一种低聚原花青素的眼用产品制备方法及应用与流程

1.本发明涉及眼部护理技术领域，具体是涉及一种低聚原花青素的眼用产品制备方法及应用。


背景技术：

2.原花青素，是植物中广泛存在的一大类多酚类化合物的总称，其共同的特点是在酸性介质中加热均可产生花青素，故被称为原花青素。原花青素是植物中一种色素成分，广泛存在于各种植物中。
3.原花青素是植物中广泛存在的一大类多酚类化合物的总称，具有强抗氧化、消除自由基的作用，可有效消除超氧阴离子自由基和羟基自由基，也参与磷酸、花生四烯酸的代谢和蛋白质磷酸化，保护脂质不发生过氧化损伤；是强有力的金属螯合剂，可螯合金属离子，在体内形成惰性化合物；保护和稳定维生素c，有助于维生素c的吸收和利用。原花青素分布广泛，存在于许多植物的皮、壳、籽、核、花、叶中，葡萄籽中原花青素含量最高，种类丰富。
4.国际上干眼的发病率为5.5％
‑
33.7％，我国的发生率为21％
‑
30％，我国干眼患者已占眼科门诊患者的30％以上，且随着社会人口老龄化以及视频终端设备的迅速广泛普及，干眼的患病率呈快速增长状态。据分析2019年有3.6亿人患干眼症。眼表疾病和眼表暴露于空气和外界环境导致眼表微环境失调息息相关，针对眼表氧化损伤的眼药水，已经广泛应用于干眼、结膜炎等疾病中。而原花青素，具有强抗氧化、消除自由基的作用，可作为制备眼表氧化损伤的眼药水的重要成分。
5.现有的眼用产品，基本上包含眼药水和在眼皮外敷的皮肤护理产品。在日常生活中，抗氧化眼药水的使用频率并不高。但在现有电子设备的刺激下，人们用眼习惯越来越不好，干眼和视频终端综合症患者越来越多。现在的人们逐渐意识到眼健康和皮肤抗衰护理的重要性，但市面上缺乏在既能有效护肤又能保护抗氧化的眼部产品。


技术实现要素：

6.为解决上述技术问题，本发明提供了一种低聚原花青素的眼用产品制备方法及应用。
7.本发明的技术方案是：一种低聚原花青素的眼用产品制备方法，包括以下步骤：
8.s1：原花青素低聚物提取
9.s1
‑
1：将葡萄籽用纱布包裹，然后隔着纱布对葡萄籽进行机械挤压，挤压完成后，收集从纱布渗出的葡萄籽油待用，将葡萄籽渣与浓度为70％乙醇溶液按质量比为1:2加入提取器中进行提取，提取完成后过滤，得到葡萄籽提取液；
10.s1
‑
2：将步骤s1
‑
1得到的葡萄籽提取液进行加热，加热温度为60
‑
65℃，并伴随搅拌，使乙醇溶液挥发，得到溶液a，将溶液a与葡萄籽油混合搅拌，得到溶液b；
11.s1
‑
3：将混合液b用超临界co2萃取，萃取后通过分离器分离出纯度为96.5％的原
花青素低聚物；
12.s2：配制基础液
13.按重量份取干制药物：人参3
‑
4份、野菊花6
‑
8份、羊蹄草5
‑
6份、薄荷3
‑
5份、金缕梅4
‑
5份、海核仁3
‑
5份混合后放入破碎机进行破碎，破碎后得到混合粉，将混合粉倒入锅炉中进行水提取，混合粉与水的质量比为1:50，提取温度100
‑
120℃，伴随搅拌，提取时长为2
‑
3h，搅拌完成后过滤，得到滤液，再将滤液自然冷却至5
‑
15℃，得到基础液；
14.s3：配制眼用液
15.在基础液中滴入步骤s1得到的所述原花青素低聚物、维生素e、维生素a，并以80r/min的搅拌速度，搅拌5
‑
10min，得到眼用液，所述眼用液中原花青素低聚物的质量百分比为1.2
‑
1.4％，维生素e的质量百分比为1.3
‑
1.5％,维生素a的质量百分比为0.8
‑
1.1％，余量为基础液。
16.进一步地，所述步骤s1
‑
1中提取器的转速为1200
‑
3000r/min，提取时间为3
‑
6min，提取速度块，提取效果好。
17.进一步地，所述超临界co2萃取，co2流量为8
‑
10l/h，温度50
‑
70℃，萃取压力20
‑
40mpa，一级分离釜中的压力为8
‑
10mpa，二级分离釜中的压力为0.1
‑
0.2mpa，萃取时间1
‑
2h，以上参数下，萃取原花青素的效率高。
18.进一步地，所述步骤s2中破碎后的混合粉粒径为96
‑
120μm，使药物成分有效的浸出。
19.进一步地，所述步骤s2中提取时的搅拌速度为30
‑
50r/min，提取出的基础液药效好。
20.进一步地，所述步骤s2中过滤采用工业滤布进行过滤，工业滤布过滤效果好。
21.进一步地，所述步骤s1
‑
1中机械挤压压力为10
‑
20mpa，每挤压一次需要变换挤压面，挤压次数为12次/min，挤压时长为5
‑
6min，每挤压一次需要变换挤压面，同时收紧纱布，使葡萄籽内的液油充分浸出。
22.进一步地，所述步骤s1
‑
2中的搅拌速度为50
‑
70r/min，挥发时长为3
‑
4h，使乙醇充分挥发。
23.进一步地，将所述步骤s3得到的眼用液作为眼药水滴入眼睛内，用于缓解眼疲劳和眼干涩。
24.进一步地，将步骤s3中所述的眼用液用于对眼周皮肤进行湿敷，用于眼部皮肤保湿和延缓眼部皮肤衰老。
25.本发明的有益效果是：
26.(1)本发明所制备的眼用液可以滴入眼睛作为眼药水使用，能有效缓解眼睛干涩、眼疲劳，低聚原花青素具有清除能力以及较强的抗氧化能力，对眼表与氧化损伤相关的疾病具有很好的治疗效果，能显著降低氧化损伤，能有效减少细胞凋亡和组织损伤。
27.(2)本发所制备的眼用液，不仅可以当做眼药水对眼睛进行抗氧化治疗，还可以外敷用于眼部及眼部周围皮肤的护理。由于本发明的眼用液具有很强的抗氧化性，因此作为眼部皮肤护理可以很好的补充水分，以及改善眼部皱纹，延缓眼部皮肤衰老。
附图说明
28.图1是本发明眼用液的制备流程图。
29.图2是本发明眼用液抗氧化检测图。
具体实施方式
30.实施例1
31.如图1所示，一种低聚原花青素的眼用产品制备方法，包括以下步骤：
32.s1：原花青素低聚物提取
33.s1
‑
1：将葡萄籽用纱布包裹，然后隔着纱布对葡萄籽进行机械挤压，挤压完成后，收集从纱布渗出的葡萄籽油待用，将葡萄籽渣与浓度为70％乙醇溶液按质量比为1:2加入提取器中进行提取，提取完成后过滤，得到葡萄籽提取液；
34.s1
‑
2：将步骤s1
‑
1得到的葡萄籽提取液进行加热，加热温度为60℃，并伴随搅拌，使乙醇溶液挥发，得到溶液a，将溶液a与葡萄籽油混合搅拌，得到溶液b；
35.s1
‑
3：将混合液b用超临界co2萃取，萃取后通过分离器分离出纯度为96.5％的原花青素低聚物；
36.s2：配制基础液
37.按重量份取干制药物：人参3份、野菊花6份、羊蹄草5份、薄荷3份、金缕梅4份、海核仁3份混合后放入破碎机进行破碎，破碎后得到混合粉，将混合粉倒入锅炉中进行水提取，混合粉与水的质量比为1:50，提取温度100℃，，伴随搅拌，提取时长为2h，搅拌完成后过滤，得到滤液，再将滤液自然冷却至5℃，得到基础液；
38.s3：配制眼用液
39.在基础液中滴入步骤s1得到的原花青素低聚物、维生素e、维生素a，并以80r/min的搅拌速度，搅拌5min，得到眼用液，眼用液中原花青素低聚物的质量百分比为1.2％，维生素e的质量百分比为1.3％,维生素a的质量百分比为0.8％，余量为基础液。
40.步骤s1
‑
1中提取器的转速为1200r/min，提取时间为3min，，提取速度块，提取效果好。
41.超临界co2萃取，co2流量为8l/h，温度50℃，萃取压力20mpa，一级分离釜中的压力为8mpa，二级分离釜中的压力为0.1mpa，提取时间1h，以上参数下，萃取原花青素的效率高。
42.步骤s2中破碎后的混合粉粒径为96
‑
100μm，使药物成分有效的浸出。
43.步骤s2中熬制时长为2h，提取时的搅拌速度为30r/min，提取出的基础液药效好。
44.步骤s2中过滤采用工业滤布进行过滤，工业滤布过滤效果好。
45.步骤s1
‑
1中机械挤压压力为10mpa，挤压次数为12次/min，挤压时长为5min，每挤压一次需要变换挤压面，同时收紧纱布，使葡萄籽内的液油充分浸出。
46.步骤s1
‑
2中的搅拌速度为50r/min，挥发时长为3h，使乙醇充分挥发。
47.实施例2
48.如图1所示，一种低聚原花青素的眼用产品制备方法，包括以下步骤：
49.s1：原花青素低聚物提取
50.s1
‑
1：将葡萄籽用纱布包裹，然后隔着纱布对葡萄籽进行机械挤压，挤压完成后，收集从纱布渗出的葡萄籽油待用，将葡萄籽渣与浓度为70％乙醇溶液按质量比为1:2加入
提取器中进行提取，提取完成后过滤，得到葡萄籽提取液；
51.s1
‑
2：将步骤s1
‑
1得到的葡萄籽提取液进行加热，加热温度为63℃，并伴随搅拌，使乙醇溶液挥发，得到溶液a，将溶液a与葡萄籽油混合搅拌，得到溶液b；
52.s1
‑
3：将混合液b用超临界co2萃取，萃取后通过分离器分离出纯度为96.5％的原花青素低聚物；
53.s2：配制基础液
54.按重量份取干制药物：人参4份、野菊花7份、羊蹄草6份、薄荷4份、金缕梅5份、海核仁4份混合后放入破碎机进行破碎，破碎后得到混合粉，将混合粉倒入锅炉中进行水提取，混合粉与水的质量比为1:50，提取温度110℃，，伴随搅拌，提取时长为2.5h，搅拌完成后过滤，得到滤液，再将滤液自然冷却至10℃，得到基础液；
55.s3：配制眼用液
56.在基础液中滴入步骤s1得到的原花青素低聚物、维生素e、维生素a，并以80r/min的搅拌速度，搅拌8min，得到眼用液，眼用液中原花青素低聚物的质量百分比为1.3％，维生素e的质量百分比为1.4％,维生素a的质量百分比为1.0％，余量为基础液。
57.步骤s1
‑
1中提取器的转速为1800r/min，提取时间为4min，，提取速度块，提取效果好。
58.超临界co2萃取，co2流量为9l/h，温度60℃，萃取压力30mpa，一级分离釜中的压力为9mpa，二级分离釜中的压力为0.2mpa，萃取时间2h，以上参数下，萃取原花青素的效率高。
59.步骤s2中破碎后的混合粉粒径为100
‑
110μm，使药物成分有效的浸出。
60.步骤s2中熬制时长为2.5h，提取时的搅拌速度为40r/min，提取出的基础液药效好。
61.步骤s2中过滤采用工业滤布进行过滤，工业滤布过滤效果好。
62.步骤s1
‑
1中机械挤压压力为15mpa，挤压次数为12次/min，挤压时长为6min，每挤压一次需要变换挤压面，同时收紧纱布，使葡萄籽内的液油充分浸出。
63.步骤s1
‑
2中的搅拌速度为60r/min，挥发时长为3.5h，使乙醇充分挥发。
64.实施例3
65.如图1所示，一种低聚原花青素的眼用产品制备方法，包括以下步骤：
66.s1：原花青素低聚物提取
67.s1
‑
1：将葡萄籽用纱布包裹，然后隔着纱布对葡萄籽进行机械挤压，挤压完成后，收集从纱布渗出的葡萄籽油待用，将葡萄籽渣与浓度为70％乙醇溶液按质量比为1:2加入提取器中进行提取，提取完成后过滤，得到葡萄籽提取液；
68.s1
‑
2：将步骤s1
‑
1得到的葡萄籽提取液进行加热，加热温度为65℃，并伴随搅拌，使乙醇溶液挥发，得到溶液a，将溶液a与葡萄籽油混合搅拌，得到溶液b；
69.s1
‑
3：将混合液b用超临界co2萃取，萃取后通过分离器分离出纯度为96.5％的原花青素低聚物；
70.s2：配制基础液
71.按重量份取干制药物：人参4份、野菊花8份、羊蹄草6份、薄荷5份、金缕梅5份、海核仁5份混合后放入破碎机进行破碎，破碎后得到混合粉，将混合粉倒入锅炉中进行水提取，混合粉与水的质量比为1:50，提取温度120℃，伴随搅拌，提取时长为3h，搅拌完成后过滤、
得到滤液，再将滤液自然冷却至15℃，得到基础液；
72.s3：配制眼用液
73.在基础液中滴入步骤s1得到的原花青素低聚物、维生素e、维生素a，并以80r/min的搅拌速度，搅拌5
‑
10min，得到眼用液，眼用液中原花青素低聚物的质量百分比为1.4％，维生素e的质量百分比为1.5％,维生素a的质量百分比为1.1％，余量为基础液。
74.步骤s1
‑
1中提取器的转速为3000r/min，提取时间为6min，，提取速度块，提取效果好。
75.超临界co2萃取，co2流量为10l/h，温度70℃，萃取压力40mpa，一级分离釜中的压力为10mpa，二级分离釜中的压力为0.2mpa，萃取时间2h，以上参数下，萃取原花青素的效率高。
76.步骤s2中破碎后的混合粉粒径为110
‑
120μm，使药物成分有效的浸出。
77.步骤s2中熬制时长为3h，提取时的搅拌速度为50r/min，提取出的基础液药效好。
78.步骤s2中过滤采用工业滤布进行过滤，工业滤布过滤效果好。
79.步骤s1
‑
1中机械挤压压力为20mpa，挤压次数为12次/min，挤压时长为6min，每挤压一次需要变换挤压面，同时收紧纱布，使葡萄籽内的液油充分浸出。
80.步骤s1
‑
2中的搅拌速度为70r/min，挥发时长为4h，使乙醇充分挥发。
81.实施例4
82.如图1所示，一种低聚原花青素的眼用产品制备方法，包括以下步骤：
83.s1：原花青素低聚物提取
84.s1
‑
1：将葡萄籽用纱布包裹，然后隔着纱布对葡萄籽进行机械挤压，挤压完成后，收集从纱布渗出的葡萄籽油待用，将葡萄籽渣与浓度为70％乙醇溶液按质量比为1:2加入提取器中进行提取，提取完成后过滤，得到葡萄籽提取液；
85.s1
‑
2：将步骤s1
‑
1得到的葡萄籽提取液进行加热，加热温度为65℃，并伴随搅拌，使乙醇溶液挥发，得到溶液a，将溶液a与葡萄籽油混合搅拌，得到溶液b；
86.s1
‑
3：将混合液b用超临界co2萃取，萃取后通过分离器分离出纯度为96.5％的原花青素低聚物；
87.s2：配制基础液
88.按重量份取干制药物：人参4份、野菊花8份、羊蹄草6份、薄荷5份、金缕梅5份、海核仁5份混合后放入破碎机进行破碎，破碎后得到混合粉，将混合粉倒入锅炉中进行水提取，混合粉与水的质量比为1:50，提取温度120℃，伴随搅拌，提取时长为3h，搅拌完成后过滤、得到滤液，再将滤液自然冷却至15℃，得到基础液；
89.s3：配制眼用液
90.在基础液中滴入步骤s1得到的原花青素低聚物、维生素e、维生素a，并以80r/min的搅拌速度，搅拌5
‑
10min，得到眼用液，眼用液中原花青素低聚物的质量百分比为1.4％，维生素e的质量百分比为1.5％,维生素a的质量百分比为1.1％，余量为基础液。
91.步骤s1
‑
1中提取器的转速为3000r/min，提取时间为6min，，提取速度块，提取效果好。
92.超临界co2萃取，co2流量为10l/h，温度70℃，萃取压力40mpa，一级分离釜中的压力为10mpa，二级分离釜中的压力为0.2mpa，萃取时间2h，以上参数下，萃取原花青素的效率
高。
93.步骤s2中破碎后的混合粉粒径为110
‑
120μm，使药物成分有效的浸出。
94.步骤s2中熬制时长为3h，提取时的搅拌速度为50r/min，提取出的基础液药效好。
95.步骤s2中过滤采用工业滤布进行过滤，工业滤布过滤效果好。
96.步骤s1
‑
1中机械挤压压力为20mpa，挤压次数为12次/min，挤压时长为6min，每挤压一次需要变换挤压面，同时收紧纱布，使葡萄籽内的液油充分浸出。
97.步骤s1
‑
2中的搅拌速度为70r/min，挥发时长为4h，使乙醇充分挥发。
98.将步骤s3得到的眼用液作为眼药水滴入眼睛内，用于缓解眼疲劳和眼干涩。
99.将步骤s3中的眼用液用于对眼周皮肤进行湿敷，用于眼部皮肤保湿和延缓眼部皮肤衰老。
100.实施例5
101.将实施例4所制备的低聚源花青素配成眼用凝胶、喷雾、雾化、眼用湿房镜或者采用理疗镜熏蒸的方式施用。优选眼药水和熏蒸方式。
102.实施例4相比实施例1
‑
实施例3增加本发明所制备眼用液的两种应用，实施例1
‑
实施例4，步骤s1
‑
2中所使用的提取器为菲跃品牌生产的型号为fy
‑
sxt
‑
06的提取器，步骤s1
‑
3中超临界co2萃取设备为江苏华安科研有限公司生产的ha100
‑
50
‑
0.5型超临界萃取装置，分离器为此设备自带的分离器。
103.细胞毒性检测：将本发明所制备的眼用液浓缩成浓度为10mg/ml、50mg/ml、100mg/ml的眼用液进行毒性检测。
104.检测所用细胞：角膜上皮、结膜上皮细胞，毒性检测结果如表1
105.表1：毒性检测结果
[0106][0107][0108]
抗氧化性检测：
[0109]
用实施例1
‑
实施例3所制备的眼用液分别对手臂细胞、眼角膜细胞、眼皮细胞进行抗氧化性检测，结果如图2所示，其中测试一对应实施例1，测试二对应实施例2，测试三对应实施例3。