一种玉米赤霉醇免疫亲和柱及其制备方法和用途与流程

技术特征：
1.一种玉米赤霉醇免疫亲和柱，包括偶联有玉米赤霉醇单克隆抗体的固相载体、装载其的塑料管及保存液，其特征在于，所述玉米赤霉醇单克隆抗体是以玉米赤霉醇半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得；所述玉米赤霉醇半抗原是以玉米赤霉酮为起始原料，在l-羟脯氨酸盐的催化下，与三甲基氰硅烷反应得到氰醇化合物，再对氰基进行水解反应得到的，其分子结构式为：2.如权利要求1所述的玉米赤霉醇免疫亲和柱，其特征在于，所述固相载体为溴化氰活化琼脂糖凝胶4b。3.如权利要求1所述的玉米赤霉醇免疫亲和柱，其特征在于，所述载体蛋白为牛血清白蛋白。4.权利要求1所述的玉米赤霉醇免疫亲和柱的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：1)固相载体活化：将溴化氰活化琼脂糖凝胶4b用1mmol/l hcl溶液浸泡30min，3000～8000r/min离心2～10min分离固相载体，再用0.1mol/l ph 9.0的cb缓冲液洗涤固相载体3～5次，5000r/min离心10min分离固相载体；2)抗体偶联：向步骤1)活化的固相载体中加入玉米赤霉醇单克隆抗体，再加入0.1mol/l ph 9.0的cb缓冲液，37℃条件下150r/min震荡反应1h；反应结束后，离心分离偶联物，用0.1mol/l ph 8.3的nahco3缓冲液洗涤偶联物3～5次；3)抗体封闭：向步骤2)的偶联物中加入0.1mol/l ph 8.0的含0.5mol/l nacl的tris-hcl溶液，4℃过夜或者37℃、150r/min反应2h封闭未结合位点；反应结束后，用0.1mol/l ph 4.0的含0.5mol/l nacl的醋酸钠溶液与0.1mol/l ph 8.0的含0.5mol/l nacl的tris-hcl溶液交替洗涤3～5次，最后用0.1mol/l ph 8.0的含0.5mol/l nacl的tris-hcl溶液复溶；4)装柱：按每支1ml抗体-固相载体偶联物进行装柱，加保存液，4～8℃保存。5.权利要求1所述的玉米赤霉醇免疫亲和柱的用途，其特征在于，所述用途为提取动物源性食品中的玉米赤霉醇残留。

技术总结
本发明公开了一种玉米赤霉醇免疫亲和柱，包括偶联有玉米赤霉醇单克隆抗体的固相载体、装载其的塑料管及保存液，所述玉米赤霉醇单克隆抗体是以玉米赤霉醇半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得，所述玉米赤霉醇半抗原是以玉米赤霉酮为起始原料，在L-羟脯氨酸盐的催化下，与三甲基氰硅烷反应得到氰醇化合物，再对氰基进行水解反应得到的。本发明提供的玉米赤霉醇免疫亲和柱结构简单、使用方便、特异性强，可快速提取动物源性食品中的玉米赤霉醇残留。留。留。


技术研发人员：万宇平 马玉华 王兆芹 李晓芳 赵杨 李天伟
受保护的技术使用者：山东勤邦生物技术有限公司
技术研发日：2021.10.15
技术公布日：2022/1/21