一种硬性角膜接触镜清洗装置的制作方法

1.本实用新型涉及角膜接触镜清洗技术领域，尤其涉及一种硬性角膜接触镜清洗装置。


背景技术：

2.角膜接触镜如何除蛋白的问题困扰了行业半个多世纪，引发了各国的眼视光行业对接触镜佩戴安全的高度重视。我国也因角膜接触镜上的角膜感染案例频发，从而将接触镜在2012年便列入第三类医疗器械类，作为高风险管理，其原因在于：接触镜材质结构有大量肉眼不见的纤维透痒孔，人眼时刻分泌大量的泪液，泪液里含有大量泪蛋白，泪蛋白极易渗透到纤维透痒孔中，造成镜片dk值降低(透氧率)，造成角膜缺氧、水肿等症状，严重的会造成角膜受损，细菌感染，角膜炎症甚至是视力受损等问题。
3.为了清除接触镜表面的细菌，传统的清洗方法是配合护理液对镜片进行物理揉搓，或者使用化学活性剂浸泡以达到除蛋白的目的，但是无论是国内外的实验数据还是用户反馈，都证明这些手段的除蛋白效果甚微，且手指揉搓，尤其是硬性角膜接触镜很容易造成镜片划伤、破损。
4.电泳(electrophoresis,ep)是电泳现象的简称，指的是带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动的现象。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。而蛋白电泳(spe)作为一种蛋白质的分析技术，蛋白质在缓冲液中带负电荷或正电荷，在电场中向阳极或阴极移动称为电泳，不同的蛋白质分子具有不同的电泳迁移率。电解(electrolysis)是将电流通过电解质溶液或熔融态电解质(又称电解液)，在阴极和阳极上引起氧化还原反应的过程，电化学电池在外加直流电压时可发生电解过程。
5.另外，现有的角膜接触镜清洗装置大多都只有清洗功能，当清洗完毕后需要配备相应的储纳盒用于储放清洗完的角膜接触镜，功能较为单一，且携带装置较多，不够方便。
6.因此，结合上述存在的技术问题，有必要提出一种新的技术方案。


技术实现要素：

7.本实用新型的目的是解决现有技术中存在的问题，提供一种适用于硬性角膜接触镜的清洗装置，通过电泳解离技术在将泪蛋白等秽物从硬性角膜接触镜上分离的同时还可以分解泪蛋白和杀菌消毒，同时还在清洗装置上设置有储纳槽或储纳仓，可用于储纳清洗完的角膜接触镜，具体方案如下：
8.本实用新型提供一种硬性角膜接触镜清洗装置，其包括：本体，所述本体内具有容纳腔，其内容置有储电装置、电路板和开关组件，所述储电装置和开关组件分别与所述电路板与电连接，所述本体的一侧设有储纳槽；和电泳解离仓，所述电泳解离仓设于所述本体的一侧，所述电泳解离仓内至少设置有一组电泳解离探针，所述电泳解离仓内均填充有含cl
‑
的电解质溶液，所述电泳解离探针与所述含cl
‑
的电解质溶液接触，所述电泳解离探针与所述电路板电连接。
9.进一步的，所述本体包括本体底座和本体上盖，所述本体上盖卡合在所述本体底座的一侧，所述储纳槽和电泳解离仓均设于所述本体上盖远离所述本体底座的一侧。
10.进一步的，所述本体上盖远离所述本体底座的一侧设有安装槽，所述电泳解离仓能够安装在所述安装槽内。
11.进一步的，所述安装槽内与所述电泳解离探针对应位置设有转接弹簧针，所述转接弹簧针与所述电路板电连接，在所述电泳解离仓安装在所述安装槽内时，所述转接弹簧针能够与其对应的所述电泳解离探针连接。
12.进一步的，所述电泳解离仓包括电泳解离底座和电泳解离上盖，所述电泳解离上盖卡合在所述电泳解离底座的一侧，所述电泳解离上盖远离所述电泳解离底座的一侧设有左电泳解离槽和右电泳解离槽，所述电泳解离探针设于所述电泳解离底座内，且所述电泳解离探针的一端穿过所述电泳解离底座远离所述电泳解离上盖的一侧与外部连通，所述电泳解离探针的另一端延伸至所述左电泳解离槽或右电泳解离槽。
13.进一步的，所述左电泳解离槽和右电泳解离槽内均至少设置有一组电泳解离探针，且每一组电泳解离探针均至少包括一个第一探针和一个第二探针，所述第一探针和第二探针间隔设置，硬性角膜接触镜能够放置在所述第一探针和第二探针之间。
14.进一步的，所述电泳解离仓能够以磁吸附方式或卡扣方式安装在所述安装槽内，所述电泳解离仓与所述安装槽之间设有限位结构。
15.进一步的，其还包括储纳仓，所述储纳仓能够安装在所述储纳槽内，所述储纳仓包括左容置槽和右容置槽。
16.进一步的，所述储纳仓能够以磁吸附方式或卡扣方式安装在所述储纳槽内，所述储纳仓与所述储纳槽之间设有限位结构。
17.进一步的，其还包括密封盖，所述密封盖卡合在所述左电泳解离槽和/或右电泳解离槽上，和/或所述密封盖卡合在所述储纳槽上，和/或所述密封盖卡合在所述左容置槽和/或右容置槽上；所述硬性角膜接触镜清洗装置还包括防滑垫，所述防滑垫设于所述本体底座远离所述本体上盖的一侧。
18.进一步的，在所述电泳解离仓中放入硬性角膜接触镜以及电解质溶液，启动所述硬性角膜接触镜清洗装置，所述电泳解离仓内的第一探针和第二探针在电路回路下形成正极探针和负极探针，待清洗的硬性角膜接触镜表面及透氧孔内所附着的蛋白在电解质溶液中带电荷，带电荷的泪蛋白朝向与其电性相反的电泳解离探针位置移动；
19.所述电解质溶液中的cl
‑
朝向正极探针移动，且失去电子被氧化为氯气，氯气溶于所述电解质溶液中生成次氯酸，次氯酸与蛋白在电泳解离仓内发生氧化还原反应，所述泪蛋白被降解；
20.次氯酸在所述电解质溶液中发生自身氧化还原反应，分解出氢离子、氯离子和氧气，所述次氯酸在分解过程中吸收所述电泳解离仓内微生物的功能蛋白的电子，以使得所述微生物的功能蛋白失活，所述微生物被灭杀。
21.进一步的，所述电解质溶液为含nacl的溶液，
22.所述含nacl的溶液中带正电荷的氢离子向负极探针移动，并在所述负极探针附近发生还原反应生成氢气，所述电解质溶液中的钠离子与氢氧根离子生成氢氧化钠，硬性角膜接触镜表面的油脂与所述氢氧化钠发生皂化反应，硬性角膜接触镜表面的油脂被清除；
23.所述次氯酸与蛋白在电泳解离仓内发生氧化还原反应，蛋白被降解，具体包括：
24.所述次氯酸与形成蛋白骨架的肽链反应，得到氯醛甲酰胺，以氯醛甲酰胺形成的肽链在溶液中水解，所述肽链中的肽键断裂，分解为小分子蛋白和氨基酸，蛋白降解，和/或，
25.所述次氯酸与形成蛋白骨架的肽链的侧链反应，所述侧链包括赖氨酸侧链，所述次氯酸与所述赖氨酸侧链发生反应，在蛋白的赖氨酸侧链以及蛋白的氨基上形成氯胺，所述氯胺分解形成羰基形式的有机分子片段【1,2】，所述赖氨酸侧链上的肽键断裂，分解为小分子蛋白和氨基酸，蛋白被降解，
26.所述微生物包括细菌和病毒，所述次氯酸在分解过程中吸收所述细菌的细胞壁上的功能蛋白的电子，所述细菌失活；
27.所述次氯酸在分解过程中吸收所述病毒的外壳上的功能蛋白的电子，所述病毒失活；
28.所述次氯酸具有强氧化性，其渗透所述微生物细胞内，与所述微生物细胞内的菌体蛋白、核酸和酶发生氧化反应，以使得所述微生物被灭杀。
29.与现有技术相比，本技术的硬性角膜接触镜清洗装置具有如下一个或多个有益效果：
30.(1)本技术的硬性角膜接触镜清洗装置，其采用蛋白电泳原理和电解技术相结合的技术，并配合含有cl
‑
的电解质溶液，既可以有效的使得硬性角膜接触镜上泪蛋白等秽物从硬性角膜接触镜上脱离，还可以在电泳解离仓内产生次氯酸，不但可以将硬性角膜接触镜上顽固的沉积性蛋白分解为小分子蛋白和氨基酸使得电泳吸附更加容易，同时还可以杀死细菌和病原微生物，起到除蛋白和灭菌消毒的双重功效；
31.(2)本技术的硬性角膜接触镜清洗装置，其所使用的电解质溶液可以是任何不含重金属的含cl
‑
的溶液，比如生理盐水和普通护理液等，有很强的适用性；
32.(3)本技术的硬性角膜接触镜清洗装置，其设置有储电装置，便于携带，能够在路上等缺乏电源的环境内正常使用；
33.(4)本技术的硬性角膜接触镜清洗装置，其设置有储纳槽，可用于储放清洗完成的角膜接触镜；
34.(5)本技术的硬性角膜接触镜清洗装置，其设置有卡拆卸的储纳仓，可以用于储放角膜接触镜，且便于携带。
附图说明
35.图1为本技术实施例提供的硬性角膜接触镜清洗装置在电泳解离仓分离时的结构示意图；
36.图2为本技术实施例提供的硬性角膜接触镜清洗装置在电泳解离仓分离时俯视方向的结构示意图；
37.图3为本技术实施例提供的硬性角膜接触镜清洗装置的本体的结构示意图；
38.图4为本技术实施例提供的硬性角膜接触镜清洗装置的爆炸结构示意图；
39.图5为本技术实施例提供的硬性角膜接触镜清洗装置在安装有罩盖时俯视方向的结构示意图；
40.图6为本技术实施例提供的硬性角膜接触镜清洗装置在图5a处的剖视图；
41.图7为本技术实施例提供的硬性角膜接触镜清洗装置在电泳解离仓和收纳仓分离时的结构示意图；
42.图8为验证例2中用12％sds
‑
page检测3n护理液对溶菌酶的降解情况得到的电镜图；
43.图9为验证例2中用15％sds
‑
page检测市场商用硬性角膜接触镜除蛋白液对溶菌酶的降解情况得到的电镜图。
44.其中，1
‑
本体，11
‑
本体上盖，111
‑
储纳槽，112
‑
安装槽，113
‑
转接弹簧针，12
‑
本体底座，13
‑
电路pcba主板，14
‑
电路pcba副板，2
‑
电泳解离仓，21
‑
电泳解离探针，22
‑
电泳解离底座，23
‑
电泳解离上盖，231
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左电泳解离槽，232
‑
右电泳解离槽，3
‑
储纳仓，31
‑
左容置槽，32
‑
右容置槽，4
‑
罩盖，5
‑
密封盖，6
‑
防滑垫，7
‑
工具凹槽，71
‑
佩戴工具，8
‑
遮光泡棉。
具体实施方式
45.为更进一步阐述本实用新型为达成预定实用新型目的所采取的技术手段及功效，以下结合附图及较佳实施例，对依据本实用新型的具体实施方式、结构、特征及其功效，详细说明如下。
46.实施例
47.本实施例提供一种硬性角膜接触镜清洗装置，如图1至图4所示，其包括本体1和电泳解离仓2。所述本体1内具有容纳腔，其内容置有储电装置、电路板和开关组件，所述储电装置和开关组件分别与所述电路板与电连接，所述本体1的一侧设有储纳槽111。储电装置的设置，使得硬性角膜接触镜清洗装置更便于携带，能够在路上等缺乏电源的环境内正常使用。所述储纳槽111可以用于储放清洗完毕的硬性角膜接触镜。所述电泳解离仓2设于所述本体1的一侧，所述电泳解离仓2包括左电泳解离槽231和右电泳解离槽232，所述左电泳解离槽231和右电泳解离槽232内均至少设置有一组电泳解离探针21，所述电泳解离探针21与所述电路板电连接。所述左电泳解离槽231和右电泳解离槽232内均填充有包含cl
‑
的电解质溶液。在所述左电泳解离槽231和/或右电泳解离槽232内的每一组电泳解离探针21均至少包括一个第一探针和一个第二探针。所述第一探针和第二探针间隔设置，硬性角膜接触镜能够放置在所述第一探针和第二探针之间。为了更好说明，本实例将示意性的以每个电泳解离槽内各设置一组电泳解离探针21为例来展开说明，即所述左电泳解离槽231和右电泳解离槽232各设置一个第一探针和一个第二探针。其中，所述第一探针和第二探针分别与所述电路板上的正负极接入口连接，故而使得所述第一探针和第二探针一个作为正极探针，另一个作为负极探针，当然两者的正负极是可以根据需要进行调整的。本实施例优选采用两块电路板，一个为电路pcba主板13，一个为电路pcba副板14，两个电路板之间电连接。
48.如图4所示，所述本体1包括本体底座12和本体上盖11，所述本体上盖11卡合在所述本体底座12的一侧，所述储纳槽111和电泳解离仓2均设于所述本体上盖11远离所述本体底座12的一侧。图中可以看出，所述本体上盖11共包括两个部分，其中一部分为向上凸起的较高部分，与所述本体底座12之间形成一个较大的腔室，在其内部可设置一些本装置所用到的电路pcba主板13、储电装置或其他元器件，比如显示灯、开关组件、遮光泡棉8等等。另一部分为较低部分，所述电泳解离仓2和储纳槽111均设置在所述本体上盖11的较低部分，
所述电路pcba副板14设置在所述电泳解离仓2下方。为了使得整个装置更为美观，在具体实施时，所述电泳解离仓2可以与所述储纳槽111对称设置。所述本体上盖11较低部分远离所述本体底座12的一侧设有安装槽112，所述电泳解离仓2能够安装在所述安装槽112内。所述安装槽112内与所述电泳解离探针21对应位置设有转接弹簧针113，所述转接弹簧针113与所述电路pcba副板14电连接，在所述电泳解离仓2安装在所述安装槽112内时，所述转接弹簧针113能够与其对应的所述电泳解离探针21连接。所述电泳解离仓2包括电泳解离底座22和电泳解离上盖23，所述电泳解离上盖23卡合在所述电泳解离底座22的一侧，所述左电泳解离槽231和右电泳解离槽232均设于所述电泳解离上盖23远离所述电泳解离底座22的一侧，所述电泳解离探针21设于所述电泳解离底座22内，且所述电泳解离探针21的一端穿过所述电泳解离底座22远离所述电泳解离上盖23的一侧与外部连通，所述电泳解离探针21的另一端延伸至所述左电泳解离槽231或右电泳解离槽232，并能够与所述左电泳解离槽231或右电泳解离槽232内的电解质溶液接触。
49.在一个进一步的实施例中，所述电泳解离仓2能够以磁吸附方式或卡扣方式安装在所述安装槽112内，所述电泳解离仓2与所述安装槽112之间设有限位结构。当所述电泳解离仓2以磁吸附方式安装在所述安装槽112内时，可以是在所述电泳解离底座22和本体上盖11内分别设置磁吸装置。优选的，所述磁吸装置为磁铁，所述电泳解离底座22的底端和本体上盖11的所述安装槽112的下方均设置一个或多个磁块，又或可以是磁环等形状。当然，也可以是所述电泳解离底座22和本体上盖11内一个设置磁铁另一个设置铁片，又或其他可磁吸的设备等等，均在本技术的保护范围内。当所述电泳解离仓2以卡扣方式安装在所述安装槽112内时，该卡扣方式可以是一种凸点与凹槽间的配合结构，比如在电泳解离仓2的侧面设置若干个凸点，而在所述安装槽112的内侧壁对应位置设置凹槽，当电泳解离仓2安装在安装槽112内时，凸点刚好能够卡合在对应凹槽内。当然，也可以是在电泳解离仓2的侧面设置若干个凹槽，而在所述安装槽112的内侧壁对应位置设置凸点，同样可以实现相同的卡合效果。本实施例还提供了另一种的卡扣方式，比如在所述电泳解离仓2的两侧设置卡钩，在本体上盖11上开设与所述卡钩对应的卡口，在所述电泳解离仓2安装在所述安装槽112内时，所述卡钩与其对应的卡口配合连接。
50.所述限位结构包括限位凸起和限位凹槽，可以是在所述电泳解离仓2的底面设置一个或多个限位凸起，在所述安装槽112的底部对应位置设置与所述限位凸起形状对应的限位凹槽，当所述电泳解离仓2安装在所述安装槽112内时，所述限位凸起卡合在所述限位凹槽内，有效的起到了限位或导向电泳解离仓2的作用。当然，也可是在所述电泳解离仓2的底面设置一个或多个限位凹槽，在所述安装槽112的底部对应位置设置与所述限位凹槽形状对应的限位凸起，同样可以起到一样的限位和导向作用。
51.在一个进一步的实施例中，所述储纳槽111可以为一个整容置槽，也可以为两个单独的容置槽，优选采用两个独立的容置槽，其中一个作为储放左眼角膜接触镜的左容置槽31，另一个作为储放右眼角膜接触镜的右容置仓，如图1至图4所示。所述储纳槽111上可以直接卡合一个密封盖5。比如，当所述储纳槽111为一个整容置槽时，可以在容置槽的开口位置设置一个环状凸起，密封盖5可以直接卡合在所述环状凸起上。另外，密封盖5既可以是与本体上盖11分离的，也可以是可转动连接。又比如，当所述储纳槽111为两个单独的容置槽时，也可以在容置槽的环状凸起外侧设置外螺纹，密封盖5通过螺纹结构卡合在所述储纳槽
111上，如图1所示。可以用来储放清洗完成的硬性角膜接触镜，避免灰尘落入。
52.在一个进一步的实施例中，所述储纳槽111也可以仅是一个如所述安装槽112一样的凹槽结构，在所述储纳槽111内设置一个储纳仓3，如图7所示。所述储纳仓3的形状可以与所述电泳解离仓2的形状一致，使得整个装置在整体上为对称设计，更加美观，当然也可以不一致。所述储纳仓3同样可以包括左容置槽31和右容置槽32，以用来储放不同眼睛所使用的硬性角膜接触镜。与所述电泳解离仓2在安装槽112内的安装方式一样，所述储纳仓3能够以磁吸附方式或卡扣方式安装在所述储纳槽111内，所述储纳仓3与所述储纳槽111之间设有限位结构，在此不再赘述。在左容置槽31和右容置槽32上同样可以设置一个密封盖5。由于电泳解离仓2在对硬性角膜接触镜清洗完毕后，用户是无法直接佩带的，需要拿到水池等地方对硬性角膜接触镜进行再一次的清洗。而本实施例的这种储纳仓3可拆卸设计，可以使得储纳仓3作为一个独立于清洗装置存在，使用者在使用电泳解离仓2对硬性角膜接触镜清洗完毕后，可以将清洗后的硬性角膜接触镜放入至储纳仓3，然后使用者可以仅拿着储纳仓3进行清洗，一方面避免了在清洗过程中装置进水的风险，另一方面还大大提高了清洗的方便性。同时，独立式的储纳仓3设计，还可以直接用于储放硬性角膜接触镜，使得使用者携带硬性角膜接触镜更加方便。
53.在一个进一步的实施例中，所述左电泳解离槽231和右电泳解离槽232上也卡合有密封盖5，在对硬性角膜接触镜进行清洗时，可以使用所述密封盖5将所述左电泳解离槽231和右电泳解离槽232密封，防止电解质溶液泄露到电泳解离槽外。
54.在一个进一步的实施例中，所述硬性角膜接触镜清洗装置还包括防滑垫6，所述防滑垫6设于所述本体底座12远离所述本体上盖11的一侧。
55.在一个进一步的实施例中，所述本体上盖11上还设有工具凹槽7。用于放置一些佩戴工具71，比如镊子，吸盘杆等等。如图1至图4或图7所示，所述工具凹槽7设置在所述本体上盖11较低部分远离所述本体底座12的一侧，且所述工具凹槽7位于所述安装槽112或储纳槽111与所述本体上盖11的较高部分之间。同时，本技术的硬性角膜接触镜清洗装置在所述本体上盖11的较低部分还卡合有一个罩盖4，如图4和图5所示。在所述罩盖4卡合后，所述罩盖4的顶端与所述本体上盖11较高部分的上端平齐，可以保证罩盖4在保护其内装置各部件或结构不落灰的同时，还能够保证装置整体的美观性。
56.本实用新型硬性角膜接触镜清洗装置的工作原理是基于蛋白电泳技术，即带电颗粒在电场的作用下向着与其电性相反的电极移动，称为电泳。而蛋白质是由一条或几条多肽链按各自特殊的组合方式形成具有完整生物活性的分子，且蛋白质是两性电解质，当其处于等电点时，蛋白质分子本身静电荷为零，通常在偏酸性的溶液中带正电，在偏碱性的溶液中带负电。当在所述电泳解离仓2内加入电解质溶液，可使得所述电路pcba副板14在给所述第一探针和第二探针通电时，所述第一探针和第二探针之间通过电解质溶液形成通路，且所述第一探针和第二探针之间具有一定电势差，粘附在硬性角膜接触镜上的秽物，比如泪蛋白等，在电解质溶液中具有一定电荷，且在电势差的作用下与硬性角膜接触镜脱离，并在电解质溶液中向第一探针或第二探针移动，最终吸附在第一探针或第二探针表面，实现对硬性角膜接触镜的清洁。而采用含有cl
‑
的电解质溶液，当装置通电后，电解质溶液中的cl
‑
朝向正极探针移动，且失去电子被氧化为氯气，氯气溶于所述电解质溶液生成次氯酸，次氯酸与泪蛋白可以在电泳解离仓2内发生氧化还原反应，泪蛋白被降解。次氯酸是一种强
氧化剂，其可以在电解质溶液中发生自身氧化还原反应，分解出氢离子、氯离子和氧气。微生物包括细菌和病毒，所述次氯酸在分解过程中吸收所述细菌的细胞壁上的功能蛋白的电子，所述细菌失活；所述次氯酸在分解过程中吸收所述病毒的外壳上的功能蛋白的电子，所述病毒失活。所述次氯酸具有强氧化性，其还可以渗透所述微生物细胞内，与所述微生物细胞内的菌体蛋白、核酸和酶发生氧化反应，以使得所述微生物被灭杀。
57.本实施例所使用的电泳解离探针21为纳米级镀层材料，该电泳解离探针21的材质耐腐蚀，因此，电泳解离仓2内电解发生氧化还原反应不会引起电泳解离探针21腐蚀，或者说，电解质溶液不与电泳解离探针21发生反应，所述电解质溶液在所述两个带不同电性的电泳解离探针21附近发生反应(从浓度的角度来说，根据离子的定向移动的理论，相比于电泳解离槽内的其他位置而言，靠近电泳解离探针21附近的离子浓度就较高一些，但因为电泳解离槽内的空间原本就较小，而电解质浓度一定，也可以说是在电泳解离槽内发生反应)，形成破坏所述泪蛋白分子结构的离子，所述泪蛋白被所述离子电解解离。
58.在一个实施例中，优选采用0.9％浓度的nacl溶液作为清洗硬性角膜接触镜的电解质溶液。含nacl的溶液在电流的作用下被电解，溶液中的钠离子和氢离子向负极探针移动，氯离子向正极探针移动。电解过程中nacl溶液中的氢离子在所述负极探针得到电子发生还原反应形成氢气，氯离子在正极探针失去电子被还原为氯气，一定浓度的nacl溶液，产生的氯气一部分通过由气泡排出，一部分溶于水并发生如下化学反应：cl2 h2o＝hcl hclo
59.该反应生成的次氯酸hclo具有降解蛋白质的作用。次氯酸可将角膜接触镜上沉积性蛋白分解为小分子蛋白和氨基酸，小分子蛋白相比沉积性蛋白更易于吸附，从而更利于角膜接触镜上泪蛋白的移除。这个降解反应主要有两种形式：一种是直接降解蛋白质的骨架肽链，通过次氯酸与形成蛋白骨架的肽链反应，得到氯醛甲酰胺，以氯醛甲酰胺形成的肽链在溶液中水解，所述肽链中的肽键断裂，分解为小分子蛋白和氨基酸，蛋白降解；另一种则是通过次氯酸与形成蛋白骨架的肽链的侧链反应，所述侧链包括赖氨酸侧链，所述次氯酸与所述赖氨酸侧链发生反应，在蛋白的赖氨酸侧链以及蛋白的氨基上形成氯胺，所述氯胺分解形成羰基形式的有机分子片段【1,2】，所述赖氨酸侧链上的肽键断裂，分解为小分子蛋白和氨基酸，蛋白降解。
60.同时，次氯酸也有杀菌消毒的作用：次氯酸会慢慢发生自身氧化还原反应而分解，在分解时每个次氯酸分子会吸收电子(次氯酸作为强氧化剂其可以吸收微生物细胞壁的表面蛋白的电子，从而氧化微生物表面功能蛋白，微生物最终因无法摄取营养、不能正常代谢、并停止分裂而失活，最终达到杀菌消毒的效果)，达到杀菌目的，并解离出氢离子，氯离子与氧气，化学式为：
61.2hclo
→
2h

2cl
‑
o2↑
。
62.次氯酸在杀菌、杀病毒过程中,不仅可作用于细胞壁、病毒外壳，而且因次氯酸分子小、不带电荷，还可渗透入菌(病毒)体内，与菌(病毒)体蛋白、核酸、和酶等有机高分子发生氧化反应，从而杀死病原微生物。
63.同时，所述电解质溶液中带正电荷的氢离子向负极探针移动，并在所述负极探针附近发生还原反应生成氢气，所述电解质溶液中的钠离子与氢氧根离子生成氢氧化钠，硬性角膜接触镜表面的油脂与所述氢氧化钠发生皂化反应，硬性角膜接触镜表面的油脂被清除。本技术硬性角膜接触镜清洗装置在除蛋白灭菌作用时也促进了溶液酸碱度的变化，当
硬性角膜接触镜上附着有脂质时，电泳解离会促进皂化反应的进行，因此，当硬性角膜接触镜有脂质时，申请硬性角膜接触镜清洗装置也可以顺带去脂质，可谓一举多得，清洗高效，可速效还原。
64.以上理论证明了本技术在实现电泳解离除蛋白灭菌时使用的电解质溶液可以是任何不含重金属的含氯离子的溶液，甚至于生理盐水、普通护理液(基本上市面流通的护理液均含有氯离子)都可以作为本技术所述的电解质溶液，比较常规的比如nacl溶液、kcl溶液、mgcl2溶液，以及含cl
‑
的眼镜护理液，或者这些溶液中多种的组合(前提是不会发生反应从而破坏电解使得在镜片清洗槽内不能产生次氯酸)，或者整体来说，即含有氯酸盐的且可用作镜片护理液的离子溶液均可作为本技术所述的电解质溶液。因此，在本技术中使用的任何可用的含氯离子的溶液均可以起到除蛋白和灭菌的双重效果。
65.本实施例的电泳解离除蛋白灭菌方法，相比现有技术中配合护理液搓洗、浸泡镜片的方法，延长了硬性角膜接触镜的使用寿命，不仅能有效去蛋白还能杀菌消毒，这种具有双重保护的高清洁度的清洗方法可以减小人眼遭受细菌感染的风险。
66.对于新的或者使用周期较短的硬性角膜接触镜来说，其上附着的泪蛋白较少或几乎没有，因此，本技术的硬性角膜接触镜清洗装置可以用来给新角膜接触镜杀菌消毒；对于使用时间较长的角膜接触镜，其上必然沉积有较多的泪蛋白(因为人眼本身就是一个较复杂的环境，角膜接触镜使用时间长了就必然会吸附有较多的泪蛋白)，本技术的角膜接触镜清洗装置针对这种角膜接触镜进行清洗时就是有着除蛋白和灭菌的双重效果。
67.验证例1：
68.验证本技术的硬性角膜接触镜清洗装置对蛋白质的清除效果：
69.使用本技术的硬性角膜接触镜清洗装置的电泳解离除蛋白功能对溶菌酶进行清除实验(以下实验内容和数据均由经过苏州生物纳米园百拓生物医药公共服务平台测试并提供)：
70.配制一定浓度的蛋白溶液，将0.9％nacl溶液加入本技术硬性角膜接触镜清洗装置的电泳解离仓2中进行电泳实验，过程中会产生次氯酸，其可以对蛋白进行降解。
71.主要设备：
72.1、硬性角膜接触镜清洗装置；
73.2、微量紫外分光光度计：nanodrop one/onec。
74.主要试剂溶液：
75.1、蛋白：溶菌酶，索莱宝(货号：l8120)，分子量为14kda；
76.2、0.9％nacl配制，测试浓度，取2毫升电泳30分钟，检测电泳后浓度。
77.电泳中产生的次氯酸根会影响a280的紫外吸收，加10％的亚硫酸钠能完全消除影响。为了使检测的蛋白在同一个背景下，在电泳蛋白时，设置一个不加蛋白的0.9％nacl溶液最为平行对照，也电泳30分钟，加10％的亚硫酸钠，用此溶液进行背景扣除。
78.实验结果：蛋白浓度均测试3次，进行平均后作为最终浓度。
79.电泳前3次分别为：657.4μg/ml；651.2μg/ml；649.8μg/ml；平均浓度为652.8μg/ml；30分钟电泳后，取1毫升溶液，加1毫升20％的亚硫酸钠，测得平均浓度为99.9μg/ml；96.1μg/ml；98.9μg/ml，平均为98.3μg/ml；因为此浓度为亚硫酸钠对倍稀释后的浓度，所以最终浓度要乘以2，为196.6μg/ml。
80.蛋白降解率：(原始浓度
‑
剩余浓度)/原浓度x100％＝(652.8μg/ml
‑
196.6μg/ml)/652.8μg/ml＝70％。
81.30分钟电泳解后取电泳解离仓2内15微升上样，蛋白上样量为9μg，通过sds
‑
page(生物电泳跑胶)未检测到溶菌酶，蛋白被完全分解，即电泳30分钟后蛋白清除率可达100％。
82.因此，结合上述实验数据可知，本技术的硬性角膜接触镜清洗装置对蛋白质进行全面清除，清除率可达到100％。
83.验证例2：
84.验证不同护理液对蛋白的降解效果：
85.1、3n护理液对蛋白的降解：
86.在生理盐水条件下，3n护理液在电泳条件下，可以产生次氯酸，对蛋白进行降解。为了使检测结果直观可见，把人工泪液中溶菌酶的理论浓度由1.9mg/ml提高到3mg/ml。
87.主要设备：硬性角膜接触镜清洗装置；
88.电泳设备：bio
‑
rad mini；
89.主要试剂：
90.⑴
、蛋白：溶菌酶，索莱宝(货号：l8120)，分子量为14kda；0.9％nacl配制，3mg/ml；取3微升上样，蛋白上样量为9μg；
91.⑵
、百拓配置的生理盐水；溶菌酶配制为0.6mg/ml，加2毫升电泳30分钟后，取15微升上样；蛋白上样量为9μg；
92.⑶
、3n专用清洁液(0.9％nacl溶液)，溶菌酶配制为0.6mg/ml，加2毫升电泳30分钟后，取15微升上样。蛋白上样量为9μg；
93.⑷
、蛋白分子量标准：thermo fisher，货号：26619。
94.⑸
、sds
‑
page电泳缓冲液：上海生工，货号：c520001
‑
0500。
95.⑹
、sds
‑
page蛋白电泳上样缓冲液：上海生工：货号：c508320
‑
0001。
96.⑺
、sds
‑
page染色液：上海生工，货号：c900300
‑
0100。
97.⑻
、sds
‑
page脱色液：上海生工，货号：c900299
‑
0300。
98.⑼
、sds
‑
page凝胶：上海生工，货号：c661102
‑
0001。
99.①
溶菌酶：0.9％nacl配制，3mg/ml；取3微升上样，蛋白上样量为9μg；
100.②
溶菌酶：0.9％nacl配制，3mg/ml，生理盐水浸泡30分钟跑胶；蛋白上样量为9μg；
101.③
生理盐水配制0.6mg/ml溶菌酶，加2毫升电泳30分钟后，取15微升上样；蛋白上样量为9μg；
102.④
3n专用清洁液(0.9％nacl溶液)配制溶菌酶为0.6mg/ml，加2毫升电泳30分钟后，取15微升上样。蛋白上样量为9μg；
103.⑤
蛋白分子量标准。
104.实验结果：如图8所示，为12％sds
‑
page检测3n护理液对溶菌酶的降解情况得到的电镜图，从图中可以发现0.9％nacl配制的溶菌酶和3n专用清洁液(0.9％nacl溶液)均降解了蛋白，未见蛋白条带。
105.2、市售其它护理液对蛋白的降解：
106.主要试剂：a护理液：某品牌30分钟除蛋白组合液；
107.b护理液：某2小时除蛋白双氧水。
108.⑴
、蛋白：溶菌酶，索莱宝(货号：l8120)，分子量为14kda；
109.⑵
、a护理液的样品处理：溶菌酶配制为0.6mg/ml，加2毫升浸泡30分钟后，取15微升上样；蛋白上样量为9μg；
110.b护理液的样品处理：溶菌酶配制为0.6mg/ml，加2毫升浸泡2小时后，取15微升上样；蛋白上样量为9μg；
111.⑶
、蛋白分子量标准：thermo fisher，货号：26619。
112.⑷
、sds
‑
page电泳缓冲液：上海生工，货号：c520001
‑
0500。
113.⑸
、sds
‑
page蛋白电泳上样缓冲液：上海生工：货号：c508320
‑
0001。
114.⑹
、sds
‑
page染色液：上海生工，货号：c900300
‑
0100。
115.⑺
、sds
‑
page脱色液：上海生工，货号：c900299
‑
0300。
116.⑻
、sds
‑
page凝胶：上海生工，货号：c661103
‑
0001。
117.①
a护理液：溶菌酶配制为0.6mg/ml，加2毫升浸泡30分钟后，取15微升上样；蛋白上样量为9μg；
118.②
b护理液：溶菌酶配制为0.6mg/ml，加2毫升浸泡2小时后，取15微升上样；蛋白上样量为9μg；
119.③
b护理液配制0.6mg/ml溶菌酶，取15微升立即上样；蛋白上样量为9μg；
120.④
蛋白分子量标准。
121.实验结果：如图9所示，为15％sds
‑
page检测市场商用硬性角膜接触镜除蛋白液对溶菌酶的降解情况得到的电镜图，可见，a护理液溶菌酶配制为0.6mg/ml，浸泡处理30分钟后，蛋白大多被降解，仅剩微弱的条带；b护理液浸泡处理2小时后，蛋白条带和对照相比，几乎未见降解。
122.综上，对比3n护理液和其他商用硬性角膜接触镜除蛋白液对溶菌酶的降解情况，可以发现护理液或者说是用于除蛋白的电解质溶液对最终蛋白的降解情况是至关重要的，且利用3n护理液除蛋白的效果相较于其他护理液的效果确实更好。
123.验证例3：
124.验证本技术硬性角膜接触镜清洗装置对角膜接触镜上的蛋白清除情况：本验证例采用蛋白提取液对角膜接触镜上的蛋白进行提取，所述蛋白提取液由50份乙腈、50份去离子水和0.2份100％的三氟乙酸混合组成。
125.首先，需要说明的是，现阶段公知的可以提取蛋白质的物质是pbs溶液(磷酸盐缓冲溶液，一种标准盐溶液)，但是其也存在缺陷，即其不能充分提取角膜接触镜上的蛋白。因而，暂时还没有一种公认的方法可以检验人眼佩戴的角膜接触镜上实际吸附的蛋白含量，但为了证明本技术硬性角膜接触镜清洗装置的有效性，本验证例通过人工泪液培养的角膜接触镜进行实验，且在没有方法可以具体量测角膜接触镜上实际吸附的蛋白含量的前提下，本实验默认自人工泪液中培养出来的角膜接触镜上吸附的实际蛋白含量即为通过计算得到的镜片吸附蛋白理论含量。
126.对于上述论述的验证实验步骤如下：
127.1、由50份乙腈、50份去离子水和0.2份100％的三氟乙酸混合得到蛋白提取液；
128.2、取fda归类的iv类软性亲水性接触镜，在含人工泪液(2.2mg/ml)1ml的离心管中
恒温37℃培养1天，取出镜片后实测离心管中蛋白浓度为1.328mg/ml，镜片吸附的蛋白含量理论值为2.2
‑
1.328＝0.872mg，
129.3、取1ml或4ml所述蛋白提取液充分溶解步骤2中被人工泪液培养的镜片，并在常温下振动24小时，振动提取后实测蛋白浓度为0.805mg/ml，因此，计算得到利用所述蛋白提取液进行提取蛋白的蛋白提取率为0.805/0.872*100％＝92.3％。
130.通过上述实验验证得到了本验证例中所采用的蛋白提取液的蛋白提取能力，因此，可以使用该蛋白提取液来进行蛋白浓度提取检测的实验。
131.本验证例中的检测方法依附的主要原理是角膜接触镜表面及内部透氧孔中所吸附的泪蛋白，可以根据乙腈
‑
三氟乙酸
‑
水的混合溶液进行100％提取，所述蛋白提取溶液与角膜接触镜材料不发生反应，也不影响蛋白质的测量值，因而，可以将作为检测样本的角膜接触镜放置在所述蛋白提取溶液中进行振动提取分离蛋白，再通过微量紫外分光光度计检测蛋白提取溶液中的蛋白浓度，通过对该蛋白浓度进行简单计算就可以得到镜片吸附蛋白含量值。
132.基于上述检测方法进行实验，接下来验证本技术硬性角膜接触镜清洗装置分别对ok镜和rgp两种硬镜上蛋白清除情况：
133.1、验证本技术硬性角膜接触镜清洗装置对ok镜上蛋白清除情况：
134.本验证例选用的ok镜为euclid systems corporation欧几里德硬性角膜塑形镜，国械注进20163220204，lot no.:16309ptc004，材质为氟化硅氧烷聚合物；选用的电解质液为生理盐水，即为0.9％的nacl溶液，具体方法如下：
135.(1)人眼佩戴ok镜满8小时后，取下左、右眼镜片分别放入1.5ml的离心管中，并向离心管中加入1ml的乙腈
‑
三氟乙酸溶液，振动30分钟后测试离心管中的溶菌酶量，分别为0.120mg，0.116mg，测得镜片配戴1天(8h)平均吸附蛋白量为0.118mg，即认为镜片原始蛋白量为0.118mg；
136.(2)同一人继续佩戴同一型号的ok镜，获得两片表面带有蛋白的ok镜；
137.(3)将步骤(2)中的一片ok镜置于1ml 0.9％生理盐水中浸泡3分钟，再将其放入1.5ml的离心管中，并向离心管中加入1ml的乙腈
‑
三氟乙酸溶液，振动30分钟后测试离心管中的溶菌酶量为0.111mg；
138.(4)将步骤(2)中的另一片ok镜置于本技术硬性角膜接触镜清洗装置的电泳解离仓内，加入1ml 0.9％生理盐水，启动硬性角膜接触镜清洗装置清洗3分钟，清洗中电泳解离探针两端电压为4v，电流大小为1ma(清洗中电泳解离探针两端电压大小可为4v
‑
5v，电流大小为1
‑
4ma)，清洗完成后将ok镜放入1.5ml的离心管中，并向离心管中加入1ml的乙腈
‑
三氟乙酸溶液，振动30分钟后测试离心管中的溶菌酶量为0.008mg；
139.(5)计算硬性角膜接触镜清洗装置配合生理盐水对ok镜表面蛋白的洗脱率：
[0140][0141]
同理，计算用生理盐水浸泡ok镜表面蛋白的洗脱率等于(1
‑
0.111mg/0.118mg)*100％＝5.9％。
[0142]
根据上述实验结果可以发现，本技术硬性角膜接触镜清洗装置配合生理盐水对欧几里德硬性角膜塑形镜的表面蛋白洗脱率可达94.6％，而通过生理盐水浸泡欧几里德硬性角膜塑形镜可以达到的蛋白洗脱率仅有4.1％，因此，本技术硬性角膜接触镜清洗装置配合生理盐水对欧几里德硬性角膜塑形镜可达到高效清洁还原的效果，即可验证本技术硬性角膜接触镜清洗装置配合生理盐水对ok镜可达到高效清洁还原的效果。
[0143]
2、验证本技术硬性角膜接触镜清洗装置对rgp镜上蛋白清除情况：
[0144]
本验证例选用的rgp镜为爱博诺德普诺瞳硬性接触镜(日戴型rgp)(国械注准20193160515，sn：ds200114121/ds200114122)材质：甲基丙烯酸六氟异丙酯、甲基丙烯酰氧丙基三(三甲基硅氧烷基)硅烷、甲基丙烯酸、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸羟乙酯、交联剂、引发剂、紫外吸收剂及着色剂聚合而成；选用的电解质液为生理盐水，即为0.9％的nacl溶液，具体方法如下：
[0145]
(1)人眼佩戴镜rgp满8小时后，取下左、右眼镜片分别放入1.5ml的离心管中，并向离心管中加入1ml的乙腈
‑
三氟乙酸溶液，振动30分钟后测试离心管中的溶菌酶量，分别为0.215mg，0.210mg，测得镜片配戴1天(8h)平均吸附蛋白量为0.212mg，即认为镜片原始蛋白量为0.212mg；
[0146]
(2)同一人继续佩戴同一型号的rgp镜，获得两片表面带有蛋白的rgp镜；
[0147]
(3)将步骤(2)中的一片rgp镜置于1ml 0.9％生理盐水中浸泡3分钟，再将其放入1.5ml的离心管中，并向离心管中加入1ml的乙腈
‑
三氟乙酸溶液，振动30分钟后测试离心管中的溶菌酶量为0.201mg；
[0148]
(4)将步骤(2)中的另一片rgp镜置于本技术硬性角膜接触镜清洗装置的电泳解离仓内，加入1ml 0.9％生理盐水，启动硬性角膜接触镜清洗装置清洗3分钟，清洗中电泳解离探针两端电压为4v，电流大小为2ma(清洗中电泳解离探针两端电压大小可为4v
‑
5v，电流大小为1
‑
4ma)，清洗完成后将rgp镜放入1.5ml的离心管中，并向离心管中加入1ml的乙腈
‑
三氟乙酸溶液，振动30分钟后测试离心管中的溶菌酶量为0.008mg；
[0149]
(5)计算硬性角膜接触镜清洗装置配合生理盐水对rgp镜表面蛋白的洗脱率：
[0150][0151]
同理，计算用生理盐水浸泡rgp镜表面蛋白的洗脱率等于(1
‑
0.201mg/0.212mg)*100％＝5.2％。
[0152]
根据上述实验结果可以发现，本技术硬性角膜接触镜清洗装置配合生理盐水对爱博诺德普诺瞳硬性接触镜的表面蛋白洗脱率可达96.2％，而通过生理盐水浸泡爱博诺德普诺瞳硬性接触镜可以达到的蛋白洗脱率仅有5.2％，因此，本技术硬性角膜接触镜清洗装置配合生理盐水对爱博诺德普诺瞳硬性接触镜可达到高效清洁还原的效果，即可验证本技术硬性角膜接触镜清洗装置配合生理盐水对rgp镜可达到高效清洁还原的效果。
[0153]
需要说明的是，本验证例的实验过程中，利用乙腈
‑
三氟乙酸溶液进行振动提取蛋白，可将镜片上附着的蛋白自镜片上脱离，即蛋白溶于蛋白提取液中，再通过微量紫外分光光度计检测蛋白提取溶液的吸光值，再根据蛋白浓度检测标准曲线计算得到蛋白含量。
[0154]
所述蛋白浓度检测标准曲线需人为建立，建立所述蛋白浓度检测标准曲线具体包括：
[0155]
配置4mg/ml的蛋白溶液，对所述蛋白溶液进行倍比稀释，多次测试蛋白溶液的吸光值及蛋白浓度，记录测试得到的吸光值的平均值，记录测试得到的蛋白浓度的平均值，见下表3
‑
1，根据所述吸光值的平均值和蛋白浓度的平均值制作标准曲线，若线性偏离度超出
±
10％范围，认为建标数据无效，需重做；
[0156]
所述蛋白浓度检测标准曲线的函数表达式为：
[0157]
y＝2.64033436x
‑
0.001002579，
[0158]
其中，y表示测得的蛋白浓度值，x表示蛋白在280nm处的吸光值；根据实际试验数据进行曲线拟合，试验数据与拟合函数之间的吻合程度，用一个与相关系数有关的一个量r2来评价，r2值越接近1，吻合程度越高，越接近0，则吻合程度越低，在一种情况下计算得到r2＝0.999999835。
[0159]
表3
‑
1蛋白溶液倍比稀释表
[0160]
稀释倍数实测浓度(mg/ml)rsda28013.4851％9.2021.7020％4.4940.8570％2.2680.4350％1.15160.2201％0.58320.1183％0.31640.0562％0.15
[0161]
验证例4：
[0162]
验证本技术硬性角膜接触镜清洗装置对细菌的灭杀效果：
[0163]
使用本技术硬性角膜接触镜清洗装置的电泳解离除蛋白功能配合0.9％nacl溶液，电泳解离3分钟后的液体进行杀菌检测，其中对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌，以及铜绿假单胞菌的杀菌率达到99.999％，对白色念珠菌的杀菌率达到99.99％。
[0164]
说明本本技术硬性角膜接触镜清洗装置的电泳解离技术配合电解质溶液可以起到杀菌消毒作用，进一步避免人眼遭受细菌感染的风险。
[0165]
验证例5：
[0166]
验证本技术硬性角膜接触镜清洗装置对细菌的灭杀效果：
[0167]
将含卡氏棘阿米巴(atcc 30868 acanthamoeba castellanii)包囊和滋养体pbs分别用硬性角膜接触镜清洗装置、标准工作浓度消毒液，以及普通生理盐水处理，收集混合液，将收集的混合液通过碘液染色法、铁苏木素染色法等形态学观察判断虫体存活率并应用atcc medium 712培养基进行培养腹腔接种小鼠，分别计算棘阿米巴滋养体和包囊在硬性角膜接触镜清洗装置、标准工作浓度消毒液，以及普通生理盐水等处理后的存活率，与形态学观察结果比较验证；最后试验重复3次，评价硬性角膜接触镜清洗装置与标准消毒剂(具腐蚀性，不能应用常规接触角膜用具消毒)、生理盐水(作为阴性对照)对棘阿米巴的杀灭作用。
[0168]
首选，对atcc标准株卡氏棘阿米巴进行分子生物学鉴定，验证本株阿米巴原虫的
品系。
[0169]
实验步骤：
[0170]
准备物品：5ml一次性空针，无菌细菌培养瓶，15ml离心管，atcc培养基712，铁苏木素相关染色液，玻片。
[0171]
复苏：
[0172]
(1)无菌操作台紫外线消毒20min，水浴箱温度调至28℃；
[0173]
(2)取出棘阿米巴冻存管，在水浴箱中迅速融化；
[0174]
(3)用空针吸取融化的阿米巴混悬液，加入离心管中，另取一空针吸取2mlatcc培养基712加入冻存管中，吹打洗净残留的阿米巴，移入离心管；
[0175]
(4)500rpm离心7分钟；
[0176]
(5)离心管中加入4ml培养基，吹打细胞成混悬液，均分两培养瓶中，每瓶培养基加至5ml，旋紧瓶盖；
[0177]
(6)两培养瓶在28℃平缓摇动5min，使聚集的包囊均匀散开；
[0178]
(7)28℃水平孵育培养(可用无菌手套包裹培养瓶，胶布封口，防止污染)；
[0179]
(8)3
‑
5天换液，滋养体长满后传代。
[0180]
换液或者传代：
[0181]
(1)吸管或者空针轻轻吹打，是铁逼的少量滋养体悬浮(若仅换液，可省略此步骤)；
[0182]
(2)混悬液移入离心管中，500rpm离心7分钟；
[0183]
(3)加入新的培养基吹打成混悬液，移入培养瓶中。
[0184]
体外观察不同处理对卡式棘阿米巴的影响：
[0185]
(1)对棘阿米巴进行三种不同处理，并进行铁苏木素染色：
[0186]
将培养瓶中的棘阿米巴分别进行硬性角膜接触镜清洗装置(实验组)、标准工作浓度消毒液(对照组)、普通生理盐水(阴性对照)处理，观察棘阿米巴存活率。将处理后的棘阿米巴用生理盐水涂片法进行铁苏木素染色，观察视野下棘阿米巴滋养体的活动性变化。
[0187]
(2)铁苏木素染色法
[0188]
①
0.5％苏林素液、4％及2％铁明矾液和肖氏固定液，均按常规配制。
[0189]
②
固定将包囊加入肖氏固定液水浴40℃固定5分钟或室温20～30分，离心(1500rpm)5分钟后，去上清液。
[0190]
③
加入2％碘酒作用30分钟，以除去汞，离心去上清液。
[0191]
④
加入70％酒精静置1小时或过夜，除去碘化汞，离心去上清液，加水静置10分，再离心去上清液。
[0192]
⑤
媒染加入4％铁明矾液，水浴40℃媒染5分或室温30分，离心去上清液，加水洗3次。
[0193]
⑥
染色离心去上清液后，加入0.5％苏木素染液水浴40℃染色，染色时间5～15分钟，离心去上清液，加水洗3次。
[0194]
⑦
分色离心去上清后，加入2％铁明矾液进行分色，边分色边在显微镜下观察包囊退色情况，直至包囊内部结构清晰为止，一般需要3～5分钟，加水洗3次。
[0195]
⑧
离心去上清液后,加水浸泡1小时(最好过夜)，以去掉分色剂，离心上清液。
[0196]
⑨
脱水逐步加入50～95％的酒精和纯酒精，进行脱水，每级脱水10分钟，离心去上清液。
[0197]
⑩
透明加入纯酒精和冬青油(或二甲苯)各半的混合液10份，离心去上清液，加入纯冬青油或二甲苯液5份，离心去上清液。
[0198]
封片加入几滴冬青油或二甲苯液(视沉淀物多少而定)拌匀，用小吸管吸1/2滴包囊悬液滴在载玻片上与1滴中性树胶拌匀加盖玻片，自然晾干即可。
[0199]
体内观察不同处理对卡式棘阿米巴的影响：
[0200]
将不同处理下的棘阿米巴培养液50ml，以pbs洗涤3次，用pbs调节悬浮液至5ul pbs内含1
×
105个棘阿米巴滋养体。选取spf级6周龄雌性balb/c小鼠，腹腔注射小鼠后，分别计算不同处理组下棘阿米巴滋养体和包囊的存活率。若实验结果证实硬性角膜接触镜清洗装置对棘阿米巴具有杀灭和抑制作用，该实验拟推广到动物模型兔，在兔角膜进一步开展相关实验。
[0201]
验证例6：
[0202]
验证本技术硬性角膜接触镜清洗装置对角膜接触镜的去脂质效果，本验证例以rgp镜片为例，该镜片选用爱博诺德普诺瞳硬性接触镜(日戴型rgp)，国械注准20193160515，sn：ds200355733/ds200355734，材质：甲基丙烯酸六氟异丙酯、甲基丙烯酰氧丙基三(三甲基硅氧烷基)硅烷、甲基丙烯酸、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸羟乙酯、交联剂、引发剂、紫外吸收剂及着色剂聚合而成，具体方法如下；
[0203]
(1)配置人工泪液：磷脂酰胆碱
‑
0.0005mg/ml、胆固醇
‑
0.0018mg/ml、溶菌酶
‑
1.9mg/ml、bsa
‑
0.2mg/ml、g
‑
球蛋白
‑
0.1mg/ml、nacl
‑
9mg/ml、gacl2
·
2h2o
‑
0.25mg/ml、na2hpo4
·
7h2o
‑
0.28mg/ml,ph使用naoh或hcl调至7.8；
[0204]
(2)在rgp镜外人工吸附沉淀物：在无菌环境中，取爱博诺德普诺瞳硬性接触镜2片，置于步骤(1)配制的人工泪液中，人工泪液须浸没接触镜，然后置于37℃培养箱中，每隔24小时更换一次人工泪液。经过3天的沉淀物吸附后，从溶液中取出镜片，用生理盐水冲洗后进行测试。
[0205]
(3)荧光分光光度计试验：激发波长360nm，发射波长360nm，将经过沉淀物吸附后的rgp镜置于荧光分光光度计中，使镜片中心面向光束，记录发射光谱的荧光强度值。
[0206]
(4)将步骤(2)中培养的两片镜片使用生理盐水冲洗后，置于荧光分光光度计中进行测试，记录发射光谱的荧光强度值，得出清洗前的荧光强度为29.6、28.9；
[0207]
(5)将步骤(4)中测得荧光强度为29.6的镜片放入本技术硬性角膜接触镜清洗装置的电泳解离仓内，电泳解离仓内探针两端电压为4
‑
5v，并加入1ml0.9％生理盐水，启动装置清洗30分钟后，取出再置于荧光分光光度计中进行测试，记录发射光谱的荧光强度值，得出清洗后的荧光强度3.7；
[0208]
(6)将步骤(4)中测得荧光强度为28.9的镜片放入本技术硬性角膜接触镜清洗装置的电泳解离仓内，并加入1ml0.9％生理盐水，仅静置浸泡30分钟后，取出再置于荧光分光光度计中进行测试，记录发射光谱的荧光强度值，得出清洗后的荧光强度27.3；
[0209]
(7)计算步骤(5)中本技术硬性角膜接触镜清洗装置对该rgp镜片的除脂率为：(29.6
‑
3.7)/29.6＝87.5％；
[0210]
计算步骤(6)中于还原仪中配合护理液浸泡镜片的除脂率为：
[0211]
(28.9
‑
27.3)/28.9＝5.5％。
[0212]
根据上述实验结果可以发现，本技术硬性角膜接触镜清洗装置对爱博诺德普诺瞳硬性接触镜表面油脂的去除率可达87.5％，而同样的镜片在爱博诺德普诺瞳硬性接触镜内配合生理盐水进行浸泡去除镜片表面油脂的清除率仅有18.8％，因而，本技术硬性角膜接触镜清洗装置配合电解质液在启动清洗的情况下还兼具有去脂质的功效。
[0213]
综上可知，本技术的硬性角膜接触镜清洗装置通过使用nacl等含氯离子的电解质溶液，可对硬性角膜接触镜的表面蛋白和细菌以及脂质进行清除，实现对硬性角膜接触镜的还原，保障镜片入眼安全。同时，本技术的硬性角膜接触镜清洗装置，其设置有储电装置，便于携带，能够在路上等缺乏电源的环境内正常使用；其设置有储纳槽，可用于储放清洗完成的角膜接触镜；其设置有卡拆卸的储纳仓，可以用于储放角膜接触镜，且便于携带。
[0214]
在本文中，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，除了包含所列的那些要素，而且还可包含没有明确列出的其他要素。
[0215]
在本文中，所涉及的前、后、上、下等方位词是以附图中零部件位于图中以及零部件相互之间的位置来定义的，只是为了表达技术方案的清楚及方便。应当理解，所述方位词的使用不应限制本技术请求保护的范围。
[0216]
在不冲突的情况下，本文中上述实施例及实施例中的特征可以相互结合。
[0217]
以上所述仅为本实用新型的较佳实施例，并不用以限制本实用新型，凡在本实用新型的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。