睾酮检测试剂盒及其制备方法与流程

技术特征：
1.一种睾酮检测试剂盒，其特征在于，包括有试剂r1、试剂r2、试剂r3和试剂r4；其中，所述试剂r1具有链霉亲和素包被的磁性微粒和三羟甲基氨基甲烷tris缓冲液，所述试剂r2为解离剂，所述试剂r3具有吖啶酯标记的鼠抗人t抗体和磷酸盐缓冲液，所述试剂r4具有生物素标记的t衍生物和吗啉乙磺酸mes；还包括有校准品和质控品。2.根据权利要求1所述的睾酮检测试剂盒，其特征在于，所述试剂r2具有17α-甲基雄甾-17β-醇-3-酮和吗啉乙磺酸mes缓冲液。3.根据权利要求2所述的睾酮检测试剂盒，其特征在于，所述试剂r1、所述试剂r2、所述试剂r3和所述试剂r4中均含有防腐剂proclin 300；在所述试剂r2中，所述17α-甲基雄甾-17β-醇-3-酮为0.20mg/l，所述吗啉乙磺酸mes缓冲液为50mmol/l。4.根据权利要求3所述的睾酮检测试剂盒，其特征在于，所述校准品和质控品为冻干粉状态的睾酮抗原；所述防腐剂proclin 300为1g/l。5.根据权利要求1-4任一项所述的睾酮检测试剂盒，其特征在于，在所述试剂r1中，所述链霉亲和素包被的磁性微粒为2.5g/l，所述三羟甲基氨基甲烷tris缓冲液为50mmol/l；在所述试剂r3中，所述吖啶酯标记的鼠抗人t抗体为0.15mg/l，所述磷酸盐缓冲液为100mmol/l；在所述试剂r4中，所述生物素标记的t衍生物为0.78mg/l，所述吗啉乙磺酸mes为100mmol/l。6.一种睾酮检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述睾酮检测试剂盒包括有试剂r1、试剂r2、试剂r3和试剂r4，包括以下步骤：s1所述试剂r1的制备：取直径1um链霉亲和素包被的磁性微粒，用磁珠稀释液稀释浓度，搅拌混匀；s2所述试剂r3的制备：将一株针对t抗原表位的鼠抗人t抗体，与吖啶酯混合后进行吖啶酯标记；标记完成后进行离心脱盐纯化，得到一株针对t抗原表位的吖啶酯标记的鼠抗人t抗体；将得到的一株针对t抗原表位的吖啶酯标记的鼠抗人t抗体用稀释液稀释浓度；s3所述试剂r4的制备：将t衍生物用缓冲液稀释浓度，与生物素混合后进行生物素标记；标记完成后进行离心脱盐纯化，得到生物素标记的t衍生物；将得到的生物素标记的t衍生物用稀释液稀释浓度；s4分装试剂：将制备好的所述试剂r1、所述试剂r3和所述试剂r4进行分装，于2-8℃避光存储；所述睾酮检测试剂盒还包括有校准品和质控品，所述试剂r2为解离剂。7.根据权利要求6所述的睾酮检测试剂盒的制备方法，其特征在于，在所述步骤s1中，磁珠稀释液包含tris作为缓冲剂，bsa作为封闭剂和proclin 300作为防腐剂；在所述步骤s2中，稀释液包括二水合磷酸二氢钠、十二水合磷酸氢二钠作为缓冲剂，bsa、酪蛋白作为封闭剂，proclin 300作为防腐剂，tween-20作为表面活性剂；在所述步骤s3中，稀释液的主要成分为mes。8.根据权利要求6所述的睾酮检测试剂盒的制备方法，其特征在于，在所述步骤s2和所述步骤s3中，均采用zeba脱盐离心柱进行离心脱盐纯化；在所述步骤s2和所述步骤s3中，进行标记时，均是在37℃反应90分钟进行标记。
9.根据权利要求6-8任一项所述的睾酮检测试剂盒的制备方法，其特征在于，还包括有步骤s5贴标：将射频卡粘贴在试剂盒上，再将标签覆盖与所述射频卡之上；所述射频卡含有试剂批号、盒号、使用期限、项目代码、项目名称和试剂规格信息。10.根据权利要求6-8任一项所述的睾酮检测试剂盒的制备方法，其特征在于，在所述步骤s1中，链霉亲和素包被的磁性微粒用磁珠稀释液稀释至2.5g/l的浓度；在所述步骤s2中，每株鼠抗人t抗体与吖啶酯的摩尔比为1:10，将得到的一株针对t抗原表位的吖啶酯标记的鼠抗人t抗体用稀释液配成0.15mg/l的浓度；在所述步骤s3中，将t衍生物用缓冲液稀释至0.78mg/l的浓度，t衍生物与生物素的摩尔比为1:10，将得到的生物素标记的t衍生物用稀释液配成0.78mg/l的浓度。

技术总结
本发明公开了一种睾酮检测试剂盒及其制备方法，试剂盒包括有试剂R1、试剂R2、试剂R3和试剂R4；其中，所述试剂R1具有链霉亲和素包被的磁性微粒和三羟甲基氨基甲烷Tris缓冲液，所述试剂R2为解离剂，所述试剂R3具有吖啶酯标记的鼠抗人T抗体和磷酸盐缓冲液，所述试剂R4具有生物素标记的T衍生物和吗啉乙磺酸MES；还包括有校准品和质控品。检验原理为采用竞争法进行检测，试剂R2为解离剂，释放样本中结合的睾酮，且在试剂R1、试剂R3和试剂R4中均有缓冲液(试剂R4中，吗啉乙磺酸MES是缓冲液)，此外，睾酮检测试剂盒包括有校准品和质控品，检测结果准确度高，一致性更好。一致性更好。


技术研发人员：许行尚 杰弗瑞
受保护的技术使用者：广西岚煜生物科技有限公司
技术研发日：2021.10.29
技术公布日：2022/2/6