一种头孢硫脒中异硫氰酸异丙酯含量的检测方法与流程

技术特征：
1.一种头孢硫脒中异硫氰酸异丙酯含量的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：制备对照品贮备液称取异硫氰酸异丙酯对照品，加丙酮，制成每1ml中含2.4μg异硫氰酸异丙酯的溶液，作为对照品贮备液；步骤2：制备衍生化反应液以二乙胺和丙酮按体积比为1:9的混合液，作为衍生化反应液；步骤3：制备稀释剂以磷酸盐缓冲液和乙腈按体积比为1:1的混合液，作为稀释剂；步骤4：制备对照品溶液精密移取1ml步骤1的对照品贮备液，置于10ml容量瓶，加入1ml步骤2的衍生化反应液，水浴后，用步骤3的稀释剂稀释定容至刻度，作为对照品溶液；步骤5：制备供试品溶液精密称取200mg
±
0.5mg待测定的头孢硫脒供试品，置于10ml容量瓶，加入1ml步骤2的衍生化反应液，水浴后，用步骤3的稀释剂定容至刻度，摇匀，作为供试品溶液；步骤6：制备空白溶液精密移取1ml步骤2的衍生化反应液，置于10ml容量瓶，水浴后，用步骤3的稀释剂定容至刻度，作为空白溶液；步骤7：色谱条件色谱柱为c
18
柱，以磷酸盐缓冲液为流动相a，以乙腈为流动相b，进行梯度洗脱，柱温为20℃-30℃，流速为0.8ml/min-1.2ml/min，紫外检测器，检测波长为240nm；步骤8：测定分别吸取步骤4的对照品溶液和步骤5的供试品溶液各20μl，注入高效液相色谱仪，读取数据；对照品溶液峰形对称，理论塔板数2000以上，供试品溶液色谱图中如有异硫氰酸异丙酯峰，与对照品溶液中异硫氰酸异丙酯峰保留时间一致；空白溶液色谱图，无与异硫氰酸异丙酯对照相同的峰出现，即空白溶液无干扰；根据对照品溶液浓度与相应的色谱峰面积，供试品溶液色谱峰面积，采用外标法，计算得到头孢硫脒供试品中异硫氰酸异丙酯含量。2.根据权利要求1所述的头孢硫脒中异硫氰酸异丙酯含量的检测方法，其特征在于，步骤1中，所述异硫氰酸异丙酯对照品的纯度为97.0％。3.根据权利要求1所述的头孢硫脒中异硫氰酸异丙酯含量的检测方法，其特征在于，步骤3中，所述磷酸盐缓冲液的配制方法是：称取6.95g十二水合磷酸氢二钠和1.29g一水合柠檬酸，加超纯水溶解并稀释至1000ml。4.根据权利要求1所述的头孢硫脒中异硫氰酸异丙酯含量的检测方法，其特征在于，步骤4、步骤5和步骤6中，所述水浴的温度均为25℃，时间均为30min-40min。5.根据权利要求1所述的头孢硫脒中异硫氰酸异丙酯含量的检测方法，其特征在于，步骤5中，所述头孢硫脒供试品的剂型为注射剂。6.根据权利要求1所述的头孢硫脒中异硫氰酸异丙酯含量的检测方法，其特征在于，步骤7中，所述色谱柱为kromasil 100-5-c
18
柱，长度为250mm，内径为4.6mm，填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，粒径为5μm。
7.根据权利要求1所述的头孢硫脒中异硫氰酸异丙酯含量的检测方法，其特征在于，步骤7中，所述梯度洗脱的具体方法是：按体积比，0min-7min，流动相a为50％，流动相b为50％；7min-12min,流动相a为50％至40％，流动相b为50％至60％；12min至22min,流动相a为40％，流动相b为60％；22min-23min,流动相a为40％至50％，流动相b为60％至50％；23min-30min,流动相a为50％，流动相b为50％。8.根据权利要求1所述的头孢硫脒中异硫氰酸异丙酯含量的检测方法，其特征在于，步骤7中，所述柱温为25℃，所述流速为1.0ml/min。9.根据权利要求1-8任一项所述的头孢硫脒中异硫氰酸异丙酯含量的检测方法，其特征在于，步骤8中，所述头孢硫脒供试品中异硫氰酸异丙酯含量按式1计算：式中，w
s
为对照品的称样量，mg；a
s
为对照品溶液的峰面积；d
s
为对照品溶液的稀释体积，ml；p为对照品含量；a
t
为供试品溶液的峰面积；d
s
为供试品溶液的稀释体积，ml；w
t
为供试品的称样量，mg。

技术总结
本发明公开了一种头孢硫脒中异硫氰酸异丙酯的检测方法，属于分析技术领域。所述头孢硫脒中异硫氰酸异丙酯含量的检测方法，包括如下步骤：步骤1：制备对照品贮备液；步骤2：制备衍生化反应液；步骤3：制备稀释剂；步骤4：制备对照品溶液；步骤5：制备供试品溶液；步骤6：制备空白溶液；步骤7：色谱条件；步骤8：测定。本发明建立了头孢硫脒中异硫氰酸异丙酯含量的高效液相色谱测定法，可以有效地对头孢硫脒原料药中可能存在的异硫氰酸异丙酯杂质进行检测，控制每克头孢硫脒原料药中异硫氰酸异丙酯≤12μg，从而有效地控制头孢硫脒原料药的质量。从而有效地控制头孢硫脒原料药的质量。从而有效地控制头孢硫脒原料药的质量。


技术研发人员：刘世称 覃金 罗辉 石殷华 秦依萍 黄彩蜜 唐路秀 李玉华 张丰鸣
受保护的技术使用者：广西科伦制药有限公司
技术研发日：2021.09.08
技术公布日：2022/1/10