一种基于3D打印构建用于修复重建颅颌面的方法与流程

技术特征：
1.一种基于3d打印构建用于修复重建颅颌面的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）自体骨基质（auto
‑
bm）研磨首先，把每个自体骨基质（auto
‑
bm）粉碎成0.5
×
0.5 cm
2 碎片，将其碎片放置冷冻干燥箱种，在
‑
80℃下冻干24小时；之后，把自体骨基质（auto
‑
bm）放入研磨缸，液氮预冷10min，然后用振动研磨机研磨成auto
‑
bm颗粒；（2）bm料浆的制备将聚乙二醇己内酯 (pcl)和冰乙酸(gaa)按重量比为2:3放置在锥形瓶中，被缓慢加热至90℃，在聚乙二醇己内酯 (pcl)完全溶解后，形成pcl墨水；pcl墨水在室温下被完全冷却1小时，此后，将auto
‑
bm颗粒与pcl墨水按重量比为3:5混合在一起合成bm浆料；（3）3d打印多层次3d打印自体骨（3dp
‑
auto
‑
bone）首先进行颌面部三维重建ct，将该三维重建ct数据输入3d打印机，采用堆砌技术打印，历时4h，获得1:1面颅骨模型；在模型上分析骨折情况，记录在模型上可以观察的骨折数量; 与正常侧对比，测量明显错位部位断端的最大移位距离，建立受损或缺失的3d模型；之后将步骤（2）中的bm浆料注入3d打印机，形成3d打印自体骨（3dp
‑
auto
‑
bone）；（4）骨髓提取骨髓间充质干细胞（bmscs）在大腿上部切口1cm，在股骨顶部开一个孔，用肝素冲洗的注射器抽取骨髓4ml；将肝素抗凝收集的骨髓悬液与d
‑
hanks液按体积比为1:1进行稀释，将稀释后的骨髓悬液和分离液按体积比为2:1加入离心管，将离心管放置离心机中，1800 转/分钟，离心 15 分钟，收集富含有核细胞的界面层细胞；之后用d
‑
hanks液清洗界面层细胞 1 遍，并调整细胞浓度为 1
×
105/ml，接种于培养基中，在37℃，含5% co2的环境中培养，传代至传代3 (p3)；（5）3d打印自体骨（3dp
‑
auto
‑
bone）结合骨髓间充质干细胞骨髓间充质干细胞（bmscs）的p3自动繁衍达到80%，悬浮于新鲜完全培养液（ccm）中，量取250毫升，浓度为4
×
10
6 /毫升的bmscs悬液添加到每个预亲水的3d打印自体骨（3dp
‑
auto
‑
bone）上孔超低附着板，在37℃、5% co
2 的环境中培养2h；之后，每48 h加入新鲜完全培养液（ccm） 1 ml，刷新一次；同时将骨髓间充质干细胞（bmscs）以同样的方式播种在3dp
‑
auto
‑
bone中，培养2周后制成多层定制骨植入物植入机体。2.如权利要求1所述的基于3d打印构建用于修复重建颅颌面的方法，其特征在于：步骤（2）中的聚乙二醇己内酯 (pcl)和冰乙酸(gaa)按重量和体积比为16:23进行配置。3.如权利要求1所述的基于3d打印构建用于修复重建颅颌面的方法，其特征在于：步骤（2）中的auto
‑
bm颗粒与pcl墨水按重量和体积比为3：4进行配置。4.如权利要求1所述的基于3d打印构建用于修复重建颅颌面的方法，其特征在于：步骤（4）中的培养基包含有dmem
‑
lg、1％青 链 霉 素 双 抗 溶 液 (penicillin
‑
streptomycin)、5ng/ml 成 纤 维 细 胞 生 长 因子 (bfgf)、10％ fbs( 胎牛血清 )。5.如权利要求1所述的基于3d打印构建用于修复重建颅颌面的方法，其特征在于：骨髓间充质干细胞（bmscs）在步骤（4）的培养过程和步骤（5）在3dp
‑
auto
‑
bone中的种植均采用25gy的伽玛辐射灭菌。

技术总结
本发明涉及3D打印技术领域，具体说是一种基于3D打印构建用于修复重建颅颌面的方法；包括以下步骤：自体骨基质研磨，制备BM料浆，3D打印多层次3D打印自体骨，骨髓提取骨髓间充质干细胞，传代至传代3，将3D打印自体骨结合骨髓间充质干细胞，培养2周后植入机体；本发明采用自体骨基质和自体细胞制备的3D打印自体骨具有天生的生物相容性、生物安全性和骨再生能力，在种植体中，不需要额外的诱导成骨因子，形成带血管蒂的成熟骨，为成骨提供良好的生物活性；也对特定患者的颅骨缺损植入，用于真正的患者特异性修复；本发明的BM料浆通过改进工艺，使其混合后可轻易打印，不堵塞喷嘴，确保打印过程的流畅程度，减小打印后的误差。减小打印后的误差。减小打印后的误差。


技术研发人员：李谊 柳韶真 胡浩磊
受保护的技术使用者：中国人民解放军联勤保障部队第九八八医院
技术研发日：2021.08.19
技术公布日：2021/11/23