一种含有植物提取物的抑菌组合物及其在制备口腔卫生用品中的应用的制作方法

1.本发明属于口腔卫生用品技术领域，具体涉及一种含有植物提取物的抑菌组合物及其在制备口腔卫生用品中的应用。


背景技术：

2.拿虎为荨麻科植物海南冷水花(pilea tsiangiana metc.)的全草。直立草本，高30
‑
45cm。叶柄在每对对生叶等长，长1
‑
3.5cm，有条纹；托叶三角形，长约lmm，宿存；叶干后淡绿色；叶片卵形，长4
‑
16cm，宽3
‑
8cm，先端短渐尖，有伸长的尖头，基部圆形，边缘有浅锯齿，锯齿向上，两面均无毛，有稠密的钟乳体，钟乳体长线状，分布均匀，有时彼此重叠；叶脉为三出脉，两侧基出脉达叶片先端，支脉平行，直角开展，网脉不明显。雌雄异株；雄花序疏散，长2
‑
3cm，有纤弱的总花梗；雌花序未见；雄花萼裂4枚，卵形，长约lmm，先端有龙骨状的角突，背部被贴伏的柔毛或粗毛；雄蕊4，花药有横向紫色条纹。花期8
‑
10月，果期11月至翌年1月。
3.洋桔梗(eustoma grandiflorum(raf.)shinners)龙胆科多年生植物，株高30
‑
100厘米。叶对生，阔椭圆形至披针形，几无柄，叶基略抱茎；叶表蓝绿色。雌雄蕊明显，苞片狭窄披针形，花瓣覆瓦状排列。花色丰富，有单色及复色，花瓣单瓣与双瓣之分。
4.洗必泰，又名氯己定，是一种有机化合物，化学式为c
22
h
30
cl2n
10
，是一种广谱杀菌剂。
5.口腔卫生用品，包括漱口液、清洗液、牙膏、牙根管冲洗液，其活性成分的作用均为杀菌消毒，洗必泰为本领域常用的杀菌消毒剂，但由于其为化学合成物质，使用量收到限制，许多植物提取物均具有杀菌消毒作用，目前还没有拿虎和洋桔梗的提取物作为口腔卫生用品消毒剂的报道。


技术实现要素：

6.本发明的目的在于提供一种含有植物提取物的抑菌组合物及其在制备口腔卫生用品中的应用。
7.一种含有植物提取物的抑菌组合物，包括如下重量份数的活性组分：拿虎提取物30
‑
100份、洋桔梗提取物30
‑
100份、洗必泰3
‑
5份。
8.拿虎，为荨麻科植物海南冷水花(pileatsiangianametc.)的全草。分布于广东、海南、广西等地。微苦辛，性凉。归肝经。具有解毒消肿的功效。治疗疔疮痈肿等病症。
9.所述拿虎提取物的制备方法为：取拿虎全草晒干，粉碎，过50
‑
80目筛，用8
‑
12倍重量75％乙醇渗漉提取2
‑
4h，药渣加4
‑
8倍量75％乙醇继续渗漉提取0.5
‑
1.5h，弃去药渣，合并两次提取液，50℃以下减压回收乙醇，浓缩至药液比为1:1.0
‑
1.2的浸膏，制成。
10.洋桔梗植株中所含有的桔梗皂苷是重要的药用成分，功能主治咳嗽痰多，咽喉肿痛，宣肺，失音，洋桔梗性味平、苦、辛。有活血消食，祛痰利咽的功效。洋桔梗有镇咳的作用，
增强人体抵抗力，消除炎症，提高人体的免疫功能，有益于身体健康。
11.所述洋桔梗提取物的提取方法为：取洋桔梗的花朵打浆，然后加5
‑
10倍重量的水进行煎煮1
‑
3小时，滤取药液，活性炭脱色，过滤，蒸干，制成。
12.优选地，拿虎提取物、洋桔梗提取物和洗必泰的质量比为3:2:0.2。
13.作为本发明的发明目的之一，本发明还提供了含有上述植物提取物的抑菌组合物在制备口腔卫生用品中的应用。
14.优选地，所述含有植物提取物的抑菌组合物在制备口腔卫生用品中的添加量为0.5
‑
2wt％。
15.优选地，所述口腔卫生用品包括牙膏、漱口水、牙粉。
16.作为本发明的发明目的之一，本发明还提供了一种含有植物提取物的抑菌组合物的牙膏，其中，所述含有植物提取物的抑菌组合物的添加量为1wt％。
17.作为本发明的发明目的之一，本发明还提供了一种含有植物提取物的抑菌组合物的漱口水，其中，所述含有植物提取物的抑菌组合物的添加量为2wt％。
18.作为本发明的发明目的之一，本发明还提供了一种含有植物提取物的抑菌组合物的牙粉，其中，所述含有植物提取物的抑菌组合物的添加量为1.5wt％。
19.本发明的有益效果：本发明的含有植物提取物的抑菌组合物，为拿虎提取物和洋桔梗提取物的组合物，单组份均有杀灭口腔有害细菌的作用，两者组合使用，协同增效，效果更好。
附图说明
20.图1为实施例8
‑
10在30s和120s对大肠杆菌的杀灭时间数据；
21.图2为实施例8
‑
10在30s和120s对金黄色葡萄球菌的杀灭时间数据；
22.图3为实施例8
‑
10在30s和120s对变异链球菌的杀灭时间数据。
具体实施方式
23.为了便于理解本发明，下面将对本发明进行更全面的描述。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
24.实施例1拿虎提取物的制备
25.拿虎提取物的制备方法为：取拿虎全草晒干，粉碎，过60目筛，用10倍重量75％乙醇渗漉提取3h，药渣加6倍量75％乙醇继续渗漉提取1h，弃去药渣，合并两次提取液，50℃以下减压回收乙醇，浓缩至药液比为1:1.1的浸膏，制成。
26.实施例2洋桔梗提取物的制备
27.洋桔梗提取物的提取方法为：取洋桔梗的花朵打浆，然后加8倍重量的水进行煎煮2小时，采用纱布滤取药液，加入占滤液质量5％的活性炭脱色，再次过滤，蒸干，制成。
28.实施例3抑菌实验
29.将已经培养好的白色念珠菌用灭菌后的生理盐水清洗，然后转移进灭菌锥形瓶中，充分震荡均匀，用移液枪从灭菌锥形瓶中吸取菌液，将吸取的菌液稀释到1
×
107cfu/ml，放入改良马丁培养基中(成分蛋白胨5.0g、磷酸氢二钾1.0g、酵母浸出粉2.0g、硫酸镁
0.5g、葡萄糖20.0g、水1000ml)，终浓度为5
×
106cfu/ml；将实施例1制备的拿虎提取物和实施例2制备的洋桔梗提取物分别放入上述接菌的改良马丁培养基中，终质量浓度均为6％；空白对照加入等重量的无菌水；组合实验同时加入拿虎提取物和洋桔梗提取物，终浓度分别为3％、3％。在23℃的培养箱中培养白色念珠菌，测定抑菌率，抑菌率计算公式：
30.(空白对照的活菌数
‑
实验组活菌数)/空白对照的活菌数x100％
31.测定结果见表1：
32.表1
[0033][0034]
注：与拿虎提取物组或洋桔梗提取物对比；*代表p<0.05。
[0035]
实施例4
‑
6含有植物提取物的抑菌组合物在牙膏中的应用
[0036]
含有植物提取物的抑菌组合物的牙膏按照如下方法制备：
[0037]
(1)按照表2的组成原料的重量百分比称取各原料；将拿虎提取物、洋桔梗提取物、洗必泰用一部分去离子水溶解，然后将去离子水溶液加入牙膏制膏机中；再将山梨醇、丙二醇、羧甲基纤维素钠、黄原胶、香精和其余的去离子水加入到牙膏制膏机中，使牙膏制膏机中慢速搅拌并抽真空，待真空度达到
‑
0.09mpa时，关闭真空泵；
[0038]
(2)使牙膏制膏机高速搅拌，将二氧化硅、十二基硫酸钠依次利用真空泵吸入到牙膏制膏机中；
[0039]
(3)开启真空泵，混合环境的真空度达到
‑
0.09～
‑
0.095mpa时，继续均质20
‑
30分钟，使膏体达到紧致状态，然后关闭真空泵，将香精通过真空泵吸入到牙膏制膏机中；
[0040]
(4)开启真空泵继续均质乳化10
‑
20分钟可制得所需的成品膏体。
[0041]
表2
[0042][0043]
抑菌试验
[0044]
按照qbt 2738
‑
2012《日化产品抗菌抑菌效果的评价方法》进行抑菌效果测试。在20℃
‑
21℃的条件下，牙膏浓度为1:1，作用时间2min，试验菌种均为金黄色葡萄球菌(atcc 6538)、大肠杆菌(atcc25922)和白色念珠菌(atcc 10231)3种菌种；抑菌率≥50％时，标识为有抑菌效果，重复三次；抑菌率≥90％时，标识为有较强抑菌效果，重复三次。
[0045]
空白对照样不含上述抑菌组合物。
[0046]
测试结果参见表3。
[0047]
表3
[0048][0049][0050]
实施例7含有植物提取物的抑菌组合物在漱口水中的应用
[0051]
一种漱口液，由如下重量份数的组分构成：含有植物提取物的抑菌组合物2％，防腐剂0.1％，食用乙醇15％，香精0.5％，薄荷脑0.05％，甘油1％，余量为去离子水。含有植物提取物的抑菌组合物中拿虎提取物、洋桔梗提取物和洗必泰的质量比为3:2:0.2。
[0052]
先将含有植物提取物的抑菌组合物、防腐剂加入食用乙醇中搅拌溶解。将薄荷脑、甘油和去离子水加入搅拌釜搅拌10分钟，然后将前述乙醇溶液加入，再搅拌10分钟，最后加入香精，即可制得漱口水。
[0053]
将本实施例所得漱口液用于口腔溃疡患者使用，受试者共20人，均为成年男性，口腔内均有不同程度的牙菌斑形成。采用本发明的漱口液3个月，每天早晚各漱口一次，检测牙菌斑的改善情况，牙菌斑检测方法：显示剂检查法，用2％藻红液染色，先用棉球将藻红液涂在牙面上，5分钟后观察菌斑的显色情况。用以下标准定义菌斑程度：0度：无菌斑；1度：菌斑位于牙颈部，呈散在点状分布；2度：菌斑位于牙颈部，呈线状，其宽度为1毫米；3度：菌斑的宽度＞1毫米，但末达到牙冠的l/3；4度：菌斑的宽度达到牙冠的l/3，但末达到牙冠2/3；5度：菌斑的宽度达到牙冠的2/3或更多。测定结果显示，14名受试者牙菌斑的菌斑程度由4度变为2度，6名受试者牙菌斑的菌斑程度由3度变为2度。
[0054]
实施例8
‑
10含有植物提取物的抑菌组合物在牙粉中的应用
[0055]
牙粉的配方表参见表4。将各原料按比例混合均匀，即得。
[0056]
表4
[0057][0058]
抑菌试验
[0059]
在超净工作台内，将牙粉用去离子水制成浓度为30％(w/w)的牙粉浆液。选取大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、变异链球菌；接种在tsa斜面培养基上于37℃培养24h,连续转接2次；用2ml灭菌生理盐水(0.85％)将上述斜面洗脱，装于10ml灭菌离心管中，作为初始菌液，4℃保藏备用。用微量移液器吸取菌液1ml于9ml无菌生理盐水中，振荡混匀，此稀释倍数为1：10。用移液器吸取10倍稀释菌液1ml于9ml无菌生理盐水中，此即100倍稀释。其余以此类推，稀释到1 0
‑
12梯度；选取合适的梯度，按照《化妆品卫生规范》(2007)分别对细菌进行计数。取无菌试管，先加入0.5ml菌悬液(1x108cfu/ml～5x108cfu/ml),用移液器吸取上述浓度杀菌液4.5ml注入其中，迅速混匀并立即记时。待菌悬液与杀菌液相互作用至各预定时间(30s，2min),分别吸取0.5ml菌悬液与杀菌液的混合液加于4.5ml经灭菌的中和剂中混匀，作用10min。
[0060]
分别吸取上述混合液1.0ml，按活菌培养计数方法测定存活菌数，每管样液接种2个平皿即可。如平板上生长的菌落数较多时，可进行系列10倍稀释后，再进行活菌培养计
数。计算杀灭对数值:计算各组的活菌浓度(cfu/ml)，并换算为对数值(n)，然后按下式计算杀灭对数值；杀灭对数值(kl)＝对照组平均活菌浓度的对数值(no)—试验组活菌浓度对数值(nx)；计算杀灭对数值时，取小数点后两位值，可以进行数字修约。
[0061]
从图1可以看出，实施例9对大肠杆菌的杀菌速率要明显高于实施例8。在30s和120s时，实施例10在30s产生6.5左右的大肠杆菌对数杀灭，在120s时的对数杀灭与30s相仿，均比实施例8和9的对数杀灭要更高。这说明拿虎提取物与洋桔梗提取物产生了协同的杀菌效果。
[0062]
从图2可以看出，对于金黄色葡萄球菌，实施例8在120s时均显示出4左右的细菌对数杀灭，实施例9在120s时均显示出6左右的细菌对数杀灭。两者复配后实施例10显示了高水平的杀灭，在30s和120s时产生6.5左右的细菌对数杀灭，显示出明显的协同抑菌效果。
[0063]
图3显示了拿虎提取物对变异链球菌显示出来很强的抑菌效果，在30s和120s时产生5以上的对数杀灭。实施例8对变异链球菌的抑菌效果相对较弱，在30s和120s时产生2.5左右的对数杀灭。两者复配后的牙膏，对变异链球菌的抑菌效果相对实施例9的抑菌效果有所提升，但提升不是特别明显。
[0064]
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。