一种用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒的制作方法

1.本实用新型涉及试剂盒技术领域，尤其涉及一种用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒。


背景技术：

2.肝素结合蛋白(hbp)是一种由成熟中性粒细胞分泌的蛋白质，当细菌感染或出现急性呼吸窘迫综合症(ards)或者急性肺损伤(ali)以及呼吸衰竭时，其水平会升高。
3.目前，用于hbp检测的主要有酶联免疫法(elisa)、层析法和胶乳增强免疫比浊法。elisa其代表产品是英国axis-shield公司的肝素结合蛋白测定试剂盒(酶联免疫法)，其操作步骤复杂繁琐，耗时长，人为因素较多，容易引起误差。


技术实现要素：

4.本实用新型的目的在于，针对现有技术的上述缺陷，提供一种操作简单、能够快速检测全血样本中肝素结合蛋白(hbp)浓度的用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒。
5.为实现上述目的，本实用新型提供了一种用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒，所述用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒包括盒体、盒盖、穿刺针和两个筒体，所述盒体的内部设置有两个安装腔，两个所述筒体分别与所述盒体拆卸连接，两个所述筒体分别位于两个所述安装腔的内部，所述穿刺针与所述盒盖拆卸连接，所述盒盖具有腔体，所述腔体与所述穿刺针相连通，所述腔体的两侧出口分别位于两个所述筒体的上方，两个所述筒体的内部分别盛有第一试剂和第二试剂，能够对肝素结合蛋白进行快速检测，且操作简单。
6.其中，所述穿刺针的底部设置有第一连接部，所述盒盖设置有与所述第一连接部相匹配的第二连接部，所述第二连接部位于所述第一连接部的内部，以实现所述穿刺针与所述盒盖之间的拆卸连接。
7.其中，所述盒盖设置有连接架，所述连接架远离所述盒盖的一端设置有钩部，所述盒体具有相互垂直设置的连接口和拆卸口，所述连接架位于所述连接口的内部，所述钩部抵持在所述拆卸口的内部，以实现所述盒盖与所述盒体之间的拆卸连接。
8.其中，所述用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒还包括密封环，所述密封环与所述盒体固定连接，所述密封环围设在两个所述安装腔的外侧，以对所述盒体与所述盒盖之间进行密封。
9.其中，所述用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒还包括保护套，所述保护套与所述穿刺针拆卸连接，所述保护套围设在所述穿刺针的外部，以对所述穿刺针进行保护。
10.其中，所述用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒还包括密封组件，所述密封组件包括密封板和两个密封片，两个所述密封片间隔设置在所述密封板上，两个所述密封片分别穿设在两个所述安装腔的内部，所述密封板与所述盒体拆卸连接，以对两个所述安装腔进行密封。
11.其中，所述用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒还包括橡胶柱，所述盒体具有固
定口，所述密封板具有卡槽，所述橡胶柱与所述盒体拆卸连接，所述橡胶柱位于所述固定口的内部，并穿设在所述卡槽的内部，以将所述密封板固定在所述盒体上。
12.其中，所述密封板设置有多个防滑槽，多个所述防滑槽间隔设置，并位于所述密封板的上端面，便于工作人员将所述密封板从所述盒体中拉出。
13.本实用新型的一种用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒，需要检测肝素结合蛋白时，通过所述穿刺针刺破皮肤，血液通过所述穿刺针以及所述腔体的两侧出口分别流入两个所述筒体中，通过第一试剂和第二试剂对肝素结合蛋白进行检测，从而提高检测准确性，且血液直接通过所述穿刺针流入两个所述筒体中进行检测，从而提高检测速度，且操作简单，易于使用者操作。
附图说明
14.为了更清楚地说明本实用新型实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本实用新型的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
15.图1是本实用新型提供的一种用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒的结构示意图。
16.图2是本实用新型提供的一种用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒的俯视图。
17.图3是本实用新型提供的一种用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒的剖视图。
18.图4是本实用新型提供的图3中a-a处的剖视图。
19.图5是本实用新型提供的图4中b处的局部放大图。
20.图6是本实用新型提供的一种用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒的多个实施例的曲线图。
21.图7是本实用新型提供的一种用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒的20例临床样本的相关性的曲线图。
22.1-盒体、11-安装腔、12-连接口、13-拆卸部、14-固定口、2-盒盖、21-腔体、22-第二连接部、23-连接架、231-钩部、3-穿刺针、31-第一连接部、4-筒体、5
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密封环、6-保护套、7-密封组件、71-密封板、711-卡槽、712-防滑槽、72-密封片、8-橡胶柱。
具体实施方式
23.下面详细描述本实用新型的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本实用新型，而不能理解为对本实用新型的限制。
24.在本实用新型的描述中，需要理解的是，术语“长度”、“宽度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本实用新型和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本实用新型的限制。此外，在本实用新型的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另
有明确具体的限定。
25.请参阅图1至图5，本实用新型提供一种用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒，所述用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒包括盒体1、盒盖2、穿刺针3和两个筒体4，所述盒体1的内部设置有两个安装腔11，两个所述筒体4分别与所述盒体1拆卸连接，两个所述筒体4分别位于两个所述安装腔11的内部，所述穿刺针3与所述盒盖2拆卸连接，所述盒盖2具有腔体21，所述腔体21与所述穿刺针3相连通，所述腔体21的两侧出口分别位于两个所述筒体4的上方，两个所述筒体4的内部分别盛有第一试剂和第二试剂。
26.在本实施方式中，两个所述筒体4分别安装在两个所述安装腔11的内部，所述盒盖2与所述盒体1拆卸连接，所述穿刺针3与所述盒盖2拆卸连接，且所述穿刺针3与所述腔体21相连通，所述腔体21的两侧出口分别位于两个所述筒体4的上方，两个所述筒体4的内部分别盛有第一试剂和第二试剂，需要检测肝素结合蛋白时，通过所述穿刺针3刺破皮肤，血液通过所述穿刺针3以及所述腔体21的两侧出口分别流入两个所述筒体4中，通过第一试剂和第二试剂对肝素结合蛋白进行检测，从而提高检测准确性，且血液直接通过所述穿刺针3流入两个所述筒体4中进行检测，从而提高检测速度，且操作简单，易于使用者操作。
27.第一试剂制备：将缓冲剂(如tris、mes、hepes、mops、甘氨酸等)溶解到水中，用1m的盐酸或1m的naoh溶液调ph，然后顺序加入其他物质(盐、 bsa和表面活性剂等)搅拌均匀后得到第一试剂。
28.第二试剂制备：将乳胶微球稀释至一定浓度和抗体混合，然后反应一段时间，加入bsa溶液进行封闭，然后离心去除上清液，用乳胶微球稀释液进行稀释超声重悬至一定浓度，得到第二试剂。
29.同源样本：同一时间对同一个人采集的血液样本。
30.检测：用全自动生化分析仪、特定蛋白分析仪或者其他透射或散射类的比浊poct类仪器对hbp试剂进行定标，拟合曲线。然后对样本进行检测和分析。
31.进一步的，所述穿刺针3的底部设置有第一连接部31，所述盒盖2设置有与所述第一连接部31相匹配的第二连接部22，所述第二连接部22位于所述第一连接部31的内部。
32.在本实施方式中，通过所述穿刺针3底部的所述第一连接部31与所述第二连接部22相互配合，以将所述穿刺针3与所述盒盖2进行连接。
33.进一步的，所述盒盖2设置有连接架23，所述连接架23远离所述盒盖2的一端设置有钩部231，所述盒体1具有相互垂直设置的连接口12和拆卸口，所述连接架23位于所述连接口12的内部，所述钩部231抵持在所述拆卸口的内部；
34.所述用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒还包括密封环5，所述密封环5与所述盒体1固定连接，所述密封环5围设在两个所述安装腔11的外侧。
35.在本实施方式中，将所述盒盖2与所述盒体1进行连接时，将所述连接架 23插入所述连接口12中，所述钩部231卡在所述拆卸口的内部从而将所述盒盖 2与所述盒体1进行固定，需要对所述盒盖2进行拆卸时，通过所述拆卸口按压所述钩部231，使所述钩部231从所述拆卸口中退出，从而对所述盒盖2进行拆卸，所述密封环5围设在两个所述安装腔11的外侧，将所述盒盖2与所述盒体 1之间进行密封。
36.进一步的，所述用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒还包括保护套6，所述保护套6与所述穿刺针3拆卸连接，所述保护套6围设在所述穿刺针3的外部。
37.在本实施方式中，所述保护套6能够对所述穿刺针3进行保护，从而对所述穿刺针3进行保护，使所述穿刺针3在未使用前处于无菌状态。
38.进一步的，所述用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒还包括密封组件7，所述密封组件7包括密封板71和两个密封片72，两个所述密封片72间隔设置在所述密封板71上，两个所述密封片72分别穿设在两个所述安装腔11的内部，所述密封板71与所述盒体1拆卸连接；
39.所述用于肝素结合蛋白定量检测的试剂盒还包括橡胶柱8，所述盒体1具有固定口14，所述密封板71具有卡槽711，所述橡胶柱8与所述盒体1拆卸连接，所述橡胶柱8位于所述固定口14的内部，并穿设在所述卡槽711的内部；
40.所述密封板71设置有多个防滑槽712，多个所述防滑槽712间隔设置，并位于所述密封板71的上端面。
41.在本实施方式中，所述密封组件7能够对两个所述安装腔11进行密封，防止第一试剂和第二试剂随意流动，两个所述密封片72分别穿设在两个所述安装腔11的内部，从而对所述安装腔11进行密封，所述橡胶柱8固定在所述固定口14的内部，并穿设在所述卡槽711中，从而将所述密封板71与所述盒体1 进行固定，需要使用本试剂盒时，将所述橡胶柱8从所述固定口14中拔出，使得所述密封板71能够相对于所述盒体1进行滑动，将所述密封板71从所述盒体1中拔出，所述密封片72不再对所述安装腔11进行密封，使得血液能够通过所述腔体21进入所述安装腔11中，且所述密封板71上间隔设置有多个所述防滑槽712，以便于工作人员拔出所述密封板71。
42.实施例1：
43.第二试剂的制备：将外购的10％平均粒径为0.325nm的聚苯乙烯羧基乳胶微球用5mm tris-hcl(ph8.0)稀释至1.0％，调节至1mg/ml的hbp抗体溶液 (5mm tris-hcl，ph8.0)加入等量的上诉稀释后为1.0％乳胶微球。在37℃搅拌2h后，加入等量体积的2.0％bsa溶液(5mm tris-hcl，ph8.0)，混合物在 37℃搅拌1h后，离心(15000rpm，30min)去除上清液，将白色沉淀物重悬于 5mm tris-hcl，ph8.0。此混合物用5mm tris-hcl，ph8.0稀释，使得在660nm 波长处的吸光度为1.50abs，该溶液即为第二试剂。
44.第一试剂的制备：
[0045][0046]
实施例2：
[0047]
第二试剂的制备如实施例1。
[0048]
第一试剂的制备：
[0049][0050]
实施例3：
[0051]
第二试剂的制备如实施例1。
[0052]
第一试剂的制备：
[0053][0054][0055]
比较例1：
[0056]
第二试剂的制备如实施例1。
[0057]
第一试剂的制备：
[0058]
100mm
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tris(ph7.0)
[0059]
500mm
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nacl
[0060]
1.0％(w/v)
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bsa
[0061]
上述实施例对低值同源血清、血浆和全血的测试：
[0062]
低值样本：
[0063] 实施例1实施例2实施例3比较例1血清13.0512.5113.2412.88血浆13.1112.6213.1012.73全血12.848.297.363.23
[0064]
表1
[0065]
高值样本：
[0066] 实施例1实施例2实施例3比较例1血清114.53120.76117.88128.94血浆110.03116.37118.27120.49全血109.8587.5474.3610.28
[0067]
表2
[0068]
实施例4：
[0069]
第二试剂的制备如实施例1。
[0070]
第一试剂的制备：
[0071]
100mm
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
tris(ph7.0)
[0072]
500mm
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
nacl
[0073]
1.0％(w/v)
ꢀꢀ
bsa
[0074]
改变sds的浓度，其不同浓度如下：
[0075][0076][0077]
表3
[0078]
测试：
[0079][0080]
表4
[0081]
在图6中，四条曲线由上至下依次为：实施例4-1、实施例4-2、实施例4-3、实施例4-4。综上，sds浓度在0.1％-0.5％最佳。
[0082]
以上所揭露的仅为本实用新型一种较佳实施例而已，当然不能以此来限定本实用新型之权利范围，本领域普通技术人员可以理解实现上述实施例的全部或部分流程，并依本实用新型权利要求所作的等同变化，仍属于实用新型所涵盖的范围。