基于二氧化锰纳米片仿酶荧光复合材料的毒死蜱比率荧光法的制作方法

技术特征：
1.基于二氧化锰纳米片仿酶荧光复合材料的毒死蜱比率荧光法，其特征在于，其步骤如下：a、牛血清白蛋白；简称bsa，功能化的金纳米簇；简称auncs的制备：将haucl4和bsa放于放于37℃温育10min，按体积比1:1混合，剧烈搅拌2
‑
5min；将naoh相比于上述混合溶液1:20加入到上述溶液中，于37℃下剧烈搅拌反应12小时，即可获得黄色auncs溶液，通过透析进行纯化，冷冻抽干获得黄色auncs粉末，超纯水溶解稀释至0.20mg ml
‑1备用；b、二氧化锰纳米片；简称mno
2 nss仿酶荧光复合材料的制备：将步骤a的auncs溶液与超纯水按照体积比80:313混合，缓慢搅拌5min；然后将50mmol l
‑1mncl2·
4h2o相比于上述混合溶液3:655加入到上述溶液中，缓慢搅拌1小时；随后将1mol l
‑1naoh相比于上述混合溶液1:99加入到上述溶液中，缓慢搅拌反应4小时，得到棕黄色auncs
‑
mno
2 nss仿酶荧光复合材料溶液，通过1kda透析进行纯化，放置于4℃备用；c、毒死蜱比率荧光分析：在多个1.5ml离心管中分别加入25μl不同浓度的cp、25μl 180mu ml
‑1ache混匀，在37℃下300rpm反应40min；然后加入25μl 2mmol l
‑1atch、25μl ph＝8.0 100mmol l
‑1tris
‑
hcl缓冲液混匀，在37℃下300rpm反应25min；随后加入50μl步骤b的auncs
‑
mno2nss、25μl ph＝8.0 100mmol l
‑1tris
‑
hcl缓冲液、300μl超纯水混匀，在37℃下300rpm反应15min；最后加入5μl 0.6mmol l
‑1opd和320μl超纯水混匀，短暂离心后，在50℃、300rpm避光震荡条件下反应10min，于25℃下静置5min；在室温下使用荧光分光光度计、紫外
‑
可见分光光度计测定溶液的荧光发射光谱和紫外
‑
可见吸收光谱并进行紫外光下拍照；d、水凝胶平台的制备：称量60mg海藻酸钠，倒入15ml离心管中，加入3ml超纯水，摇晃后超声30min取出备用；在酶标条孔中分别加入10μl不同浓度的cp、10μl 180mu ml
‑1ache、100μl海藻酸钠和30μl 5mg ml
‑1ca(no3)2·
4h2o搅拌均匀后于37℃下反应40min，再加入10μl tris
‑
hcl缓冲液和10μl 2mmol l
‑1atch搅拌均匀后反应25min；随后再加入20μl auncs
‑
mno
2 nss、10μl tris
‑
hcl缓冲液搅拌均匀后继续反应15min；加入2μl 0.6mmol l
‑1opd后搅拌均匀后于50℃下反应10min，冷却后进行紫外光下拍照。2.如权利要求1所述的一种基于二氧化锰纳米片仿酶荧光复合材料的毒死蜱比率荧光法，其特征在于，步骤a所述的haucl4的浓度为10mmol l
‑1，bsa的浓度为50mg ml
‑1，naoh的浓度为1mol l
‑1。3.如权利要求1所述的一种基于二氧化锰纳米片仿酶荧光复合材料的毒死蜱比率荧光法，其特征在于，步骤a所述haucl4及bsa需提前在37℃下温育10min，整个合成过程在37℃下进行。4.如权利要求1所述的一种基于二氧化锰纳米片仿酶荧光复合材料的毒死蜱比率荧光法，其特征在于，步骤b所述的mncl2·
4h2o的浓度为50mmol l
‑1，naoh的浓度为1mol l
‑1。5.如权利要求1所述的一种基于二氧化锰纳米片仿酶荧光复合材料的毒死蜱比率荧光法，其特征在于，步骤c所述的tris
‑
hcl缓冲液ph为8.0，浓度为100mmol l
‑1。6.如权利要求1所述的一种基于二氧化锰纳米片仿酶荧光复合材料的毒死蜱比率荧光法，其特征在于，步骤c进行荧光光谱测定时，对auncs参数设置为激发波长为580nm，发射波
长范围为600
‑
850nm；对氧化型邻领苯二胺；简称opd
ox
参数设置为激发波长为440nm，发射波长范围为460
‑
700nm；激发与发射狭缝分别为10、10nm，响应时间为0.25s。7.如权利要求1所述的一种基于二氧化锰纳米片仿酶荧光复合材料的毒死蜱比率荧光法，其特征在于，步骤c中auncs最佳发射波长位于645nm处，opd
ox
最佳发射波长位于550nm处。8.如权利要求1所述的一种基于二氧化锰纳米片仿酶荧光复合材料的毒死蜱比率荧光法，其特征在于，步骤c进行紫外
‑
可见吸收光谱检测的扫描范围为700
‑
300nm。9.如权利要求1所述的一种基于二氧化锰纳米片仿酶荧光复合材料的毒死蜱比率荧光法，其特征在于，手持紫外灯下拍照在365nm照射下进行。

技术总结
本发明公开了一种基于二氧化锰纳米片仿酶荧光复合材料(AuNCs


技术研发人员：孙春燕 李红霞 司金雨 邹睿琦 刘妮 吕婷 杨川宇 于沛桐
受保护的技术使用者：吉林大学
技术研发日：2021.08.20
技术公布日：2021/11/21