一种CHI3L1单克隆抗体及其制备方法和应用与流程

技术特征：
1.一种chi3l1单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：使用抗原对动物进行免疫，获得免疫细胞；将所述免疫细胞和融合伴侣细胞融合，并且挑选出阳性融合细胞；对所述阳性融合细胞进行亚克隆得到克隆化的融合细胞，所述克隆化的融合细胞可以分泌单克隆抗体；其中，所述抗原为重组抗原p1或重组抗原p2，所述重组抗原p1对应chi3l1序列中31-149aa基因序列，所述重组抗原p2对应chi3l1序列中248-383aa基因序列；所述单克隆抗体为p1来源的单抗或p2来源的单抗。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述抗原的制备包括以下步骤：所述31-149aa基因序列采用bamh1、hindiii双酶切；将所述31-149aa基因序列与采用相同内切酶酶切的pet30a质粒连接，并转化大肠杆菌感受态细胞，表达纯化得到所述重组抗原p1。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述抗原的制备包括以下步骤：所述248-383aa基因序列采用ecor1、xho1双酶切；将所述248-383aa基因序列与采用相同内切酶酶切的pet30a质粒连接，并转化大肠杆菌感受态细胞，表达纯化得到所述重组抗原p2。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述阳性融合细胞通过间接elisa法，采用真核表达全长chi3l1和几丁质酶1挑选得到。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述阳性融合细胞为全长chi3l1阳性且几丁质酶1阴性的细胞。6.根据权利要求1至5中任一项所述的制备方法，其特征在于，还包括以下步骤：抗体配对：在捕获抗体中加入真核表达全长chi3l1，进行免疫反应，清洗后加入标记抗体，清洗后加入显色剂，显色则配对成功；当所述捕获抗体为所述p1来源的单抗时，所述标记抗体为所述p2来源的单抗；当所述捕获抗体为所述p2来源的单抗时，所述标记抗体为所述p1来源的单抗。7.一种chi3l1单克隆抗体，其特征在于，由权利要求1-6任一项提供的方法制备得到。8.根据权利要求7所述的chi3l1单克隆抗体，其特征在于，应用于磁微粒化学发光免疫诊断。9.一种chi3l1检测试剂盒，其特征在于，包括：发光试剂和固相试剂；所述发光试剂和所述固相试剂均由权利要求7提供的所述chi3l1单克隆抗体制备得到。10.一种chi3l1单克隆抗体的应用，其特征在于，将由权利要求7提供的所述chi3l1单克隆抗体应用于磁微粒化学发光免疫诊断。

技术总结
本发明提供了一种CHI3L1单克隆抗体及其制备方法和应用；其中，制备方法包括以下步骤：S10：使用抗原对动物进行免疫，获得免疫细胞；S20：将免疫细胞和融合伴侣细胞融合，并且挑选出阳性融合细胞；S30：对阳性融合细胞进行亚克隆得到克隆化的融合细胞，克隆化的融合细胞可以分泌单克隆抗体；其中，抗原为重组抗原P1或重组抗原P2，重组抗原P1对应CHI3L1序列中31-149aa基因序列，重组抗原P2对应CHI3L1序列中248-383aa基因序列；单克隆抗体为P1来源的单抗或P2来源的单抗。本发明的有益效果在于：将重组蛋白作为免疫原产量高，制备方便，可以获得多位点的单克隆抗体，多种的配对方式可用满足不同方法学检测的需要。足不同方法学检测的需要。足不同方法学检测的需要。


技术研发人员：邹继华 何进军 张华杰 贾江花 瑞亚
受保护的技术使用者：美康生物科技股份有限公司
技术研发日：2021.10.15
技术公布日：2022/1/21