一种尿液外泌体提取试剂管及制作方法与流程

技术特征：
1.一种尿液外泌体提取试剂管，包括盖帽(1)、外管(2)和内管(3)，所述外管(2)的顶端表面螺纹套接有盖帽(1)，所述外管(2)的内部套接有内管(3)，其特征在于，所述内管(3)的内壁设置有纳米纤维膜(4)。2.根据权利要求1所述的一种尿液外泌体提取试剂管及制作方法，其特征在于，所述外管(2)和内管(3)的外壁均设置有容量刻度线，且外管(2)和内管(3)均为聚碳酸酯材料制成。3.权利要求1所述的尿液外泌体提取试剂管制作方法，其特征在于，制作步骤如下：a：将分子量9万的plla溶解后和壳聚糖按5:1的比例溶解于三氟乙醇溶液制备得到浓度为8wt％的混合溶液，并在25-30℃的室温下充分溶解plla和壳聚糖混合液；b：用27g针头在8-10kv的高电压下,以0.5
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1.0ml/h的速度推进注射器,用静置平面接收纳米纤维膜；c：将纳米纤维膜放入乙醇和间甲苯酚的混合溶剂中，在25-30℃的室温溶脱60min后干燥；d：将膜放入1.5mol/l氢氧化钠甲醇水溶液浸泡30min，获得多孔plla/壳聚糖纳米纤维膜；e：将50mg阳离子聚丙烯酰胺添加至100ml去离子水中，加热至50℃下搅拌，用naoh调节出ph＝7.0的溶液，将多孔plla/壳聚糖纳米纤维膜浸入溶液中，在25-30℃的室温搅拌24小时后，干燥；f：用紫外灯照射3小时，对阳离子聚丙烯酰胺与壳聚糖进行交联反应，则得到带正电荷多孔plla/壳聚糖纳米纤维膜；g：将正电荷多孔plla/壳聚糖纳米纤维膜粘附在内管(3)的内壁，将内管(3)与外管(2)组合后拧上盖帽(1)即可。4.根据权利要求3所述的一种尿液外泌体提取试剂管制作方法，其特征在于，步骤c中乙醇和间甲苯酚的比例为1:1。5.根据权利要求3所述的一种尿液外泌体提取试剂管制作方法，其特征在于，步骤d当中氢氧化钠甲醇水溶液的甲醇与水比例为1∶1。

技术总结
本发明公开了一种尿液外泌体提取试剂管及制作方法，包括盖帽、外管和内管，外管的顶端表面螺纹套接有盖帽，外管的内部套接有内管，内管的内壁设置有纳米纤维膜。本发明可在短时间能完成整个反应，无需长时间等待；利用正负电荷吸引原理，不但无分离试剂的污染，还可以除掉尿液中粒径大小为50-200nm不带电荷的脂蛋白；正电荷多孔纳米纤维膜上的孔径大小为50-200nm左右，可得到高纯度的粒径大小为50-200nm的外泌体，防止其他粒径微囊泡的污染；正电荷多孔纳米纤维膜上多孔的结构大大提高了膜与样品的接触面积，增大尿液外泌体提取效率。率。率。


技术研发人员：沈宏伟 易路
受保护的技术使用者：中南大学湘雅二医院
技术研发日：2020.08.21
技术公布日：2022/2/23