抗GAL3抗体及其用途的制作方法

技术特征：
1.一种诱导免疫激活的方法，包括：在破坏gal3和tim
‑
3之间的相互作用的条件下，使包括gal3表达细胞和tim
‑
3表达细胞的多种细胞与抗体接触，其中抗体特异性结合至gal3，其中gal3表达细胞在结合至抗体时表达诱导免疫激活的细胞因子，并且其中抗体不是imt001。2.根据权利要求1所述的方法，其中细胞因子是干扰素。3.根据权利要求2所述的方法，其中干扰素是ifnγ。4.根据权利要求3所述的方法，其中ifnγ产生是通过同种型抗体的ifnγ产生的150％、160％、170％、180％、190％、200％或更多。5.根据权利要求1所述的方法，其中细胞因子是白细胞介素。6.根据权利要求5所述的方法，其中白细胞介素是il
‑
2。7.根据权利要求1
‑
6的任一项所述的方法，其中免疫激活包括cd3 t淋巴细胞、cd4 t辅助细胞、cd8 细胞毒素t细胞、天然杀伤细胞或其组合的增殖。8.根据权利要求1
‑
7的任一项所述的方法，其中免疫激活包括多种细胞内m1巨噬细胞群的增加。9.根据权利要求1
‑
8的任一项所述的方法，其中免疫激活包括多种细胞内m2巨噬细胞群的减少。10.一种促进t细胞或天然杀伤(nk)细胞增殖的方法，其包括：在影响多种细胞中t细胞和/或nk细胞增殖的条件下，使包括t细胞、nk细胞和gal3表达细胞的多种细胞与抗体接触，其中抗体特异性结合至gal3，并且其中抗体不是imt001。11.根据权利要求10所述的方法，其中多种细胞进一步包括tim
‑
3表达细胞。12.根据权利要求11所述的方法，其中抗体进一步破坏gal3和tim
‑
3的相互作用。13.一种诱导免疫激活的方法，其包括：在破坏gal3和tim
‑
3之间的相互作用的条件下，使包括gal3表达细胞和tim
‑
3表达细胞的多种细胞与抗体接触，其中抗体特异性结合至gal3，并且其中gal3
‑
tim
‑
3相互作用被减少至小于70％、小于60％、小于59％、小于50％、小于40％、小于34％、小于30％、小于20％、小于14％、小于10％、小于7％、小于5％、小于4％或小于1％。14.根据权利要求13所述的方法，其中相互作用发生在选自区域145
‑
168、160
‑
177或165
‑
184的gal3的一个或多个残基处，其中残基位置对应于seq id no:1的位置145
‑
168、160
‑
177或165
‑
184。15.根据权利要求13所述的方法，其中相互作用发生在选自区域149
‑
156、152
‑
168、163
‑
169、163
‑
177或163
‑
171的gal3的一个或多个残基处，其中残基位置对应于seq id no:1的位置149
‑
156、152
‑
168、163
‑
169、163
‑
177或163
‑
171。16.根据权利要求13
‑
15的任一项所述的方法，其中相互作用发生在选自区域91
‑
111或82
‑
111的tim
‑
3的一个或多个残基处，其中残基位置对应于seq id no:2的位置91
‑
111或82
‑
111。17.根据权利要求13
‑
15的任一项所述的方法，其中相互作用发生在选自区域91
‑
111、107
‑
117、96
‑
102、100
‑
106或92
‑
119的tim
‑
3的一个或多个残基处，此处残基位置对应于seq id no:2的位置91
‑
111、107
‑
117、96
‑
102、100
‑
106或92
‑
119。18.根据权利要求13
‑
17的任一项所述的方法，其中tim
‑
3是人tim
‑
3。
19.根据权利要求1
‑
18的任一项所述的方法，其中gal3表达细胞是肿瘤细胞。20.根据权利要求1
‑
19的任一项所述的方法，其中多个细胞位于肿瘤微环境(tme)内。21.根据权利要求1
‑
20的任一项所述的方法，其中抗体诱导tme内肿瘤细胞的减少。22.根据权利要求1
‑
21的任一项所述的方法，其中多种细胞进一步包括肿瘤浸润淋巴细胞(til)。23.根据权利要求1
‑
22的任一项所述的方法，其中多种细胞进一步包括cd3 t淋巴细胞、cd4 t辅助细胞、cd8 细胞毒素t细胞或其组合。24.根据权利要求1、10、13或22的任一项所述的方法，其中接触进一步诱导til增殖。25.根据权利要求1、10、13或23的任一项所述的方法，其中接触进一步诱导cd3 t淋巴细胞、cd4 t辅助细胞、cd8 细胞毒素t细胞或其组合的增殖。26.根据权利要求1、10、13或22
‑
25的任一项所述的方法，其中接触进一步包括m1巨噬细胞增殖的增加。27.根据权利要求1、10、13或22
‑
26的任一项所述的方法，其中接触进一步包括tme内m2巨噬细胞群的减少。28.根据权利要求1
‑
27的任一项所述的方法，其中抗体结合至对应于seq id no:1的残基1
‑
20的gal3区域内的至少一个氨基酸残基。29.根据权利要求1
‑
27的任一项所述的方法，其中抗体结合至对应于seq id no:1的残基41
‑
91的gal3区域内的至少一个氨基酸残基。30.根据权利要求1
‑
27或29的任一项所述的方法，其中抗体结合至对应于seq id no:1的残基41
‑
71的gal3区域内的至少一个氨基酸残基。31.根据权利要求1
‑
27或29的任一项所述的方法，其中抗体结合至对应于seq id no:1的残基71
‑
91的gal3区域内的至少一个氨基酸残基。32.根据权利要求1
‑
31的任一项所述的方法，其中抗体结合至肽_1、肽_4、肽_5、肽_6、肽_7或肽8内的至少一个氨基酸残基。33.根据权利要求1
‑
32的任一项所述的方法，其中抗体包括小于1nm、1.2nm、2nm、5nm、10nm、13.5nm、15nm、20nm、25nm或30nm的k
d
。34.根据权利要求1
‑
33的任一项所述的方法，其中抗体包括人源化抗体。35.根据权利要求1
‑
34的任一项所述的方法，其中抗体包括全长抗体或其结合片段。36.根据权利要求1
‑
35的任一项所述的方法，其中抗体包括双特异性抗体或其结合片段。37.根据权利要求1
‑
36的任一项所述的方法，其中抗体包括单价fab’、二价fab2、单链可变片段(scfv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdab)或骆驼化抗体或其结合片段。38.根据权利要求1
‑
37的任一项所述的方法，其中抗体包括igg框架。39.根据权利要求1
‑
38的任一项所述的方法，其中抗体包括igg1、igg2或igg4框架。40.根据权利要求1
‑
39的任一项所述的方法，其中抗体进一步包括fc突变。41.根据权利要求1
‑
33或35
‑
40的任一项所述的方法，其中抗体包括嵌合抗体。42.根据权利要求1、10或13的任一项所述的方法，其进一步包括在接触步骤之前向受试者施用抗体。
43.根据权利要求42所述的方法，其中受试者被诊断具有癌症。44.根据权利要求43所述的方法，其中癌症是实体瘤。45.根据权利要求44所述的方法，其中癌症是乳腺癌、结肠直肠癌、肾癌、肝癌或肺癌。46.根据权利要求43所述的方法，其中癌症是血液系统恶性肿瘤。47.根据权利要求43
‑
46的任一项所述的方法，其中癌症是转移性癌症。48.根据权利要求43
‑
46的任一项所述的方法，其中癌症是复发或难治癌症。49.根据权利要求42
‑
48的任一项所述的方法，其中抗体被配制用于全身施用。50.根据权利要求42
‑
49的任一项所述的方法，其中抗体被配制用于肠胃外施用。51.根据权利要求42
‑
50的任一项所述的方法，其中抗体与另外治疗剂组合施用。52.根据权利要求51所述的方法，其中抗体和另外治疗剂同时施用。53.根据权利要求51所述的方法，其中抗体和另外治疗剂依次施用。54.根据权利要求53所述的方法，其中抗体在施用另外治疗剂之前施用。55.根据权利要求53所述的方法，其中抗体在施用另外治疗剂之后施用。56.根据权利要求51
‑
55的任一项所述的方法，其中另外治疗剂包括免疫检查点调节剂。57.根据权利要求51
‑
55的任一项所述的方法，其中另外治疗剂包括化疗剂、靶向治疗剂、激素治疗剂或基于干细胞的治疗剂。58.根据前述权利要求任一项所述的方法，其中受试者是人。59.根据权利要求58所述的方法，其中抗体在手术之前或之后施用。60.根据权利要求58所述的方法，其中抗体以与辐射疗法结合、在辐射疗法之前或在辐射疗法之后施用。61.根据前述权利要求任一项所述的方法，其中抗体的k
d
高于抗体imt001的k
d
。62.一种减少组织中纤维化或其倾向的方法，其包括：在使得组织中纤维化生物标志物的表达水平降低的条件下，使组织与特异性结合gal3抗体的抗体接触。63.根据权利要求62所述的方法，其中组织进一步包括tim
‑
3表达细胞。64.根据权利要求63所述的方法，其中抗体进一步破坏gal3和tim
‑
3的相互作用。65.根据权利要求63所述的方法，其中抗体不破坏gal3和tim
‑
3的相互作用。66.根据权利要求62
‑
65的任一项所述的方法，其中至少一种纤维化生物标志物包括α
‑
平滑肌肌动蛋白(α
‑
sma)。67.根据权利要求62
‑
65的任一项所述的方法，其中至少一种纤维化生物标志物包括纤连蛋白。68.根据权利要求62
‑
65的任一项所述的方法，其中至少一种纤维化生物标志物包括α
‑
平滑肌肌动蛋白(α
‑
sma)和纤连蛋白。69.根据权利要求62
‑
68的任一项所述的方法，其中组织是肾组织或肝组织。70.根据权利要求62
‑
68的任一项所述的方法，其中组织选自由以下组成的组：肝组织、肾组织、皮肤组织、肺组织、心脏组织、脑组织、肠组织、骨髓组织和软组织。71.根据权利要求62
‑
70的任一项所述的方法，其中用抗体治疗的组织中至少一种纤维化生物标志物的表达小于用migg2b抗体治疗的对照组织中至少一种纤维化生物标志物的
表达。72.根据权利要求62
‑
71的任一项所述的方法，其中抗体导致降低组织中细胞外基质蛋白的积累。73.根据权利要求72所述的方法，其中细胞外基质蛋白包括胶原。74.根据权利要求73所述的方法，其中组织包括产生胶原的细胞。75.根据权利要求74所述的方法，其中产生胶原的细胞是成纤维细胞。76.根据权利要求75所述的方法，其中成纤维细胞由纤维发生细胞因子激活。77.根据权利要求76所述的方法，其中纤维发生细胞因子是tgf
‑
β1。78.根据权利要求62
‑
77的任一项所述的方法，其中组织具有升高的tgf
‑
β1表达。79.根据权利要求62
‑
78的任一项所述的方法，其中抗体包括人源化抗体。80.根据权利要求62
‑
79的任一项所述的方法，其中抗体包括全长抗体或其结合片段。81.根据权利要求62
‑
79的任一项所述的方法，其中抗体包括双特异性抗体或其结合片段。82.根据权利要求62
‑
79的任一项所述的方法，其中抗体包括嵌合抗体。83.根据权利要求62
‑
82的任一项所述的方法，其中抗体结合至对应于seq id no:1的残基1
‑
20的gal3区域内的至少一个氨基酸残基。84.根据权利要求62
‑
82的任一项所述的方法，其中抗体结合至对应于seq id no:1的残基41
‑
91的gal3区域内的至少一个氨基酸残基。85.根据权利要求62
‑
82或84的任一项所述的方法，其中抗体结合至对应于seq id no:1的残基41
‑
71的gal3区域内的至少一个氨基酸残基。86.根据权利要求62
‑
82或84的任一项所述的方法，其中抗体结合至对应于seq id no:1的残基71
‑
91的gal3区域内的至少一个氨基酸残基。87.根据权利要求62
‑
86的任一项所述的方法，其中抗体结合至肽_1、肽_4、肽_5、肽_6、肽_7或肽8内的至少一个氨基酸残基。88.根据权利要求62
‑
87的任一项所述的方法，其中抗体包括小于1nm、1.2nm、2nm、5nm、10nm、13.5nm、15nm、20nm、25nm或30nm的k
d
。89.根据权利要求62
‑
88的任一项所述的方法，其中抗体包括单价fab’、二价fab2、单链可变片段(scfv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdab)或骆驼化抗体或其结合片段。90.根据权利要求62
‑
89的任一项所述的方法，其中抗体包括igg框架。91.根据权利要求62
‑
90的任一项所述的方法，其中抗体包括igg1、igg2或igg4框架。92.根据权利要求62
‑
91的任一项所述的方法，其中抗体进一步包括fc突变。93.根据权利要求62
‑
92的任一项所述的方法，其进一步包括在接触步骤之前向受试者施用抗体。94.根据权利要求93所述的方法，其中受试者被诊断具有纤维化疾病。95.根据权利要求94所述的方法，其中纤维化疾病是肾纤维化。96.根据权利要求94所述的方法，其中纤维化疾病是肝纤维化。97.根据权利要求93
‑
96的任一项所述的方法，其中抗体被配制用于全身施用。98.根据权利要求93
‑
96的任一项所述的方法，其中抗体被配制用于肠胃外施用。
99.根据权利要求93
‑
98的任一项所述的方法，其中受试者是哺乳动物。100.根据权利要求64和66
‑
99的任一项所述的方法，其中gal3
‑
tim
‑
3相互作用被减少至小于70％、小于60％、小于59％、小于50％、小于40％、小于34％、小于30％、小于20％、小于14％、小于10％、小于7％、小于5％、小于4％或小于1％。101.根据权利要求100所述的方法，其中相互作用发生在选自区域145
‑
168、160
‑
177或165
‑
184的gal3的一个或多个残基处，其中残基位置对应于seq id no:1的位置145
‑
168、160
‑
177或165
‑
184。102.根据权利要求100所述的方法，其中相互作用发生在选自区域149
‑
156、152
‑
168、163
‑
169或163
‑
171的gal3的一个或多个残基处，其中残基位置对应于seq id no:1的位置149
‑
156、152
‑
168、163
‑
169或163
‑
171。103.根据权利要求100
‑
102的任一项所述的方法，其中相互作用发生在选自区域90
‑
122或82
‑
111的tim
‑
3的一个或多个残基处，其中残基位置对应于seq id no:2的位置90
‑
122或82
‑
111。104.根据权利要求100
‑
102的任一项所述的方法，其中相互作用发生在选自区域91
‑
111、107
‑
117、96
‑
102、100
‑
106或92
‑
119的tim
‑
3的一个或多个残基处，此处残基位置对应于seq id no:2的位置91
‑
111、107
‑
117、96
‑
102、100
‑
106或92
‑
119。105.一种用于治疗受试者中免疫相关疾病的抗gal3抗体，其中抗gal3抗体诱导免疫系统的激活。106.根据权利要求105所述的用于治疗免疫有关疾病的抗gal3抗体，其中抗gal3抗体抑制gal3和tim
‑
3之间的相互作用。107.根据权利要求105或106所述的用于治疗免疫有关疾病的抗gal3抗体，其中免疫系统的激活包括cd3 t淋巴细胞、cd4 t辅助细胞、cd8 细胞毒素t细胞、nk细胞、m1巨噬细胞或其组合的增殖。108.根据权利要求105
‑
107的任一项所述的用于治疗免疫有关疾病的抗gal3抗体，其中免疫系统的激活包括m2巨噬细胞的减少。109.根据权利要求105
‑
108的任一项所述的用于治疗免疫有关疾病的抗gal3抗体，其中免疫相关疾病是癌症。110.根据权利要求109所述的用于治疗免疫有关疾病的抗gal3抗体，其中癌症是乳腺癌、结肠直肠癌、肾癌、肝癌、肺癌或血液系统恶性肿瘤。111.根据权利要求109或110所述的用于治疗免疫有关疾病的抗gal3抗体，其中癌症是转移性癌症、复发癌症或难治癌症。112.根据权利要求109
‑
111的任一项所述的用于治疗免疫有关疾病的抗gal3抗体，其中抗gal3抗体与另外治疗剂，比如免疫检查点调节剂、化疗剂、靶向治疗剂、激素治疗剂、基于干细胞的治疗剂、科手术或辐射疗法组合施用。113.根据权利要求105
‑
108的任一项所述的用于治疗免疫有关疾病的抗gal3抗体，其中免疫相关疾病是纤维化，并且抗gal3抗体导致降低组织中细胞外基质蛋白的积累。114.根据权利要求113所述的用于治疗免疫有关疾病的抗gal3抗体，其中细胞外基质蛋白包括胶原。115.根据权利要求113或114所述的用于治疗免疫有关疾病的抗gal3抗体，其中降低受
试者中至少一种纤维化生物标志物的表达水平，和其中至少一种纤维化生物标志物包括α
‑
sma、纤连蛋白或二者。116.根据权利要求113
‑
115的任一项所述的用于治疗免疫有关疾病的抗gal3抗体，其中组织选自由以下组成的组：肝组织、肾组织、皮肤组织、肺组织、心脏组织、脑组织、肠组织、骨髓组织和软组织。117.根据权利要求113
‑
116的任一项所述的用于治疗免疫有关疾病的抗gal3抗体，其中纤维化是肾纤维化、肝纤维化、肺纤维化、心脏纤维化或血管纤维化。118.根据权利要求105
‑
117的任一项所述的用于治疗免疫有关疾病的抗gal3抗体，其中抗gal3抗体被配制用于全身施用、肠胃外施用、静脉内施用或皮下施用。119.根据权利要求105
‑
118的任一项所述的用于治疗免疫有关疾病的抗gal3抗体，其中受试者是人。120.根据权利要求1
‑
104的任一项所述的方法，其中抗gal3抗体选自由以下组成的组：2d10.2b2、3b11.2g2、4a11.2b5、4g2.2g6、6h6.2d6、7d8.2d8、12g5.d7、13a12.2e5、13g4.2f8、13h12.2f8、14h10.2c9、15f10.2d6、15g7.2a7、19b5.2e6、19d9.2e5、20d11.2c6、20h5.a3、23h9.2e4、24d12.2h9、846.1f5、846.2h3、846t.1h2、9h2.2h10、imt001
‑
4、imt006
‑
1、imt006
‑
5、imt006
‑
8和mimt001。121.根据权利要求1
‑
104的任一项所述的方法，其中抗gal3抗体是imt001
‑
4、imt006
‑
1、imt006
‑
5或imt006
‑
8的一种或多种。122.根据权利要求105
‑
119的任一项所述的用于治疗免疫有关疾病的抗gal3抗体，其中抗gal3抗体选自由以下组成的组：2d10.2b2、3b11.2g2、4a11.2b5、4g2.2g6、6h6.2d6、7d8.2d8、12g5.d7、13a12.2e5、13g4.2f8、13h12.2f8、14h10.2c9、15f10.2d6、15g7.2a7、19b5.2e6、19d9.2e5、20d11.2c6、20h5.a3、23h9.2e4、24d12.2h9、846.1f5、846.2h3、846t.1h2、9h2.2h10、imt001
‑
4、imt006
‑
1、imt006
‑
5、imt006
‑
8和mimt001。123.根据权利要求105
‑
119的任一项所述的用于治疗免疫有关疾病的抗gal3抗体，其中抗gal3抗体是imt001
‑
4、imt006
‑
1、imt006
‑
5或imt006
‑
8。124.一种至少包括图35a
‑
36b的抗体的任一种内的hcdr3的抗gal3抗体。125.根据权利要求124所述的抗gal3抗体，其进一步包括图35a
‑
36b的抗体的任一种内的所有3个hcdr。126.根据权利要求125所述的抗gal3抗体，其进一步包括图35a
‑
36b的抗体的任一种内的所有3个lcdr。127.一种抗gal3抗体，其包括图36a内重链序列的任一种，或与其至少80％同一性的序列。128.一种抗gal3抗体，其包括图36b内轻链序列的任一种，或与其至少80％同一性的序列。129.根据权利要求128所述的抗gal3抗体，其进一步包括图36a内重链序列的任一种，或与其至少80％同一性的序列。130.一种包括6个cdr的抗gal3抗体，其中6个cdr，在它们的组合序列中，与图35a和35b内任何组6个cdr至少80％同一性。131.一种抗gal3抗体，其包括至少一个来自图38的cdr。
132.一种抗gal3抗体，其包括至少两个来自图38的cdr。133.一种抗gal3抗体，其包括至少三个来自图38的cdr。134.一种抗gal3抗体，其包括至少四个来自图38的cdr。135.一种抗gal3抗体，其包括至少五个来自图38的cdr。136.一种抗gal3抗体，其包括六个来自图38的cdr。137.一种抗gal3抗体，其包括六个来自图38的cdr，并且其中所述六个来自单个bin。138.一种抗gal3抗体，其包括六个来自图38的cdr或在它们的整个序列中，与其至少80％同一性的一组6个cdr。

技术总结
本文公开了特异性结合至Gal3的抗体及其使用方法。在一些实施方式中，本文还描述了用特异性结合至Gal3的抗体诱导免疫激活或促进T细胞或天然杀伤细胞增殖的方法。本文还公开了用特异性结合至Gal3的抗体减少组织中纤维化或其倾向的方法和组合物。在一些情况下，抗Gal3抗体还破坏Gal3和TIM


技术研发人员：孙东旭 王岩 吴奕楠 C
受保护的技术使用者：真和制药有限公司
技术研发日：2020.01.29
技术公布日：2021/11/26