一种复合工艺生产海藻水解产品及其在虾养殖中应用的制作方法

1.本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种复合工艺生产海藻水解产品及其在虾养殖中应用。


背景技术：

2.海藻酸、甜菜碱是海藻中的主要成分，是自然界中理想的生物活性物质，具有良好的抗病抑菌活性。其中，海藻酸对杆状病毒和多角体病毒等病毒的复制过程具有很好阻断作用，而甜菜碱对细菌性病害特别是弧菌有较好抑制作用。杆状病毒与弧菌是目前对虾养殖中常见的病害的病原微生物，对该微生物繁殖的抑制，就能较好实现对对虾养殖中主要病害的防治作用。海藻酸、甜菜碱主要都是通过对海藻的水解来获得，目前的海藻水解工艺基本上基本都是采用物理法、化学法、生物法等工艺：1、物理法海藻综合利用率低，成本高，难于工业化生产；2、化学法对活性物质破坏较为严重，所得的产物活性低，应用效果较差；3、生物法克服以上两者方法缺点，但产物浓度较低，应用不方便，而且成本也较高，如果后续采用浓缩办法，对活性物质也会造成不同成度的破坏，同样也增加成本。因此目前海藻开发的产品活性浓度较低，基本都是应用在农作物的生产上，较少应用于养殖业，还没有文献报道海藻的水解物直接应用于对虾的病害防治上。
3.综上所述，研发一种复合工艺生产海藻水解产品及其在虾养殖中应用，仍是生物技术领域中急需解决高浓度、高活性的关键问题。


技术实现要素：

4.针对现有技术所存在的上述缺点，本发明的目的在于提供一种复合工艺生产海藻水解产品及其在虾养殖中应用，本发明通过特定的工艺解决：1、海藻酸、甜菜碱生产过程中活性保留问题；2、海藻酸、甜菜碱的浓度问题以及经济价值问题；3、实现在虾养殖过程中对病毒与弧菌病害上防治问题；4、同时也为高活性海藻酸产品的进一步应用创造条件，解决在对虾养殖中抗生素、化学药滥用问题，为对虾产品的生态养殖、可持续发展和环境生态保护创造了条件，同时也为消费者提供更加安全、绿色食品做出有效保障。
5.为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：
6.一种海藻水解产品，所述海藻水解产品由泡叶藻经切块、粉碎、水解以及过滤制备；
7.所述的海藻水解产品的制备方法具体步骤包括：
8.s1、将晒干后的泡叶藻切块，获得泡叶藻块；
9.s2、将泡叶藻块放入粉碎机中粉碎，并过80目筛，获得泡叶藻粉；
10.s3、将过筛后的泡叶藻粉与酒石酸粉按10：1混合后，再与40℃清水1：1(w/v)混合，在温度为40℃的恒温条件下，浸泡1小时，获得混合液；
11.s4、将混合液置于若干20cm的正四方槽中，将正四方槽放入冰库迅速冷却至
‑
18℃；
12.s5、将冷冻后的混合液取出，在室温条件下化冰；
13.s6、化冰后再放入冰库冷却至
‑
25℃；
14.s7、取出后迅速投入50℃的水解罐中，同时保持水解罐温度不变；
15.s8、调ph为4.5，加入果胶酶，水解12小时；
16.s9、调ph至5.5，罐温升至55℃，加入复合纤维素酶，水解8小时；
17.s10、罐温保持不变，调ph至7.0，加入蛋白酶，水解28小时；
18.s11、水解后用磷酸和柠檬酸混合调ph至4.0，过滤除杂，获得海藻水解产品。
19.本发明进一步设置为：在所述步骤s1中，所述泡叶藻块大小为1.5
‑
2.5cm。
20.本发明进一步设置为：在所述步骤s2中，将过筛后的泡叶藻粉与酒石酸粉按10：1混合后，再与40℃清水1：1(w/v)混合，保持40℃恒温浸泡1小时。
21.本发明进一步设置为：在所述步骤s4中，将正四方槽放入冰库迅速冷却至
‑
18℃，取出置室温化冰。
22.本发明进一步设置为：在所述步骤s6中，化冰后再放入冰库冷却至
‑
25℃；
23.本发明进一步设置为：在所述步骤s7中，所述水解罐内的投料量为11％。
24.本发明进一步设置为：在所述步骤s8中，所述果胶酶的添加量为10000u/g果胶酶0.1％干粉重。
25.本发明进一步设置为：在所述步骤s9中，所述复合纤维素酶的添加量为20000u/g纤维素酶0.3％干粉重。
26.本发明进一步设置为：在所述步骤s10中，所述蛋白酶的添加量为100000u/g蛋白酶0.8％干粉重。
27.本发明提供了海藻水解产品在虾养殖中的应用。
28.有益效果
29.采用本发明提供的技术方案，与已知的公有技术相比，具有如下有益效果：
30.(1)、采用本发明工艺生产出的海藻酸、甜菜碱含量分别为：≥45g/l、≥26g/l，本工艺未经强酸强碱高温处理、也未经高温浓缩处理，产品的活性物质能保持较高的活性，同时又达到较高的含量要求，从生产成本与生物活性都实现新的创新。
31.(2)、本发明的海藻水解产品在对虾养殖过程中病害的预防和治疗中的应用，产品基本解决对虾养殖化学品滥用的问题，优于化学品防治的效果，特别是早期预防具有较好的效果。
附图说明
32.图1为一种复合工艺生产海藻水解产品的流程图。
具体实施方式
33.为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
34.下面结合实施例对本发明作进一步的描述。
35.实施例
36.请参照图1所示，一种海藻水解产品，海藻水解产品由泡叶藻经切块、粉碎、水解以及过滤制备；
37.海藻水解产品的制备方法具体步骤包括：
38.步骤一、将晒干后的泡叶藻切块，泡叶藻块大小为1.5
‑
2.5cm，获得泡叶藻块。
39.步骤二、将泡叶藻块放入粉碎机中粉碎，并过80目筛，获得泡叶藻粉。
40.步骤三、将过筛后的泡叶藻粉与酒石酸粉按10：1混合后，再与40℃清水1：1(w/v)混合，在40℃恒温条件下，浸泡1小时，获得混合液。
41.步骤四、将混合液置于若干20cm的正四方槽中，将正四方槽放入冰库迅速冷却至－18℃。
42.步骤五、将冷冻后的混合液取出，在室温条件下化冰。
43.步骤六、化冰后再放入冰库冷却至
‑
25℃。
44.步骤七、取出后迅速投入50℃的水解罐中，同时保持水解罐温度不变，水解罐内的投料量(含干粉计)为11％。
45.步骤八、调ph为4.5，加入果胶酶，水解12小时，果胶酶的添加量为10000u/g果胶酶0.1％干粉重。
46.步骤九、调ph至5.5，罐温升至55℃，加入复合纤维素酶，水解8小时，复合纤维素酶的添加量为20000u/g纤维素酶0.3％干粉重；
47.步骤十、罐温保持不变，调ph至7.0，加入蛋白酶，水解28小时，蛋白酶的添加量为100000u/g蛋白酶0.8％干粉重。
48.步骤十一、水解后用磷酸和柠檬酸混合调ph至4.0，过滤除杂，获得海藻水解产品。
49.本发明提供了海藻水解产品在虾养殖中的应用。
50.产品在对虾养殖中的应用：
51.a、预防措施的使用方法：一亩1.5米深的虾塘，一次使用1升的海藻水解产品，即约1000吨水使用1000ml，一般一季的养殖投放两次海藻酸产品，第一次为虾苗投放时，一起施用，第二次是对虾养殖一个月时，再进行投放；
52.b、出现病症初期的使用方法：在养殖过程中如果出现对虾有游塘现象，摄食量减少时，说明有可能出现病害，再通过网捞对虾观察是否出现病害，这时一亩1.5米深的虾塘，可用海藻水解液2000毫升施用，一周后再用海藻水解液1000毫升，这样基本可以达到病害的防治，如果在初期发病时情况较为严重，可在第三周时再用一次海藻水解液1000毫升。
53.本发明的海藻水解产品在对虾养殖过程中病害的预防和治疗中的应用，基本解决对虾养殖化学品滥用的问题，优于化学品防治的效果，特别是早期预防具有较好的效果。
54.效果试验
55.检测方法：海藻酸采用n/t3174
‑
2017标准的间羟基联苯法、甜菜碱采用液相色谱法。
56.根据往年虾塘的发病情况，选择了几口往年发生过病毒病和弧菌病害的虾塘进行对照试验，分为四组对照试验，分别为a组、b组、c组和d组，每组3个塘重复，每一个塘约300平方米左右。
57.a组：为传统常规药物防治措施。
58.用二氯异氰尿酸钠0.2毫克/升全池泼洒，每亩投放沸石粉30
‑
50公斤。
59.b组：为海藻水解液预防措施。
60.在虾苗投放时，每亩虾塘(1.5米深)用海藻水解液1000毫升，一个月后再用海藻水解液1000毫升。
61.c组：为初期发病常规用药措施。
62.对虾有游塘现象，摄食量减少时，可能为发病的初期，在饲料中添加0.3％的链霉素或氟苯尼考轮流使用，五天一次用药。
63.d组：为初期发病用海藻水解液措施。
64.每亩虾塘用海藻水解液2000毫升，一周后再用1000毫升海藻水解液。
65.以每个虾塘的虾苗投入量均为0.8万尾的密度进行养殖，饲料投放、虾塘管理与以往保持不变，试验结果见表1。
66.表1试验结果
[0067][0068][0069]
注：每个虾塘的产量(单位：斤)。
[0070]
通过分析上述表中的相关数据可知，b组案比a组增产了15斤，增产了4％，说明b组达到了预期的预防效果，而且比传统的预防实现了增产；d组比c组增产了32.4斤，增产了9.5％，增产效果较为明显，说明海藻水解液对对虾的病害具有一定的治疗效果，而且还取得较明显的增产效果，同时也说明，化学药对对虾的病害具有较好治疗效果，但对对虾的后期生产产生一定不良的效果，产量明显不如生物的防治方案。而且抗生素等化学药的长期施用，也会产生病原菌的耐药现象和超级病原菌的产生，对生态养殖将产生更大的负面影响。本发明的海藻水解产品，生产过程无三废产生，工艺温和，所产生的副产物海藻渣，也可以进一步发酵生产成有机肥产品，是环保低耗的绿色产品，符合国家绿色发展要求。本发明是利用海藻中的海藻酸和甜菜碱来实现对对虾的病害防治，是对对虾生态养殖的创新，同时也为其他水产养殖提供一个有益的借鉴。由此表明本发明提供的一种复合工艺生产海藻水解产品在虾养殖中应用具有更广阔的市场前景，更适宜推广。
[0071]
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不会使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。