吲哚乙酸（IAA）在制备预防或治疗炎症性肠病药物中的应用的制作方法

吲哚乙酸(iaa)在制备预防或治疗炎症性肠病药物中的应用
技术领域
1.本发明属于医药技术领域，尤其涉及吲哚乙酸(iaa)在制备预防或治疗炎症性肠病药物中的应用。


背景技术：

2.炎症性肠病(ibd)，包括溃疡性结肠炎和克罗恩病，是一种临床常见的慢性消化系统疾病，可导致肠道黏膜溃疡和肠道功能的进行性破坏。炎症性肠病临床表现主要有腹痛、腹泻、甚至可有血便，其多迁延、易反复，并可诱发结肠癌。溃疡性结肠炎是结肠粘膜层和黏膜下层连续性炎症，病灶部位集中在结肠；克罗恩病为非连续性全层炎症，累及全消化道。在过去的十年里，ibd已经成为一个全球性的公共卫生挑战，其发病率正在以前所未有的速度在全球范围内增加，给医疗保健系统带来了巨大的财政和资源负担。到目前为止，ibd的确切病因和病理生理学尚未阐明，其发病机制复杂并受到多种因素影响，包括宿主遗传、环境改变、肠道微生物紊乱和免疫因素。基于此，ibd的临床治疗仍缺乏有效药物。
3.当前，药物治疗和手术切除是治疗ibd的主要方法。临床上常用包括氨基水杨酸类、免疫抑制剂、糖皮质激素及生物制剂等以求预防和缓解ibd的发生发展。这些药物主要通过抑制异常的免疫应答从而减轻炎症，但存在远期疗效不理想、耐受性差、副作用多、价格昂贵等多种弊端，不适合长期使用，寻找安全有效且价格低廉的抗ibd药物具有重要的理论意义和临床应用价值。


技术实现要素：

4.为了解决上述技术问题，本发明提供吲哚乙酸(iaa)在制备预防或治疗炎症性肠病药物中的应用。
5.为达上述目的，本发明采用如下的技术方案：
6.本发明提供了吲哚乙酸(iaa)在制备预防或治疗炎症性肠病药物中的应用。
7.优选地，所述炎症性肠病为溃疡性结肠炎。
8.优选地，所述吲哚乙酸的cas号为87-51-4。
9.更优选地，所述药物被制成任何一种药学上可接受的剂型。
10.更优选地，所述任何一种药学上可接受的剂型选自片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、缓释制剂、控释制剂、纳米制剂、注射剂。
11.试验证明iaa可显著抑制实验性结肠炎的发生发展，有效缓解结肠炎相关症状，其不仅可缓解结肠炎所致的实验动物体重减轻、疾病活动指数(dai)上调、结肠及脾脏肿大等症状，也可显著调节结肠炎状态下髓过氧化物酶(mpo)和相关致炎因子(tnf-α、il-1β)含量的升高以及抑炎因子的降低(il-10)。iaa还可以通过增加肠粘膜屏障完整性相关蛋白(zo-1、occludin)的表达，恢复肠粘膜屏障结构和功能的完整性，纠正生物体内肠道稳态的失调，进而达到防治结肠炎的目的。
12.与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
13.本发明提供了吲哚乙酸(iaa)的新用途，可将其应用于炎症性肠病的治疗中，并取得极好的治疗效果。
附图说明
14.图1a为实施例1中4组小鼠的平均体重变化折线图。
15.图1b为实施例1中4组小鼠的平均dai统计结果图。
16.图2a为实施例1中4组小鼠脾脏和结肠的宏观图及平均结肠重量和长度比。
17.图2b为实施例1中4组小鼠平均的脾脏重量和小鼠体重比。
18.图3a为实施例1中4组小鼠平均mpo的统计结果图。
19.图3b为实施例1中4组小鼠平均的炎症因子活性统计结果图。
20.图4a为实施例1中3组小鼠平均的fitc-葡聚糖的检测结果图。
21.图4b为实施例1中3组小鼠肠完整性相关紧密连接蛋白的检测结果图。
具体实施方式
22.实施例1
23.本实施例建立以下模型并进行相应的药物干预：
24.(1)动物实验采用3％dss溶液诱导c57bl/6小鼠构建结肠炎模型(自由饮水dss水溶液10天)，并将小鼠分组，每组十只，分别记为iaa-iaa治疗组，5-asa-5-氨基水杨酸治疗组，colitis-结肠炎组(使用dss化学试剂造成结肠炎模型组)，同时设置ctrl-空白对照组(未使用dss化学试剂的健康小鼠)；
25.(2)每日分别灌胃给与模型小鼠iaa(使用剂量为20mg/kg)或阳性药物5-asa(使用剂量为100mg/kg)一次，每日记录小鼠体重变化及dai打分，dai打分标准参见表1：
26.表1
[0027][0028][0029]
(3)生物样品收集及分析：第十天处死小鼠，记录结肠及脾脏重量，收集结肠分别进行mpo、炎症因子活性分析，分析iaa对于结肠炎小鼠的治疗作用，结果如图1a、1b、2a、2b、3a、3b所示，其中图1a为4组小鼠的平均体重变化折线图，图1b为4组小鼠的平均dai统计结果图，图2a为4组小鼠典型脾脏和结肠的宏观图及平均结肠重量和长度比，图2b为4组小鼠平均的脾脏重量和小鼠体重比；图3a为4组小鼠平均mpo的统计结果，图3b为4组小鼠平均的炎症因子活性统计结果，其中mpo和炎症因子活性的测定采用相应指标的elisa试剂盒进行检测。
[0030]
其中由图1a和1b可知吲哚乙酸iaa(20mg/kg，口服)和5-氨基水杨酸(5-asa，
100mg/kg，口服)可显著降低结肠炎小鼠的体重减少量及dai指数。可以发现，结肠炎小鼠的体重呈现先上升后下降的变化趋势，而iaa及5-asa处理后明显缓解了体重降低的趋势，同时结肠炎小鼠的dai指数随着造模时间延长，不断升高，iaa及5-asa的处理明显缓解了dai指数的上升，这说明iaa对结肠炎小鼠的体重减少及便血等特征有明显缓解。
[0031]
由图2a和图2b可知，iaa组和5-asa可抑制结肠炎小鼠结肠长度的缩短及脾脏的肿胀。从结肠和脾脏的形态图可以直观的发现，iaa及5-asa的处理可缓解由于结肠炎所致的结肠缩短及脾脏肿胀。分析结肠重量和长度及脾脏重量和体重的比值分析可得到类似的结论。
[0032]
由图3a和3b可知，iaa组可降低结肠炎小鼠结肠组织中促炎因子tnf-α、il-1β等的含量，并增加抑炎因子il-10的含量。此外，iaa还可以显著降低dss诱导的mpo的上调，减轻结肠组织炎性细胞浸润，效果与5-asa组相当。
[0033]
(4)肠渗透性功能表征：第十天每组随机选择3只小鼠，采用荧光素异硫氰酸酯(fitc)标记的葡聚糖对小鼠体内肠渗透性进行肠渗透性功能考察实验。具体为将小鼠禁食4h后，随后口服4kda的荧光染料荧光素异硫氰酸酯(fitc)-葡聚糖(60mg/100g)，5h后依据连续稀释fitc-葡聚糖制备的标准曲线计算各组小鼠血清中的fitc-葡聚糖浓度，结果如图4a所示，同时采用westernblotting技术对肠完整性相关紧密连接蛋白进行分析，评价肠屏障结构完整性，结果如4b所示。数据统计：使用graphpad prism 8.4(graphpad,san diego,ca)进行统计分析。p《0.05(
*/#
p《0.05,
**/##
p《0.01,
***/###
p《0.001)为差异有统计学意义，所有数据均以平均值
±
s.e.m.表示。
[0034]
由图4a和图4b可知，iaa处理可明显降低结肠炎小鼠肠道渗透性，并上调相关结构完整性相关蛋白从而恢复肠屏障结构的完整性。通过小鼠异硫氰酸荧光素(fitc)考察肠渗透性，结肠炎小鼠血清中fitc的浓度相比于健康小鼠显著升高(4.839
±
0.3027vs 0.7528
±
0.1063μg/ml，p《0.001)，iaa干预后明显下调(4.839
±
0.3027vs 1.819
±
0.3956μg/ml，p《0.001)。并通过对紧密连接蛋白zo-1及occludin的表达量(参见图4b)考察肠粘膜屏障结构的完整性，可以发现iaa处理明显增加了由于结肠炎所致的紧密连接蛋白缺失。
[0035]
以上结果充分表明iaa可通过调节紧密连接蛋白的表达从而恢复肠屏障结构和功能的完整性，最终改善结肠炎。
[0036]
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。