一种高效免疫调节微生态制剂的制备及应用的制作方法

1.本发明属于微生态制剂领域，具体地说是一种高效免疫调节微生态制剂的制备及应用。


背景技术：

2.嗜酸乳杆菌(lactobacillus acidophilus)是农业部2013年批准可用于饲料添加剂的34种益生菌之一。属于乳杆菌属，是肠道中的重要微生物，作为机体的有益菌群和制备微生态制剂的常用菌种之一，当其达到一定数量时，具有调节肠道微生物菌群、抑制病原菌、增强免疫力、降血脂等作用，起到健康促进效果。嗜酸乳杆菌成为目前乳酸菌家族中极为重视研究与开发的益生菌之一。
3.通过现有的制备方法制备的微生态制剂，培养基中的活菌总数不高、细菌存活率低、而且使用效果不明显的问题；为此，本发明提供一种高效免疫调节微生态制剂的制备及应用。


技术实现要素：

4.为了弥补现有技术的不足，解决通过现有的制备方法制备的微生态制剂，培养基中的活菌总数不高、细菌存活率低、而且使用效果不明显的问题，本发明提出的一种高效免疫调节微生态制剂的制备及应用。
5.本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种高效免疫调节微生态制剂的制备，该制备方法包括以下几个步骤：
6.s1：将原料配比为：葡萄糖0.5-1.0％、低聚异麦芽糖0.1-0.5％、大豆蛋白胨0.1-0.5％、柠檬酸氢二铵0.1％、乙酸钠0.1％、k2hpo40.1％、mgso40.015％、mnso40.02％、l-半胱氨酸盐酸盐0.025％、云芝糖肽0.01-0.05％、黄芪多糖0.01-0.05％、三萜皂苷0.01-0.05％和水，制得嗜酸乳杆菌发酵培养基；
7.s2：往嗜酸乳杆菌发酵培养基中加入乳酸或naoh，使得嗜酸乳杆菌发酵培养基内的ph范围为6.0-6.4，配置好发酵培养基，最后再通过高压蒸汽121℃灭菌30min；
8.s3：将通过s2得到的发酵培养基用冰盐水冷却至37℃；
9.s4：往发酵培养基中接种mrs(生化试剂)培养的嗜酸乳杆菌菌种，接种量为0.05-0.1％；
10.s5：往发酵培养基中通入氮气保压至0.01-0.05mpa，搅拌转速50转/min，温度保持37℃，厌氧培养30h。
11.进一步，所述云芝糖肽是由云芝提取而来的中药提取物。
12.进一步，所述黄芪多糖是由黄芪提取而来的中药提取物。
13.进一步，所述三萜皂苷是由山茶籽粉提取而来的中药提取物。
14.进一步，一种高效免疫调节微生态制剂在肉鸡饲养中的应用。
15.本发明的有益效果如下：
16.1.通过本制备方法制备的高效免疫调节微生态制剂，可显著提高嗜酸乳杆菌的活菌总数，同时对有害菌(大肠杆菌和沙门氏菌)的抑制效果也十分显著。
17.2.通过本制备方法制备的高效免疫调节微生态制剂，并且往培养基中添加云芝糖肽、三萜皂苷和黄芪多糖发酵，可以明显增加机体的非特异性免疫，提高机体的免疫能力，达到预防疾病的目的。
附图说明
18.下面结合附图对本发明做进一步说明。
19.图1是本发明的方法流程图；
具体实施方式
20.为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。
21.实施例1
22.一种高效免疫调节微生态制剂的制备，该制备方法包括以下几个步骤：
23.s1：将原料配比为：葡萄糖0.5-1.0％、低聚异麦芽糖0.1-0.5％、大豆蛋白胨0.1-0.5％、柠檬酸氢二铵0.1％、乙酸钠0.1％、k2hpo40.1％、mgso40.015％、mnso40.02％、l-半胱氨酸盐酸盐0.025％和水，制得嗜酸乳杆菌发酵培养基；
24.s2：往嗜酸乳杆菌发酵培养基中加入乳酸或naoh，使得嗜酸乳杆菌发酵培养基内的ph范围为6.0-6.4，配置好发酵培养基，最后再通过高压蒸汽121℃灭菌30min；
25.s3：将通过s2得到的发酵培养基用冰盐水冷却至37℃；
26.s4：往发酵培养基中接种mrs(生化试剂)培养的嗜酸乳杆菌菌种，接种量为0.05-0.1％；
27.s5：往发酵培养基中通入氮气保压至0.01-0.05mpa，搅拌转速50转/min，温度保持37℃。
28.实施例2
29.s1：将原料配比为：葡萄糖0.5-1.0％、低聚异麦芽糖0.1-0.5％、大豆蛋白胨0.1-0.5％、柠檬酸氢二铵0.1％、乙酸钠0.1％、k2hpo40.1％、mgso40.015％、mnso40.02％、l-半胱氨酸盐酸盐0.025％、云芝糖肽0.01-0.05％、黄芪多糖0.01-0.05％、三萜皂苷0.01-0.05％和水，制得嗜酸乳杆菌发酵培养基；
30.s2：往嗜酸乳杆菌发酵培养基中加入乳酸或naoh，使得嗜酸乳杆菌发酵培养基内的ph范围为6.0-6.4，配置好发酵培养基，最后再通过高压蒸汽121℃灭菌30min；
31.s3：将通过s2得到的发酵培养基用冰盐水冷却至37℃；
32.s4：往发酵培养基中接种mrs(生化试剂)培养的嗜酸乳杆菌菌种，接种量为0.05-0.1％；
33.s5：往发酵培养基中通入氮气保压至0.01-0.05mpa，搅拌转速50转/min，温度保持37℃，厌氧培养30h。
34.分别检测实施例1和实施例2中发酵培养基的ph值、活菌总数和抑菌效果，得到的发酵结果如表1。
35.表1
[0036][0037]
通过表1可以看出，新发酵培养基可使活菌总数达到20亿/ml以上；添加中药提取物对活菌总数、ph的影响不大，但是对抑菌效果有明显提升。
[0038]
实施例3
[0039]
微生态制剂在肉鸡的应用：
[0040]
选择同批次90只1日龄初生仔鸡，分成3组，每组30只。
[0041]
对照组以无添加的鸡场井水为饮水。
[0042]
实验组1使用不含中药提取物发酵的嗜酸乳杆菌微生态制剂，用井水在100倍稀释下作为饮水。
[0043]
实验组2使用含中药提取物发酵的嗜酸乳杆菌微生态制剂，用井水在100倍稀释下作为饮水。
[0044]
实验时间从仔鸡的1日龄持续到42日龄。
[0045]
42日龄时从各组随机取10只，各自鸡心采血5ml。经3000r/min离心10min，分离血清于1.5ml离心管中，用酶联免疫吸附法(elisa)测定血清中igg含量，检测结构如表2。
[0046]
表2
[0047] 对照组实验组1实验组2igg(mg/ml)3.15
±
0.423.89
±
0.344.11
±
0.31
[0048]
通过表2可以看出，嗜酸乳杆菌微生态制剂(实验组1、实验组2)的免疫效果显著高于对照组，说明嗜酸乳杆菌微生态制剂对仔鸡的免疫增强作用十分明显。
[0049]
添加中药提取物发酵而成的嗜酸乳杆菌(实验组2)对肉鸡的免疫增强作用明显强于无中药发酵的嗜酸乳杆菌(实验组1)，且显著强于对照组，说明由中药提取物发酵而成的嗜酸乳杆菌对仔鸡免疫增强效果比单纯嗜酸乳杆菌的效果有明显提升。
[0050]
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。