果树休眠枝抗寒性比较方法与流程

1.本发明涉及果树技术领域，具体涉及一种果树休眠枝抗寒性比较方法。


背景技术：

2.果树的抗寒性因品种的不同而有明显差异，寻找快速简便的抗寒性比较方法是果树抗性育种的重要内容。虽然许多学者的研究已发现，叶片解剖特征、还原糖含量变化以及叶片电导率等都与果树的抗寒性有关，可以作为果树抗寒性的生理指标，但由于这些指标的测定方法比较烦琐，需时较长，因此，在实际应用上受到一定的限制。


技术实现要素：

3.为解决现有技术中存在的上述问题，本发明提供了一种果树休眠枝抗寒性比较方法，该果树休眠枝抗寒性比较方法测定方式简单，所需时间短，适用范围广。
4.根据本发明的一方面提供了一种果树休眠枝抗寒性比较方法，包括：截取多个待测品种的多个粗壮度一致、生长势一直、枝芽饱满的一年生枝条；将每个所述枝条等分为多段，获取多个待测枝条；将待测枝条维持在第一预设温度，而后使所述待测枝条所处的环境温度降低至测试温度；测量获取所述待测枝条在第一预设温度的第一电阻值、所述待测枝条在测试温度下的第二电阻值和所述待测枝条在降温过程中的多个第三阻值；基于所述第一电阻值、所述第二电阻值和多个所述第三阻值，绘制电阻值曲线图；基于所述电阻值曲线图，比较多个待测品种的抗寒性。
5.优选地，所述将每个所述枝条等分为多段，获取多个待测枝条的步骤包括：将每个所述枝条分为15cm的三段，其中靠近枝干的第一待测枝条、靠近顶芽的为第二待测枝条、位于所述第一待测枝条和所述第二待测枝条之间的为第三待测枝条。
6.优选地，在所述将每个所述枝条等分为三段，获取多个待测枝条的步骤之后还包括：通过自来水冲洗所述待测枝条表面的泥土；通过蒸馏水对所述待测枝条进行第一冲洗；通过去离子水对所述待测枝条进行第二冲洗；基于吸水纸将所述待测枝条擦干；将所述待测枝条的两端进行封蜡，并用保鲜膜包裹；其中，所述第一冲洗的执行次数大于或等于4次，所述第二冲洗的执行次数大于或等于5次。
7.优选地，所述测量获取所述待测枝条在第一预设温度的第一电阻值、所述待测枝条在测试温度下的第二电阻值和所述待测枝条在降温过程中的多个第三阻值的步骤包括：在所述待测枝条在第一预设温度的情况下，检测获取第一电阻值；
控制环境温度以第一预设降温速度降低至所述测试温度；在降温过程中每经过一小时检测获取一个所述第三阻值，在所述环境温度降温至所述测试温度后保温12h，检测虎获取所述第二电阻值。
8.优选地，还包括：控制所述环境温度升温至所述第一预设温度，在升温过程中，每经过1h检测获取第四阻值；基于所述第一电阻值、所述第二电阻值、多个所述第三阻值和多个所述第四阻值，确定细胞膜致害临界点和细胞膜冻害临界温度。
9.优选地，所述测试温度为多个；在所述测试温度高于-20℃的情况下，所述第一预设降温速度为4℃/小时；在所述测试温度低于或等于-20℃的情况下，所述第一预设降温速度为2℃/小时。
10.优选地，所述基于所述第一电阻值、所述第二电阻值和多个所述第三阻值，确定细胞膜致害临界点和细胞膜冻害临界温度的步骤包括：基于在多个所述测试温度条件下的多个所述第一电阻值、多个所述第二电阻值和多个所述第三阻值绘制电阻值与温度之间的变化曲线；将所述变化曲线中第一个电阻值经由上升趋势变化为下降趋势的拐点所对应的温度作为细胞膜致害临界点；将所述变化曲线中第二个电阻值经由上升趋势变化为下降趋势的拐点所对应的温度作为细胞膜冻害临界温度。
11.有益效果：本发明提供的果树休眠枝抗寒性比较方法通过截取果树的枝条，进一步对枝条进行截取，检测枝条在不同状态下的电阻值绘制曲线图，在比对多个曲线图即可对多个果树的抗寒性进行比较，测试方法简单，所需时间段，在果树休眠枝抗寒性能检测过程中具备较强的可能性和实用价值。
附图说明
12.图1是本发明一种实施例的果树休眠枝抗寒性比较方法的示意流程图。
具体实施方式
13.下面结合附图详细介绍本发明技术方案。
14.图1是本发明一种实施例的果树休眠枝抗寒性比较方法的示意流程图。
15.如图1所示，根据本发明的第一方面提供了一种果树休眠枝抗寒性比较方法，包括：步骤101：截取多个待测品种的多个粗壮度一致、生长势一直、枝芽饱满的一年生枝条；步骤102：将每个枝条等分为多段，获取多个待测枝条；步骤103：将待测枝条维持在第一预设温度，而后使待测枝条所处的环境温度降低至测试温度；步骤104：测量获取待测枝条在第一预设温度的第一电阻值、待测枝条在测试温度下的第二电阻值和待测枝条在降温过程中的多个第三阻值；
步骤105：基于第一电阻值、第二电阻值和多个第三阻值，绘制电阻值曲线图；步骤106：基于电阻值曲线图，比较多个待测品种的抗寒性。
16.本发明提供的果树休眠枝抗寒性比较方法通过截取果树的枝条，进一步对枝条进行截取，检测枝条在不同状态下的电阻值绘制曲线图，在比对多个曲线图即可对多个果树的抗寒性进行比较，测试方法简单，所需时间段，在果树休眠枝抗寒性能检测过程中具备较强的可能性和实用价值。
17.本技术实施例通过截取枝条来确定果树休眠枝的抗寒性能，使得只需要将检测电路的探针刺入到果树休眠枝内即可进行检测，使得测试过程简单，测试速率高。
18.通过截取多个粗壮度一致、生长势一直、枝芽饱满的一年生枝条，使得实验样本的一致性高。
19.通过将每个枝条等分为多段，获取多个待测枝条，能够对一个枝条的不同位置进行检测，使得检测结果更加具备代表性。
20.测量获取待测枝条在第一预设温度的第一电阻值、待测枝条在测试温度下的第二电阻值和待测枝条在降温过程中的多个第三阻值，能够以不同温度状态下待测枝条的电阻值为依据确定细胞膜致害临界点和细胞膜冻害临界温度，使得果树休眠枝的抗寒性能确定更加准确。
21.在一些示例中，可以采用qjz型便携式惠斯通电桥,插入组织的电极是自制的(将2个铜探针固定焊接在绝缘板上,探针间距3cm,外露1cm）。将2个探针纵向插入枝干皮层深达木质部，迅速调节电桥平衡，读记电阻值数。测距与电阻值相关性测量，2个电极探针与导线相接，测距是事先画在被测枝干上的。用数字式万用电表(hiok13200,日本产)作为电阻测定仪,测定探针由有机玻璃与钢针制成，除研究探针距离对电阻的测定影响外，探针之间距离均为3cm。
22.在一些示例中，截取多个粗壮度一致、生长势一直、枝芽饱满的一年生枝条的步骤可以包括：剪取生长健壮、无病害、粗壮度、生长势成熟度一致、枝芽饱满的一年生枝条100枝，选取直径为4、8、10、12mm粗细均匀的枝条分成长10cm的20段，测定植株横截面积与电阻之间的关系；选取粗细均匀的枝条分成长10cm的20段，测距分别为2、3、4cm，测定不同测距与电阻之间的关系；选取粗细均匀有芽和无芽的枝条分成长10cm的各20段，测定有无芽对电阻的影响。每次测定均测枝条的四个方向。
23.作为优选技术方案，将每个枝条等分为三段，获取多个待测枝条的步骤包括：将每个枝条分为15cm的三段，其中靠近枝干的第一待测枝条、靠近顶芽的为第二待测枝条、位于第一待测枝条和第二待测枝条之间的为第三待测枝条。
24.作为优选技术方案，在将每个枝条等分为三段，获取多个待测枝条的步骤之后还包括：通过自来水冲洗待测枝条表面的泥土；通过蒸馏水对待测枝条进行第一冲洗；通过去离子水对待测枝条进行第二冲洗；基于吸水纸将待测枝条擦干；将待测枝条的两端进行封蜡，并用保鲜膜包裹；其中，第一冲洗的执行次数大于或等于4次，第二冲洗的执行次数大于或等于5次。
25.在一些示例中，剪取生长健壮、无病害、粗壮度、生长势成熟度一致、枝芽饱满的一年生枝条100枝，选取粗细均匀的枝条分成长15cm的三段，靠近枝干的为一组，记为g（相对抗寒）；靠近顶芽的为另一组，记为s（相对不抗寒）；中间的为一组，记为z。用自来水冲洗掉
枝条上的泥土后，用蒸馏水冲洗４遍，再用去离子水冲洗５遍，然后用吸水纸将枝条擦干。将枝条两端封蜡后用保鲜膜包裹，再用塑料袋分装，g、z和s随机各取10枝为一组，共7组，置于4℃冰箱保存。在低温程控冰箱内进行低温胁迫处理。试验设温度 4 ℃( ck) 、-15℃、-20℃、-25℃、-30℃，从4℃降温至所设定温度后保持12小时，再升温至4℃度，升温和降温速度为4℃/小时（为了使试验更精确，当温度降至-20℃时，降温速度为2℃/小时），取出后于室温下放置12小时。降温和升温过程每隔一小时测一次枝条电阻，降至目标温度时测其初始电阻和终止电阻。取出后于室温下放置12小时。
26.通过清洗、吸水纸擦干、封蜡和保鲜膜包裹的方式，能够降低其他因素对枝条电阻值的影响。
27.作为优选技术方案，测量获取待测枝条在第一预设温度的第一电阻值、待测枝条在测试温度下的第二电阻值和待测枝条在降温过程中的多个第三阻值的步骤包括：在待测枝条在第一预设温度的情况下，检测获取第一电阻值；控制环境温度以第一预设降温速度降低至测试温度；在降温过程中每经过一小时检测获取一个第三阻值，在环境温度降温至测试温度后保温12h，检测虎获取第二电阻值。
28.作为优选技术方案，还包括：控制环境温度升温至第一预设温度，在升温过程中，每经过1h检测获取第四阻值；基于第一电阻值、第二电阻值、多个第三阻值和多个第四阻值，确定细胞膜致害临界点和细胞膜冻害临界温度。作为优选技术方案，测试温度为多个；在测试温度高于-20℃的情况下，第一预设降温速度为4℃/小时；在测试温度低于或等于-20℃的情况下，第一预设降温速度为2℃/小时。
29.在测试温度高于-20℃的情况下，第一预设降温速度为4℃/小时；在测试温度低于或等于-20℃的情况下，第一预设降温速度为2℃/小时能够提高温控的准确性。
30.作为优选技术方案，还可以基于第一电阻值、第二电阻值和多个第三阻值，确定细胞膜致害临界点和细胞膜冻害临界温度。
31.具体地，基于第一电阻值、第二电阻值和多个第三阻值，确定细胞膜致害临界点和细胞膜冻害临界温度的步骤包括：基于在多个测试温度条件下的多个第一电阻值、多个第二电阻值和多个第三阻值绘制电阻值与温度之间的变化曲线；将变化曲线中第一个电阻值经由上升趋势变化为下降趋势的拐点所对应的温度作为细胞膜致害临界点；将变化曲线中第二个电阻值经由上升趋势变化为下降趋势的拐点所对应的温度作为细胞膜冻害临界温度。
32.第一个电阻值经由上升趋势变化为下降趋势的拐点以前电阻值增大一方面由于冷冻处理枝条时导致细胞收缩,胞间联丝被拉断，因此枝条组织的导电能力减低,另一方面是因为胞间结冰从细胞内夺取水分,从而使胞间离子浓度相对减低则导电能力减低。因此测得电阻值增大当冷冻温度达到细胞膜致害临界点时,细胞膜因结冰伤害离子外渗达到胞间，致使细胞膜致害临界点以后测得的电阻值减小。
33.当温度达到第二个电阻值经由上升趋势变化为下降趋势的拐点时，细胞膜因结冰伤害，离子外渗达到胞间，致使细胞膜冻害临界温度以后测得的电阻值减少。由于胞间离子浓度达到与0℃基本相同的水平，膜的伤害还未造成离子大量外渗伤害是可逆的，因此可以将变化曲线中第二个电阻值经由上升趋势变化为下降趋势的拐点时的温度称为细胞膜冻害临界温度。
实施例
34.图1是本发明一种实施例的果树休眠枝抗寒性比较方法的示意流程图。
35.如图1所示，根据本发明的第一方面提供了一种果树休眠枝抗寒性比较方法，包括：步骤101：截取多个待测品种的多个粗壮度一致、生长势一直、枝芽饱满的一年生枝条；步骤102：将每个所述枝条等分为多段，获取多个待测枝条；步骤103：将待测枝条维持在第一预设温度，而后使所述待测枝条所处的环境温度降低至测试温度；步骤104：测量获取所述待测枝条在第一预设温度的第一电阻值、所述待测枝条在测试温度下的第二电阻值和所述待测枝条在降温过程中的多个第三阻值；步骤105：基于所述第一电阻值、所述第二电阻值和多个所述第三阻值，绘制电阻值曲线图；步骤106：基于所述电阻值曲线图，比较多个待测品种的抗寒性。
36.其中，将每个枝条等分为三段，获取多个待测枝条的步骤包括：将每个枝条分为15cm的三段，其中靠近枝干的第一待测枝条、靠近顶芽的为第二待测枝条、位于第一待测枝条和第二待测枝条之间的为第三待测枝条。
37.其中，在将每个枝条等分为三段，获取多个待测枝条的步骤之后还包括：通过自来水冲洗待测枝条表面的泥土；通过蒸馏水对待测枝条进行第一冲洗；通过去离子水对待测枝条进行第二冲洗；基于吸水纸将待测枝条擦干；将待测枝条的两端进行封蜡，并用保鲜膜包裹；其中，第一冲洗的执行次数大于或等于4次，第二冲洗的执行次数大于或等于5次。
38.其中，测量获取待测枝条在第一预设温度的第一电阻值、待测枝条在测试温度下的第二电阻值和待测枝条在降温过程中的多个第三阻值的步骤包括：在待测枝条在第一预设温度的情况下，检测获取第一电阻值；控制环境温度以第一预设降温速度降低至测试温度；在降温过程中每经过一小时检测获取一个第三阻值，在环境温度降温至测试温度后保温12h，检测虎获取第二电阻值。
39.其中，还包括：控制环境温度升温至第一预设温度，在升温过程中，每经过1h检测获取第四阻值；基于第一电阻值、第二电阻值、多个第三阻值和多个第四阻值，确定细胞膜致害临界点和细胞膜冻害临界温度。
40.其中，测试温度为多个；在测试温度高于-20℃的情况下，第一预设降温速度为4℃/小时；在测试温度低于或等于-20℃的情况下，第一预设降温速度为2℃/小时。
41.最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可
以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。