一种奥沙利铂脂质体及其注射剂在制备治疗胃癌药物中的用途的制作方法

1.本发明属于药物制剂技术领域，具体涉及一种奥沙利铂脂质体及其注射剂在制备治疗胃癌药物中的用途。


背景技术：

2.目前，铂类化疗药物主要分为三大类：一代顺铂，二代卡铂、奈达铂、环铂，三代奥沙利铂、洛铂。
3.奥沙利铂为第3代铂类抗癌药，为二氨环己烷的铂类化合物，即以1，2
‑
二氨环己烷基团代替顺铂的氨基。与其他铂类药作用相同，即均以dna为靶作用部位，铂原子与dna形成交叉联结，拮抗其复制和转录。
4.cn 103181898a公开了一种奥沙利铂脂质体及其应用，所述奥沙利铂脂质体包括奥沙利铂、磷脂、胆固酸和泊洛沙姆f68，磷脂与胆固醇的质量比为3～8：1，奥沙利铂与磷脂的质量比为1：30～60，泊洛沙姆f68与磷脂的质量比为1：5～15。但是发明中缺少对脂质包封率的实验数据，难以确定是否会发生渗漏情况。
5.因此，我们致力于开发一种、包封率高、稳定性好，治疗胃癌的效果佳的奥沙利铂脂质体制剂。


技术实现要素：

6.针对现有技术的不足，本发明提供了一种含铂类药物脂质体，通过优选药物载体、稳定剂、缓冲剂等，解决了含铂类药物脂质体包封率低、有关物质含量高的问题，提高了奥沙利铂治疗胃癌的效果。
7.具体而言，本发明的技术方案如下：
8.本发明提供了一种含铂类药物脂质体；
9.所述的含铂类药物的脂质体包含：
10.(1)铂类药物；
11.(2)脂质载体。
12.进一步的，所述的铂类药物为顺铂、卡铂、奈达铂、双环铂、洛铂、奥沙利铂的一种，优选为奥沙利铂。
13.所述的脂质载体包括但不限于普通脂质材料、修饰后的脂类材料；
14.进一步的，所述修饰后的脂类材料包括但不限于被氨基酸、聚乙二醇、叶酸、半乳糖、甘露糖修饰的脂质材料，优选为氨基酸修饰的脂类材料。
15.具体的，所述的氨基酸修饰的脂类材料中氨基酸选自甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、色氨酸、丝氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、苏氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、硒半胱氨酸、吡咯赖氨酸中的一种。
16.优选为，脂质载体为苏氨酸修饰的脂类材料。
17.进一步优选为，脂质载体为苏氨酸磷脂。
18.其中，含铂类药物的脂质体中铂类药物和脂质载体的重量份比为1：0.5
‑
6。
19.优选为，含铂类药物的脂质体中铂类药物和脂质载体的重量份比为1:2。
20.本发明的第二个目的在于提供一种制备所述含铂类药物脂质体的方法，具体包括以下步骤：
21.(1)空白脂质体制备：用巴比妥钠缓冲溶液与脂质载体混合制备空白脂质体，透析；
22.(2)药物装载：向步骤(1)所得空白脂质体中加入铂类药物，水浴加热，缓慢搅拌，冷却至室温，即得。
23.本发明的第三个目的在于提供一种注射剂。
24.所述注射剂是由上述含铂类药物脂质体和药学上可接受的辅料组成。
25.进一步的，注射剂可以包括：
26.(1)含铂类药物的脂质体；
27.(2)稳定剂；
28.(3)缓冲剂；
29.(4)溶剂；
30.进一步的：
31.所述的稳定剂为海藻糖或麦芽糖。
32.所述的缓冲剂选自磷酸盐缓冲溶液、碳酸盐缓冲溶液、氨基酸缓冲溶液、巴比妥钠缓冲溶液的一种或多种。
33.优选为：
34.所述的稳定剂为海藻糖。
35.所述的缓冲剂为巴比妥钠缓冲溶液和磷酸盐缓冲溶液。
36.具体的，所述铂类药物与稳定剂的重量份比为1:0.1
‑
0.5，优选为1:0.2。
37.优选的，所述注射剂中各组分以重量比计算为：
[0038][0039]
进一步优选的，注射剂中各组分以重量比计算为：
[0040][0041]
其中巴比妥钠缓冲溶液的浓度为0.05
‑
0.5mol/l，优选为0.1mol/l。
[0042]
本发明的第四个目的在于提供所述的注射剂在制备治疗癌症药物中的用途。
[0043]
进一步的，所述癌症包括但不限于胃癌、卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、肺癌、鼻咽癌、食道癌、肠癌、肝癌、甲状腺癌、脑癌、膀胱癌，胰腺癌、乳腺癌、宫颈癌中的一种或多种。
[0044]
尤其是所述奥沙利铂脂质体注射剂在制备治疗胃癌药物中的用途。
[0045]
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
[0046]
(1)通过优选脂质载体以及脂质载体与药物的比例，提高了脂质体的包封率和稳定性。
[0047]
(2)通过筛选稳定剂的种类，降低了有关物质的含量，提高了注射剂的稳定性；
[0048]
(3)本发明脂质体制剂能够有效抑制体外胃癌细胞hgc、sgc
‑
7901的活性，对胃癌细胞hgc、sgc
‑
7901的抑制率高。
[0049]
(4)动物实验研究表明，本发明奥沙利铂脂质体制剂能够缓解癌症精神萎靡等症状，抑制大鼠体内肿瘤重量，降低大鼠肿瘤内bcl
‑
2、vegf的表达水平、提高大鼠肿瘤内bax的表达水平，效果优于市售奥沙利铂制剂。
具体实施方式
[0050]
为了使本发明的目的、技术方案更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明做进一步的说明，但是本发明的保护范围并不限于这些实施例，实施例仅用于解释本发明。本领域技术人员应该理解的是，凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。
[0051]
实施例1
‑
3(小体积注射剂1000支)
[0052]
实施例1配方：
[0053][0054]
实施例2配方：
[0055][0056]
实施例3配方：
[0057][0058]
实施例1
‑
3制备方法：
[0059]
(1)空白脂质体制备：先用0.1mol/l的巴比妥钠缓冲溶液与苏氨酸磷脂混合制备空白脂质体，透析；
[0060]
(2)药物装载：向步骤(1)所得空白脂质体中加入奥沙利铂，加热30
‑
40℃、缓慢搅拌20
‑
40分钟，冷却至室温，加入海藻糖，搅拌；
[0061]
(3)配制：向步骤(2)所得溶液中加入磷酸盐缓冲溶液，调节ph为6
‑
8，优选为ph＝7.4，加注射用水至2000ml，过滤。
[0062]
实施例4(小体积注射剂1000支)
[0063][0064]
实施例4制备方法：
[0065]
(1)空白脂质体制备：先用0.05mol/l巴比妥钠缓冲溶液与苏氨酸磷脂混合制备空白脂质体，透析；
[0066]
(2)药物装载：向步骤(1)所得空白脂质体中加入奥沙利铂，加热30
‑
40℃、缓慢搅拌20
‑
40分钟，冷却至室温，加入海藻糖，搅拌；
[0067]
(3)配制：向步骤(2)所得溶液中加入磷酸盐缓冲溶液，调节ph为6
‑
8，优选为ph＝7.4，加注射用水至5000ml，过滤。
[0068]
实施例5(小体积注射剂1000支)
[0069]
实施例5配方：
[0070][0071]
实施例5制备方法：
[0072]
(1)空白脂质体制备：先用0.5mol/l巴比妥钠缓冲溶液与丝氨酸磷脂混合制备空白脂质体，透析；
[0073]
(2)药物装载：向步骤(1)所得空白脂质体中加入奥沙利铂，加热30
‑
40℃、缓慢搅拌20
‑
40分钟，冷却至室温，加入麦芽糖，搅拌；
[0074]
(3)配制：向步骤(2)所得溶液中加入磷酸盐缓冲溶液，调节ph为6
‑
8，优选为ph＝7.4，加注射用水至5000ml，过滤。
[0075]
实施例6(冻干粉针剂1000支)
[0076]
实施例6配方：
[0077][0078]
实施例6制备方法：
[0079]
(1)空白脂质体制备：先用0.1mol/l巴比妥钠缓冲溶液与苏氨酸磷脂混合制备空白脂质体，透析；
[0080]
(2)药物装载：向步骤(1)所得空白脂质体中加入奥沙利铂，加热30
‑
40℃、缓慢搅拌20
‑
40分钟，冷却至室温，；
[0081]
(3)冷冻干燥：将步骤(2)所得溶液无菌过滤后(膜滤器孔径0.2μm)，分装入西林瓶中，冷冻干燥，即得。
[0082]
对比实施例1(小体积注射剂1000支)
[0083][0084]
制备方法：
[0085]
(1)空白脂质体制备：先用0.1mol/l巴比妥钠缓冲溶液与胆固醇
‑
磷脂混合制备空白脂质体，透析；
[0086]
(2)药物装载：向步骤(1)所得空白脂质体中加入奥沙利铂，加热30
‑
40℃、缓慢搅拌20
‑
40分钟，冷却至室温，加入海藻糖，搅拌；
[0087]
(3)配制：向步骤(2)所得溶液中加入磷酸盐缓冲溶液，调节ph为6
‑
8，优选为ph＝7.4，加注射用水至5000ml，过滤。
[0088]
对比实施例2(小体积注射剂1000支)
[0089][0090]
制备方法：
[0091]
(1)空白脂质体制备：先用0.1mol/l巴比妥钠缓冲溶液与苏氨酸磷脂混合制备空白脂质体，透析；
[0092]
(2)药物装载：向步骤(1)所得空白脂质体中加入奥沙利铂，加热30
‑
40℃、缓慢搅拌20
‑
40分钟，冷却至室温，加入海藻糖，搅拌；
[0093]
(3)配制：向步骤(2)所得溶液中加入磷酸盐缓冲溶液，调节ph为6
‑
8，优选为ph＝7.4，加注射用水至5000ml，过滤。
[0094]
对比实施例3(小体积注射剂1000支)
[0095]
[0096]
制备方法：
[0097]
(1)空白脂质体制备：先用0.1mol/l巴比妥钠缓冲溶液与苏氨酸磷脂混合制备空白脂质体，透析；
[0098]
(2)药物装载：向步骤(1)所得空白脂质体中加入奥沙利铂，加热30
‑
40℃、缓慢搅拌20
‑
40分钟，冷却至室温，加入甘露醇，搅拌；
[0099]
(3)配制：向步骤(2)所得溶液中加入磷酸盐缓冲溶液，调节ph为6
‑
8，优选为ph＝7.4，加注射用水至5000ml，过滤。
[0100]
对比实施例4(小体积注射剂1000支)
[0101][0102]
制备方法：
[0103]
(1)空白脂质体制备：先用0.1mol/l巴比妥钠缓冲溶液与苏氨酸磷脂混合制备空白脂质体，透析；
[0104]
(2)药物装载：向步骤(1)所得空白脂质体中加入奥沙利铂，加热30
‑
40℃、缓慢搅拌20
‑
40分钟，冷却至室温，加入海藻糖，搅拌；
[0105]
(3)配制：向步骤(2)所得溶液中加入磷酸盐缓冲溶液，调节ph为6
‑
8，优选为ph＝7.4，加注射用水至5000ml，过滤。
[0106]
对比实施例5(小体积注射剂1000支)
[0107][0108]
制备方法：
[0109]
(1)空白脂质体制备：先用0.1mol/l枸橼酸钠缓冲溶液与苏氨酸磷脂混合制备空白脂质体，透析；
[0110]
(2)药物装载：向步骤(1)所得空白脂质体中加入奥沙利铂，加热30
‑
40℃、缓慢搅拌20
‑
40分钟，冷却至室温，加入海藻糖，搅拌；
[0111]
(3)配制：向步骤(2)所得溶液中加入磷酸盐缓冲溶液，调节ph为6
‑
8，优选为ph＝7.4，加注射用水至5000ml，过滤。
[0112]
验证实施例
[0113]
一、质量评价
[0114]
1.基本性能测试
[0115]
表1实施例与对比实施例基本性能测试
[0116] 性状可见异物粒径实施例1淡黄色透明液体符合规定符合规定实施例2淡黄色透明液体符合规定符合规定实施例3淡黄色透明液体符合规定符合规定实施例4无色透明液体符合规定符合规定实施例5淡黄色透明液体符合规定符合规定对比实施例1淡黄色透明液体符合规定符合规定对比实施例2淡黄色透明液体符合规定符合规定对比实施例3少量黄色絮状物不符合规定符合规定对比实施例4淡黄色透明液体符合规定符合规定对比实施例5淡黄色透明液体符合规定符合规定
[0117]
2.包封率
[0118]
包封率是脂质体质量评价的一个重要指标，是指包入脂质体的药物量占体系总药量的百分比，
[0119]
包封率＝(脂质体中包封的药物量/投入总药量)
×
100％
[0120]
＝(投入总药量
‑
未包入脂质体内的游离药物量)/投入总药量
×
100％
[0121]
采用葡聚糖凝胶、超速离心法、透析法等分离方法将溶液中游离药物和脂质体分离，分别测定，计算包封率。
[0122]
表2实施例与对比实施例脂质体的包封率(％)
[0123][0124]
[0125]
通过表2可以看出，包封率的高低与脂质载体的种类、载体与药物的比例、水相介质等均相关。本发明所保护的技术方案制备而成的脂质体制剂中脂质体包封率均在95％以上，最佳技术方案的包封率高达99.02％；而对比实施例方案制备的制剂脂质体包封率普遍较低，尤其是对比实施例1选择其他的脂质载体(胆固醇
‑
磷脂)包封药物，包封率仅有81.35％，另外，水相介质的选择也是至关重要的，对比实施例5选择枸橼酸钠缓冲溶液作为介质，脂质体的包封率仅有86.64％。
[0126]
3.渗漏率
[0127]
渗漏率是指脂质体在贮藏一段时间后，渗漏到介质中的药物量与贮藏前脂质体中包封的药量指比，是脂质体稳定性的一个评价指标，测定方法同包封率方法。
[0128]
渗漏率(％)＝(贮藏后渗漏到介质中药物量/贮藏前脂质体中包封的药物量)
×
100％
[0129]
表3实施例与对比实施例脂质体的渗漏率(％)
[0130]
[0131][0132]
通过表3可以看出，对比实施例的渗漏率普遍偏高，尤其是对比实施例1和对比实施例5，说明脂质载体的种类和水相介质缓冲剂的选择影响脂质体的渗漏率。本发明技术方案制备的脂质体稳定性较好，渗漏率低，尤其是对于4℃和25℃的储存条件，渗漏率基本一致，说明使用本发明所保护的技术方案制备的脂质体可以在25℃的条件下贮存，稳定性高。
[0133]
4.有关物质
[0134]
照高效液相色谱法(通则0512)测定。避光操作。
[0135]
双羟基奥沙利铂(杂质ⅲ)与其他杂质照高效液相色谱法(通则0512)测定。临用新制。
[0136]
供试品溶液：取本品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中含奥沙利铂2mg的溶液。
[0137]
对照溶液：精密量取供试品溶液适量，用水定量稀释制成每1ml中含奥沙利铂2μg
的溶液。
[0138]
限度：供试品溶液色谱图中除草酸峰外，如有与系统适用性溶液第二个主峰保留时间一致的色谱峰(杂质ⅲ)，其峰面积不得大于对照溶液主峰面积的4.6倍(0.1％)；其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积的2倍(0.2％)，其他杂质峰面积的总和不得大于对照溶液主峰面积的5倍(0.5％)。(加速试验条件：温度40℃
±
2％，相对湿度：75％
±
5％)表4实施例与对比实施例有关物质含量(％)
[0139][0140][0141]
通过表4有关物质含量测试可知，稳定剂海藻糖的加入可以明显降低有关物质的含量，麦芽糖也具有降低有关物质含量的效果，并且加速试验显示，本发明所保护的方案制得的制剂长期稳定性高，实验数据显示，0天和加速6个月的有关物质的含量均低于对比实施例。
[0142]
二、药理学实验
[0143]
发明人开展相关药效学试验研究以证明本发明含铂类药物脂质体制剂在治疗胃癌方面的功效以及对于肾脏毒性的影响。需要说明的是，以下实验研究均是在急性毒性试验、长期毒性试验证明药物安全性基础之上开展，实验研究中的给药剂量均在安全剂量范围之内。下述药效学试验所选取的药品为本发明具有代表性的配方所得的药品；本发明所包含的其它实施例所得制剂，发明人同样进行了药效学实验，实验结果具有相同或类似的效果，但由于篇幅限制，在此不一一列举。
[0144]
1.本发明实施例对胃癌细胞的抑制作用
[0145]
1.1胃癌细胞hgc、sgc
‑
7901的培养
[0146]
将胃癌细胞hgc、sgc
‑
7901分别培养于含10％的胎牛血清(fbs)的1640培养基中，置于37℃、湿度适宜、5％co2恒温孵育箱中培养；每日观察培养液的颜色变化、有无污染、细胞贴壁以及生长情况等，每3天更换一次培养液；待细胞贴壁达瓶底的80％，用0.25％胰酶消化传代。
[0147]
1.2实验分组
[0148]
空白组：含10％血清rpmi
‑
1640培养液。
[0149]
对照组1：分别含胃癌细胞hgc的10％的胎牛血清(fbs)的1640培养液。
[0150]
对照组2：分别含胃癌细胞sgc
‑
7901的10％的胎牛血清(fbs)的1640培养液。
[0151]
实施例1组1：加入含有本发明实施例1所述药物于上述分别含胃癌细胞hgc的10％的胎牛血清(fbs)的1640培养液，使其药物终浓度为85mg/ml；每24h更换新鲜药液，连续作用3d后弃去药液，以含10％胎牛血清rpmi
‑
1640培养液继续培养5d。
[0152]
实施例1组2：加入含有本发明实施例1所述药物于上述分别含胃癌细胞sgc
‑
7901的10％的胎牛血清(fbs)的1640培养液，使其药物终浓度为85mg/ml；每24h更换新鲜药液，连续作用3d后弃去药液，以含10％胎牛血清rpmi
‑
1640培养液继续培养5d。
[0153]
市售参比组1：加入含有市售奥沙利铂药物于上述分别含胃癌细胞hgc的10％的胎牛血清(fbs)的1640培养液，使其药物终浓度为85mg/ml；每24h更换新鲜药液，连续作用3d后弃去药液，以含10％胎牛血清rpmi
‑
1640培养液继续培养5d。
[0154]
市售参比组2：加入含有市售奥沙利铂药物于上述分别含胃癌细胞sgc
‑
7901的10％的胎牛血清(fbs)的1640培养液，使其药物终浓度为85mg/ml；每24h更换新鲜药液，连续作用3d后弃去药液，以含10％胎牛血清rpmi
‑
1640培养液继续培养5d。
[0155]
1.3实验方法
[0156]
上述各组待细胞过夜贴壁后48小时取出96孔板，每孔内加入浓度为5g/l的四甲基偶氮唑盐(mtt)20μl重新放置于培养箱内孵育4h；吸干培养基，每孔加入150μl二甲基亚砜(dmso)，混匀；置于酶标仪490nm波长处光度(a)。
[0157]
1.4实验结果
[0158]
细胞增殖抑制率＝(对照组a值
‑
空白组a值)
‑
(药物组a值
‑
空白组a值)/(对照组a值
‑
空白组a值)。
[0159]
表5各组对胃癌细胞hgc增殖活性的影响结果(n＝10)
[0160][0161][0162]
注：与空白组比较，*p<0.01
[0163]
与模型组比较，
#
p<0.01
[0164]
表6各组对胃癌细胞sgc
‑
7901增殖活性的影响结果(n＝10)
[0165][0166]
注：与空白组比较，*p<0.01
[0167]
与模型组比较，
#
p<0.01
[0168]
表5、表6的结果显示，实施例1制备的奥沙利铂制剂对胃癌hgc、sgc
‑
7901细胞的抑制作用较好，3.0ng/ml达到92.89％和90.10％。相同浓度下，本发明所述的制剂效果优于市售制剂。
[0169]
2.本发明实施例对荷瘤大鼠相关影响因子的表达及肾损伤的影响
[0170]
2.1实验动物
[0171]
sd大鼠，spf级，180
‑
220g，实验动物许可证号：syxk(鲁)20180008，购于鲁南制药集团股份有限公司，实验前在标准条件下适应性喂养1周。
[0172]
2.2方法
[0173]
2.2.1实验动物
[0174]
sd大鼠若干只，雌雄各半，spf级，180
‑
220g，实验前适应性饲养一周。
[0175]
2.2.2造模方式和分组
[0176]
取对数生长期胃癌sgc7901细胞株悬液0.2ml(含细胞数1
×
106个)，注射入大鼠左下肢外侧皮下，正常饲养3周，待皮下肿瘤组织长至1cm
×
1cm大小左右，胃癌荷瘤大鼠模型建成，观察大鼠成瘤情况，最后共有52只建模成功。
[0177]
实施例1组、市售奥沙利铂组、模型组、空白组，共四组。每组10只建模成功的大鼠，雌雄各半。
[0178]
2.2.3给药
[0179]
实施例1组：4mg/kg腹腔注射，每日1次，共7d；
[0180]
市售奥沙利铂组：4mg/kg腹腔注射，每日1次，共7d；
[0181]
模型组：等体积葡萄糖溶液腹腔注射，每日1次，共7d；
[0182]
空白组：等体积葡萄糖溶液腹腔注射，每日1次，共7d。
[0183]
2.3.统计学处理
[0184]
采用spss 22.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用表示，多组间比较采用单因素方差分析，两组间采用独立样本t检验方式分析。以p<0.05为差异有统计学意义。
[0185]
2.4实验项目与结果
[0186]
2.4.1大鼠生存行为学观察
[0187]
开始给药后定时称其体重，同时进行饮食、活动和精神状态的观察。
[0188]
评分标准：皮毛光泽暗淡、进食饮水减少、行动迟缓、精神萎靡、明显消瘦、聚集。大鼠出现上述症状各计1份，累计统计。
[0189]
表7各组大鼠行为学观察评分(n＝10)
[0190]
分组行为学评分空白组0.0
±
0.0模型组5.6
±
0.32*实施例1组2.0
±
0.28*
#
市售奥沙利铂组3.2
±
0.41*
#
[0191]
注：与空白组比较，*p<0.01
[0192]
与模型组比较，
#
p<0.01
[0193]
空白组大鼠精神状态良好。建模组大鼠出现皮毛光泽暗淡，进食饮水减少，行动迟缓，精神萎靡等现象，造模成功。给药后，市售奥沙利铂组大鼠状态症状明显减轻，但是实施例组大鼠状态更好，能够觅食积极，无明显消瘦、聚集等现象。
[0194]
2.4.2大鼠抑瘤率
[0195]
给药7d后停止治疗，大鼠全部处死，剥离肿瘤，称其瘤重并记录，计算抑瘤率。
[0196]
抑瘤率(％)＝(对照组平均瘤重
‑
治疗组平均瘤重)/对照组平均瘤重
×
100％。
[0197]
表8各组大鼠肿瘤重量及抑瘤率(n＝10)
[0198]
分组肿瘤重量(g)抑瘤率空白组0.0
±
0.0——模型组2.17
±
0.29*——实施例1组0.48
±
0.05*
#
77.89
±
0.09市售奥沙利铂组1.13
±
0.11*
#
44.92
±
0.18
[0199]
注：与空白组比较，*p<0.01
[0200]
与模型组比较，
#
p<0.01
[0201]
实施例1组和市售奥沙利铂组分别与空白组和模型组相比，差异有统计学意义(p＜0.01)。且实施例1组的抑瘤率达到77.89％，抑瘤效果优于市售奥沙利铂。
[0202]
2.4.3各组大鼠瘤体内bcl
‑
2、bax、vegf的含量表达
[0203]
bcl
‑
2是抑制细胞凋亡的基因，bax是bcl
‑
2家族中诱导细胞凋亡的基因，当肿瘤发生时，bax的表达降低，而bcl
‑
2的表达升高,导致肿瘤细胞无限增殖。vegf是一种高度特异性的促血管内皮细胞生长因子，在胃癌、食管癌、结直肠癌、食管癌、前列腺癌、乳腺癌等多种实体肿瘤中都具有高表达的现象，对肿瘤细胞的侵袭转移起着重要的调控作用。
[0204]
表9各组大鼠肿瘤内bcl
‑
2、bax的含量表达(n＝10)
[0205]
分组bcl
‑
2bax空白组0.125
±
0.112.03
±
0.41模型组1.576
±
0.32*1.211
±
0.31*实施例1组0.301
±
0.09*
#
1.792
±
0.23*
#
市售奥沙利铂组0.682
±
0.28*
#
1.412
±
0.38*
#
[0206]
注：与空白组比较，*p<0.01
[0207]
与模型组比较，
#
p<0.01
[0208]
表10各组大鼠肿瘤内vegf的含量表达(n＝10)
[0209][0210][0211]
注：与空白组比较，*p<0.01
[0212]
与模型组比较，
#
p<0.01
[0213]
各组大鼠瘤体内bcl
‑
2、bax、vegf的含量表达显示，空白组与模型组、实施例1组、市售奥沙利铂组相比，差异有统计学意义(p＜0.01)；模型组与实施例1组、市售奥沙利铂组相比，差异有统计学意义(p＜0.01)。本发明所制备的制剂能明显增强促凋亡基因bax的表达，降低凋亡抑制基因bcl
‑
2、血管内皮生长因子vegf的表达，效果均由于市售奥沙利铂制剂。