一种鉴别寿眉白茶茶青采摘季节的方法与流程

1.本发明属于分析化学领域，具体涉及一种鉴别寿眉白茶茶青采摘季节的方法。


背景技术：

2.白茶是我国六大茶类中的一类轻发酵茶，其加工不经炒揉，只经萎凋和烘焙两道工序制作而成，该过程中随鲜叶水分散失，细胞膜透性改变，促使发生叶绿素降解、多酚物质部分氧化、蛋白质水解、淀粉水解、氨基酸氧化脱梭等化学反应，形成了干茶色白隐绿，汤色杏黄明亮，滋味甘醇爽口的典型品质特征。同时，特征工艺形成的白茶品质成分同样具有抗氧化、抗菌消炎等生物功效，深受消费者青睐。随着人们消费能力的提高及对品质生活要求的不断提高，消费理念也由注重茶叶外形转变为更加注重茶叶香气、滋味等内质表现。滋味品质特征作为内质评判的重要方面，其权重在五因子百分制评判中占30%~35%，是茶叶品质评判的核心因子。
3.在茶的世界中，茶叶的品质与天气和气候是息息相关的，一年四季气候变化不定，制作出的茶叶自然各有异同，又分为春茶、夏茶、秋茶和冬茶。在选购白茶时，会通过白茶的一些信息来判断是否值得购买，其中的一条信息便是茶青的采摘季节。茶叶采摘时间因地区、茶树品种以及制茶种类而不同。白茶春茶在四月清明前后、芽叶萌发符合于采摘标准时即可开采，可采到五月上旬，产量约占全年总产量的50%。夏季采摘自六月到七月，产量约占25%。秋茶采摘自七月后。从品质来说，春茶为最佳，其叶质柔软，芽心肥壮，茸毛洁白，茶身沉重，汤水浓厚、爽口，所以在春茶中高级茶所占的比重大。夏茶芽心瘦小，叶质带硬，茶身轻飘，汤水淡薄或稍带青涩。秋茶品质则介于春、夏茶之间。寿眉，是白茶中的一种，主要以茶树嫩梢的一芽一二叶为原料，经萎凋和干燥后得来；其外观，叶片居多，茶梗粗壮，芽叶连枝，芽头较为细小，花香突出，是寿眉最大的特色。寿眉按照采摘时间不同可以分为春寿眉、夏寿眉和秋寿眉，其各有特色，春寿眉鲜爽度更高、花香更足，这是因为春天茶树生长快，所以新叶更嫩更鲜爽；秋寿眉花香不如春寿眉，但是因为一整个夏天的休养生长，叶片更大，厚度更厚，果胶含量更多。因此市场上不同季节的白茶寿眉价格有很大差异。本发明以白茶为研究对象，剖析白茶滋味特征属性，并利用白茶中32种特征代谢成分属性进行分析，以期为快速、全面、准确地评判茶叶滋味品质提供新方法、新思路。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于提供一种鉴别寿眉白茶茶青采摘季节的方法。
5.为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：一种鉴别寿眉白茶茶青采摘季节的方法，其是选取同一茶园不同季节的白茶茶青，以同一工艺制成寿眉白茶，测定其中32种特征代谢成分的含量，然后以所得特征代谢成分的含量为指标建立样本矩阵，应用主成分分析法，选取主成分中权重最大的化学成分为区分因子，以区分因子作为自变量，确定白茶茶青的采摘季节。
6.其中，所述寿眉白茶的制备工艺包括如下步骤：
1）拣剔：取采摘的一芽二叶、芽长1.5~2.0厘米的茶青，精拣细剔去除杂质，达到嫩、匀、净的目的；2）炒制：将拣剔后的茶青在竹匾上摊放3小时，然后于120～140℃的锅中炒至叶质柔软、色泽转暗；3）搓条显毫：在75℃的锅中采用抖、理、搓、抓的手法，先理直茶条，再用双手掌合拢搓条，至茶条圆而略扁，茸毫显露，干度达七成左右时，将锅温降低至50～60℃；4）煇锅：采用慢速翻炒的手法炒至茸毫披露，使锅温略升10℃左右，以促使水分蒸发、理顺茶条，固定形状，当茶叶发出持久的清香、捻茶即成粉末，且含水量6%以下时起锅，摊凉贮藏。
7.所述32种特征代谢成分为表没食子儿茶素没食子酸酯（egcg）、咖啡因（caffeine）、槲皮素3
‑
o
‑
葡萄糖基芦丁苷（quercetin 3
‑
o
‑
glucosyl rutinoside）、表儿茶素没食子酸酯（ecg）、芦丁（rutin）、茶氨酸异构体2（theanine isomer 2）、山奈酚
‑3‑
o
‑
半乳糖基芦丁苷（kaempferol
‑3‑
o
‑
galactosylrutinoside）、芹菜素6
‑
c
‑
葡萄糖苷8
‑
c
‑
阿拉伯糖苷（apigenin 6
‑
c
‑
glucoside 8
‑
c
‑
arabinoside）、表没食子儿茶素
‑
表儿茶素没食子酸酯二聚体（egc
‑
ecg dimer）、可可碱（theobromine）、茶氨酸异构体1（theanine isomer 1）、山奈酚
‑3‑
o
‑
葡萄糖基芦丁苷（kaempferol
‑3‑
o
‑
glucosylrutinoside）、槲皮素3
‑
o
‑
半乳糖基芦丁糖苷（quercetin 3
‑
o
‑
galactosyl rutinoside）、表儿茶素
‑
表没食子儿茶素没食子酸酯二聚体（ec
‑
egcg dimer）、异牡荆素（isovitexin）、没食子素（theogallin）、茶皂素f（theasinensin f）、骆驼草b（camellianin b）、牡荆素鼠李糖苷（vitexin rhamnoside）、没食子儿茶素（gc）、山奈酚
‑3‑
o
‑
葡萄糖苷（epkaempferol
‑3‑
o
‑
glucoside）、牡荆素（vitexin）、3
‑
没食子酸8
‑
抗坏血酸甘油酯（8
‑
c
‑
ascorbylepigallocatechin 3
‑
gallate）、儿茶素（c）、山茶苷a（camelliquercetiside a、芹菜素4'
‑
o
‑
鼠李糖苷（apigenin 4'
‑
o
‑
rhamnoside）、表没食子儿茶素
‑3‑
o
‑
(3
‑
o
‑
甲基)没食子酸酯（ecg3"me）、表没食子儿茶素
‑
表儿茶素二聚体二聚体（(e)gc
‑
(e)c dimer）、表阿夫儿茶素（(epi)afzelechin）、( )
‑
表儿茶素（( )
‑
epicatechin）。
8.采用超高效液相色谱
‑
四级杆飞行时间质谱系统对所制备寿眉白茶中32种特征代谢成分的含量进行测定，其具体测定步骤如下：1）样品提取：取0.1g寿眉白茶茶样，加入1ml、80wt%甲醇溶液，室温搅拌混合10min后，在4℃条件下以9000rpm离心15min，取上清液；2）样品溶液的制备：将离心后所得残渣按步骤1）所述条件重复提取2次后，将所得上清液合并于容量瓶中，并用80wt%甲醇溶液定容至5ml；3）样品的检测：将所得样品溶液经0.45μm微孔滤膜过滤后，采用uplc/tof
‑
ms进行检测；其中，uplc的检测条件为：beh c18色谱柱，其规格为：100 mm
×
2.1 mm，1.7 μm；柱温为40℃；以含0.1vol%甲酸的水溶液为流动相a，含0.1vol%甲酸的乙腈溶液为流动相b进行梯度洗脱，流动相流速为0.3 ml/min，其洗脱程序为:0
‑
2 min流动相a的体积比由100%降至95%，2
‑
13 min流动相a的体积比由95%降至50%，13
‑
14 min流动相a的体积比由50%降至0%，14
‑
17 min流动相a的体积比由0%升至100%；tof
‑
ms的分析条件为：离子源：esi；检测模式：esi
‑
；毛细管电压：1.5 kv；串联电
压：10
‑
40 ev；扫描范围为50
‑
1200 da；离子源温度为120℃；去溶剂化温度为500℃；去溶剂化流速为800 l/h；锥孔电压为40 v。
9.本发明的显著优势在于：本发明可实现寿眉白茶不同采摘季节的有效鉴定，可为快速、全面、准确地评判茶叶滋味品质提供新方法、新思路。
附图说明
10.图1为主成分分析图。
11.图2为聚类分析图。
具体实施方式
12.为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方案做进一步的说明，但是本发明不仅限于此。
实施例
13.1）于政和县某茶园选取春（4月
‑
5月上旬）、夏（6月中下旬
‑
8月上旬）、秋（9月中下旬
‑
11月）、冬茶（11月中下旬）四季采摘的白茶茶青共6批（其中，春季1批，夏季2批，秋季2批，冬茶1批），依次标记为a
‑
f（每个样品设置3个生物学重复，分别标记为1、2、3），其采摘时间见表1。
14.表1 不同批次白茶茶青采摘时间2）将所选取的茶青分别制成寿眉白茶；其制备工艺步骤如下：a）拣剔：取采摘的一芽二叶、芽长1.5~2.0厘米的茶青，精拣细剔去除杂质，达到嫩、匀、净的目的；b）炒制：将拣剔后的茶青在竹匾上摊放3小时，然后于120～140℃的锅中炒至叶质柔软、色泽转暗；c）搓条显毫：在75℃的锅中采用抖、理、搓、抓的手法，先理直茶条，再用双手掌合拢搓条，至茶条圆而略扁，茸毫显露，干度达七成左右时，将锅温降低至50～60℃；d）煇锅：采用慢速翻炒的手法炒至茸毫披露，使锅温略升10℃左右，以促使水分蒸发、理顺茶条，固定形状，当茶叶发出持久的清香、捻茶即成粉末，且含水量6%以下时起锅，
摊凉贮藏。
15.3）采用超高效液相色谱
‑
四级杆飞行时间质谱系统对制备的寿眉白茶中32种特征代谢成分（egcg、caffeine、quercetin 3
‑
o
‑
glucosyl rutinoside、ecg、rutin、theanine isomer 2、kaempferol
‑3‑
o
‑
galactosylrutinoside、apigenin 6
‑
c
‑
glucoside 8
‑
c
‑
arabinoside、egc
‑
ecg dimer、theobromine、theanine isomer 1、kaempferol
‑3‑
o
‑
glucosylrutinoside、quercetin 3
‑
o
‑
galactosyl rutinoside、ec
‑
egcg dimer、isovitexin、theogallin、theasinensin f、camellianin b、vitexin rhamnoside、gc、epkaempferol
‑3‑
o
‑
glucoside、vitexin、8
‑
c
‑
ascorbylepigallocatechin 3
‑
gallate、c、camelliquercetiside a、apigenin 4'
‑
o
‑
rhamnoside、ecg3"me、(e)gc
‑
(e)c dimer、(epi)afzelechin、( )
‑
epicatechin）的含量进行测定，其具体测定步骤如下：i）样品提取：取0.1g寿眉白茶茶样，加入1ml、80wt%甲醇溶液，室温搅拌混合10min后，在4℃条件下以9000rpm离心15min，取上清液；ii）样品溶液的制备：将离心后所得残渣按步骤i）所述条件重复提取2次后，将所得上清液合并于容量瓶中，并用80wt%甲醇溶液定容至5ml；iii）样品的检测：将所得样品溶液经0.45μm微孔滤膜过滤后，采用uplc/tof
‑
ms进行检测；其中，uplc的检测条件为：色谱柱：beh c18（100 mm
×
2.1 mm，1.7 μm）；柱温为40℃；以含0.1vol%甲酸的水溶液为流动相a，含0.1vol%甲酸的乙腈溶液为流动相b进行梯度洗脱，流动相流速为0.3 ml/min，其洗脱程序为:0
‑
2 min流动相a的体积比由100%降至95%，2
‑
13 min流动相a的体积比由95%降至50%，13
‑
14 min流动相a的体积比由50%降至0%，14
‑
17 min流动相a的体积比由0%升至100%；tof
‑
ms的分析条件为：离子源：esi；检测模式：esi
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；毛细管电压：1.5 kv；串联电压：10
‑
40 ev；扫描范围为50
‑
1200 da；离子源温度为120℃；去溶剂化温度为500℃；去溶剂化流速为800 l/h；锥孔电压为40 v。
16.其测定结果见表2。
17.表2 不同批次寿眉白茶中各特征代谢成分及其含量（μg/g，dw）
4）对6批样品的32个共有峰的绝对峰面积进行标准化处理后，采用spss 24.0软件进行主成分分析，计算其特征值和方差贡献率，结果见表3。由表3可见，得到了3个主成分因子，其特征值分别为34.464%、28.004%、13.006%，这提示主成分因子1、2、3可作为寿眉白茶的评价指标，适用于主成分分析。故取主成分因子1、2、3为指标对6批寿眉样品进行评价，结果见表4。
18.表3 主成分特征值
表4 主成分特征值5）以各共有峰的峰面积除以称样量的数值作为原始数据，采用spss 24.0软件，以组间联接法结合平方欧氏距离对6批寿眉样品进行聚类分析，结果见图2。由图2可知，6批寿眉样品可聚为四类，春茶a1
‑
a3聚为一类，夏茶b1
‑
c3聚为一类，秋茶d1
‑
e3聚为一类，冬茶f1
‑
3聚为一类。结果显示，不同月份的寿眉样品中夏、秋茶样品质量较为相近，与春茶和冬茶质量差异较大，通过32种化合物组成和含量形成的矩阵结合主成分分析和聚类分析均能将春、秋、夏和冬四个季节的茶青区分开来。
19.以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。