一种新型冠状病毒抗原、抗体联合智能化检测装置的制作方法

1.本实用新型涉及免疫诊断技术领域，尤其是涉及一种新型冠状病毒抗原、抗体联合智能化检测装置。


背景技术：

2.新型冠状病毒肺炎（简称新冠肺炎，英文简称covid
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19）是新型冠状病毒（简称新冠病毒，英文简称sars
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cov
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2）感染导致的急性呼吸道传染病。新型冠状病毒是以前从未在人体中发现的冠状病毒新毒株。患者初始症状多为发热、乏力和干咳，少数患者伴有鼻塞、流涕、腹泻等上呼吸道和消化道症状。重症病例多在1周后出现呼吸困难，严重者快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍及多器官功能衰竭等。目前，尚缺少针对该病原体的有效抗病毒药物，主要以隔离治疗，对症支持治疗为主。
3.当前对sars
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cov
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2诊断方法主要有核酸检测、抗体检测和抗原检测。其中核酸检测目前是作为新冠病毒(sars
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cov
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2)检测的“金标准”，通过荧光
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pcr，在新型冠状病毒orf1ab/n基因序列的高度保守区域设计引物及荧光探针，通过全自动荧光pcr仪对疑似新型冠状病毒（sars
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cov
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2）感染患者标本中的病毒rna进行扩增检测，从而实现对新型冠状病毒（sars
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cov
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2）rna的定性检测，但是其操作复杂，需要特定的实验室和专业的培训人员，测定周期较长，劳力成本高。而新冠抗原、抗体检测试剂，操作简单，无需特殊仪器和设备，可短时间完成诊断。且联合诊断可作为感染周期的鉴别诊断，感染早期，患者未出现免疫应答，体内无法检测出抗体或抗体检出率低，但此时抗原浓度较高；而感染后中后期，病毒可能被抑制出现浓度降低，而体内抗体（主要是igg）却维持在一定滴度能被检出，大大提高了新冠肺炎的检出率。
4.目前新冠抗体检测常用的方法有酶联免疫吸附实验法（elisa）、化学发光免疫分析法和胶体金免疫层析法；而新冠抗原检测主要还是集中在免疫层析法。elisa是一种结合抗原、抗体特异性反应和酶对底物高效催化作用的高敏感性免疫学实验技术。该检测方法灵敏度较高，载体标准化难度较低，但检测速度慢、易污染、步骤较为繁琐。化学发光免疫分析法是将高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，用于各种抗原、抗体、激素等检测。该法灵敏度高于elisa，具有特异性强、线性范围宽、结果稳定、操作简化等特点，广泛应用于临床标本的检测。但是该方法对设备、操作、使用环境的要求比较高，使用时需要配套的化学发光仪器。免疫层析法是以胶体金颗粒为示踪标志物，应用于抗原抗体检测的一种新型免疫标记技术，该方法可仅在15min内通过肉眼观察获取检测结果，突破了现有检测技术对人员、场所的限制，缩短检测时间，操作方便快速，在基层医疗单位及现场检测中广泛使用。
5.目前新冠病毒检测各有侧重，不能相互替代，因此开发一种能同时检测抗原抗体的鉴别诊断至关重要，抗原抗体联合检测可有效缩短检测窗口期，提高阳性检出率，为各种可能的风险人群提供双重保障。
6.专利号cn202010196320.4，公开的“联合诊断covid
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19和肺炎支原体的胶体金免疫层析检测试纸及其制备方法”，本实用新型涉及免疫诊断技术领域，针对现有技术的covid
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19和肺炎支原体抗体检测空白的问题，公开了提供联合诊断covid
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19和肺炎支原体的胶体金免疫层析检测试纸，具体包括以下制备步骤：1）制备检测线t和质控线c；2）胶体金偶联物处理垫的制备；3）制备检测试纸：将吸水垫、样品垫、胶体金偶联物处理垫的制备、包被好抗体的改性硝酸纤维素膜及pvc底板按顺序进行连接组装，即得成品。制备得到能准确检测出是否患有2019
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ncov和支原体肺炎，检测周期短，检测工序简单，设备便携，采用抗体检测抗原的方式，抗原没有潜伏期，结果显示直观、准确，特异性强，对于新冠和肺支不同时间的感染都能诊断，检测效率高。
7.其不足之处在于，仅采用抗体检测，其检测方式单一，容易出现漏检的情况。


技术实现要素：

8.本实用新型是为了克服现有新冠检测装置检测形式单一及灵敏度低的问题，提供一种新型冠状病毒抗原、抗体联合智能化检测装置，该联合诊断试剂检测周期短，检测工序简单，且本产品是采用抗原抗体联合检测的方式，抗原产品可直接缩短检测窗口期，结果显示直观、准确，特异性强， 而抗体产品将有助于鉴别近期和既往感染，有助于疑似患者的诊断，现场app扫码信息，可以及时反馈病人的信息到相关疾控大数据平台，做到早发现，早控制。
9.为了实现上述目的，本实用新型采用以下技术方案：
10.一种新型冠状病毒抗原、抗体联合智能化检测装置，所述检测装置包括上塑料壳、下塑料壳，所述上塑料壳分别设有抗体检测组和抗原检测组，抗体检测组包括抗体检测观察窗口及抗体检测加样孔，抗原检测组包括抗原检测观察窗口和抗原检测加样孔。
11.作为优选，所述下塑料壳内侧设有的抗体检测试剂条卡槽和抗原检测试剂条卡槽，所述抗体检测试剂条卡槽与所述抗体检测组相对应，所述抗原检测试剂条卡槽与所述抗原检测组相对应。
12.上下塑料壳通过固定凸起和固定凸台槽结合起来对整个检测装置加以固定，试剂条卡槽用于放置试剂条，试剂从加样孔加入试剂条上，并通过观察窗口观察测试结果，该检测装置能够准确检测出所加试剂的结果，该检测装置体积小巧，滴加简便，有效期长，检测结果准确度高。检测新型冠状病毒抗体的窗口位于测试板的左侧，将样本窗口和缓冲液窗口分开，与右侧检测抗原的单窗口易于区分，不容易造成实验的错误加样；加样孔位于缓冲液窗口上方，加样后，样本与标记垫先行结合，再由缓冲液将结合复合物迁移至硝酸纤维素膜上进行层析作用，两窗口加样模式可使样本与标记垫上的原料结合更充分，从而提高临床检出率。并且在该模板加样后，已加样本不会受到缓冲液的冲击力作用，使样本被冲击至模板边缘，导致漏检状况出现。
13.作为优选，上塑料壳内侧设有固定凸起，所述固定凸起围绕在上塑料壳内侧边缘；下塑料壳内侧设有固定凸台槽，所述固定凸台槽围绕在下塑料壳内侧边缘，所述固定凸起位于所述固定凸台槽内。
14.固定凸起和固定凸台槽都沿周向分布连接，使得下塑料壳之间的连接力周向分布均匀，保证连接效果。
15.作为优选，抗体检测试剂条卡槽和抗原检测试剂条卡槽构造一致。
16.作为优选，所述抗体检测试剂条卡槽包括端部挡边、侧挡边及位于端部挡边和侧挡边之间的底托。
17.作为优选，所述端部挡边呈u型，侧挡边之间设有连接条。
18.端部u型挡边能够将试纸固定在能与样品垫接触的位置，同时与侧挡边共同作用将试剂条固定在试剂条卡槽范围内，防止试剂条周向移动，影响使用效果。
19.作为优选，所述上塑料壳内侧设有试纸压紧柱和试纸压紧块，所述试纸压紧柱位于所述抗体检测观察窗口两端，所述试纸压紧块位于抗体检测加样孔和抗体检测观察窗口之间。
20.试纸压紧柱是为了用于压住试剂条的端部，防止试剂条翘曲；试纸压紧块是为了压紧试剂条的中间部位，防止试剂条中间段凸出翘起。
21.作为优选，抗体检测试剂条卡槽和抗原检测试剂条卡槽内分别设有抗体检测试剂条和抗原检测试剂条。
22.作为优选，抗体检测观察窗口、抗体检测加样孔、抗原检测观察窗口及抗原检测加样孔的边缘处均为倒喇叭口状，所述上塑料壳表面设有二维码扫描区域。
23.在滴加样品液及缓冲液的时候能够保证滴加的效果，使得飞溅到孔周围的滴加液能够顺着倒喇叭口边沿向下流动，顺利到达检测试纸条上进行相关的检测，现场可采用app扫描二维码扫描区域，可以及时反馈病人的信息到相关疾控大数据平台，做到早发现，早控制，运作效率高，提升了防控效率。
24.作为优选，所述抗体检测组还包括缓冲液窗口。
25.因此，本实用新型具有如下有益效果：
26.（1）提供联合诊断 covid
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19 抗原抗体的免疫层析检测试纸，制备出利用抗原和抗体检测试纸检测新冠病毒的产品，检测时间短，仅需15
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20min，能够满足现场检测的需要，抗原、抗体互相补充可减少临床漏检风险；
27.（2）直接检测抗原的准确性较检测抗体高，制备得到能准确检测出是否患有新冠病毒，抗原没有潜伏期，检测抗原能够更好的避免因窗口期抗体滴度低而出现的临床漏检情况。双重检测可以保证结果的有效性；
28.（3）操作简便，不需要借助其他设备仪器；检测结果显示直观，肉眼就可判断，适合个人使用；检测效率高，检测结果更直接；配合手机app扫码，可现场实时智能化反馈检测结果，为抗疫中心提供数据，缩短信息的传递时间。
附图说明
29.图1是本实用新型的上塑料壳外侧结构俯视示意图。
30.图2是本实用新型的上塑料壳内侧结构示意图。
31.图3是本实用新型的下塑料壳内侧视结构示意图。
32.图4是本实用新型不含缓冲液窗口的结构示意图。
33.图5是本实用新型的俯视图。
34.图6是本实用新型的检测过程图。
35.图中：1、上塑料壳；2、下塑料壳；3、抗体检测观察窗口；4、抗体检测加样孔；5、缓冲
液窗口；6、抗原检测观察窗口；7、抗原检测加样孔；8、抗体检测试剂条卡槽；8.1、端部挡边；8.2、侧挡边；8.21、连接条；8.3、底托；9、抗原检测试剂条卡槽；10、固定凸台槽；11、固定凸起；12、二维码扫描区域；13、试纸压紧柱；14、试纸压紧块。
具体实施方式
36.下面结合附图与具体实施方式对本实用新型做进一步的描述。
37.实施例1
38.如图1
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3所示的实施例中，一种新型冠状病毒抗原、抗体联合智能化检测装置，所述检测装置包括上塑料壳1、下塑料壳2，所述上塑料壳1分别设有抗体检测组和抗原检测组，抗体检测组包括抗体检测观察窗口3、抗体检测加样孔4及缓冲液窗口5，抗原检测组包括抗原检测观察窗口6和抗原检测加样孔7。
39.所述下塑料壳2内侧设有的抗体检测试剂条卡槽8和抗原检测试剂条卡槽9，所述抗体检测试剂条卡槽8与所述抗体检测组相对应，所述抗原检测试剂条卡槽9与所述抗原检测组相对应。
40.上塑料壳1内侧设有固定凸起11，所述固定凸起11围绕在上塑料壳1内侧边缘；下塑料壳2内侧设有固定凸台槽10，所述固定凸台槽10围绕在下塑料壳2内侧边缘，所述固定凸起11位于所述固定凸台槽10内。抗体检测试剂条卡槽8和抗原检测试剂条卡槽9构造一致。所述抗体检测试剂条卡槽8包括端部挡边8.1、侧挡边8.2及位于端部挡边8.1和侧挡边8.2之间的底托8.3。所述端部挡边8.1呈u型，侧挡边8.2之间设有连接条8.21。所述上塑料壳1内侧设有试纸压紧柱13和试纸压紧块14，所述试纸压紧柱13位于所述抗体检测观察窗口3两端，所述试纸压紧块14位于抗体检测加样孔4和抗体检测观察窗口3之间。抗体检测试剂条卡槽8和抗原检测试剂条卡槽9内分别设有抗体检测试剂条和抗原检测试剂条。抗体检测观察窗口3、抗体检测加样孔4、缓冲液窗口5、抗原检测观察窗口6及抗原检测加样孔7的边缘处均为倒喇叭口状。所述上塑料壳1表面设有二维码扫描区域12。抗体检测试剂条卡槽和抗原检测试剂条卡槽内分别设有抗体检测试剂条和抗原检测试剂条，抗体检测试剂条和抗原检测试剂条上设有银离子垫。
41.所述缓冲液窗口5旁设有“b”字样；抗体检测加样孔4和抗原检测加样孔7旁分别设有“s”字样；抗体检测观察窗口3从靠近抗体检测加样孔4一端开始依次设有“igm”、“igg”及“c”字样；抗原检测观察窗口6从靠近抗原检测加样孔7一端开始依次设有“ag”和“c”字样。观察窗口与二维码扫描区域12之间设有“covid
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19”字样。
42.所述抗体检测试剂条的制备步骤如下：
43.（1）样品垫制备：取4
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8 g/l tris、4
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7 g/l酪蛋白钠盐、6
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15 g/l聚乙烯吡咯烷酮、0.1
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10g/l tween 20 及0.1
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10g/l tetronic、0.05
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0.5 mg/ml阻断剂、1/50鼠抗rbc及0.02% proclin300混合溶于水中，调ph至7.5
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8.5，喷洒于玻璃纤维膜，烘干；
44.（2）胶体金偶联物处理垫制备：整个过程在94
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96℃恒温加热系统中进行，在氯金酸水溶液中加入柠檬酸三钠水溶液，获得胶体金，用k2co3溶液调节获得的胶体金ph至6
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10，依次加入将待标记新型冠状病毒抗原、bsa、peg20000，搅拌10
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20 min后，2
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8℃、9000
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14000rpm离心10
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20min，取沉淀物，稀释至一定浓度后喷点于聚酯膜，干燥20
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24h；
45.（3）银离子处理垫制备：硝酸银以0.1
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1.0 mg/ml溶于pbs，调ph至7
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8，喷点于玻璃
min后，观察实验结果。
63.结果判定：若在第三检测线处出现紫红色条带，为阳性；若无紫红色条带，则为阴性。无论是否检测到新型冠状病毒抗原，c处均为紫红色条带。
64.实施例2
65.如图4所示，与实施例1的区别在于，所述抗体检测组不包括缓冲液窗口；其中所述的上盖包括与下板连接处1、板面2，抗体检测观察窗口3、抗体加样孔4、抗原检测观察窗口6和抗原加样孔7；上盖与下板相互嵌合固定即为联合诊断新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂板；所述抗体检测观察窗口3和抗原检测观察窗口6平行排列，将不会影响结果判读以致结果误判；所述抗体加样孔4和抗原加样孔7平行排列可以避免样本加入时的交叉污染。
66.所述的抗体加样孔与之前不同之处在于加样孔和缓冲液孔为同一孔，因此抗体检测加样方式也可以预先将样本加入缓冲液加样孔4中，随后滴加缓冲液。