新型BSSL抗体的制作方法

技术特征：
1.一种分离的抗体或其抗原结合片段，所述分离的抗体或其抗原结合片段包含：重链可变区(hcvr)的三个互补决定区(cdr)(hcdr)；和轻链可变区(lcvr)的三个cdr(lcdr)，其中第一hcdr包含根据seq id no:7的氨基酸序列或与seq id no:7具有至少87％同一性的氨基酸序列，优选由其组成；第二hcdr包含根据seq id no:8的氨基酸序列或与seq id no:8具有至少75％同一性的氨基酸序列，优选由其组成；第三hcdr包含根据seq id no:9的氨基酸序列或与seq id no:9具有至少83％同一性的氨基酸序列，优选由其组成；第一lcdr包含根据seq id no:10的氨基酸序列或与seq id no:10具有至少80％同一性的氨基酸序列，优选由其组成；第二lcdr包含氨基酸序列ats或与所述氨基酸序列ats具有至少66％同一性的氨基酸序列优选aas，优选由其组成，以及第三lcdr包含根据seq id no:11的氨基酸序列或与seq id no:11具有至少87％同一性的氨基酸序列，优选由其组成。2.根据权利要求1所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述第一hcdr包含根据seq id no:7的氨基酸序列，优选由其组成；所述第二hcdr包含选自由seq id no:8、seq id no:18和seq id no:19组成的组的氨基酸序列，优选由其组成；所述第三hcdr包含根据seq id no:9的氨基酸序列，优选由其组成；所述第一lcdr包含选自由seq id no:10和seq id no:20组成的组的氨基酸序列，优选由其组成；所述第二lcdr包含选自由ats和aas组成的组的氨基酸序列，优选由其组成；以及所述第三lcdr包含选自由seq id no:11、seq id no:21和seq id no:22组成的组的氨基酸序列，优选由其组成。3.根据权利要求2所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述第一hcdr包含根据seq id no:7的氨基酸序列，优选由其组成；所述第二hcdr包含根据seq id no:8的氨基酸序列，优选由其组成；所述第三hcdr包含根据seq id no:9的氨基酸序列，优选由其组成；所述第一lcdr包含根据seq id no:10的氨基酸序列，优选由其组成；所述第二lcdr包含氨基酸序列ats，优选由其组成；以及所述第三lcdr包含根据seq id no:11的氨基酸序列，优选由其组成。4.根据权利要求3所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述分离的抗体或其抗原结合片段包含：延伸的第二hcdr，其包含根据seq id no:12的氨基酸序列，优选由其组成；延伸的第一lcdr，其包含根据seq id no:14的氨基酸序列，优选由其组成；以及延伸的第二lcdr，其包含根据seq id no:15的氨基酸序列，优选由其组成。5.根据权利要求3或4所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述hcvr包含根据seq id no:36的氨基酸序列，优选由其组成；和/或
所述lcvr包含根据seq id no:37的氨基酸序列，优选由其组成。6.根据权利要求3所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述分离的抗体或其抗原结合片段包含：延伸的第二hcdr，其包含根据seq id no:12的氨基酸序列，优选由其组成；延伸的第一lcdr，其包含根据seq id no:16的氨基酸序列，优选由其组成；以及延伸的第二lcdr，其包含根据seq id no:17的氨基酸序列，优选由其组成。7.根据权利要求3或6所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述hcvr包含根据seq id no:36的氨基酸序列，优选由其组成；和/或所述lcvr包含根据seq id no:38的氨基酸序列，优选由其组成。8.根据权利要求2所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述第一hcdr包含根据seq id no:7的氨基酸序列，优选由其组成；所述第二hcdr包含根据seq id no:18的氨基酸序列，优选由其组成；所述第三hcdr包含根据seq id no:9的氨基酸序列，优选由其组成；所述第一lcdr包含根据seq id no:10的氨基酸序列，优选由其组成；所述第二lcdr包含氨基酸序列ats，优选由其组成；以及所述第三lcdr包含根据seq id no:21的氨基酸序列，优选由其组成。9.根据权利要求8所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述分离的抗体或其抗原结合片段包含：延伸的第二hcdr，其包含根据seq id no:23的氨基酸序列，优选由其组成；延伸的第一lcdr，其包含根据seq id no:16的氨基酸序列，优选由其组成；以及延伸的第二lcdr，其包含根据seq id no:15的氨基酸序列，优选由其组成。10.根据权利要求8或9所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述hcvr包含根据seq id no:30的氨基酸序列，优选由其组成；和/或所述lcvr包含根据seq id no:31的氨基酸序列，优选由其组成。11.根据权利要求2所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述第一hcdr包含根据seq id no:7的氨基酸序列，优选由其组成；所述第二hcdr包含根据seq id no:8的氨基酸序列，优选由其组成；所述第三hcdr包含根据seq id no:9的氨基酸序列，优选由其组成；所述第一lcdr包含根据seq id no:20的氨基酸序列，优选由其组成；所述第二lcdr包含氨基酸序列aas，优选由其组成；以及所述第三lcdr包含根据seq id no:11的氨基酸序列，优选由其组成。12.根据权利要求11所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述分离的抗体或其抗原结合片段包含：延伸的第二hcdr，其包含根据seq id no:24的氨基酸序列，优选由其组成；延伸的第一lcdr，其包含根据seq id no:27的氨基酸序列，优选由其组成；以及延伸的第二lcdr，其包含根据seq id no:29的氨基酸序列，优选由其组成。13.根据权利要求11或12所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述hcvr包含根据seq id no:32的氨基酸序列，优选由其组成；和/或所述lcvr包含根据seq id no:33的氨基酸序列，优选由其组成。
14.根据权利要求2所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述第一hcdr包含根据seq id no:7的氨基酸序列，优选由其组成；所述第二hcdr包含根据seq id no:19的氨基酸序列，优选由其组成；所述第三hcdr包含根据seq id no:9的氨基酸序列，优选由其组成；所述第一lcdr包含根据seq id no:20的氨基酸序列，优选由其组成；所述第二lcdr包含氨基酸序列ats，优选由其组成；以及所述第三lcdr包含根据seq id no:22的氨基酸序列，优选由其组成。15.根据权利要求14所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述分离的抗体或其抗原结合片段包含：延伸的第二hcdr，其包含根据seq id no:25的氨基酸序列，优选由其组成；延伸的第一lcdr，其包含根据seq id no:26的氨基酸序列，优选由其组成；以及延伸的第二lcdr，其包含根据seq id no:28的氨基酸序列，优选由其组成。16.根据权利要求14或15所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述hcvr包含根据seq id no:34的氨基酸序列，优选由其组成；和/或所述lcvr包含根据seq id no:35的氨基酸序列，优选由其组成。17.根据权利要求1或2所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述hcvr包含选自由seq id no:30、seq id no:32、seq id no:34和seq id no:36组成的组的氨基酸序列，优选由其组成。18.根据权利要求1或2所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述lcvr包含选自由seq id no:31、seq id no:33、seq id no:35、seq id no:37和seq id no:38组成的组的氨基酸序列，优选由其组成。19.一种分离的抗体或其抗原结合片段，其包含：由选自zh1-[gytftsyn]-zh2-[x
53
gvix
57
pgdgx
64
tsyx
68
qkfx
72
]-zh3-[ardyygssplgy]-zh4的氨基酸序列组成的重链可变区(hcvr)，其中zh1、zh2、zh3和zh4各自独立地表示零个、一个或若干个独立选择的氨基酸残基，x
53
选自i和m；x
57
选自n和y；x
64
选自a和s；x
68
选自a和n；以及x
72
选自k和q；以及由选自zl1-[x
24
asx
27
sisyx
39
n]-zl2-[ax
57
sx
66
lx
68
]-zl3-[hqrssx
115
pt]-zl4的氨基酸序列组成的轻链可变区(lcvr)，其中zl1、zl2、zl3和zl4各自独立地表示零个、一个或若干个独立选择的氨基酸残基，x
24
选自s和r；x
27
选自s和p；x
39
选自m和l；x
57
选自a和t；x
66
选自k和s；x
68
选自a和p；以及
x
115
选自s、t和y。20.根据权利要求19所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中zh1包含根据seq id no:39的氨基酸序列，或与seq id no:39具有至少90％同一性的氨基酸序列，优选由其组成；zh2包含根据seq id no:40的氨基酸序列，或与seq id no:40具有至少90％同一性的氨基酸序列，优选由其组成；zh3包含根据seq id no:41的氨基酸序列，或与seq id no:41具有至少90％同一性的氨基酸序列，优选由其组成；zh4包含根据seq id no:42的氨基酸序列，或与seq id no:42具有至少90％同一性的氨基酸序列，优选由其组成；zl1包含根据seq id no:43的氨基酸序列，或与seq id no:43具有至少90％同一性的氨基酸序列，优选由其组成；zl2包含根据seq id no:44的氨基酸序列，或与seq id no:44具有至少90％同一性的氨基酸序列，优选由其组成；zl3包含根据seq id no:45的氨基酸序列，或与seq id no:45具有至少90％同一性的氨基酸序列，优选由其组成；和/或zl4包含根据seq id no:46的氨基酸序列，或与seq id no:46具有至少90％同一性的氨基酸序列，优选由其组成。22.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述分离的抗体或其抗原结合片段特异性结合胆汁盐刺激的脂肪酶(bssl)，优选人bssl(hbssl)。23.一种特异性结合胆汁盐刺激的脂肪酶(bssl)，优选人bssl(hbssl)的表位的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述表位包含：第一表面，其包含根据seq id no:1的氨基酸序列，或与seq id no:1具有至少80％，优选至少83％同一性的氨基酸序列；以及第二表面，其包含根据seq id no:2的氨基酸序列，或与seq id no:2具有至少80％，优选至少85％或至少92％同一性的氨基酸序列。24.根据权利要求23所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述第一表面包含根据seq id no:3的氨基酸序列，或与seq id no:3具有至少80％，优选至少83％，并且更优选至少91％同一性的氨基酸序列。25.根据权利要求23或24所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述分离的抗体或其抗原结合片段进一步特异性结合选自由以下组成的组的表面：根据seq id no:5的氨基酸序列，或与seq id no:5具有至少80％，优选至少85％同一性的氨基酸序列；根据seq id no:4的氨基酸序列，或与seq id no:4具有至少80％，优选至少83％，更优选至少88％，例如至少94％同一性的氨基酸序列；和根据seq id no:6的氨基酸序列，或与seq id no:6具有至少80％，优选至少84％，并且更优选至少92％同一性的氨基酸序列。26.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段选自由人抗体、人源化抗体和嵌合抗体或其抗原结合片段组成的组。
27.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗原结合片段选自由单链可变片段(scfv)、fab片段、f(ab')2片段、f(ab’)3片段、fab’片段、fd片段、fv片段、dab片段、分离的互补决定区(cdr)和纳米抗体组成的组，优选scfv。28.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述分离的抗体或其抗原结合片段是单克隆抗体或其抗原结合片段。29.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中具有选自由igg、iga、igm、igd和ige组成的组的同种型类别，优选igg，并且更优选igg1或igg4。30.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述分离的抗体或其抗原结合片段包含至少一个抑制与fc受体(fcγr)相互作用的fc沉默突变。31.根据权利要求30所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中分离的抗体或其抗原结合片段属于igg同种型类别并且所述至少一个fc沉默突变选自由l234a、l235a和p329g组成的组。32.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述分离的抗体或其抗原结合片段包含至少一个防止或减少体内fab臂交换的稳定突变。33.根据权利要求32所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述分离的抗体或其抗原结合片段是igg4同种型亚类并且所述至少一个稳定突变是s228p。34.一种药物组合物，其包含根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体和/或其抗原结合片段以及药学上可接受的载剂或赋形剂。35.根据权利要求1至33中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，或根据权利要求34所述的药物组合物，其用作药物。36.根据权利要求1至33中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，或根据权利要求34所述的药物组合物，其用于治疗和/或预防炎性疾病。37.根据权利要求36所述使用的分离的抗体或其抗原结合片段或药物组合物，其中所述所述炎性疾病为慢性炎性疾病。38.根据权利要求36所述使用的分离的抗体或其抗原结合片段或药物组合物，其中所述炎性疾病为全身性炎性疾病。39.根据权利要求36所述使用的分离的抗体或其抗原结合片段或药物组合物，其中所述炎性疾病为自身免疫疾病。40.根据权利要求36所述使用的分离的抗体或其抗原结合片段或药物组合物，其中所述炎性疾病是自身炎性疾病。41.根据权利要求36所述使用的分离的抗体或其抗原结合片段或药物组合物，其中所述炎性疾病是自然杀伤(nk)细胞介导的炎性疾病。42.根据权利要求36所述使用的分离的抗体或其抗原结合片段或药物组合物，其中所述炎性疾病选自由类风湿性关节炎(ra)、幼年特发性关节炎(jia)、银屑病关节炎、炎性肠病(ibd)如克罗恩病或溃疡性结肠炎(uc)、以及肝脂肪变性组成的组。43.一种多核苷酸，其编码根据权利要求1至33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段。44.一种表达载体，其包含根据权利要求43所述的多核苷酸。45.一种细胞，其包含根据权利要求1至33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段、根
据权利要求43所述的多核苷酸和/或根据权利要求44所述的表达载体。46.一种产生抗体或其抗原结合片段的方法，所述方法包括：在所述抗体或其抗原结合片段由所述细胞表达的条件下培养包含根据权利要求44所述的表达载体的根据权利要求45所述的细胞；以及任选地，从所述细胞或培养所述细胞的培养基中分离所述抗体或其抗原结合片段。47.一种用于检测样品中是否存在胆汁盐刺激的脂肪酶(bssl)和/或定量样品中bssl的量的方法，所述方法包括：使所述样品与根据权利要求1至33中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段接触；以及检测所述样品中是否存在bssl和/或基于结合bssl的分离的抗体或其抗原结合片段的量定量所述样品中bssl的量。48.一种用于诊断胆汁盐刺激的脂肪酶(bssl)相关疾患的方法，所述方法包括：a)使来自受试者的样品与根据权利要求1至33中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段接触；b)检测所述样品中是否存在bssl和/或基于结合bssl的分离的抗体或其抗原结合片段的量定量所述样品中bssl的量；以及c)基于步骤b)中的结果，断定所述受试者是否患有bssl相关疾患。49.一种胆汁盐刺激的脂肪酶(bssl)表位，其包含：第一表面，其包含根据seq id no:1的氨基酸序列，或与seq id no:1具有至少80％，优选至少83％同一性的氨基酸序列；以及第二表面，其包含根据seq id no:2的氨基酸序列，或与seq id no:2具有至少80％，优选至少85％或至少92％同一性的氨基酸序列。50.根据权利要求49所述的bssl表位，其中所述第一表面包含根据seq id no:3的氨基酸序列，优选由其组成。51.根据权利要求49或50所述的bssl表位，其进一步包含表面，所述表面包含选自由seq id no:4、seq id no:5和seq id no:6组成的组的氨基酸序列，优选由其组成。

技术总结
本发明涉及结合人胆汁盐刺激的脂肪酶(hBSSL)的新型分离的抗体及其抗原结合片段。所述抗体及其抗原结合片段结合位于hBSSL的N端部分并鉴定为包含氨基酸残基7-12和氨基酸残基42-55的先前未表征的表位。本5发明还涉及抗体和/或其抗原结合片段的医学用途，特别是在治疗炎性病症中的医学用途，并且涉及相关的药物组合物。药物组合物。药物组合物。


技术研发人员：O
受保护的技术使用者：利普姆股份制有限公司
技术研发日：2020.07.10
技术公布日：2022/2/24