基于金纳米粒子的比色适配体传感检测大米中真菌毒素的方法与流程

技术特征：
1.一种基于金纳米粒子的比色适配体传感检测大米中真菌毒素的方法，其特征是，所述真菌毒素为包括以下步骤：（1）向金纳米粒子水溶液中加入真菌毒素的适配体水溶液，进行孵育，然后分别加入不同浓度的真菌毒素溶液，进行孵育，最后加入氯化钠水溶液进行孵育，观察溶液颜色变化，测定不同溶液在620 nm和520 nm处的紫外吸收值，计算紫外吸收值的比值a
620 nm
/a
520 nm
；（2）以真菌毒素浓度为横坐标，以对应的a
620 nm
/a
520 nm
为纵坐标，绘制标准曲线；（3）将待测的大米样品粉碎，用甲醇进行萃取，然后离心取上清液，将上清液用甲醇稀释，得待检样品溶液；（4）按照步骤（1）的方式，将真菌毒素溶液替换为待检样品溶液，观察溶液颜色的变化，测定620 nm和520 nm处的紫外吸收值，得到待检样品的a
620 nm
/a
520 nm
比值；（5）将待检样品的a
620 nm
/a
520 nm
比值带入标准曲线，计算得到待检样品中真菌毒素的含量。2.根据权利要求1所述的方法，其特征是：所述真菌毒素包括赭曲霉毒素a、黄曲霉毒素b1。3.根据权利要求2所述的方法，其特征是：赭曲霉毒素a的适配体为5’端巯基化的适配体，其核苷酸序列为：5
’ꢀ
sh
‑
gatcgggtgtgggtggcgtaaagggagcatcggaca
‑3’
；黄曲霉毒素b1核苷酸序列为5’端巯基化的适配体，其核苷酸序列为：5
’ꢀ
sh
‑
gttgggcacgtgttgtctctctgtgtctcgtgcccttcgctaggcccaca
‑3’
。4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征是：步骤（1）和（4）中，赭曲霉毒素a的适配体在金纳米粒子水溶液中的浓度为0.65
‑
0.75 μm；黄曲霉毒素b1适配体在金纳米粒子水溶液中的浓度为0.28
‑
0.3 μm。5.根据权利要求1所述的方法，其特征是：步骤（1）和（4）中，金纳米粒子的粒径为15
‑
25 nm，金纳米粒子的浓度为0.2
‑
0.25 mm。6.根据权利要求1所述的方法，其特征是：步骤（1）和（4）中，氯化钠在加入氯化钠后的溶液体系中的浓度为25
‑
34 mm。7.根据权利要求1所述的方法，其特征是：步骤（1）和（4）中，每次孵育时，均在室温下以200
‑
250 r/min的速度孵育20
‑
30min。8.根据权利要求1所述的方法，其特征是：步骤（3）中，将待测的大米样品粉碎，取0.5
‑
1.0 g加入1.5
‑
2 ml甲醇，室温震荡混匀10
‑
15 min，超声萃取10
‑
15 min，然后离心收集上清液，将上清液用甲醇稀释10
‑
20倍，作为待检样品溶液待用。9.根据权利要求2所述的方法，其特征是：步骤（4）中，若观察到溶液颜色由红色变为蓝色，则表示样品中含有赭曲霉毒素a或黄曲霉毒素b1。10.根据权利要求1所述的方法，其特征是：步骤（1）中，金纳米粒子水溶液的制备方法为：取浓度0.01
‑
0.1wt% 的haucl4水溶液，将其在搅拌下煮沸，然后加入1
‑
5wt%的柠檬酸钠水溶液，当溶液由紫色变成红色后，再煮沸15
‑
20 min，冷却至室温，过滤，得到金纳米粒子水溶液。

技术总结
本发明公开了一种基于金纳米粒子的比色适配体传感检测大米中真菌毒素的方法，向金纳米粒子水溶液中加入真菌毒素适配体水溶液，进行孵育，然后加入待测样品溶液，进行孵育，最后加入氯化钠水溶液进行孵育，观察溶液颜色变化，测定不同溶液在620 nm和520 nm处的紫外吸收值，计算这两者的紫外吸收值的比值A


技术研发人员：曹宏梅 李瑞 李林芝 黄添增
受保护的技术使用者：海南大学
技术研发日：2021.06.11
技术公布日：2021/11/30