与多个Fc同种型和亚类偶联的抗原结合片段的制作方法

技术特征：
id no:3位置181处的反应性赖氨酸残基，另一个结合基序包含seq id no:3的片段，该片段包含seq id no:3位置294处的反应性天冬酰胺；j)第一结合基序和第二结合基序中的一个包含seq id no:10的片段，该片段包含seq id no:10位置176处的反应性赖氨酸，另一个结合基序包含seq id no:10的片段，该片段包含seq id no:10位置308处的反应性天冬酰胺；k)第一结合基序和第二结合基序中的一个包含seq id no:11的片段，该片段包含seq id no:11位置15处的反应性赖氨酸，另一个结合基序包含seq id no:11的片段，该片段包含seq id no:11位置101处的反应性天冬氨酸；l)第一结合基序和第二结合基序中的一个包含seq id no:13的片段，该片段包含seq id no:13位置742处的反应性赖氨酸，另一个结合基序包含seq id no:13的片段，该片段包含seq id no:13位置854处的反应性天冬酰胺；m)第一结合基序和第二结合基序中的一个包含seq id no:15的片段，该片段包含seq id no:15位置405处的反应性赖氨酸，另一个结合基序包含seq id no:15的片段，该片段包含seq id no:15位置496处的反应性天冬氨酸；n)所述第一结合基序和/或所述第二结合基序包含异肽，该异肽包含seq id no:21或23或25或27的氨基酸序列，或与seq id no:21或23或25或27中任何一个所述的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的蛋白质；o)第一结合基序包括分选酶识别域，第二结合基序包括分选酶桥接域；p)第一结合基序包括蝶豆粘酶1识别域；或q)第一结合基序和第二结合基序各自包含断裂内含蛋白；和其中第一结合基序和第二结合基序通过蛋白质连接相互作用，自发地或借助于酶形成共价键。12.权利要求11所述的核酸构建体对的组合，其中：a)第一结合基序和第二结合基序之一包含seq id no:7或与seq id no:7具有至少70％同一性的序列，而另一结合基序包含seq id no:8、9、28、33或44或与seq id no:8、9、28、33或44具有至少50％同一性的序列；b)第一结合基序和第二结合基序之一包含seq id no:34或与seq id no:34具有至少70％同一性的序列，而另一结合基序包含seq id no:8、9、28、33或44或与seq id no:8、9、28、33或44具有至少50％同一性的序列；c)第一结合基序和第二结合基序之一包含seq id no:35或与seq id no:35具有至少70％同一性的序列，而另一结合基序包含seq id no:36或与seq id no:36具有至少70％同一性的序列；d)第一结合基序和第二结合基序之一包含seq id no:37或与seq id no:37具有至少70％同一性的序列，而另一结合基序包含seq id no:38或与seq id no:38具有至少70％同一性的序列；e)第一结合基序和第二结合基序之一包含seq id no:39或与seq id no:39具有至少70％同一性的序列，而另一结合基序包含seq id no:40或与seq id no:40具有至少50％同一性的序列；f)第一结合基序和第二结合基序之一包含seq id no:41或与seq id no:41具有至少
70％同一性的序列，而另一结合基序包含seq id no:42或与seq id no:42具有至少50％同一性的序列；或g)第一结合基序和第二结合基序之一包含seq id no:43或与seq id no:43具有至少70％同一性的序列，而另一结合基序包含seq id no:8、9、28或44或与seq id no:8、9、28或44具有至少50％同一性的序列。13.多个原核或真核宿主细胞，其中所述多个原核或真核宿主细胞各自包含来自根据权利要求11或12所述的核酸构建体的一个核酸构建体。14.多个fc片段，其中每个fc片段在n端包含独特第二结合基序，其中每个独特第二结合基序能够通过蛋白质连接自发或借助酶与独特第一结合基序共价结合，其中每个fc片段属于物种、同种型和/或亚类的独特组合。15.权利要求14所述的多个fc片段，其中每个fc片段与独特标记物或独特的珠结合。16.权利要求14或15所述的多个fc片段，其中：i)独特第二结合基序包含seq id no:1或3或5或6或7或25或27或29或30或34或35或37或39或41或43，seq id no:1中所列序列的残基302-308，或与seq id no:1或3或5或6或7或34或35或37或39或41或43具有至少50％同一性的序列；或其片段，且能通过蛋白质连接自发或借助酶与独特第一结合基序共价偶联，所述第一结合基序包含seq id no:1或8或9或28或33或36或38或40或42或44中所述序列的残基31-291，或与seq id no:1或8或9或26或28或33或36或38或40或42或44具有至少50％同一性的序列；或其片段，或ii)独特第二结合基序包含seq id no:8或9或26或28或33或36或38或40或42或44、或seq id no:1中所述序列的残基31-291，或与seq id no:1或8或9或28或33或36或38或40或42或44具有至少50％同一性的序列；或其片段，且能通过蛋白质连接自发或借助酶与独特第一结合基序共价偶联，所述独特第一结合基序包含seq id no:1或3或5或6或7或25或27或29或30或34或35或37或39或41或43，seq id no:1中所列序列的残基302-308，或与seq id no:1或3或5或6或7或25或27或29或30或34或35或37或39或41或43具有至少50％同一性的序列；或其片段。17.权利要求16所述的多个fc片段，其中第二结合基序包含seq id no:44或与seq id no:44具有至少50％同一性的序列；并且能够通过蛋白质连接自发地或借助于酶共价偶联到第一结合基序，其包含seq id no:34或与seq id no:34具有至少50％同一性的序列。18.一种制备多个全长抗体的方法，其中每个全长抗体包含在c端包含独特第一结合基序的抗原结合片段和在n端包含独特第二结合基序的fc片段，该方法包括将权利要求14至17中任何一项的多个fc片段与多个抗原结合片段接触，每个抗原结合片段在c端包含独特第一结合基序，接触在允许独特第二结合基序通过蛋白质连接自发或借助酶共价偶联到独特第一结合基序的条件下进行。19.一种试剂盒，其包括：a)抗原结合片段，在其c端包含第一结合基序，任选地包含第一可检测标记物；和b)在n端包含第二结合基序的fc片段，任选地包含第二可检测标记物；和/或c)包含权利要求1和/或2中定义的抗原结合片段和/或fc片段的核酸构建体，其中，所述第一结合基序和所述第二结合基序能够通过蛋白质连接相互共价偶联。20.权利要求19所述的试剂盒，其中第一和第二可检测标记物相互独立为荧光团、荧光
蛋白或酶。

技术总结
本发明涉及多个全长抗体，其中每个全长抗体包括特异性结合到独特抗原并包括位于C端的第一结合基序的抗原结合片段，和属于物种、同种型和亚类独特组合，且包括N端的第二结合基序的Fc片段，其中每个抗体的第一结合基序和第二结合基序通过蛋白质连接彼此共价偶联。还提供了通过将样本与多个全长抗体接触来检测样本中多个抗原的分析方法。还提供了编码多个全长抗体的核酸构建体。长抗体的核酸构建体。


技术研发人员：H
受保护的技术使用者：生物辐射ABD瑟罗泰克有限公司
技术研发日：2020.03.18
技术公布日：2022/1/28