一种获得猕猴桃愈伤组织的同质突变体的方法与流程

技术特征：
1.一种获得猕猴桃愈伤组织的同质突变体的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将猕猴桃愈伤组织进行
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co
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γ辐射处理，所述
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co
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γ辐射处理的辐射剂量为0
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500gy；(2)将每块辐射处理后的所述猕猴桃愈伤组织按4分法分成4份(如图1所示)，分别置于继代培养基上进行第一次继代培养15
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20d；(3)将第一次继代培养后的所述猕猴桃愈伤组织按9分法分成9份(如图1所示)，且每块所述猕猴桃愈伤组织只保留左侧边缘中间部位的1份用于继代培养，培养15
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20d；(4)重复步骤(3)3
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5次后，按9分法取左侧边缘中间部位的1份用于预分化培养，培养时间20
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30d；(5)待分化出芽后，每块愈伤组织按4分法取其中有芽点且生长状态好的1份，转移至分化培养基中进行分化培养，培养15
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20d；(6)重复步骤(5)3
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5次后，得到长度高于3cm的芽；(7)取步骤(6)中长度3
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5cm的芽进行嫩枝扦插，得到猕猴桃愈伤组织的同质突变体。2.根据权利要求1所述的获得猕猴桃愈伤组织的同质突变体的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述猕猴桃愈伤组织通过如下方法获得；取2张滤纸置于培养皿中，加入5
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10ml液体继代培养基使滤纸湿透，将预培养的愈伤组织置于培养皿中，用封口膜封好，得到猕猴桃愈伤组织。3.根据权利要求2所述的获得猕猴桃愈伤组织的同质突变体的方法，其特征在于，所述预培养的愈伤组织通过如下方法获得：取猕猴桃一年生未木质化枝条进行愈伤组织诱导，并通过继代培养基进行扩大培养，得到愈伤组织；将所述愈伤组织切成0.4*0.4cm的小方块，然后置于继代培养基上继续培养7
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10d，得到预培养的愈伤组织。4.根据权利要求1所述的获得猕猴桃愈伤组织的同质突变体的方法，其特征在于，步骤(7)中，所述嫩枝扦插通过如下方法进行：取长度3
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5cm的芽，用生根溶液将嫩芽基部浸泡1
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2h，然后直接扦插于蛭石中，并覆膜保温。5.根据权利要求4所述的获得猕猴桃愈伤组织的同质突变体的方法，其特征在于，所述蛭石优选直径0.1
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0.3cm的蛭石。6.根据权利要求1所述的获得猕猴桃愈伤组织的同质突变体的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的继代培养基组分为：ms基本培养基，浓度32g/l的蔗糖、7.5g/l的琼脂、0.25mg/l的6
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苄氨基嘌呤以及1mg/l的萘乙酸；光照培养条件为：16h/d光照和8h/d黑暗，光照强度为5000lx。7.根据权利要求1所述的获得猕猴桃愈伤组织的同质突变体的方法，其特征在于，步骤(4)中所述的预分化培养基组分为：ms基本培养基，浓度32g/l的蔗糖、7.5g/l的琼脂以及3mg/l的玉米素；光照培养条件为：16h/d光照和8h/d黑暗，光照强度为5000lx。8.根据权利要求1所述的获得猕猴桃愈伤组织的同质突变体的方法，其特征在于，步骤(5)中所述的分化培养基组分为：ms基本培养基，浓度32g/l的蔗糖、7.5g/l的琼脂以及0.5mg/l的玉米素；光照培养条件为：16h/d光照和8h/d黑暗，光照强度为5000lx。9.根据权利要求4所述的获得猕猴桃愈伤组织的同质突变体的方法，其特征在于，所述生根溶液的组分为：浓度为含有100mg/l的3
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吲哚丁酸和50mg/l的奈乙酸的溶液。10.根据权利要求1所述的获得猕猴桃愈伤组织的同质突变体的方法，其特征在于，所
述获得猕猴桃愈伤组织的同质突变体的方法还包括，步骤(8)通过表型观察结合分子标记对所述猕猴桃愈伤组织的同质突变体进行验证。

技术总结
本发明公开了一种获得猕猴桃愈伤组织的同质突变体的方法，该方法通过将猕猴桃愈伤组织进行


技术研发人员：苑平 卜范文 徐海 杨莉颖 程小梅 汤佳乐 张平 黄佳 何科佳 陈为峰
受保护的技术使用者：湖南省园艺研究所
技术研发日：2021.09.03
技术公布日：2021/12/3