技术特征：
1.一种融合蛋白，其特征在于：包含豆蔻酰化结构域、cas9结构域和核定位信号，其中所述豆蔻酰化结构域不包含棕榈酰化基序，其中多肽被配置成在翻译期间被豆蔻酰化、封装到外泌体中，并定位至受体细胞的细胞核中。2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于：所述豆蔻酰化结构域包含氨基酸序列g-x
1-x
1-x
1-s/t-x
2-x
2-x2(序列号：1)，其中x1是除cys外的任何氨基酸，并且其中x2是任何氨基酸或不含任何氨基酸。3.一种重组多核苷酸，其特征在于：包含编码与第一表达控制序列可操作地连接的向导rna的核酸序列，以及编码与第二表达控制序列可操作地连接的根据权利要求1或2所述的融合蛋白的核酸序列。4.一种细胞，其特征在于：包含根据权利要求3所述的多核苷酸。5.一种制备基因编辑组合物的方法，其特征在于：包含在适于产生封装向导rna和融合蛋白的细胞外囊泡的条件下培养根据权利要求4所述的细胞。6.一种基因编辑组合物，其特征在于：包含封装根据权利要求1或2所述的融合蛋白和向导rna的细胞外囊泡。7.根据权利要求6所述的基因编辑组合物，其特征在于：通过根据权利要求6所述的方法产生。8.一种用于在细胞中编辑基因的方法，其特征在于：包含使所述细胞与根据权利要求6或7所述的基因编辑组合物接触。9.一种用于将蛋白质封装到细胞外囊泡中的方法，其特征在于：包含提供所述蛋白质与豆蔻酰化结构域的融合体，其中所述豆蔻酰化结构域不包含棕榈酰化基序，其中多肽被配置成在翻译期间被豆蔻酰化并封装到细胞外囊泡中。
技术总结
本文公开了一种用于基因编辑的融合蛋白，其包含Cas9结构域，所述Cas9结构域被配置成封装到外泌体中并定位至受体细胞的细胞核。还公开了包含编码所公开的Cas9融合蛋白的核酸序列的重组多核苷酸。还公开了包含所公开的多核苷酸的细胞。还公开了制备基因编辑组合物的方法，其涉及在适于产生封装向导RNA和融合蛋白的细胞外囊泡的条件下培养所公开的细胞。还公开了涉及封装所公开的Cas9融合蛋白和向导RNA的细胞外囊泡的基因编辑组合物。最后，本文还公开了用于在细胞中编辑基因的方法，其涉及使所述细胞与本文公开的基因编辑组合物接触。所述细胞与本文公开的基因编辑组合物接触。所述细胞与本文公开的基因编辑组合物接触。
技术研发人员：蔡后建
受保护的技术使用者：乔治亚大学研究基金公司
技术研发日：2020.04.02
技术公布日：2022/1/10
再多了解一些
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