一种稻壳基磁性介孔二氧化硅吸附材料及其制备的固相萃取柱的制作方法

1.本发明涉及食品检测技术领域，尤其是涉及一种稻壳基磁性介孔二氧化硅吸附材料及其制备的固相萃取柱。


背景技术：

2.真菌毒素是真菌在生长繁殖过程中产生的次生代谢有毒产物，极易污染粮食作物且不易被烹调加热或加工破坏，其具生殖毒性、肾毒性、神经毒性、免疫毒性、致畸毒性和致癌性等，对人和动物造成严重损害。对真菌毒素污染的全面预防和准确监测是切实保证粮食安全、维护公民健康的必要手段，真菌毒素含量的检测是其中举足轻重的一环。目前真菌毒素的检测技术发展很快，已经从传统的薄层色谱法(tlc)发展到以现代色谱、色质联用法和免疫质谱联用技术如气质联用(gc
‑
ms)、液质联用(hplc
‑
ms)，以及基于免疫化学基础上的免疫分析方法如酶联免疫吸附法(elisa)等。其中，免疫学检测方法虽简单、快速、成本低且可进行大规模筛选，但该类方法建立在抗原与抗体特异性结合的基础上，真菌毒素全抗原及抗体均为蛋白质分子，在高温、强酸、强碱等极端检测环境下极易失活变性。目前实验室较为常用的真菌毒素检测方法是色谱检测法，该方法需经的提取净化的分析方法样品前处理操作烦琐、复杂、费时、劳动强度大，但随着深入研究和技术的不断进步，样品前处理步骤也已经历着不断的更新和进步；方便、灵敏的固相萃取柱已被应用于样品中毒素的富集以替代昂贵的免疫亲和柱。
3.但归根溯源，免疫亲和柱基于特异性强的抗原
‑
抗体结合理论，固相萃取柱还是难以企及免疫亲和柱的灵敏性、特异性和准确性，且回收率较低。市面上现有固相萃取柱多采取一柱一样品模式，浪费严重、检测成本很高，且对操作人员技术要求高、结果准确度底；而且传统固相萃取柱中使用的传统吸附剂仅依靠非特异性的吸附力分离不同化合物，难以同时实现高纯度和高回收率；随着真菌毒素检测对时效性、准确性、快捷性、普及性的不断追求，此局面也亟待新技术的出现而不断改善和进步。


技术实现要素：

4.针对现有技术存在的上述问题，本发明申请人提供了一种稻壳基磁性介孔二氧化硅吸附材料及其制备的固相萃取柱。本发明利用稻壳基制备的环保材料为载体，利用共价与非共价杂化方法与双功能单体、双模板手段制备分子印迹聚合物，并填充成特异吸附真菌毒素的固相萃取柱，在真菌毒素检测过程中可达到特异性、快速性和准确性效果。
5.本发明的技术方案如下：
6.一种稻壳基磁性介孔二氧化硅吸附材料，所述吸附材料的制备方法包括如下步骤：
7.(1)稻壳经清洗、粉碎、酸煮、煅烧后获得粒径75
‑
100μm的固体稻壳灰，其与naoh水溶液经80
‑
100℃加热5
‑
20min混合配制得到澄清透明稻壳灰溶液；
8.(2)将fe3o4与十六烷基三甲基溴化铵溶液搅拌混合，并加热至70
‑
90℃，再加入步骤(1)制得的稻壳灰溶液，调节ph为10.7
‑
11后继续搅拌2
‑
3h，恒温陈化12
‑
24h后经离心、洗涤、干燥、煅烧，得磁性介孔二氧化硅；
9.(3)将虚拟模板溶解到反应溶剂二甲基亚砜中后依次加入功能单体、交联剂和步骤(2)制得的磁性介孔二氧化硅，超声混合为预聚合溶液；
10.(4)将该预聚合溶液转移至含有分散剂的有机溶剂中，形成混合溶液，在氮气保护下将混合溶液升温至60
‑
80℃后加入引发剂，经紫外照射引发、室温搅拌发生聚合反应，反应结束后，用磁铁分离、洗涤、索氏提取，洗脱模板分子，得到所述吸附材料。
11.步骤(1)中，所述naoh水溶液的浓度为0.6
‑
0.8m，所述固体稻壳灰与naoh的质量比例为0.6
‑
1:1；加热混合的条件为：80
‑
100℃下，混合5
‑
10min。
12.步骤(2)中，十六烷基三甲基溴化铵溶液的浓度为0.02
‑
0.1m；fe3o4与十六烷基三甲基溴化铵的质量比例为2:7
‑
8；稻壳灰溶液与十六烷基三甲基溴化铵溶液的体积用量比例为1:1
‑
2。
13.步骤(2)中，煅烧条件为：升温速率1
‑
5℃/min，升温至550
‑
600℃并保温2
‑
6h。
14.步骤(3)中，所述虚拟模板为槲皮素和姜黄素，槲皮素与姜黄素的摩尔比为1：1；
15.所述功能单体为甲基丙烯酸和4
‑
乙烯基吡啶，甲基丙烯酸与4
‑
乙烯基吡啶的摩尔为1:1；
16.所述虚拟模板与功能单体的摩尔比为1:3.5
‑
4；所述交联剂为乙二醇二甲基丙烯酸酯，所述交联剂与功能单体的摩尔比为5:1；
17.所述磁性介孔二氧化硅与虚拟模板的质量比为10:3。
18.步骤(3)中，超声混合的条件为：超声功率40khz，超声时间15
‑
30min。
19.步骤(4)中，所述有机溶剂为二甲基亚砜和甲醇的混合物，二甲基亚砜与甲醇的体积比为7
‑
9:1；
20.所述分散剂为聚乙烯吡咯烷酮，用量为有机溶剂质量的0.02
‑
0.05％。
21.所述引发剂为偶氮二异丁腈，引发剂与功能单体的质量比为1:4；
22.紫外照射的条件为：辐照强度为100
‑
150μw/cm2，照射时间30
‑
60min。
23.一种含所述稻壳基磁性介孔二氧化硅吸附材料的固相萃取柱。
24.所述固相萃取柱包括套筒、注射进样口、出液口，固相萃取柱套筒上设有盖子，盖子上设有注射进样口，固相萃取柱套筒内腔设有上玻璃纤维挡板和下玻璃纤维挡板，上玻璃纤维挡板和下玻璃纤维挡板之间放置所述稻壳基磁性介孔二氧化硅吸附材料。
25.一种所述固相萃取柱的应用，用于前处理真菌毒素。
26.本发明有益的技术效果在于：
27.本发明利用酸煮和煅烧方法从稻壳中提取得到纯度高、比表面积大的介孔二氧化硅，并包裹四氧化三铁得到磁性吸附材料，用水热法和表面印迹法制备磁性真菌毒素分子印迹聚合物，考察此聚合物对玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素a等真菌毒素的吸附性能及选择性能，并对实际样品中的真菌毒素进行特异性吸附与重复性测试，获得高回收率、高精密度的特异性吸附材料，进而利用该吸附材料填充为吸附目标物型固相萃取柱，可应用到高效液相色谱检测真菌毒素的前处理过程。本发明制备得到的吸附材料，选择性好、特异性强，具有较强的磁性，分离速度快且免除了复杂的离心和过滤操作。
28.通过计算机分子对接的模拟选择虚拟模板槲皮素和姜黄素，利用两种替代模板与两种功能单体，在预组装体系中可以形成氢键和p
‑
p相互作用，有助于形成高度选择性的分子识别位点、减少溶剂对体系的影响以及加速传质过程；利用四氧化三铁的金属离子与模板分子产生的金属螯合作用与静电、分子间氢键相互作用，以及合理控制介孔二氧化硅孔径与真菌毒素大小相当，通过化学结合与物理结合，增强传质与吸附能力；制备出的分子印迹聚合物对真菌毒素具有较强的特异性识别能力和结合、洗脱能力。利用槲皮素和姜黄素作为模板分子，大大降低了聚合物的制备成本，避免了制备过程中毒性物质泄露及检测时的假阳性问题，对环境友好。
附图说明
29.图1为固相萃取柱的结构示意图；
30.图2为本发明实施例1涉及的静态吸附曲线；
31.图3为本发明实施例1涉及的动态吸附曲线；
32.图4为本发明实施例1制得固相萃取柱进行萃取的萃取液的液相色谱图；
33.图5为玉米赤霉烯酮的标准品的液相色谱图。
34.具实施方式
35.下面结合附图和实施例，对本发明进行具体描述。
36.实施例1
37.一种稻壳基磁性介孔二氧化硅吸附材料及其制备的固相萃取柱，具体制备方法包括如下步骤：
38.(1)制备稻壳基磁性介孔二氧化硅
39.稻壳用自来水、去离子水清洗后烘干，粉碎过80目筛，经2m盐酸煮沸2h后水洗离心，离心上清液为中性时将沉淀物烘干后送入马弗炉，在550℃进行6h煅烧获得固体稻壳灰；粒径为80μm左右。
40.按固体稻壳灰与naoh质量比5:4的比例，将固体稻壳灰和0.8m naoh水溶液经100℃加热溶解20min混合配制得到稻壳灰溶液；
41.将0.2g fe3o4与100ml 0.02m的十六烷基三甲基溴化铵溶液超声30min混合均匀，在80℃下搅拌并加热30min，逐滴加入50ml上述稻壳灰溶液，用1m盐酸溶液调节ph为11后继续搅拌2h，恒温陈化24h后经离心、去离子水洗涤3次、真空干燥，在马弗炉中控制升温速率1℃/min到550℃后保温煅烧2h，得磁性介孔二氧化硅；
42.(2)制备分子印迹聚合物
43.将0.18g槲皮素与姜黄素(槲皮素与姜黄素的摩尔比为1:1)溶解到5ml二甲基亚砜中，再依次加入0.086g甲基丙烯酸、0.105g 4
‑
乙烯基吡啶、1.9822g乙二醇二甲基丙烯酸酯和分散在2.5ml二甲基亚砜中的0.5g步骤(1)制得的磁性介孔二氧化硅，功率40khz下，超声30min混合为预聚合溶液；
44.将该预聚合溶液转移至45ml二甲基亚砜和5ml甲醇、0.2g聚乙烯吡咯烷酮的100ml三口圆底烧瓶的混合溶液中，充入氮气并将该溶液体系升温至60℃，加入0.05g偶氮二异丁腈，利用100μw/cm2的紫外照射40min后在室温下搅拌6h；用磁铁分离、洗涤，利用甲醇：乙酸＝8：2进行索氏提取洗脱模板分子，得到分子印迹聚合物，即所述吸附材料。
45.(3)制备固相萃取柱
46.参照图1，设计固相萃取柱的长为5cm，直径为1cm，含套筒、注射进样口、出液口，套筒上设有盖子，盖子上设有注射进样口，固相萃取柱套筒内腔设有上玻璃纤维挡板和下玻璃纤维挡板；装置好下玻璃挡板后，装填入0.8g步骤(2)制得的吸附材料，压实后约1.5
‑
2cm，装入上玻璃纤维挡板，即可制得所述固相萃取柱。
47.利用本实施例制得固相萃取柱进行玉米赤霉烯酮高效液相色谱检测的前处理：
48.对于受检固体试样，将其粉碎后称取40.0g(精确到0.1g)于均质杯中，加入4g氯化钠和100ml乙腈
‑
水混合液(乙腈:水＝85:15)，以高速均质器(4.4)高速搅拌提取2min后定量滤纸过滤，移取10.0ml滤液加入40ml水稀释混匀，经玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清；
49.将固相萃取柱连接于玻璃注射器下，准确移取10.0ml滤液注入玻璃注射器中，将空气压力泵与玻璃注射器连接，调节压力使溶液以1滴/s～2滴/s的流速缓慢通过固相萃取柱，直至有部分空气进入柱中，用5ml水淋洗柱子1次，流速为1滴/s～2滴/s，直至有部分空气进入柱中，弃去全部流出液，准确加入1.5ml甲醇洗脱，流速约为1滴/s，收集洗脱液于玻璃试管中，于55℃以下氮气吹干后，用1.0ml流动相溶解残渣，供液相色谱测定。
50.对于受检液体样品，准确称取混合均匀的样品25.0g用乙腈定容至100.0ml，超声提取2min后定量滤纸过滤，移取10.0ml滤液加入40ml水中稀释混匀，经玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清，将固相萃取柱连接于玻璃注射器下，准确移取10.0ml注入玻璃注射器中，将空气压力泵与玻璃注射器相连接，调节压力使溶液以1滴/s～2滴/s的流速缓慢过柱直至有部分空气进入柱中，依次用10ml pbs缓冲液和10ml水淋洗柱，流速为1滴/s～2滴/s，空气进入后弃去全部流出液，准确加入1.0ml甲醇洗脱，流速约为1滴/s；收集洗脱液于玻璃试管中，于55℃以下氮气吹干后用1.0ml流动相溶解残渣，供液相色谱测定。
51.实施例2：
52.一种稻壳基磁性介孔二氧化硅吸附材料及其制备的固相萃取柱，具体制备方法包括如下步骤：
53.(1)制备稻壳基磁性介孔二氧化硅
54.稻壳用自来水、去离子水清洗后烘干，粉碎过80目筛，经2m盐酸煮沸2h后水洗离心，离心上清液为中性时将沉淀物烘干后送入马弗炉，在550℃进行6h煅烧获得固体稻壳灰；粒径为100μm。
55.按固体稻壳灰与naoh质量比1:1的比例，将固体稻壳灰和0.7m naoh水溶液经100℃加热溶解20min混合配制得到稻壳灰溶液；
56.将0.4g fe3o4与100ml 0.05m的十六烷基三甲基溴化铵溶液超声30min混合均匀，在80℃下搅拌并加热30min，逐滴加入50ml上述稻壳灰溶液，用1m盐酸溶液调节ph为10.7后继续搅拌2.5h，恒温陈化24h后经离心、去离子水洗涤3次、真空干燥，在马弗炉中控制升温速率5℃/min到6℃后保温煅烧2h，得磁性介孔二氧化硅；
57.(2)制备分子印迹聚合物
58.将0.15g槲皮素与姜黄素(槲皮素与姜黄素的摩尔比为1:1)溶解到5ml二甲基亚砜中，再依次加入0.086g甲基丙烯酸、0.105g 4
‑
乙烯基吡啶、1.9822g乙二醇二甲基丙烯酸酯和分散在2.5ml二甲基亚砜中的0.5g步骤(1)制得的磁性介孔二氧化硅，功率40khz下，超声20min混合为预聚合溶液；
59.将该预聚合溶液转移至40ml二甲基亚砜和5ml甲醇、0.2g聚乙烯吡咯烷酮的100ml三口圆底烧瓶的混合溶液中，充入氮气并将该溶液体系升温至60℃，加入0.05g偶氮二异丁腈，利用150μw/cm2的紫外照射30min后在室温下搅拌6h；用磁铁分离、洗涤，利用甲醇:乙酸＝8:2进行索氏提取洗脱模板分子，得到分子印迹聚合物，即所述吸附材料。
60.(3)制备固相萃取柱
61.参照图1，设计固相萃取柱的长为5cm，直径为1cm，含套筒、注射进样口、出液口，套筒上设有盖子，盖子上设有注射进样口，固相萃取柱套筒内腔设有上玻璃纤维挡板和下玻璃纤维挡板；装置好下玻璃挡板后，装填入0.8g步骤(2)制得的吸附材料，压实后约1.5
‑
2cm，装入上玻璃纤维挡板，即可制得所述固相萃取柱。
62.利用本实施例制得固相萃取柱进行玉米赤霉烯酮高效液相色谱检测的前处理：
63.受检试样粉碎过筛后准确称取40.0g(精确至0.1g)于均质杯中，加入4.0g氯化钠和100ml乙腈
‑
水混合液(乙腈：水＝85：15)以高速均质器高速搅拌提取1min后定量滤纸过滤，移取10.0ml滤液并加入40ml pbs吐温
‑
20缓冲液稀释混匀，经0.02μm玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清；将固相萃取柱连接于玻璃注射器下，准确移取10.0ml滤液，注入玻璃注射器中，将空气压力泵与玻璃注射器相连接，调节压力使溶液以1滴/滴/s的流速缓慢过柱直至有空气进入固相萃取柱中，依次用10ml pbs/吐温
‑
20缓冲液和10ml水淋洗免疫亲和柱，流速为1滴/滴/s，空气进入柱中后弃去全部流出液，准确加入1.0ml甲醇洗脱，流速约为1滴/s，收集洗脱液于玻璃试管中于55℃以下氮气吹干后用1.0ml流动相溶解残渣供荧光光度计在激发波长360nm、发射波长450nm下测定。
64.实施例3：
65.一种稻壳基磁性介孔二氧化硅吸附材料及其制备的固相萃取柱，具体制备方法包括如下步骤：
66.(1)制备稻壳基磁性介孔二氧化硅
67.稻壳用自来水、去离子水清洗后烘干，粉碎过80目筛，经2m盐酸煮沸2h后水洗离心，离心上清液为中性时将沉淀物烘干后送入马弗炉，在550℃进行5h煅烧获得固体稻壳灰；粒径为75μm。
68.按固体稻壳灰与naoh质量比5:4的比例，将固体稻壳灰和1m naoh水溶液经100℃加热溶解20min混合配制得到稻壳灰溶液；
69.将0.2g fe3o4与100ml 0.04m的十六烷基三甲基溴化铵溶液超声30min混合均匀，在80℃下搅拌并加热30min，逐滴加入50ml上述稻壳灰溶液，用1m盐酸溶液调节ph为11后继续搅拌2h，恒温陈化24h后经离心、去离子水洗涤3次、真空干燥，在马弗炉中控制升温速率1℃/min到550℃后保温煅烧2h，得磁性介孔二氧化硅；
70.(2)制备分子印迹聚合物
71.将0.15g槲皮素与姜黄素(槲皮素与姜黄素的摩尔比为1:1)溶解到5ml二甲基亚砜中，再依次加入0.086g甲基丙烯酸、0.105g 4
‑
乙烯基吡啶、1.9822g乙二醇二甲基丙烯酸酯和分散在2.5ml二甲基亚砜中的0.5g步骤(1)制得的磁性介孔二氧化硅，功率40khz下，超声30min混合为预聚合溶液；
72.将该预聚合溶液转移至45ml二甲基亚砜和5ml甲醇、0.2g聚乙烯吡咯烷酮的100ml三口圆底烧瓶的混合溶液中，充入氮气并将该溶液体系升温至60℃，加入0.05g偶氮二异丁
腈，利用100μw/cm2的紫外照射15min后在室温下搅拌6h；用磁铁分离、洗涤，利用甲醇:乙酸＝8:2进行索氏提取洗脱模板分子，得到分子印迹聚合物，即所述吸附材料。
73.(3)制备固相萃取柱
74.参照图1，设计固相萃取柱的长为5cm，直径为1cm，含套筒、注射进样口、出液口，套筒上设有盖子，盖子上设有注射进样口，固相萃取柱套筒内腔设有上玻璃纤维挡板和下玻璃纤维挡板；装置好下玻璃挡板后，装填入0.8g步骤(2)制得的吸附材料，压实后约1.5
‑
2cm，装入上玻璃纤维挡板，即可制得所述固相萃取柱。
75.利用本实施例制得固相萃取柱进行赭曲霉毒素a高效液相色谱检测的前处理：
76.称取试样25.0g(精确到0.1g)，加入100ml甲醇
‑
水溶液(甲醇：水＝80：20)经高速均质3min或振荡30min后定量滤纸过滤，移取10ml滤液加入40ml磷酸盐缓冲液稀释至50ml混合均匀，经玻璃纤维滤纸过滤，收集滤液；将固相萃取柱连接于玻璃注射器下，准确移取全部滤液注入玻璃注射器中，将空气压力泵与玻璃注射器相连接，调节压力使溶液以约1滴/s的流速通过固相萃取柱直至空气进入柱中，依次用10ml缓冲液、10ml水先后淋洗固相萃取柱，流速为1滴/滴/s后弃去全部流出液抽干小柱；准确加入1.5ml甲醇进行洗脱，流速约为1滴/s，收集全部洗脫液于干45℃下氮气吹干，用流动相溶解残渣供高效液相色谱检测用。
77.测试例：
78.(1)固相萃取柱填料的静态吸附效果
79.将实施例1制得的稻壳基磁性介孔二氧化硅和吸附材料分别按每份20mg的量准确称取8组，分别置于的10ml离心管中，各加2ml不同玉米样品(分别添加1mg/l，2mg/l，5mg/l，10mg/l，20mg/l，30mg/l，40mg/l，50mg/l，60mg/l，70mg/l，80mg/l，90mg/l的玉米赤霉烯酮溶液)，置于空气摇床室温下振荡90min，后经离心5000r/min分离15min后取上清液过0.22μm滤膜，在高效液相色谱仪进行测定。根据公式计算出聚合物的吸附容量。
80.q＝(c0
‑
ct)
×
v/m
81.其中，q为材料的吸附量，(mg
·
g
‑1)；
82.c0与ct分别为标准溶液和平衡溶液中玉米赤霉烯酮的浓度，(μg
·
ml
‑1)；v为加入标准溶液体积，(ml)；
83.m为材料的质量(mg)。
84.静态吸附曲线如图2所示，由图2可知，随着浓度的增加，吸附材料的吸附量也增加，当浓度到达80mg/l时基本达到平衡吸附量，但稻壳基磁性介孔二氧化硅的增加幅度低于吸附材料，且在相同浓度下的吸附量远小于吸附材料的吸附量。在印迹过程中，模板分子在印迹聚合物中留下了印迹孔穴，使其对毒素分子的亲和力远高于没有进行印迹处理的载体。
85.(2)固相萃取柱填料的动态吸附效果
86.将实施例1制得的稻壳基磁性介孔二氧化硅和吸附材料分别按每份20mg的量准确称取8组，分别加入2ml 50mg/l的玉米赤霉烯酮溶液，固定在空气摇床上，室温下振荡不同的时间(5min，10min，20min，30min，60min，90min，120min，180min)后经离心机5000r/min离心15min，取上清液过0.22μm滤膜，在高效液相色谱仪上测定上清液中玉米赤霉烯酮的浓度，根据公式计算出聚合物的吸附容量。
87.动力学吸附曲线如图3所示，从图3中动力学吸附曲线可以看出，两种材料的的吸附量在前30min内迅速增加，然后速度减慢；稻壳基磁性二氧化硅的吸附在90min时达到吸附平衡，吸附量为4.21mg/g，其吸附行为与所述吸附材料基本相同，但吸附量明显较低(分子印迹聚合物的吸附在60min达到平衡，吸附量为8.79mg/g)；所述吸附材料在30min时的吸附量是稻壳基磁性介孔二氧化硅的2.4倍，显示出其优异的吸附能力。
88.(3)固相萃取柱使用效果
89.该固相萃取柱的使用方法为：将实施例1制得的固相萃取柱连接于玻璃注射器下，准确移取全部滤液注入玻璃注射器中，将空气压力泵与玻璃注射器相连接，调节压力使溶液以约1滴/s的流速通过固相萃取柱直至空气进入柱中，用缓冲液或超纯水先后淋洗固相萃取柱，后弃去全部流出液抽干小柱；准确加入甲醇溶液进行洗脱，收集洗脫液，后处理洗脱液以进行检测。
90.利用玉米样品进行加标回收实验，提取液中玉米赤霉烯酮的加标水平为50ppb，利用固相萃取柱进行吸附、洗脱后获得洗脱液进行液相色谱法检测，最终得到液相色谱图为图4所示，与标准品的液相色谱图谱图5对比发现，经过该固相萃取柱处理后对出峰时间、峰面积、杂峰面积等的影响很小，可获得可靠准确的检测效果，可以用于实际检测。
91.对玉米、小麦、酱油进行了三水平加标回收实验。提取液中玉米赤霉烯酮的加标水平分别为50ppb、100ppb、200ppb，如表所示，在玉米样品中三个加标水平的回收率分别为95.81％、98.22％、99.05％，rsd分别为7.12％、6.23％、3.98％；小麦样品中回收率分别为95.29％、99.73％、99.77％，rsd分别为9.66％、9.42％、0.12％；在酱油样品中回收率分别为97.72％、98.34％、98.77％，rsd分别为2.65％、7.11％、5.44％。zen的平均回收率均高于95.29％，rsd不超过9.66％，说明方法具有较高的回收率，且效果稳定，假阳性出现的概率低，能够用于对实际样品中玉米赤霉烯酮的分离与检测定量中，且应用于微量毒素含量的液体样品中效果更好。加标回收率如表1所示。
92.表1
[0093][0094]
固相萃取柱重复使用效果：准备添加玉米赤霉烯酮为50ppb的相同玉米提取液10份，用一根新制固相萃取柱多次过柱检测洗脱液中玉米赤霉烯酮的含量并计算回收率。重复使用回收率如表2所示。
[0095]
表2
[0096][0097][0098]
由表2可以看出，固相萃取柱经多次使用后，吸附量虽略有下降但可基本保持稳定及重复使用的性能，说明填料的分子印迹聚合物不仅具有强吸附能力及高稳定性，且通过简单的方法即可实现材料的循环利用，极具环保性。