一种新型促睡眠乳源活性肽CCL-4S及其制备方法和应用与流程

技术特征：
1.一种新型促睡眠乳源活性肽ccl
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4s，其特征在于：包括如seq id no:1所示的氨基酸序列。2.权利要求1所述新型促睡眠乳源活性肽ccl
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4s在制备促睡眠产品中的应用。3.一种促睡眠产品，其特征在于：其原料中包括权利要求1所述的新型促睡眠乳源活性肽ccl
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4s。4.根据权利要求3所述的促睡眠产品，其特征在于：所述促睡眠产品为食品或者药品。5.权利要求1所述新型促睡眠乳源活性肽ccl
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4s的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将原料乳源酪蛋白酶解物浓缩，得到多肽饱和水样，真空喷雾干燥，得到多肽粉末；（2）将所得多肽粉末用配制成水溶液，过滤后将滤液借助制备型高效液相色谱进行初步分离；根据图谱中出峰时间及峰形相似度，分为6段进行接样，将组分分别收集，进行浓缩并真空冻干，分别测量其体外促睡眠活性；（3）将上一步骤所得具有最好的促睡眠活性的一段组分配制成水溶液，过滤后将滤液借助制备型高效液相色谱对其进行初步分离；根据图谱中出峰时间及峰形相似度，分为3段进行接样，将组分分别收集，进行浓缩并真空冻干，分别测量其体外促睡眠活性；（4）将上一步骤所得具有最好的促睡眠活性的一段组分配制成水溶液，过滤后将滤液借助制备型高效液相色谱对其进行初步分离；根据图谱中出峰时间及峰形相似度，分为4段进行接样，将组分分别收集，进行浓缩并真空冻干，分别测量其体外促睡眠活性，具有最好的促睡眠活性的一段即为本发明新型促睡眠乳源活性肽ccl
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4s。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：步骤（2）中的色谱条件：色谱柱为自装玻璃柱（20 mm
×
450 mm，c18填料（10μm，300
ꢀå
，macherey nagel，france））；流动相：a 泵为超纯水（含0.1% tfa），b 泵为乙腈（含0.1% tfa）；流速：10 ml/min；进样量：5 ml；检测波长：214 nm；洗脱条件：10%
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20%（0.01
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30 min），20%
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35%（30
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90 min），35%
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52.5%（90
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110 min），52.5%
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90%（110
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125 min）。7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：步骤（3）中的色谱条件：色谱柱为welch c18 柱子（4.6 mm
×
250 mm，5 μm，ultimate）；流动相：a泵为超纯水（含0.1% tfa），b泵为乙腈（含0.1% tfa）；进样量：20
ꢀµ
l；流速：1 ml/min；检测波长：214 nm；洗脱条件：10%
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20%（0.01
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10 min），20%
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30%（10
‑
40 min），30%
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90%（40
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48 min）。8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：步骤（4）中的色谱条件：色谱柱为welch c18 柱子（4.6 mm
×
250 mm，5 μm，ultimate）；流动相：a泵为超纯水（含0.1% tfa），b泵为乙腈（含0.1% tfa）；进样量：20
ꢀµ
l；流速：1 ml/min；检测波长：214 nm；洗脱条件：10%
‑
20%（0.01
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10 min），20%
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30%（10
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40 min），30%
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90%（40
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48 min）。9.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述的浓缩为60℃旋蒸，所述的配制成水溶液为用超纯水配置成200mg/ml的溶液；所述的过滤为过0.22 μm滤膜。10.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所用乳源酪蛋白酶解物为牛乳酪蛋白采用蛋白酶酶解后的牛乳多肽溶液，具体制备方法如下：将适量胰蛋白酶加入酪蛋白中水解2
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7小时，再将ph 值调至2
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7，离心取上清，然后，将所得上清液高温灭活，随后离心收集上清液，冻干，
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20℃保存备用。

技术总结
本发明涉及一种新型促睡眠乳源活性肽CCL


技术研发人员：曹庸 刘星雨 陈媛媛 何泽琪 戴伟杰
受保护的技术使用者：华南农业大学
技术研发日：2021.09.18
技术公布日：2021/12/3