，用dcm(50ml)和meoh(5ml)稀释，并用10％ch3co2h(水溶液)(2
×
15ml)洗涤。将有机层用5％nahco3(水溶液)(2
×
10ml)和5％nacl(水溶液)(2
×
10ml)洗涤，并浓缩。将粗产物通过柱色谱法(sio2，dcm/meoh)纯化，得到(r)-4-(4-(苯硫基)-3-((4-氨磺酰基-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)-氨基)丁酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体9-1)(420mg，62％产率)。lc/ms(esi)m/z 665.4[m-h]-。
[0217]
步骤2：在0℃下，向中间体9-1(300mg，0.45mmol)在thf(30ml)中的搅拌溶液中添加bh3·
thf(1m的thf溶液，2.25ml，2.25mmol)。将所得反应混合物在密封管中加热至55℃
保持16小时。然后将反应冷却至0℃，并用meoh(4ml)处理，并加热至40℃。12小时后，将反应浓缩并将粗产物通过柱层析法(c18，dcm/meoh)纯化，得到中间体9(150mg，51％产率)。lc/ms(esi)m/z 653.2[m h]

。
[0218]
一般程序a：酰基磺酰胺的形成
[0219][0220]
在室温下，向对应的磺酰胺b(1.0当量)在dcm(0.01-0.1m)中的溶液中添加edc
·
hcl(1.5-1.75当量)和dmap(1-2.5当量)。在单独的烧瓶中，将适当的酸a(1-1.1当量)溶于dcm(0.02-0.1m)中并用et3n(2-2.5当量)处理。(注释#1和2)。将酸溶液添加到磺酰胺悬浮液中，并在室温下搅拌和/或加热至35℃。通过lcms确定完成后，将n,n-二甲基乙二胺(2-2.5当量，注释#3)添加到反应混合物中，并将反应搅拌90分钟。然后将反应混合物先后用10％acoh水溶液(注释#4)、5％nahco3(水溶液)和5％nacl(水溶液)洗涤。将有机层干燥，过滤并浓缩。将粗产物c通过以下方法纯化：1)柱色谱法(sio2)，2)hplc(10mm nh4co3h(水溶液):ch3cn或meoh)，或者3)用有机溶剂研磨。
[0221]
注释#1：在一些情况下，未添加dcm。
[0222]
注释#2：在一些情况下，将et3n添加到含有磺酰胺b的烧瓶中。
[0223]
注释#3：在一些情况下，在后处理过程中未添加n,n-二甲基乙二胺。
[0224]
注释#4：在一些情况下，将有机层用dcm和meoh稀释以溶解粗产物。
[0225]
中间体10
[0226]
(r)-4-(4-((4,4-二甲基-2-(3-甲基双环[1.1.1]戊烷-1-基)环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-((4-(4-羟基哌啶-1-基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0227][0228]
一般程序a的代表性实施例：在室温下，向中间体8(138.9mg，0.24mmol)、dmap(29.9mg，0.245mmol)、edc
·
hcl(70.3mg，0.37mmol)在dcm(5ml)中的搅拌溶液中添加中间体5(100mg，0.24mmol)和et3n(68μl，0.49mmol)的混合物。将所得反应混合物在室温下搅拌并且然后加热至35℃并搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温，用dcm(48.5ml)和meoh
(2.5ml)稀释，用10％acoh(水溶液)(2
×
100ml)、5％nahco3(水溶液)(2
×
10ml)和5％nacl(水溶液)(2
×
10ml)洗涤。将有机层经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过hplc(30:70至0:100 10mm nh4co3h(水溶液)/ch3cn)纯化，得到中间体10(55mg，23％产率)，为灰白色固体。lc/ms(esi)m/z 958.2[m h]

。
[0229]
中间体11
[0230]
(r)-4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-((4-(4-羟基哌啶-1-基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0231][0232]
按照一般程序a，使用中间体6和中间体8制备中间体11。lc/ms(esi)m/z 994.6m h]

。
[0233]
中间体12
[0234]
(r)-4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-((1-(苯硫基)-4-(哌嗪-1-基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0235][0236]
步骤1：按照一般程序a，使用中间体6和中间体9制备(r)-4-(3-((4-(n-(4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)氨磺酰基)-2-((三氟-甲基)磺酰基)苯基)氨基)-4-(苯硫基)丁基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体12-1)。lc/ms(esi)m/z 1079.3[m h]

[0237]
步骤2：在0℃下，向中间体12-1(350mg，0.32mmol)在et2o(5ml)中的搅拌溶液中添加hcl(2m的et2o溶液，2.0ml)。将反应温热至室温并搅拌16小时。将反应浓缩，用冰冷的水稀释，用饱和nahco3水溶液(10ml)处理，并用10％meoh的dcm溶液(3
×
30ml)萃取。将合并的有机层在无水na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过hplc(30:70至1:99 10mm nh4co3h(水溶液)/ch3cn)纯化，得到中间体12(14mg，4％产率)，为灰白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.32(br s,2h),8.02(s,1h),7.91(d,j＝8.8hz,1h),7.68(d,j＝8.8hz,2h),7.34-7.23(m,4h),7.19-7.15(m,1h),6.83-6.75(m,3h),6.66(d,j＝8.8hz,1h),5.97(t,j＝56.8hz,1h),3.97(br s,1h),3.26-3.23(m,2h),3.15-3.10(m,4h),3.02-2.90(m,6h),2.52-2.50(m,2h),2.40-2.23(m,8h),2.10-1.83(m,9h),1.67(s,3h),1.23(t,j＝6.4hz,2h),0.82(s,6h)；lc/ms(esi)m/z 979.4[m h]

。
[0238]
中间体13
[0239]
(r)-4-(4-((4,4-二甲基-2-(3-甲基双环[1.1.1]戊烷-1-基)环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-((1-(苯硫基)-4-(哌嗪-1-基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0240]
步骤1：按照一般程序a，使用中间体5和中间体9制备(r)-4-(3-((4-(n-(4-(4-((4,4-二甲基-2-(3-甲基双环[1.1.1]戊烷-1-基)环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)氨磺酰基)-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)-4-(苯硫基)丁基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体13-1)。lc/ms(esi)m/z 1043.6[m h]

。
[0241]
步骤2：在0℃下，向中间体13-1(800mg，0.767mmol)在et2o(8ml)中的搅拌溶液中添加2m hcl的et2o溶液(8ml)，并将反应温热至室温。16小时后，将反应混合物浓缩，并且然后溶于10％meoh的dcm溶液(50ml)中。将有机层用饱和nahco3水溶液(2
×
20ml)、盐水(2
×
20ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到中间体13(550mg，76％产率)，为灰白色固体。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.05(d,j＝2.0hz,1h),7.94(dd,j＝9.2,7.2hz,1h),7.72(d,j＝8.8hz,2h),7.37-7.35(m,2h),7.31(t,j＝5.6hz,2h),7.22-7.20(m,1h),6.85-6.79(m,3h),6.69(d,j＝9.2hz,1h),4.00-3.99(m,1h),3.31-3.23(m,4h),3.15(s,4h),3.01-2.97(m,6h),2.49-2.33(m,9h),2.03-1.99(m,3h),1.79-1.67(m,9h),1.26-1.23(m,3h),1.11(s,3h),0.84(s,6h)；lc/ms(esi)m/z 943.5[m h]

。
[0242]
中间体14
[0243]
(r)-4-(4-((2-(3-乙基双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-((4-(4-羟基哌啶-1-基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0244]
按照一般程序a，使用中间体7和中间体8制备中间体14。
[0245]
中间体15
[0246]
(r)-4-(4-((2-(3-乙基双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-((1-(苯硫基)-4-(哌嗪-1-基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺
酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0247]
步骤1：按照一般程序a，使用中间体7和中间体9制备(r)-4-(3-((4-(n-(4-(4-((2-(3-乙基双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)氨磺酰基)-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)-4-(苯硫基)丁基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体15-1)。
[0248]
步骤2：按照针对中间体12的步骤2中所述的程序，使用中间体15-1代替中间体12-1，制备中间体15。
[0249]
中间体16
[0250]
2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-((2-(2-(丙-2-炔-1-基氧基)乙氧基)乙基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮
[0251][0252]
在室温下，向2-[2-(2-丙炔-1-基氧基)乙氧基]乙胺(116.6mg，0.81mmol)在1-甲基-2-吡咯烷酮(3ml)中的溶液中添加dipea(210.6mg，1.63mmol)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚啉-1,3-二酮(150mg，0.54mmol)。然后将反应混合物加热到80℃。12小时后，将反应混合物冷却至室温，并将水(20ml)添加到反应混合物中。将反应用etoac萃取，并将合并的有机层经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过柱色谱法(sio2)纯化，得到中间体16(0.12g，55％产率)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.93(s,1h),7.55-7.47(m,1h),7.12(d,j＝7.0hz,1h),6.94(d,j＝8.5hz,1h),6.49(s,1h),4.96-4.89(m,1h),4.92(dd,j＝12.1,5.4hz,1h),4.22(d,j＝2.3hz,2h),3.75-3.70(m,6h),3.50(q,j＝5.4hz,2h),2.88-2.76(m,3h),2.44(t,j＝2.4hz,1h),2.18-2.10(m,1h)。
[0253]
中间体17
[0254]
4-((2-(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙基)氨基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮
[0255]
[0256]
步骤1：在室温下，向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚啉-1,3-二酮(2.50，9.05mmol)和(2-(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(2.69，10.9mmol)在dmso(25ml)中的溶液中添加dipea(3.23ml，18.1mmol)，并将反应混合物加热至90℃。16小时后，将反应冷却至室温并添加水(25ml)。将反应混合物用10％meoh的dcm溶液(3
×
75ml)萃取，并将合并的有机层用盐水(2
×
25ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到(2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体17-1)(950mg，20％产率)，为黄色固体。lc/ms(esi)m/z 505.3[m h]

。
[0257]
步骤2：在0℃下将中间体17-1(500mg，1.00mmol)在dcm(5ml)中的溶液用tfa(5当量)处理，并且然后温热至室温。2小时后，将反应混合物浓缩，并且然后用20％et2o的正戊烷溶液研磨，得到中间体18的tfa盐(350mg，70％产率)，为无色油状物。lc/ms(esi)m/z 405.5[m h]

。
[0258]
中间体18
[0259]
甲磺酸2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙酯
[0260][0261]
步骤1：在室温下，向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚啉-1,3-二酮(1.0g，3.62mmol)在dmso(5ml)中的搅拌溶液中添加2-(2-氨基乙氧基)乙-1-醇(0.571mg，5.43mmol)，然后添加dipea(1.29ml，7.29mmol)。将反应加热至90℃并搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温并通过柱色谱法(sio2，meoh/dcm)纯化，得到2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-((2-(2-羟基乙氧基)乙基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮(中间体18-1)(530mg，40％产率)，为黄色固体。lc/ms(esi)m/z 362.3[m h]

[0262]
步骤2：在0℃下，向中间体18-1(160mg，0.44mmol)在dcm(4ml)中的搅拌溶液中添加三乙胺(0.43ml，3.09mmol)和mscl(0.05ml，0.75mmol)，并将反应温热至室温。3小时后，将反应混合物用冰冷的水稀释，并用dcm(2
×
20ml)萃取。将合并的有机层用饱和nahco3水溶液(2
×
5ml)、盐水(10ml)洗涤，经na2so4干燥并浓缩，得到中间体18(190mg，97％粗品)，为黄色油状物。粗产物无需进一步纯化即可使用。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.00(s,1h),7.53-7.49(m,1h),7.12(d,j＝6.8hz,1h),6.93(d,j＝8.4hz,1h),6.48(t,j＝5.2hz,1h),4.93-4.89(m,1h),4.39-4.36(m,2h),3.79-3.72(m,4h),3.51-3.47(m,2h),3.04(s,3h),2.76-2.72(m,2h),2.17-2.12(m,2h)；lc/ms(esi)m/z 440.3[m h]

。
[0263]
中间体19
[0264]
2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-((2-(2-(2-碘乙氧基)乙氧基)乙基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮
[0265]
[0266]
步骤1：按照针对中间体18的步骤1中所述的程序，使用2-(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙醇代替2-(2-氨基乙氧基)乙-1-醇，制备2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-((2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮(中间体19-1)。lc/ms(esi)m/z 406.2[m h]

。
[0267]
步骤2：按照针对中间体18的步骤2中所述的程序，使用中间体19-1代替中间体18-1，制备甲磺酸2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙酯(中间体19-2)。lc/ms(esi)m/z 484.5[m h]

。
[0268]
步骤3：在室温下，将中间体19-2(350mg，0.72mmol)在ch3cn(3ml)中的搅拌溶液用nai(130mg，0.86mmol)处理，并且然后加热至90℃保持16小时。将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤。将硅藻土用etoac(3
×
25ml)洗涤，并将合并的有机层浓缩。将粗产物通过柱色谱法(sio2，etoac/石油醚)纯化，得到中间体19(230mg，经两个步骤得到60％产率)，为黄色固体。lc/ms(esi)m/z 516.1[m h]

。
[0269]
中间体20
[0270]
2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-((2-(2-(2-(2-碘乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮
[0271]
步骤1：按照针对中间体18的步骤1中所述的程序，使用2-(2-(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙-1-醇代替2-(2-氨基乙氧基)乙-1-醇，制备2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-((2-(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮(中间体20-1)。lc/ms(esi)m/z 450.1[m h]

。
[0272]
步骤2：按照针对中间体18的步骤2中所述的程序，使用中间体20-1代替中间体18-1，制备甲磺酸2-(2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-yl)氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯(中间体20-2)。lc/ms(esi)m/z 528.3[m h]

。
[0273]
步骤3：按照针对中间体19的步骤3中所述的程序，使用中间体20-2代替中间体19-2，制备中间体20。lc/ms(esi)m/z 560.2[m h]

。
[0274]
中间体21
[0275]
(r)-1-(4-(苯硫基)-3-((4-氨磺酰基-2-(三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)丁基)哌啶-4-羧酸叔丁酯
[0276][0277]
在室温下，向哌啶-4-羧酸叔丁酯(365.2mg，1.97mmol)在thf(15ml)中的搅拌溶液中添加(r)-4-((4-氧代-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯磺酰胺
(按照wo2012017251a1中所述的程序制备)(950mg，1.97mmol)在thf(10ml)中的溶液。1小时后，将反应冷却至0℃，并添加na(oac)3bh(1.25g，5.91mmol)，并将反应温热至室温，并搅拌16小时。将反应混合物用饱和nahco3水溶液(15ml)淬灭，并用etoac(2
×
20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(15ml)洗涤，经na2so4干燥并浓缩。将粗产物通过柱色谱法(sio2，meoh/dcm)纯化，得到中间体21(500mg，49％产率)，为灰白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.98(d,j＝2.4hz,1h),7.83(dd,j＝9.2,2.0hz,1h),7.39-7.29(m,6h),7.22-7.18(m,1h),7.03(d,j＝9.6hz,1h),6.93(d,j＝8.8hz,1h),4.09-4.08(m,1h),3.40-3.22(m,2h),2.78-2.75(m,1h),2.55-2.51(m,1h),2.31-2.08(m,3h),1.97-1.89(m,2h),1.92-1.46(m,4h),1.50-1.44(m,2h),1.46(s,9h)；lc/ms(esi)m/z 652.1[m h]

。
[0278]
中间体22
[0279]
(r)-1-(3-((4-(n-(4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)氨磺酰基)-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)-4-(苯硫基)丁基)哌啶-4-羧酸
[0280][0281]
步骤1：按照一般程序a，使用中间体6和中间体21制备(r)-1-(3-((4-(n-(4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)氨磺酰基)-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)-4-(苯硫基)丁基)哌啶-4-羧酸叔丁酯(中间体22-1)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.35(s,1h),8.06(dd,j＝8.8,1.6hz,1h),7.72(d,j＝8.4hz,2h),7.35-7.28(m,2h),7.24-7.22(m,3h),7.01(d,j＝5.6hz,1h),6.82(d,j＝8.4hz,2h),6.61(d,j＝9.6hz,1h),5.81(t,j＝56.8hz,1h),3.93-3.89(m,1h),3.30(br s,4h),3.06(br s,4h),2.90-2.87(m,1h),2.77-2.74(m,1h),2.50-2.45(m,7h),2.23-2.10(m,7h),2.05(s,6h),1.98-1.89(m,3h),1.78-1.73(m,3h),1.44(s,9h),1.32-1.29(m,2h),0.9(s,6h)；lc/ms(esi)m/z 1078.5[m h]

。
[0282]
步骤2：在0℃下，向中间体22-1(900mg，0.834mmol)在dcm(10ml)中的搅拌溶液中添加tfa(10ml)。将反应温热至室温并搅拌5小时。将反应混合物浓缩并用et2o和戊烷研磨，得到中间体22的tfa盐(900mg)，为灰白色固体。lc/ms(esi)m/z 1022.5[m h]

。
[0283]
中间体23
[0284]
甲磺酸2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-5-基)氨基)乙氧基)乙酯
[0285]
[0286]
步骤1：在室温下，向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚啉-1,3-二酮(700mg，2.53mmol)在nmp(9ml)和dmso(1ml)中的搅拌溶液中添加2-(2-氨基乙氧基)乙-1-醇(266mg，2.53mmol)，然后添加dipea(652mg，5.06mmol)。将反应加热至90℃并搅拌12小时。将反应混合物冷却至室温，用冰冷的水稀释，并用etoac(3
×
50ml)萃取。将合并的有机层用水(2
×
50ml)、盐水(2
×
10ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过柱色谱法(sio2，meoh/dcm)纯化，得到2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-((2-(2-羟基乙氧基)乙基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮(中间体23-1)(200mg，22％产率)，为灰白色固体。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.94(s,1h),7.62(d,j＝8.4hz,1h),7.01-6.99(m,1h),6.78(d,j＝8.4,2.0hz,1h),4.95-4.87(m,2h),3.81-3.74(m,4h),3.64-3.62(m,2h),3.44(q,j＝5.2hz,2h),2.84-2.73(m,3h)。2.17-2.11(m,1h),1.83(t,j＝6.0hz,1h)；lc/ms(esi)m/z 362.5[m h]

。
[0287]
步骤2：在0℃下，向中间体23-1(160mg，0.44mmol)在dcm(10ml)中的搅拌溶液中添加甲磺酰氯(0.04ml，0.531mmol)和tea(0.25ml，1.77mmol)。然后将反应温热至室温并搅拌2小时。将反应用冰冷的水淬灭，并用dcm(2
×
30ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2
×
10ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩得到中间体23(150mg，77％粗产率)，为黄色油状物。粗产物无需进一步纯化即可使用。lc/ms(esi)m/z 440.1[m h]

。
[0288]
中间体24
[0289]
2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-(2-(2-碘乙氧基)乙氧基)异吲哚啉-1,3-二酮
[0290]
步骤1：向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-羟基异吲哚啉-1,3-二酮(0.5g，1.82mmol)在dmf(5ml)中的搅拌溶液中添加nahco3(0.3g，3.64mmol)，随后添加ki(0.06g，0.364mmol)。10分钟后，添加2-(2-氯乙氧基)乙-1-醇(0.35g，2.73mmol)，并将所得反应混合物加热至70℃并搅拌12小时。然后将反应混合物冷却至室温，用冰冷的水稀释，并用10％meoh的dcm溶液(3
×
100ml)萃取。将合并的有机层用水(2
×
30ml)、盐水(2
×
25ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过柱色谱法(sio2，etoac/石油醚)纯化，得到2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)异吲哚啉-1,3-二酮(中间体24-1)(230mg，034％产率)，为灰白色油状物。lc/ms(esi)m/z 363.3[m h]

。
[0291]
步骤2：按照针对中间体23的步骤2中所述的程序，使用中间体24-1代替中间体23-1，制备甲磺酸2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-5-基)氧基)乙氧基)乙酯(中间体24-2)。lc/ms(esi)m/z 441.2[m h]

。
[0292]
步骤3：向中间体24-2(250mg，0.52mmol)在ch3cn(5ml)中的搅拌溶液中添加nai(0.154mg，1.04mmol)，并将所得反应混合物加热至90℃并搅拌2小时。然后将反应冷却至室温，用冰冷的水(50ml)淬灭，并用etoac(2
×
100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2
×
25ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到中间体24(200mg，74％粗产率)，为黄色油状物。粗产物无需进一步纯化即可使用。lc/ms(esi)m/z 473.2[m h]

。
[0293]
中间体25
[0294]
甲磺酸2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-5-基)氧基)乙氧基)乙酯
[0295][0296]
步骤1：按照针对中间体24的步骤1中所述的程序，使用2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-羟基异吲哚啉-1,3-二酮代替2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-羟基异吲哚啉-1,3-二酮，制备2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)异吲哚啉-1,3-二酮(中间体25-1)。lc/ms(esi)m/z 363.3[m h]

。
[0297]
步骤2：按照针对中间体23的步骤2中所述的程序，使用中间体25-1代替中间体23-1，制备中间体25。lc/ms(esi)m/z 441.2[m h]

。
[0298]
中间体26
[0299]
(r)-4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-((4-(甲基氨基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0300][0301]
步骤1：按照一般程序a，使用中间体6和(r)-4-(苯硫基)-3-((4-氨磺酰基-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)丁酸甲酯(按照专利wo2012017251a1中所述的程序制备)，制备(r)-3-((4-(n-(4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)氨磺酰基)-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)-4-(苯硫基)丁酸甲酯(中间体26-1)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.39(d,j＝2.4hz,1h),8.15(dd,j＝9.2,2.0hz,1h),7.64(d,j＝8.8hz,2h),7.42(m,3h),7.39-7.28(m,3h),6.81(d,j＝8.8hz,2h),6.52(d,j＝9.2hz,1h),5.67(t,j＝56.4hz,1h),4.10-4.03(m,1h),3.68(s,3h),3.33-3.31(m,4h),3.14-3.08(m,4h),2.80-2.78(m,2h),2.51(t,j＝4.8hz,4h),2.10-2.04(m,2h),2.01(s,6h),1.70(s,2h),1.32-1.24(m,2h),0.88(s,6h)，未观察到nh质子；lc/ms(esi)m/z 939.5[m h]

。
[0302]
步骤2：在-78℃下，向中间体26-1(480mg，0.51mmol)在dcm(40ml)中的搅拌溶液中添加dibal-h(1.0m的甲苯溶液，1.53ml，1.53mmol)。3小时后，将反应混合物在-78℃下用meoh(3ml)淬灭，温热至0℃，并用饱和酒石酸钾钠水溶液(10ml)和dcm(20ml)处理。1小时后，分离有机层，经na2so4干燥并浓缩，得到(r)-4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-((4-氧代-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺(中间体26-2)(420mg，90％粗产率)，为灰白色固体。粗产物无需进一步纯化即可使用lc/ms(esi)m/z 909.52[m h]

。
[0303]
步骤3：在室温下，向盐酸甲胺(62mg，0.92mmol)在thf(10ml)中的搅拌溶液中添加中间体26-2(420mg，0.46mmol)。2小时后，将反应冷却至0℃，并且添加na(oac)3bh(293mg，1.38mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌16小时。将反应混合物用饱和nahco3水溶液
(10ml)淬灭，并用etoac(3
×
25ml)萃取。将合并的有机层经na2so4干燥，并浓缩。将粗产物通过柱色谱法(sio2，meoh/dcm)纯化，得到中间体26(140mg，33％产率)，为灰白色固体。lc/ms(esi)m/z 924.6[m h]

。
[0304]
中间体27
[0305]
4-(4-((2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)甲基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)丁酸
[0306][0307]
步骤1：在室温下，向中间体16(220mg，0.55mmol)在meoh(3ml)中的溶液中添加cui(104.9mg，0.55mmol)和4-叠氮丁酸叔丁酯(122.5mg，0.66mmol)，并将反应在60℃下搅拌12小时。然后将反应混合物冷却至室温，并在etoac(50ml)和水(10ml)之间分配，并且浓缩有机相。将残余物通过柱色谱法(sio2，etoac/石油醚)纯化，得到4-(4-((2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)甲基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)丁酸叔丁酯(中间体27-1)(0.18g，56％产率)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.19(br s,1h),7.59(s,1h),7.53-7.43(m,1h),7.11(d,j＝6.8hz,1h),6.99(s,1h),6.93(d,j＝8.6hz,1h),4.93(dd,j＝12.0,5.4hz,1h),4.75-4.65(m,2h),4.48-4.32(m,2h),3.76-3.67(m,6h),3.49-3.48(m,2h),2.91-2.76(m,3h),2.31-2.15(m,5h),1.45(s,9h)。
[0308]
步骤2：将中间体27-1在4m hcl的二氧杂环己烷溶液(20ml)中的溶液在室温下搅拌2小时。将反应混合物浓缩，得到残余物，该残余物通过hplc(85:15至65:35h2o(0.075％tfa))/ch3cn)纯化，得到中间体27(0.08g，74％产率)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝8.99(br s,1h),7.62(s,1h),7.50(t,j＝7.8hz,1h),7.12(d,j＝6.8hz,1h),6.91(d,j＝8.2hz,1h),4.98-4.91(m,1h),4.72(s,2h),4.51-4.42(m,2h),3.77-3.67(m,6h),3.47(br s,2h),2.89-2.76(m,3h),2.40-2.14(m,5h)。
[0309]
实施例1
[0310]
4-((r)-3-((4-(n-(4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)氨磺酰基)-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)-4-(苯硫基)丁基)-n-(2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙基)哌嗪-1-甲酰胺
[0311][0312]
在室温下，向中间体17(153mg，0.30mmol)在dcm(5ml)中的搅拌溶液中添加tea(85μl，0.612mmol)和羰基二咪唑(99.2mg，0.612mmol)。2小时后，添加中间体12(100mg，0.102mmol)和dipea(7.5μl，0.06mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用饱和nh4cl水溶液(5ml)淬灭并用dcm(3
×
25ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2
×
25ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过柱色谱法(sio2，meoh/dcm)纯化，得到实施例9，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.08(s,1h),8.11(s,1h),7.94(d,j＝8.4hz 1h),7.73(d,j＝8.8hz,2h),7.57(t,j＝7.2hz,1h),7.38-7.25(m,4h),7.20-7.16(m,2h),7.05-6.75(m,4h),6.60(t,j＝5.6hz,1h),6.58-6.40(m,1h),6.00(t,j＝56.8hz,1h),5.06-5.02(m,1h),4.10-4.00(m,1h),3.65-3.42(m,12h),3.35-3.00(m,12h),3.90-2.75(m,2h),2.65-2.53(m,4h),2.50-2.20(m,7h),2.10-1.95(m,10h),1.90-1.70(m,3h),1.35-1.20(m,4h),0.86(s,6h)；lc/ms(esi)m/z 1409.4[m h]

。
[0313]
实施例2
[0314]
4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-(((2r)-4-(4-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙基)哌嗪-1-基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0315][0316]
在室温下，向中间体12(220mg，0.224mmol)在1,4-二氧杂环己烷(5ml)中的搅拌溶液中添加中间体18(157.0mg，0.359mmol)，然后添加nai(3.0mg，0.022mmol)和dipea(0.11ml，0.674mmol)。使反应混合物加热至90℃并搅拌2天。然后将反应混合物冷却至室温，用冰冷的水稀释，并用10％meoh的dcm溶液(3
×
45ml)萃取。将合并的有机层经na2so4干
燥，过滤并浓缩。将粗产物通过hplc(20:80至5:95h2o(0.05％tfa))/ch3cn)纯化，得到实施例2(20mg，6％产率)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.10(s,1h),9.03(br s,1h),8.08(s,1h),7.96(d,j＝8.4hz,1h),7.72(d,j＝8.8hz,2h),7.58(t,j＝8.2hz,1h),7.35-7.25(m,4h),7.20-7.13(m,2h),7.04(d,j＝6.8hz,1h),6.95-6.65(m,4h),6.63-6.58(m,1h),6.01(t,j＝56.8hz,1h),5.10-5.00(m,1h),4.01(br s,1h),3.70-3.60(m,4h),3.55-3.45(m,2h),3.33-2.50(m,19h),2.40-1.90(m,18h),1.71(s,3h),1.80-1.70(m,2h),0.86(s,6h)；lc/ms(esi)m/z 1322.9[m h]

。
[0317]
实施例3
[0318]
4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-(((2r)-4-(4-(2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙基)哌嗪-1-基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0319][0320]
在室温下，向中间体12(130mg，0.132mmol)在dmf(2ml)中的搅拌溶液中添加中间体19(102mg，0.199mmol)和dipea(70μl，0.396mmol)。然后将反应加热至40℃并搅拌2天。将反应混合物冷却至室温，用水(50ml)稀释，并用10％meoh的dcm溶液(3
×
50ml)萃取。将合并的有机层用5％nacl(水溶液)(50ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过柱色谱法(sio2，ch3cn，然后meoh/dcm)，随后通过hplc(10mm nh4co3h(水溶液):ch3cn)纯化，得到实施例3(16mg，6％产率)，为黄色固体。lc/ms(esi)m/z 1366.3[m h]

。
[0321]
实施例4
[0322]
4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-(((2r)-4-(4-(2-(2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)哌嗪-1-基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0323][0324]
按照针对实施例3所述的程序，使用中间体20代替中间体19，制备实施例4。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.15(s,1h),8.01(s,1h),7.95(d,j＝8.8hz,1h),7.73(d,j＝8.8hz,2h),7.59(t,j＝7.2hz,1h),7.34-7.26(m,4h),7.20-7.17(m,1h),7.14(d,j＝8.8hz,1h),7.04(d,j＝6.8hz,1h),6.88-6.81(m,3h),6.70-6.58(m,1h),6.60(t,j＝5.6hz,1h),6.14(t,j＝56.4hz,1h),5.08-5.02(m,1h),4.10-4.01(m,1h),3.62-3.46(m,14h),3.46-3.18(m,10h),2.99-2.56(m,6h),2.60-2.32(m,12h),2.09-2.02(m,4h),1.90(s,6h),1.70-1.69(m,2h),1.26-1.22(m,2h),0.86(s,6h)；lc/ms(esi)m/z 1410.5[m h]

。
[0325]
实施例5
[0326]
1-((r)-3-((4-(n-(4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)氨磺酰基)-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)-4-(苯硫基)丁基)-n-(2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙基)哌啶-4-甲酰胺
[0327][0328]
在室温下，向中间体22(120mg，0.107mmol)在dmf(4ml)中的搅拌溶液中添加中间体17(59.0mg，0.117mmol)、hatu(48.9mg，0.128mmol)和dipea(0.114ml，0.643mmol)。16小时后，将反应混合物用水(10ml)淬灭，并用etoac(3
×
10ml)萃取。将合并的有机层用冷水(2
×
10ml)、盐水(10ml)洗涤，经na2so4干燥并浓缩。将粗产物通过柱色谱法(sio2，meoh/dcm)纯化，得到实施例5，为黄色固体。lc/ms(esi)m/z 1408.6[m h]

。
[0329]
实施例6
[0330]
4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-(((2r)-4-(4-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代
异吲哚啉-5-基)氨基)乙氧基)乙基)哌嗪-1-基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0331][0332]
按照针对实施例2所述的程序，使用中间体23代替中间体18，制备实施例6。lc/ms(esi)m/z 1322.6[m h]

。
[0333]
实施例7
[0334]
4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-(((2r)-4-(4-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氧基)乙氧基)乙基)哌嗪-1-基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0335][0336]
在室温下，向中间体12(150mg，0.15mmol)在1,4-二氧杂环己烷(6ml)中的搅拌溶液中添加中间体24(100.0mg，0.22mmol)，然后添加dipea(0.08ml，0.45mmol)和nai(2.3mg，0.01mmol)。使反应混合物加热至90℃并搅拌2天。然后将反应混合物冷却至室温并浓缩。将粗产物用10％meoh的dcm溶液(100ml)稀释，用水(2
×
25ml)、盐水(2
×
25ml)洗涤，经na2so4干燥并浓缩。将粗产物通过hplc(60:40至45:55 10mm nh4co3h(水溶液)/ch3cn)纯化，得到实施例7(6.5mg，3％产率)，为黄色固体。lc/ms(esi)m/z 1323.6[m h]

。
[0337]
实施例8
[0338]
4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-(((2r)-4-(4-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-5-基)氧基)乙氧基)乙基)哌嗪-1-基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0339][0340]
按照针对实施例7所述的程序，使用中间体25代替中间体24，制备实施例8。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h,8.07(s,1h),7.93(d,j＝7.2hz,1h),7.83(d,j＝8.4hz,1h),7.72(d,j＝8.8hz,2h),7.45(d,j＝2.0hz,1h),7.37-7.26(m,5h),7.20-7.16(m,1h),6.88-6.81(m,3h),6.70(br s,1h),6.00(t,j＝56.4hz,1h),5.14-5.09(m,1h),4.32(s,2h),4.00(br s,1h),3.79-3.54(m,4h),3.32-3.19(m,6h),3.02-2.85(m,5h),2.67-2.55(m,4h),2.50-2.32(m,11h),2.05-1.99(m,6h),1.99(s,6h),1.70(s,3h),1.26-1.23(m,2h),0.85(s,6h)；lc/ms(esi)m/z 1323.6[m h]

。
[0341]
实施例9
[0342]
4-(4-((4,4-二甲基-2-(3-甲基双环[1.1.1]戊烷-1-基)环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-(((2r)-4-(4-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙基)哌嗪-1-基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0343][0344]
按照针对实施例7所述的程序，使用中间体18代替中间体24以及使用中间体13代替中间体12，制备实施例9。lc/ms(esi)m/z 1286.8[m h]

。
[0345]
实施例10
[0346]
4-(4-((4,4-二甲基-2-(3-甲基双环[1.1.1]戊烷-1-基)环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-(((2r)-4-(4-(2-(2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)哌嗪-1-基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0347][0348]
按照针对实施例7所述的程序，使用中间体20-2代替中间体24以及使用中间体13代替中间体12，制备实施例10。lc/ms(esi)m/z 1374.9[m h]

。
[0349]
实施例11
[0350]
4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-(((2r)-4-((2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙基)(甲基)氨基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0351][0352]
在室温下，向中间体26(120mg，0.129mmol)在1,4-二氧杂环己烷(10ml)中的搅拌溶液中添加中间体19(132mg，0.25mmol)和dipea(0.1ml，0.51mmol)。使反应混合物加热至90℃并搅拌2天。然后将反应混合物冷却至室温并浓缩。将粗产物用10％meoh的dcm溶液(50ml)稀释，用水(2
×
15ml)、盐水(2
×
10ml)洗涤，经na2so4干燥并浓缩。将粗产物通过hplc(10mm nh4co3h(水溶液)/ch3cn)纯化，得到实施例11(13mg，8％产率)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),8.09(s,1h),7.96(d,j＝5.6hz,1h),7.72(d,j＝8.8hz,2h),7.56(t,j＝8.0hz,1h),7.33(d,j＝7.6hz,2h),7.27(t,j＝7.2hz,2h),7.20-7.18(m,1h),7.10(d,j＝8.8hz,1h),7.03(d,j＝6.8hz,1h),6.83-6.73(m,4h),6.56(t,j＝5.2hz,1h),6.00(t,j＝56.4hz,1h),5.07-5.02(m,1h),4.01(br s,1h),3.56-3.41(m,10h),3.25-3.10(m,9h),2.99-2.88(br s,2h),2.92-2.83(m,2h),2.67-2.55(m,5h),2.50-2.45(m,4h),2.15-2.05(m,5h),1.98(s,6h),1.70(s,2h),1.25(t,j＝6.4hz,2h),0.86(s,6h)；lc/ms(esi)m/z 1311.2[m h]

。
[0353]
实施例12
[0354]
4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-(((2r)-4-(4-(4-(4-((2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)甲基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)丁酰基)哌嗪-1-基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0355][0356]
在室温下，向中间体12(166.8mg，0.17mmol)、hatu(64.8mg，0.17mmol)和中间体27(90mg，0.17mmol)在dmf(1ml)中的溶液中添加dipea(88.0mg，0.68mmol)。1小时后，将反应物浓缩并通过hplc(53:47至0:100 10mm nh4co3h(水溶液)/ch3cn)纯化，得到实施例12(35mg，14％产率)，为浅黄色固体。lc/ms(esi)m/z 1487.5(m-h)-。
[0357]
实施例13
[0358]
4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-(((2r)-4-(4-(3-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)丙酰基)哌嗪-1-基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0359][0360]
按照针对实施例12所述的程序，使用3-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)丙酸代替中间体27，制备实施例13。lc/ms(esi)m/z 1392.4[m h]

。
[0361]
实施例14
[0362]
(2s,4r)-1-(2-(3-(2-(2-(4-((r)-3-((4-(n-(4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环
1565.6[m h]

。
[0367]
实施例15
[0368]n1-(2-(2-(2-(4-((r)-3-((4-(n-(4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)氨磺酰基)-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)-4-(苯硫基)丁基)哌嗪-1-甲酰胺基)乙氧基)乙氧基)乙基)-n
4-(1-((2s,4r)-4-羟基-2-(((s)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)琥珀酰胺
[0369][0370]
步骤1：在0℃下，向(2-(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(113mg，0.45mmol)在dcm(6ml)中的搅拌溶液中添加三乙胺(127μl，0.91mmol)，随后添加羰基二咪唑(99.2mg，0.612mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌2小时。将反应混合物冷却至0℃并滴加中间体12(300mg，0.30mmol)在ch2cl2(3ml)中的溶液进行处理。将反应混合物混合物温热至室温。16小时后，将反应混合物用ch2cl2(30ml)稀释，用水(2
×
10ml)、盐水(2
×
10ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将获得的粗品通过柱色谱法(sio2，meoh/dcm)纯化，得到(r)-(2-(2-(2-(4-(3-((4-(n-(4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)氨磺酰基)-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)-4-(苯硫基)丁基)哌嗪-1-甲酰胺基)乙氧基)乙氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(实施例15-1)(270mg，47％产率)，为无色油状物。lc/ms(esi)m/z 1253.3[m h]

。
[0371]
步骤2：在0℃下，向实施例15-1(270mg，0.21mmol)在ch2cl2(3ml)中的搅拌溶液中添加4m hcl的1,4-二氧杂环己烷溶液(2ml)。将反应混合物温热至室温并搅拌16小时。将反应混合物浓缩并将粗残余物用水稀释，使用饱和nahco3水溶液调节至～ph 8，并用10％meoh的ch2cl2溶液(2
×
30ml)萃取。将有机层经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到(r)-n-(2-(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙基)-4-(3-((4-(n-(4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)氨磺酰基)-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)-4-(苯硫基)丁基)哌嗪-1-甲酰胺(实施例15-2)(190mg，0.16mmol，76％)，为无色液体。lc/ms(esi)m/z 1154.1[m h]

。
[0372]
步骤3：向琥珀酸(58mg，0.49mmol)在dmf(4ml)中的搅拌溶液中添加hatu(93mg，0.246mmol)和dipea(63mg，0.492mmol)。将所得溶液在室温下搅拌30分钟，并在0℃下用实施例15-2(190mg，0.16mmol)处理，并且然后温热至室温。16小时后，将反应混合物用10％meoh的dcm溶液(30ml)稀释，用水(2
×
20ml)、盐水(2
×
20ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓
缩。将粗产物用ch2cl2和戊烷研磨，得到(r)-1-(4-(3-((4-(n-(4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)氨磺酰基)-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)-4-(苯硫基)丁基)哌嗪-1-基)-1,12-二氧代-5,8-二氧杂-2,11-二氮杂十五烷-15-酸(实施例15-3)(150mg，73％)，为灰白色固体。lc/ms(esi)m/z 1254.2[m h]

。
[0373]
步骤4：向实施例15-3(150mg，0.11mmol)在dcm(5ml)中的搅拌溶液中添加edc
·
hcl(34mg，0.178mmol)和dmap(29mg，0.238mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟，并且然后冷却至0℃，并添加(2s,4r)-1-(2-氨基-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-n-((s)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺(57mg，0.11mmol)和三乙胺(24mg，0.238mmol)的混合物。然后将反应混合物温热至室温并搅拌16小时。将反应混合物用10％meoh的dcm溶液(30ml)稀释，用水(2
×
20ml)、盐水(2
×
20ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过hplc(70:30至35:65 10mm nh4co3h(水溶液)/ch3cn)纯化，得到实施例15。lc/ms(esi)m/z 1679.4[m h]

。
[0374]
实施例16
[0375]
4-(4-((4,4-二甲基-2-(3-甲基双环[1.1.1]戊烷-1-基)环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-(((2r)-4-(4-(4-(4-((2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)甲基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)丁酰基)哌嗪-1-基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0376][0377]
按照针对实施例12所述的程序，使用中间体13代替中间体12，制备实施例16。
[0378]
实施例17
[0379]
4-(4-((4,4-二甲基-2-(3-甲基双环[1.1.1]戊烷-1-基)环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)-n-((4-(((2r)-4-(4-(2-(2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)哌嗪-1-基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺
[0380][0381]
按照针对实施例4所述的程序，使用中间体13代替中间体12，制备实施例17。
[0382]
实施例18
[0383]
4-((r)-3-((4-(n-(4-(4-((4,4-二甲基-2-(3-甲基双环[1.1.1]戊烷-1-基)环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)氨磺酰基)-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)-4-(苯硫基)丁基)-n-(2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙基)哌嗪-1-甲酰胺
[0384][0385]
按照针对实施例1所述的程序，使用中间体13代替中间体12，制备实施例18。
[0386]
实施例19
[0387]
(2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙基)氨基甲酸1-((r)-3-((4-(n-(4-(4-((4,4-二甲基-2-(3-甲基双环[1.1.1]戊烷-1-基)环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)氨磺酰基)-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)-4-(苯硫基)丁基)哌啶-4-酯
[0388][0389]
将中间体10(1.0当量)、羰基二咪唑(1.5当量)和dipea(3.1当量)在1,2-dce中的溶液加热至70℃。在认为反应完成后，将反应冷却至室温，并将中间体17(2.0当量)的dmso溶液添加到反应混合物中。然后将反应物加热到70℃。在认为反应完成后，将反应冷却至室温，用水淬灭并用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，并且然后经无水na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过柱色谱法(sio2)纯化，得到实施例19。
[0390]
实施例20
[0391]
(2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙基)氨基甲酸1-((r)-3-((4-(n-(4-(4-((2-(3-(二氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)氨磺酰基)-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)-4-(苯硫基)丁基)哌啶-4-酯
[0392][0393]
按照针对实施例19所述的程序，使用中间体11代替中间体10，制备实施例20。
[0394]
实施例21
[0395]
n-((4-(((2r)-4-(4-(2-(2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)哌嗪-1-基)-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)-4-(4-((2-(3-乙基双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺
[0396][0397]
按照针对实施例4所述的程序，使用中间体15代替中间体13，制备实施例21。
[0398]
实施例22
[0399]
(2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙基)氨基甲酸1-((r)-3-((4-(n-(4-(4-((2-(3-乙基双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)氨磺酰基)-2-((三氟甲基)磺酰基)苯基)氨基)-4-(苯硫基)丁基)哌啶-4-酯
[0400][0401]
按照针对实施例19所述的程序，使用中间体14代替中间体10，制备实施例22。
[0402]
实施例a
[0403]
molt-4细胞增殖测定
[0404]
使用发光细胞活力测定测量细胞增殖。该测定涉及将单一试剂(试剂)直接添加到在补充有血清的培养基中培养的细胞。根据atcc建议培养molt-4细胞(atcc，crl-1582)，并且每个孔接种50,000个细胞。
[0405]
将评估的每种化合物制备成dmso储备溶液(10mm)。利用10点系列稀释曲线(1:3稀释)在每个板上一式两份测试化合物。最高化合物浓度为10μm(最终)，最终dmso浓度为0.1％。然后将板在37℃、5％co2下温育72小时，将细胞板在室温下平衡约30分钟。向每个孔添加等体积量的试剂(100μl)。将板在定轨振荡器上混合2分钟以诱导细胞裂解，然后在室温处温育10分钟以稳定发光信号。根据celltiter-glo方案，使用envision读板器记录发光。通过非线性回归分析，使用graphpad prism计算每种化合物的ic
50
。ic
50
值在表1中提供。
[0406]
表1
[0407]
实施例编号molt-4(nm)1c2a4a5b6a9a10aabt-263b
[0408]
对于molt-4ctg ic
50
：a＝单个ic
50
≤100nm；b＝单个ic
50
》100nm且《200nm；c＝单个ic
50
≥200nm。
[0409]
实施例b
[0410]
molt-4和molm-13细胞中的蛋白质降解测定
[0411]
将molt-4(atcc，crl-1582)(图4、图5)与媒介物或100nm浓度的指定化合物一起温育16小时。将molm-13(dsmz，acc554)(图6、图7)细胞与媒介物或增加浓度的指定化合物一起温育24小时。对于蛋白酶体抑制，在添加1μm的指定化合物之前，将molm-13细胞用1μm的mg132预处理1小时。处理后，在补充有1％磷酸酶抑制剂和蛋白酶抑制剂混合物的ripa裂解缓冲液中收获细胞。将来自每种细胞提取物的等量蛋白质(10μg/泳道)在4-12％bis-tris凝胶上分离。使用iblot 2transfer stacks转移蛋白质。将膜用含5％脱脂奶的tbs-t缓冲液(50mm tris-hcl，ph 7.6；150mm nacl；和0.05％tween)封闭，并在4℃下用一级抗体(1:1000稀释)探测过夜。在用tbs-t洗涤三次(10分钟/洗涤)后，将膜与适当的过氧化物酶缀合的二级抗体(美国细胞信号传导技术公司(cell signaling technology,usa))在室温下温育1小时。在用tbs-t洗涤三次后，用ecl蛋白质印迹检测试剂检测感兴趣的蛋白质并用azure成像系统捕获。使用imagej软件测定条带强度，并归一化为负载对照β-肌动蛋白或gapdh。一级抗体bcl-xl(#2762)、bcl-2(#2872s)、mcl-1(#5453s)和β-肌动蛋白(13e5、#4970)和gapdh(#5174)购自细胞信号传导技术公司。
[0412]
图4和图5表明，实施例2、4、5、6、9和10在molt-4细胞中以100nm浓度诱导bcl-xl降解。
[0413]
图6表明，实施例2和3可以剂量依赖性方式在molm-13细胞中诱导bcl-xl降解。
[0414]
图7表明，由实施例2、3和4诱导的bcl-xl降解可在molm-13细胞中被蛋白酶体抑制剂mg132抑制。
[0415]
此外，尽管前述已出于清楚和理解的目的通过举例说明和示例的方式进行了一些详细描述，但本领域技术人员将会理解，在不脱离本公开的实质的情况下，可进行许多和各种修改。因此，应当清楚地理解，本文所公开的形式仅是例示性的，并且不旨在限制本公开的范围，而是还涵盖与本发明的真实范围和实质一致的所有修改和替代方案。