抗癌组合疗法的制作方法

is required for pancreatic carcinogenesis”.cancer res.2013；73(15):4909
‑
22)。特定言之，已公开的数据已显示在健康组织(例如乳房及肺上皮)中，β
‑
连环素仅位于浆膜。相反，大多数tnbc、nsclc及胰腺癌主要临床样本显示由于异常wnt信号传递，β
‑
连环素细胞内聚集(即，在细胞质/细胞核中；wnt信号传递活化的生物标志物)。
5.因为lrp5作为配体依赖性wnt信号传递活化的发挥守门者作用，所以可将其视为达成由所有19种wnt配体及10种卷曲受体介导的通路的完全阻断的靶点。
6.对直接靶向癌症/癌细胞的上文描述的方法的替代方法是癌症免疫疗法。癌症免疫疗法是肿瘤学的分支，其中免疫系统用于治疗癌症，其与其中直接切离或治疗肿瘤的现有常见治疗方法形成鲜明对比。此治疗概念基于在t细胞的表面上识别许多蛋白质，这些蛋白质发挥作用以抑制这些细胞的免疫功能。这些蛋白质中所列举者为pd
‑
1(程序性细胞死亡蛋白1)。
7.pd
‑
1是t细胞上表达的细胞表面受体蛋白。pd
‑
1具有两个配体，pd
‑
l1及pd
‑
l2，其与该细胞表面受体相互作用。在结合配体时，pd
‑
1诱导负调节t细胞反应的细胞内信号。因此，通常，该蛋白质作为“免疫检查点”抑制剂发挥作用，即其发挥作用以调节细胞在免疫系统中的活性，以便于调节及限制自体免疫疾病。近期已了解许多癌症可通过修饰“免疫检查点”抑制剂使其远离免疫系统且因此避免检测。
8.因此，也已显示在一定范围的不同癌症情况中，拮抗性pd
‑
1抗体分子例如例如尼武单抗(nivolumab)及派姆单抗(pembrolizumab)可用于刺激免疫系统及由此治疗癌症。
9.尽管上文描述癌症治疗中的进展，但仍需针对癌症治疗的新颖治疗概念，这些概念显示优于标准疗法的优点。这些优点可包括活体内效用(例如经改善的临床反应、反应的延长、反应速率的增加、反应的持续时间、疾病稳定率、稳定的持续时间、疾病进展时间、无进展生存期(pfs)及/或总体生存期(os)、后续出现抗性及类似情况)、安全及良好耐受的投与及降低的频率及不良事件的严重程度。具体言之，需用于患有癌症(例如例如，肺癌(例如nsclc)、黑色素瘤、膀胱癌及胃肠道癌)的病患的额外治疗选择。
10.因此本发明的目标是为癌症提供新颖治疗，其优于当前使用及/或现有技术中已知的治疗/方法。


技术实现要素：

11.本发明提供以lrp5拮抗剂(此术语在本技术中可与术语“特异性结合至lrp5的多肽”或“可特异性结合至lrp5的多肽”互换使用)，连同对程序性细胞死亡蛋白1(pd
‑
1)具特异性的抗体(此术语在本技术中可与术语“抗pd
‑
1抗体”、“pd
‑
1抗体”或“pd
‑
1拮抗剂”互换使用)一起，从而拮抗pd
‑
1信号通路，治疗患患有过度增生性疾病的病患的方法。因此，本发明提供包含lrp5拮抗剂及抗pd
‑
1抗体的组合疗法。
12.在一个方面中，本发明提供用于治疗及/或预防过度增生性疾病，优选为癌症的方法中的lrp5拮抗剂，该方法包括将向有此需要的病患投与该lrp5拮抗剂与pd
‑
1抗体的组合，该lrp5拮抗剂选自由以下组成的组：(i)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一免疫球蛋白单一可变域(isvd)：cdr1:tyvmg(seq id no:40)
cdr2:aiswsggstyyadsvkg(seq id no:41)cdr3:srgtstpsrasgvsrydy(seq id no:42)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:igamg(seq id no:46)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；(ii)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:tyvmg(seq id no:40)cdr2:aiswsggstyyadsvkg(seq id no:41)cdr3:srgtstpsrasgvsrydy(seq id no:42)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:inamg(seq id no:49)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；(iii)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:ryava(seq id no:43)cdr2:aitwssgridyadsvkg(seq id no:44)cdr3:drrprstgrsgtgspstydy(seq id no:45)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:igamg(seq id no:46)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；及(iv)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:ryava(seq id no:43)cdr2:aitwssgridyadsvkg(seq id no:44)cdr3:drrprstgrsgtgspstydy(seq id no:45)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:inamg(seq id no:49)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；及该pd
‑
1抗体选自由以下组成的组：(i)包括包含seq id no:1(hcdr1)、seq id no:2(hcdr2)及seq id no:3(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:4(lcdr1)、seq id no:5(lcdr2)及seq id no:6(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体；(ii)包括包含seq id no:7(hcdr1)、seq id no:8(hcdr2)及seq id no:9(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:10(lcdr1)、seq id no:11(lcdr2)及seq id no:12(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体；及(iii)包括包含seq id no:13(hcdr1)、seq id no:14(hcdr2)及seq id no:15(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:16(lcdr1)、seq id no:17(lcdr2)及
seq id no:18(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体。
13.在另一方面中，本发明提供治疗及/或预防过度增生性疾病，优选癌症的方法，其包括向有此需要的病患投与治疗有效量的lrp5拮抗剂及治疗有效量的pd
‑
1抗体，该lrp5拮抗剂选自由以下组成的组：(i)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一免疫球蛋白单一可变域(isvd)：cdr1:tyvmg(seq id no:40)cdr2:aiswsggstyyadsvkg(seq id no:41)cdr3:srgtstpsrasgvsrydy(seq id no:42)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:igamg(seq id no:46)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；(ii)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:tyvmg(seq id no:40)cdr2:aiswsggstyyadsvkg(seq id no:41)cdr3:srgtstpsrasgvsrydy(seq id no:42)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:inamg(seq id no:49)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；(iii)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:ryava(seq id no:43)cdr2:aitwssgridyadsvkg(seq id no:44)cdr3:drrprstgrsgtgspstydy(seq id no:45)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:igamg(seq id no:46)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；及(iv)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:ryava(seq id no:43)cdr2:aitwssgridyadsvkg(seq id no:44)cdr3:drrprstgrsgtgspstydy(seq id no:45)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:inamg(seq id no:49)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；及该pd
‑
1抗体选自由以下组成的组：(i)包括包含seq id no:1(hcdr1)、seq id no:2(hcdr2)及seq id no:3(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:4(lcdr1)、seq id no:5(lcdr2)及seq id no:6
(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体；(ii)包括包含seq id no:7(hcdr1)、seq id no:8(hcdr2)及seq id no:9(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:10(lcdr1)、seq id no:11(lcdr2)及seq id no:12(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体；及(iii)包括包含seq id no:13(hcdr1)、seq id no:14(hcdr2)及seq id no:15(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:16(lcdr1)、seq id no:17(lcdr2)及seq id no:18(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体。
14.在另一方面中，本发明提供用于治疗及/或预防过度增生性疾病，优选癌症的方法中的pd
‑
1抗体，该方法包括将向有此需要的病患投与pd
‑
1抗体与lrp5拮抗剂的组合，该lrp5拮抗剂选自由以下组成的组：(i)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一免疫球蛋白单一可变域(isvd)：cdr1:tyvmg(seq id no:40)cdr2:aiswsggstyyadsvkg(seq id no:41)cdr3:srgtstpsrasgvsrydy(seq id no:42)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:igamg(seq id no:46)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；(ii)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:tyvmg(seq id no:40)cdr2:aiswsggstyyadsvkg(seq id no:41)cdr3:srgtstpsrasgvsrydy(seq id no:42)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:inamg(seq id no:49)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；(iii)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:ryava(seq id no:43)cdr2:aitwssgridyadsvkg(seq id no:44)cdr3:drrprstgrsgtgspstydy(seq id no:45)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:igamg(seq id no:46)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；及(iv)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:ryava(seq id no:43)cdr2:aitwssgridyadsvkg(seq id no:44)cdr3:drrprstgrsgtgspstydy(seq id no:45)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：
cdr1:inamg(seq id no:49)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；及及该pd
‑
1抗体选自由以下组成的组：(i)包括包含seq id no:1(hcdr1)、seq id no:2(hcdr2)及seq id no:3(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:4(lcdr1)、seq id no:5(lcdr2)及seq id no:6(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体；(ii)包括包含seq id no:7(hcdr1)、seq id no:8(hcdr2)及seq id no:9(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:10(lcdr1)、seq id no:11(lcdr2)及seq id no:12(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体；及(iii)包括包含seq id no:13(hcdr1)、seq id no:14(hcdr2)及seq id no:15(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:16(lcdr1)、seq id no:17(lcdr2)及seq id no:18(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体。
15.在另一方面中，本发明提供lrp5拮抗剂用于制备用于治疗及/或预防过度增生性疾病，优选癌症的方法中的医药组合物的用途，其中该lrp5
‑
拮抗剂将与pd
‑
1抗体组合使用，其中该lrp5拮抗剂选自由以下组成的组：(i)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一免疫球蛋白单一可变域(isvd)：cdr1:tyvmg(seq id no:40)cdr2:aiswsggstyyadsvkg(seq id no:41)cdr3:srgtstpsrasgvsrydy(seq id no:42)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:igamg(seq id no:46)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；(ii)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:tyvmg(seq id no:40)cdr2:aiswsggstyyadsvkg(seq id no:41)cdr3:srgtstpsrasgvsrydy(seq id no:42)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:inamg(seq id no:49)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；(iii)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:ryava(seq id no:43)cdr2:aitwssgridyadsvkg(seq id no:44)cdr3:drrprstgrsgtgspstydy(seq id no:45)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:igamg(seq id no:46)
cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；及(iv)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:ryava(seq id no:43)cdr2:aitwssgridyadsvkg(seq id no:44)cdr3:drrprstgrsgtgspstydy(seq id no:45)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:inamg(seq id no:49)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；其中该pd
‑
1抗体选自由以下组成的组：(i)包括包含seq id no:1(hcdr1)、seq id no:2(hcdr2)及seq id no:3(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:4(lcdr1)、seq id no:5(lcdr2)及seq id no:6(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体；(ii)包括包含seq id no:7(hcdr1)、seq id no:8(hcdr2)及seq id no:9(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:10(lcdr1)、seq id no:11(lcdr2)及seq id no:12(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体；及(iii)包括包含seq id no:13(hcdr1)、seq id no:14(hcdr2)及seq id no:15(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:16(lcdr1)、seq id no:17(lcdr2)及seq id no:18(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体。
16.在另一方面中，本发明提供pd
‑
1抗体用于制备用于治疗及/或预防过度增生性疾病，优选癌症的方法中的医药组合物的用途，其中该pd
‑1‑
抗体将与lrp5拮抗剂组合使用；其中该lrp5拮抗剂选自由以下组成的组：(i)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一免疫球蛋白单一可变域(isvd)：cdr1:tyvmg(seq id no:40)cdr2:aiswsggstyyadsvkg(seq id no:41)cdr3:srgtstpsrasgvsrydy(seq id no:42)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:igamg(seq id no:46)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；(ii)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:tyvmg(seq id no:40)cdr2:aiswsggstyyadsvkg(seq id no:41)cdr3:srgtstpsrasgvsrydy(seq id no:42)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:inamg(seq id no:49)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；
(iii)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:ryava(seq id no:43)cdr2:aitwssgridyadsvkg(seq id no:44)cdr3:drrprstgrsgtgspstydy(seq id no:45)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:igamg(seq id no:46)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；及(iv)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:ryava(seq id no:43)cdr2:aitwssgridyadsvkg(seq id no:44)cdr3:drrprstgrsgtgspstydy(seq id no:45)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:inamg(seq id no:49)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；其中该pd
‑
1抗体选自由以下组成的组：(i)包括包含seq id no:1(hcdr1)、seq id no:2(hcdr2)及seq id no:3(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:4(lcdr1)、seq id no:5(lcdr2)及seq id no:6(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体；(ii)包括包含seq id no:7(hcdr1)、seq id no:8(hcdr2)及seq id no:9(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:10(lcdr1)、seq id no:11(lcdr2)及seq id no:12(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体；及(iii)包括包含seq id no:13(hcdr1)、seq id no:14(hcdr2)及seq id no:15(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:16(lcdr1)、seq id no:17(lcdr2)及seq id no:18(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体。
17.在另一方面中，本发明提供一种医药组合物，其包含：
·
lrp5拮抗剂；
·
pd
‑
1抗体；及
·
任选地，一或多种医药上可接受的载剂、赋形剂及/或媒剂；其中该lrp5拮抗剂选自由以下组成的组：(i)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一免疫球蛋白单一可变域(isvd)：cdr1:tyvmg(seq id no:40)cdr2:aiswsggstyyadsvkg(seq id no:41)cdr3:srgtstpsrasgvsrydy(seq id no:42)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:igamg(seq id no:46)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；
(ii)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:tyvmg(seq id no:40)cdr2:aiswsggstyyadsvkg(seq id no:41)cdr3:srgtstpsrasgvsrydy(seq id no:42)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:inamg(seq id no:49)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；(iii)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:ryava(seq id no:43)cdr2:aitwssgridyadsvkg(seq id no:44)cdr3:drrprstgrsgtgspstydy(seq id no:45)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:igamg(seq id no:46)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；及(iv)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:ryava(seq id no:43)cdr2:aitwssgridyadsvkg(seq id no:44)cdr3:drrprstgrsgtgspstydy(seq id no:45)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:inamg(seq id no:49)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；其中该pd
‑
1抗体选自由以下组成的组：(i)包括包含seq id no:1(hcdr1)、seq id no:2(hcdr2)及seq id no:3(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:4(lcdr1)、seq id no:5(lcdr2)及seq id no:6(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体；(ii)包括包含seq id no:7(hcdr1)、seq id no:8(hcdr2)及seq id no:9(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:10(lcdr1)、seq id no:11(lcdr2)及seq id no:12(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体；及(iii)包括包含seq id no:13(hcdr1)、seq id no:14(hcdr2)及seq id no:15(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:16(lcdr1)、seq id no:17(lcdr2)及seq id no:18(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体。在一些实施例中，该医药组合物用于治疗及/或预防过度增生性疾病，优选癌症的方法中。
18.在另一方面中，本发明提供一种试剂盒，其在一或多个容器中包含：
·
包含lrp5拮抗剂及任选地一或多种医药上可接受的载剂、赋形剂及/或媒剂的第一医药组合物或剂型；
·
包含pd
‑
1抗体及任选地一或多种医药上可接受的载剂、赋形剂及/或媒剂的第
二医药组合物或剂型；
·
及任选地包含印刷说明书的包装插页；其中该lrp5拮抗剂选自由以下组成的组：(i)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一免疫球蛋白单一可变域(isvd)：cdr1:tyvmg(seq id no:40)cdr2:aiswsggstyyadsvkg(seq id no:41)cdr3:srgtstpsrasgvsrydy(seq id no:42)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:igamg(seq id no:46)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；(ii)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:tyvmg(seq id no:40)cdr2:aiswsggstyyadsvkg(seq id no:41)cdr3:srgtstpsrasgvsrydy(seq id no:42)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:inamg(seq id no:49)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；(iii)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:ryava(seq id no:43)cdr2:aitwssgridyadsvkg(seq id no:44)cdr3:drrprstgrsgtgspstydy(seq id no:45)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:igamg(seq id no:46)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；及(iv)包含以下的多肽：(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:ryava(seq id no:43)cdr2:aitwssgridyadsvkg(seq id no:44)cdr3:drrprstgrsgtgspstydy(seq id no:45)，及(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:inamg(seq id no:49)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)；其中该pd
‑
1抗体选自由以下组成的组：(i)包括包含seq id no:1(hcdr1)、seq id no:2(hcdr2)及seq id no:3(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:4(lcdr1)、seq id no:5(lcdr2)及seq id no:6(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体；
(ii)包括包含seq id no:7(hcdr1)、seq id no:8(hcdr2)及seq id no:9(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:10(lcdr1)、seq id no:11(lcdr2)及seq id no:12(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体；及(iii)包括包含seq id no:13(hcdr1)、seq id no:14(hcdr2)及seq id no:15(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:16(lcdr1)、seq id no:17(lcdr2)及seq id no:18(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr的抗pd1抗体。
19.在一些实施例中，根据本发明的试剂盒用于治疗及/或预防过度增生性疾病，优选癌症的方法中。
20.在本发明的优选实施例中，该lrp5拮抗剂选自由以下组成的组：(i)包括包含seq id no:50的氨基酸序列的第一isvd，及包含seq id no:61的序列的第二isvd的多肽；(ii)包括包含seq id no:51的氨基酸序列的第一isvg，及包含seq id no:52的序列的第二isvd的多肽；(iii)包括包含seq id no:62的序列的第一isvd，及包含seq id no:53的序列的第二isvd的多肽；(iv)包括包含seq id no:50的氨基酸序列的第一isvd，及包含seq id no:53的序列的第二isvd的多肽；(v)包括包含seq id no:62的氨基酸序列的第一isvd，及包含seq id no:61的序列的第二isvd的多肽；及(vi)包括包含seq id no:51的氨基酸序列的第一isvd，及包含seq id no:53的序列的第二isvd的多肽；优选地，该lrp5拮抗剂进一步包括包含seq id no:60的氨基酸序列的aib11域。
21.在特别优选的实施方案中，该lrp5拮抗剂包括包含选自由seq id no:57、seq id no:58及seq id no:59组成的组的氨基酸序列的多肽。
22.在本发明的优选的实施方案中，该抗pd1抗体选自由以下组成的组：(i)包括包含seq id no:19的氨基酸序列的重链可变域及包含seq id no:20的氨基酸序列的轻链可变域的抗体；(ii)包括包含seq id no:21的氨基酸序列的重链可变域及包含seq id no:22的氨基酸序列的轻链可变域的抗体；(iii)包括包含seq id no:23的氨基酸序列的重链可变域及包含seq id no:24的氨基酸序列的轻链可变域的抗体；(iv)包括包含seq id no:25的氨基酸序列的重链可变域及包含seq id no:26的氨基酸序列的轻链可变域的抗体；及(v)包括包含seq id no:27的氨基酸序列的重链可变域及包含seq id no:28的氨基酸序列的轻链可变域的抗体。
23.在本发明的特别优选的实施方案中，该pd
‑
1抗体选自由以下组成的组：(i)包括包含seq id no:29的氨基酸序列的重链及包含seq id no:30的氨基酸序列的轻链的抗体；(ii)包括包含seq id no:31的氨基酸序列的重链及包含seq id no:32的氨基酸
序列的轻链的抗体；(iii)包括包含seq id no:33的氨基酸序列的重链及包含seq id no:34的氨基酸序列的轻链的抗体；(iv)包括包含seq id no:35的氨基酸序列的重链及包含seq id no:36的氨基酸序列的轻链的抗体；及(v)包括包含seq id no:37的氨基酸序列的重链及包含seq id no:38的氨基酸序列的轻链的抗体。
24.在本发明的一些实施方案中，该pd
‑
1抗体将与该lrp5拮抗剂同时、并行、依序、连续、交替或分别投与。
25.在优选实施方案中，该lrp5拮抗剂及该pd
‑
1抗体将根据下列治疗方案投与：(i)第一治疗周期，其中该lrp5拮抗剂及该pd
‑
1抗体将同时或并行，优选地每三或四周投与；及(ii)第二治疗周期，其中仅该pd
‑
1抗体将投与及该lrp5拮抗剂未投与，优选地，其中该pd
‑
1抗体将每三或四周投与。
26.在本发明的优选实施例中，将治疗的过度增生性疾病是选自由以下组成的组的癌症：胃肠道癌、黑色素瘤肿瘤、膀胱癌及肺癌(例如nsclc)，甚至更优选地，该癌症为抗免疫治疗胃肠道癌(包括(但不限于)食道癌(例如，胃食道连接处癌)、胃(胃部)癌、肝细胞癌、胆道癌(例如，胆管癌)、胆囊癌、胰脏癌或大肠直肠癌(crc))、抗免疫治疗黑色素瘤、抗免疫治疗膀胱癌或抗免疫治疗肺癌。
27.在本发明的替代的优选实施例中，欲治疗的过度增生性疾病是抗免疫治疗实体肿瘤。附图简单说明
28.图1a至1h：显示例示性lrp5拮抗剂作为单一药剂及与例示性pd
‑
1抗体的组合在衍生自balb/c小鼠中的乳腺癌细胞系emt6的皮下同基因小鼠模型中的抗肿瘤活性。图1a：在以同型匹配的抗体；1b：以lrp5拮抗剂；1c：以pd
‑
1抗体；及1d：以lrp5拮抗剂 pd
‑
1抗体，治疗指定天数后的肿瘤体积的测量。图1e：在以同型匹配的抗体；1f：以lrp5拮抗剂；1g：以pd
‑
1抗体；及1h：以lrp5拮抗剂 pd
‑
1抗体治疗指定天数后的肿瘤收缩反应的测量。以*指示的编号显示总研究小鼠中观测到反应(即其中治疗结束时的肿瘤体积与治疗开始时的肿瘤体积之间的比率低于1(即，指示肿瘤的收缩))的小鼠的数量。发明详述定义本发明的上文与其他方面及实施方案将自本技术的进一步描述变得清晰，其中：除非本技术另有指示或定义，否则使用的所有术语具有其在本领域中的一般含义，这些一般含义对本领域技术人员而言将显而易见。在矛盾的情况下，将以本专利说明书(包括定义)为准。例如对标准手册作出参考，例如sambrook等，“molecular cloning:a laboratory manual”(第2版)，第1至3卷，cold spring harbor laboratory press(1989)；lewin,“genes iv”,oxford university press,new york,(1990)，及roitt等，“immunology”(第2版),gower medical publishing,london,new york(1989)，及对本技术引用的一般

背景技术：
作出参考。此外，除非本技术另有指示，否则如对本领域技术人员而言
显而易见，可进行未详细明确描述的所有方法、步骤、技术及操作及已以本身已知的方式进行。例如再次对标准手册、对上文提及的现有技术及对本技术引用的其他参考文献作出参考。
29.术语“抗体”包含抗体、抗体片段、抗体样分子及与上文中的任何一者结合的结合物。抗体包括(但不限于)多克隆抗体或单克隆抗体、嵌合抗体、人源化抗体、人类抗体、单特异性抗体、双特异性抗体或多特异性抗体。术语“抗体”应包含完整免疫球蛋白，因为其等由淋巴球产生及例如存在于血液血清中，由杂交瘤细胞系分泌的单克隆抗体、通过宿主细胞中的重组表达产生的多肽，其具有免疫球蛋白或单克隆抗体的结合特异性，及已通过进一步处理衍生自这些免疫球蛋白、单克隆抗体或多肽且同时保留其结合特异性的分子。特定言之，术语“抗体”包括完整免疫球蛋白，其包含两个重链及两个轻链。在另一实施例中，该术语包含免疫球蛋白的片段，例如fab片段。在另一实施例中，术语“抗体”包含具有自免疫球蛋白衍生的一或多个可变域的多肽，例如单链抗体(scfv)、单域抗体及类似物。
[0030]“人类抗体”具有氨基酸序列对应于由人类细胞产生或自利用人类抗体库或其他人类抗体编码序列的非人类来源衍生的抗体的氨基酸序列的抗体。人类抗体的此定义明确排除包含非人类抗原结合残基的人源化抗体。
[0031]
如本技术使用，术语“重组人类抗体”意欲包括通过重组方式制备、表达、建立或分离的所有人类抗体，例如自宿主细胞(例如ns0或cho细胞)或自针对人类免疫球蛋白基因转基因的动物(例如小鼠)分离的抗体或使用转染至宿主细胞内的重组表达载体表达的抗体。这些重组人类抗体具有以重排形式的可变及恒定区。根据本发明的重组人类抗体已经历活体内体细胞高频突变。因此，重组抗体的vh及vl区的氨基酸序列尽管自人类生殖系vh及vl序列衍生且与人类生殖系vh及vl序列相关，但可非活体内天然存在于人类抗体生殖系库中的序列。
[0032]“人源化”抗体指包含来自非人类高度可变区(hvr)的氨基酸残基及来自人类框架区(fr)的氨基酸残基的嵌合抗体。在某些实施方案中，人源化抗体将包含至少一个及通常两个可变域中的大体上所有，其中这些hvr中的所有或大体上所有(例如互补决定区(cdr))对应于非人类抗体的那些，及所有或大体上整个框架区(fr)对应于人类抗体的那些。人源化抗体任选地可包含自人类抗体衍生的抗体恒定区的至少一部分。抗体(例如非人类抗体)的“人源化形式”指已经历人源化的抗体。
[0033]
如本技术使用的表述“可变域”或“可变区”或fv表示轻链及重链对中的各者，其直接参与抗体对抗原的结合。轻链的可变域缩写为“vl”及重链的可变域缩写为“vh”。可变轻链及重链域具有相同一般结构及各域包含四个框架(fr)区，其序列为广泛保守的，由三个hvr(或cdr)连接。框架区采用β折叠构象及cdr可形成连接该β折叠结构的环。各链中的cdr由框架区保持它们的三维结构中及与来自其他链的cdr一起形成抗原结合位点。该抗体的重链及轻链cdr区在根据本发明的抗体的结合特异性/亲和力中发挥尤为重要的作用并因此提供本发明的另一目的。
[0034]
在本发明的上下文中，与抗体(例如pd1抗体)有关的cdr的参考基于chothia的定义(chothia及lesk,j.mol.biol.1987,196:901
‑
917)，连同kabat的定义一起(e.a.kabat、t.t.wu、h.bilofsky、m.reid
‑
miller及h.perry,sequence of proteins of immunological interest,national institutes of health,bethesda(1983))。
[0035]
除非本技术另有指示，否则无论是否本技术使用以指重链抗体或指常规4链抗体，术语“免疫球蛋白”及“免疫球蛋白序列”均用作一般术语以包括全尺寸抗体、其个别链及所有部分、其域或片段(包括(但不限于)抗原结合域或片段例如分别vhh域或vh/vl域)。另外，除非上下文需更有限的解释，否则如本技术使用的术语“序列”(例如在例如“免疫球蛋白序列”、“抗体序列”、“(单一)可变域序列”、“vhh序列”或“蛋白序列”的术语中)应通常了解为包括相关氨基酸序列及编码其的核酸序列或核苷酸序列。
[0036]
如本技术使用的术语“域”(多肽或蛋白质的域)指折叠的蛋白结构，其具有独立于该蛋白质的剩余部分保留其三级结构的能力。一般而言，域负责蛋白质的离散功能性质，且在许多情况下可添加、移除或转移至其他蛋白质而不损失该蛋白质的剩余部分及/或域的功能。
[0037]
如本技术使用的术语“免疫球蛋白域”指抗体链(例如例如常规4链抗体或重链抗体的链)的球状区，或指基本上由此球状区构成的多肽。免疫球蛋白域的特征在于其保留抗体分子的免疫球蛋白折叠特性，其以两个β折叠排列的约7个反平行β链的2层三明治构成，任选地由保守二硫键稳定。
[0038]
如本技术使用的术语“免疫球蛋白可变域”意谓基本上由本领域中援引及本技术中分别称为“框架区1”或“fr1”；称为“框架区2”或“fr2”；称为“框架区3”或“fr3”；及称为“框架区4”或“fr4”的四个“框架区”构成的免疫球蛋白域；这些框架区由本领域中援引及本技术中分别称为“互补决定区1”或“cdr1”；称为“互补决定区2”或“cdr2”；及称为“互补决定区3”或“cdr3”的三个“互补决定区”或“cdr”中断。因此，免疫球蛋白可变域的一般结构或序列可如下指示：fr1
‑
cdr1
‑
fr2
‑
cdr2
‑
fr3
‑
cdr3
‑
fr4。正是免疫球蛋白可变域通过携载抗原结合位点向抗体赋予针对抗原的特异性。
[0039]
如本技术使用的术语“免疫球蛋白单一可变域”(或isvd)意谓可特异性结合至抗原的抗原决定基而不与额外的可变免疫球蛋白域配对的免疫球蛋白可变域。在本发明的含义中的isvd的一项实例为“域抗体”，例如isvd vh及vl(vh域及vl域)。如下文中定义，isvd的另一重要实例为来自骆驼科动物的“vhh域”(或仅“vhh”)。
[0040]
鉴于上文定义，常规的4链抗体(例如igg、igm、iga、igd或ige分子；本领域中已知)的抗原结合域或fab片段、f(ab')2片段、fv片段(例如二硫键连接的fv或scfv片段)，或自此常规4链抗体衍生的双功能抗体(均为本领域中已知)的抗原结合域通常不应视为isvd，因为在这些情况下，结合至抗原的个别抗原决定基通常不由一个(单一)免疫球蛋白域但由一对(相关联)免疫球蛋白域(例如轻链及重链可变域)，即由共同结合至个别抗原的抗原决定基的免疫球蛋白域的vh
‑
vl对发生。
[0041]“vhh域”，也称为vhh、v
h
h域、vhh抗体片段及vhh抗体已最初描述为“重链抗体”(即，“缺乏轻链的抗体”；hamers
‑
casterman c、atarhouch t、muyldermans s、robinson g、hamers c、songa eb、bendahman n、hamers r.:“naturally occurring antibodies devoid of light chains”；nature363,446
‑
448(1993))的抗原结合免疫球蛋白(可变)域。已选择术语“vhh域”以区分这些可变域与常规4链抗体中存在的重链可变域(其在本技术中被称为“v
h
域”或“vh域”)及常规4链抗体中存在的轻链可变域(其在本技术中被称为“v
l
域”或“vl域”)。vhh域可特异性结合至无额外抗原结合域的抗原决定基(相对于常规4链抗体中的vh或vl域，在此情况下，该抗原决定基由vl域连同vh域一起识别)。vhh域由单一免疫球蛋
白域形成的小、稳健且有效的抗原识别单元。
[0042]
在本发明的上下文中，术语vhh域、vhh、v
h
h域、vhh抗体片段、vhh抗体及“纳米抗体”及“纳米抗体域”(为公司ablynx n.v.；ghent；belgium的商标的“纳米抗体”)可互换使用及如(例如)wo2009/109635，图1中定义，表示isvd(具有结构：fr1
‑
cdr1
‑
fr2
‑
cdr2
‑
fr3
‑
cdr3
‑
fr4并特异性结合至抗原决定基而无需第二免疫球蛋白可变域的存在)，且其也可由所谓的“标志残基”区别于vh域。
[0043]
例如riechmann及muyldermans,j.immunol.methods 231,25
‑
38(1999)的图2中显示，如应用至来自骆驼科动物的vhh域，vhh域的氨基酸残基根据由kabat等(“sequence of proteins of immunological interest”,us public health services,nih bethesda,md，公开案第91号)针对v
h
域给定的一般编号进行编号。根据此编号，
‑
fr1包含在位置1至30的氨基酸残基，
‑
cdr1包含在位置31至35的氨基酸残基，
‑
fr2包含在位置36至49的氨基酸，
‑
cdr2包含在位置50至65的氨基酸残基，
‑
fr3包含在位置66至94的氨基酸残基，
‑
cdr3包含在位置95至102的氨基酸残基，及
‑
fr4包含在位置103至113的氨基酸残基。
[0044]
然而，应注意如本领域中熟知就v
h
域及vhh域而言，每一个cdr中的氨基酸残基的总数可变化，且因此可不对应于由kabat编号指示的氨基酸残基的总数(即，根据kabat编号的一或多个位置可未由实际序列占据，或实际序列可含有比kabat编号容许的数量更多的氨基酸残基)。此意谓虽然vhh域的氨基酸残基的编号基于根据kabat的编号，但实际序列中的氨基酸残基的实际编号可不同。由于本领域中熟知此类变化，因此框架区及cdr在此序列内的个别编号及分配可由本领域技术人员确定而无需更多麻烦。
[0045]
用于编号v
h
域的氨基酸残基的替代方法(这些方法也可以类似方式应用至vhh域)为本领域中已知的。然而，在本说明书中，除非本技术另有指示，否则将遵循与本技术描述的isvd相关的权利要求和附图、根据kabat并应用至如上文描述的vhh域的编号。
[0046]
vhh域中的氨基酸残基的总数将通常在110至120的范围内，通常在112与115之间。然而，应注意更小及更长的序列也可适用于本技术描述的目的。
[0047]
获得结合至特异性抗原或抗原决定基的vhh域的方法已较早描述(例如)在wo2006/040153及wo2006/122786中。自骆驼科动物衍生的vhh域可通过原始vhh序列的氨基酸序列中的一或多个氨基酸残基用来自人类的常规4链抗体的vh域中的对应位置出现的氨基酸残基中的一或多者置换而经“人源化”。人源化vhh域可含有一或多个完全人类框架区序列，及在甚至更具体的实施方案中，可含有自dp
‑
29、dp
‑
47、dp
‑
51或其部分衍生的人类框架区序列，任选地与jh序列(例如jh5)组合。
[0048]
可互换使用的术语“抗原决定基”及“抗原决定位”指高分子(例如多肽)中由抗原结合分子(例如常规抗体或本发明的多肽)，且更特定言的由这些分子的抗原结合位点识别的部分。抗原决定基定义用于免疫球蛋白的最小结合位点，且因此表示免疫球蛋白的特异性的靶点。
[0049]
抗原结合分子(例如常规抗体或本技术揭示的多肽)识别抗原决定基的部分被称
为互补位。
[0050]
如本技术使用的术语“双互补位”(抗原)结合分子或“双互补位”多肽应意谓包含如本技术定义的第一isvd及第二isvd的多肽，其中这些两个可变域可结合至一个抗原的两个不同抗原决定基，这些抗原决定基通常非同时由一个单特异性免疫球蛋白(例如例如常规抗体或一个isvd)结合。根据本发明的双互补位多肽包含具有不同抗原决定基特异性，且不含有结合至相同抗原决定基的互补可变域对的可变域。因此，其不会彼此竞争结合至lrp5。
[0051]
可“结合”、“结合至”、“特异性结合”或“特异性结合至”某一抗原决定基、抗原或蛋白质，对某一抗原决定基、抗原或蛋白质(或对其至少一部分、片段或抗原决定基)“具有亲和力”及/或“具有特异性”的多肽(例如免疫球蛋白、抗体、isvd或一般其抗原结合分子或片段)被称为“针对”或“定向针对”该抗原决定基、抗原或蛋白质或关于此抗原决定基、抗原或蛋白质的“结合”分子。
[0052]
一般而言，术语“特异性”指特定抗原结合分子或抗原结合蛋白(例如免疫球蛋白、抗体、isvd)可结合的不同类型的抗原或抗原决定基的数量。抗原结合蛋白的特异性可基于其亲和力及/或结合性(avidity)确定。由抗原与抗原结合蛋白的离解平衡常数(k
d
)表示的亲和力是抗原决定基与抗原结合蛋白上的抗原结合位点之间的结合强度的量度：该k
d
值越小，则抗原决定基与抗原结合分子之间的结合强度越强(或者，该亲和力也可表示为亲和常数(k
a
)，其是1/k
d
)。如对本领域技术人员而言将显而易见(例如基于本技术的其他公开内容)，取决于受关注的特异性抗原，亲和力可以本身已知的方式测定。结合性抗原结合分子(例如免疫球蛋白、抗体、isvd)与相关抗原之间的结合强度的量度。结合性是抗原决定基与抗原结合分子上的其抗原结合位点之间的亲和力及该抗原结合分子上存在的相关结合位点的数量相关。
[0053]
通常，抗原结合分子(例如可特异性结合至lrp5的多肽)将以10e
‑
5至10e
‑
14摩尔/公升(m)或更小，及优选地，10e
‑
7至10e
‑
14摩尔/公升(m)或更小，更优选地，10e
‑
8至10e
‑
14摩尔/公升，及甚至更优选地，10e
‑
11至10e
‑
13的解离常数(k
d
)(如在kinexa分析中测量；在本领域中已知)，及/或以至少10e7 me
‑
1，优选地，至少10e8 me
‑
1，更优选地，至少10e9 me
‑
1，例如至少10e11 me
‑
1的结合常数(k
a
)结合。一般认为大于10e
‑
4m的任何k
d
值指示非特异性结合。优选地，抗原结合分子(例如可特异性结合至lrp5的多肽)将以小于500nm，优选地，小于200nm，更优选地，小于10nm，例如小于500pm的k
d
结合至所需抗原。抗原结合蛋白对抗原或抗原决定基的特异性结合可以本身已知的任何合适的方式，包括例如本技术描述的分析、斯卡乍得(scatchard)分析及/或竞争性结合分析，例如放射免疫分析(ria)、酶免疫分析(eia)及三明治竞争分析及本领域中本身已知的不同变异测定。
[0054]
本技术描述的lrp5拮抗剂(此术语可与术语“特异性结合至lrp5的多肽”或“可特异性结合至lrp5的多肽”互换使用)具有针对lrp5的特异性，在于其包含结合至lrp5的抗原决定基，但不或基本上不与具有类似于lrp5的抗原决定基的结构或具有无关结构的抗原决定基交叉反应的isvd。优选地，这些lrp5拮抗剂具有针对lrp5，尤其人类lrp5的亲和力及/或结合性比其针对任何其他抗原，特别是lrp6，及更特别是人类lrp6(登录编号：uniprotkb
‑
o75581/lrp6_human)的亲和力及/或结合性强至少10倍，优选至少100倍，更优选至少1000倍，甚至更优选至少10000倍，又甚至更优选至少100000倍或至少1000000倍。最
优选地，这些lrp5拮抗剂对lrp6，特别是人类lrp6无交叉反应性。
[0055]
lrp5拮抗剂将结合至lrp5的人类形式，及优选还结合至与药物研发相关的其他物种的对应体，即食蟹猕猴及小鼠lrp5。
[0056]
当本技术中使用时，术语“包含(comprising)”及其变化例如“包含(comprises)及“包含(comprise)”可用术语“含有”或“包括”或“具有”代替。此外，术语“包含”也明确涵盖由本技术列举组件“组成”的实施例。
[0057]
组合疗法本发明的目的提供用于治疗或控制各种过度增生性疾病，特别是各种恶性肿瘤的新颖疗法。
[0058]
本技术案的发明人意外发现相较于单独使用lrp5拮抗剂或抗pd
‑
1抗体，lrp5拮抗剂与抗pd
‑
1(程序性细胞死亡蛋白1)抗体组合使用具有改善临床结果的可能性。
[0059]
具体言之，在临床前研究中，发明者们单独或与抗pd
‑
1抗体组合测试lrp5拮抗剂的免疫调节功能及抗肿瘤活性(参见下文实施例1)。如通过组织病理学分析确定的完全反应，及大量t细胞肿瘤浸润仅可针对lrp5拮抗剂与抗pd
‑
1抗体的组合观测到。肿瘤引流淋巴结的facs分析进一步显示此组合治疗导致引流淋巴结中活化树突状细胞(dc)的数量增加。不希望受理论的束缚，这些发现指示lrp5拮抗剂与抗pd
‑
1抗体的组合治疗导致dc中的wnt信号传递通路的抑制，此接着导致促炎细胞因子的上调、交叉引发的恢复及肿瘤t细胞浸润及抗肿瘤活性的促进。
[0060]
虽然各种组合疗法为本领域中已知且当前正在研究中(例如在临床前或临床试验中)，但仍缺乏用于治疗癌症疾病，特定而言，实体瘤例如肺癌(例如nsclc)、黑色素瘤、膀胱癌及胃肠道癌的令人满意的治疗概念。显示优于标准疗法的优点(例如例如更佳的治疗结果、有利效应、极佳效用及/或经改善的耐受性，例如减少的副作用)的任何疗法将因此表示重要发展。
[0061]
下文实例1中显示的意外结果指示lrp5拮抗剂(其本身在肿瘤模型中无治疗效应)与抗pd
‑
1抗体(其具有仅有限的治疗效应)的组合导致这些两种化合物的协同(即，大于加成)相互作用，提供极佳结果因此可获得完全反应。
[0062]
因此，本发明关于用于治疗及/或预防过度增生性疾病，特定而言，癌症的方法，其包括组合投与lrp5拮抗剂及抗pd
‑
1抗体，各如本技术描述，及关于医学用途，用于包含这些治疗剂的医药组合物或组合及试剂盒。
[0063]
此外，本发明关于抗癌疗法，其包括组合使用lrp5拮抗剂及抗pd
‑
1抗体，各如本技术描述。
[0064]
此组合治疗可作为物质的非固定(例如自由)组合或以固定组合的形式(包括备份包)给定。
[0065]
为治疗具有肿瘤学性质的疾病，已提议大量抗癌剂(包括靶点特异性及非靶点特异性抗癌剂)，其可用作单一疗法或作为涉及多于一种药剂的组合疗法(例如双重或三重组合疗法)及/或其可与放射疗法(例如辐照治疗)、放射免疫疗法及/或手术组合。因此，除其他治疗剂及/或例如放射疗法、放射免疫疗法及手术的治疗外，可给定本技术描述的组合治疗。
[0066]
lrp5拮抗剂
在本发明的含义及其所有实施例内的可特异性结合至lrp5的多肽(本技术中也称为lrp5拮抗剂)结合至低密度脂蛋白受体样蛋白5(lrp5)的多肽，该多肽包含于不同抗原决定基结合至lrp5的两个或更多个isvd，优选第一域阻断lrp5的wnt3a结合位点，及优选抑制wnt3a驱动的靶基因转录，及/或第二域阻断lrp5的wnt1结合位点，及优选抑制wnt1驱动的靶基因转录。
[0067]
换而言之，本发明的lrp5拮抗剂包括：
‑
第一isvd，其可经由抗原决定基/以导致wnt3a信号通路抑制的方式特异性结合至lrp5，使得wnt3a驱动的靶基因转录经抑制，及
‑
第二isvd，其可经由抗原决定基/以导致wnt1信号通路的抑制的方式特异性结合至lrp5，使得wnt1驱动的靶基因转录经抑制。
[0068]
由于上文描述的lrp5拮抗剂中存在的具有结合至不同抗原决定基的两个域的两个isvd(wnt1/wnt3信号传递相关)，因此这些分子是双互补位结合分子。
[0069]
在本发明的一些实施例中，该lrp5拮抗剂包含：
‑
(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:tyvmg(seq id no:40)cdr2:aiswsggstyyadsvkg(seq id no:41)cdr3:srgtstpsrasgvsrydy(seq id no:42)，及
‑
(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:igamg(seq id no:46)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)。
[0070]
cdr序列的此特定组合例如包含于在下文中称为lrp5#1、lrp5#2、lrp5#3及lrp5#4的lrp5拮抗剂中。
[0071]
在本发明的一些实施例中，该lrp5拮抗剂包含：
‑
(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:tyvmg(seq id no:40)cdr2:aiswsggstyyadsvkg(seq id no:41)cdr3:srgtstpsrasgvsrydy(seq id no:42)，及
‑
(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:inamg(seq id no:49)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)。
[0072]
cdr序列的此特定组合例如包含于在下文中称为lrp5#5及lrp5#6的lrp5拮抗剂中。
[0073]
在本发明的一些实施例中，该lrp5拮抗剂包含：
‑
(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:ryava(seq id no:43)cdr2:aitwssgridyadsvkg(seq id no:44)cdr3:drrprstgrsgtgspstydy(seq id no:45)，及
‑
(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:igamg(seq id no:46)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)。
[0074]
cdr序列的此特定组合例如包含于在下文中称为lrp5#7及lrp5#8的lrp5拮抗剂中。
[0075]
在本发明的一些实施例中，该lrp5拮抗剂包含：
‑
(a)包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:ryava(seq id no:43)cdr2:aitwssgridyadsvkg(seq id no:44)cdr3:drrprstgrsgtgspstydy(seq id no:45)，及
‑
(b)包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:inamg(seq id no:49)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)。
[0076]
cdr序列的此特定组合例如包含于下文中称为lrp5#9的lrp5拮抗剂中。
[0077]
如本技术使用，一般而言关于这些isvd或域的术语“第一”及“第二”仅意欲指示这些域是两个不同的域(因为其至少包括不同cdr序列)。因此，这些术语不应了解为指这些域于此多肽链内的精确顺序或序列。换而言之，上文isvd(a)及(b)可以顺序(a)至(b)或以顺序(b)至(a)布置于本技术描述的多肽内。
[0078]
具体而言，本技术描述的多肽的isvd(例如包含如上文定义的cdr序列的isvd)为vhh域，优选人源化vhh域。
[0079]
在本发明的一些实施例中，该lrp5拮抗剂包含具有第一isvd(a)及第二isvd(b)的多肽，该第一isvd包含具有选自由seq id no:50、seq id no:51及seq id no:62组成的组的序列的vhh域，及该第二isvd包含具有选自由seq id no:52、seq id no:53及seq id no:61组成的组的序列的vhh域。
[0080]
在一些实施例中，该第一isvd包含seq id no:50的序列及该第二isvd包含seq id no:52的序列(lrp5#1)。
[0081]
在本发明的一些实施例中，该lrp5拮抗剂的第一isvd包含seq id no:50的序列，及该lrp5拮抗剂的第二isvd包含seq id no:61的序列(lrp5#2)。
[0082]
在一些实施例中，该第一isvd包含seq id no:62的序列，及该第二isvd包含seq id no:52的序列(lrp5#3)。
[0083]
在一些实施例中，该第一isvd包含seq id no:62的序列，及该第二isvd包含seq id no:61的序列(lrp5#4)。
[0084]
在一些实施例中，该第一isvd包含seq id no:50的序列及该第二isvd包含seq id no:53的序列(lrp5#5)。
[0085]
在一些实施例中，该第一isvd包含seq id no:62的序列，及该第二isvd包含seq id no:53的序列(lrp5#6)。
[0086]
在本发明的一些实施例中，该第一isvg包含seq id no:51的序列及该第二isvd包
含seq id no:52的序列(lrp5#7)。
[0087]
在一些实施例中，该第一isvd包含seq id no:51的序列及该第二isvd包含seq id no:61的序列(lrp5#8)。
[0088]
在一些实施例中，该第一isvd包含seq id no:51的序列及该第二isvd包含seq id no:53的序列(lrp5#9)。
[0089]
在本发明的优选的实施例中，该lrp5拮抗剂如由上文cdr及/或vhh序列定义的lrp5#2、lrp5#6或lrp5#7中的任何一个。
[0090]
根据本发明的一优选方面，该lrp5拮抗剂包含具有第一(a)及第二(b)lrp5结合isvd及第三isvd(c)的多肽。优选地，该lrp5拮抗剂包含如由上文cdr序列定义的第一及第二isvd及直接或间接连接该第一及第二isvd的第三isvd。在一些实施例中，该第一isvd经由肽接头共价连接至该第三isvd，该第三isvd经由肽接头共价连接至该第二isvd。这两个接头可为相同或不同的接头。本技术还包含存在仅一个接头。如上所述，术语“第一”及“第二”非指示其等于该多肽内的位置，因此自n至c末端，该多肽内的isvd序列可以顺序isvd(a)
‑
(c)
‑
(b)、(a)
‑
[接头]
‑
(c)
‑
[接头]
‑
(b)、(b)
‑
(c)
‑
(a)、(b)
‑
[接头]
‑
(c)
‑
[接头]
‑
(a)、(a)
‑
[接头]
‑
(c)
‑
(b)、(a)
‑
(c)
‑
[接头]
‑
(b)、(b)
‑
[接头]
‑
(c)
‑
(a)、(b)
‑
(c)
‑
[接头]
‑
(a)布置。
[0091]
优选地，该第三isvd(c)是白蛋白结合isvd。此白蛋白结合isvd的非限制性实例是alb11域，其包含下列cdr：cdr(alb11)1:sfgms(＝seq id no:54)cdr(alb11)2:sisgsgsdtlyadsvkg(＝seq id no:55)cdr(alb11)3:ggslsr(＝seq id no:56)这导致具有下列结构的优选lrp5拮抗剂的组：fr(a)1
‑
cdr(a)1
‑
fr(a)2
‑
cdr(a)2
‑
fr(a)3
‑
cdr(a)3
‑
fr(a)4
‑
[任选地的接头肽]
‑
fr(alb11)1
‑
cdr(alb11)1
‑
fr(alb11)2
‑
cdr(alb11)2
‑
fr(alb11)3
‑
cdr(alb11)3
‑
fr(alb11)4
‑
[任选地的接头肽]
‑
fr(b)1
‑
cdr(b)1
‑
fr(b)2
‑
cdr(b)2
‑
fr(b)3
‑
cdr(b)3
‑
fr(b)4，优选地，其中这些cdr包含如上文列举的序列。
[0092]
再次，三个isvd(a)、(b)及alb11的顺序不固定但也应包含其中上文域以下列顺序布置的多肽：(b)
‑
alb11
‑
(a)。
[0093]
此外，在多肽的n或c末端具有alb11域(例如alb11
‑
(a)
‑
(b)、alb11
‑
(b)
‑
(a)、(a)
‑
(b)
‑
alb11或(b)
‑
(a)
‑
alb11)的多肽还应包含在本发明内。
[0094]
在本发明的一些实施例中，该lrp5拮抗剂包括包含以下的多肽：
‑
包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:tyvmg(seq id no:40)cdr2:aiswsggstyyadsvkg(seq id no:41)cdr3:srgtstpsrasgvsrydy(seq id no:42)，
‑
包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:igamg(seq id no:46)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)
cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)，及
‑
包含下列cdr序列的白蛋白结合isvd(第三isvd)：cdr1:sfgms(seq id no:54)cdr2:sisgsgsdtlyadsvkg(seq id no:55)cdr3:ggslsr(seq id no:56)。
[0095]
cdr序列的此特定组合例如包含于在下文中称为lrp5#1、lrp5#2、lrp5#3及lrp5#4的lrp5拮抗剂中。
[0096]
在本发明的一些实施例中，该lrp5拮抗剂包括包含以下的多肽：
‑
包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:tyvmg(seq id no:40)cdr2:aiswsggstyyadsvkg(seq id no:41)cdr3:srgtstpsrasgvsrydy(seq id no:42)，
‑
包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:inamg(seq id no:49)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)，及
‑
包含下列cdr序列的白蛋白结合isvd：cdr1:sfgms(seq id no:54)cdr2:sisgsgsdtlyadsvkg(seq id no:55)cdr3:ggslsr(seq id no:56)。
[0097]
cdr序列的此特定组合例如包含在下文中称为lrp5#5及lrp5#6的lrp5拮抗剂中。
[0098]
在本发明的一些实施例中，该lrp5拮抗剂包括包含以下的多肽：
‑
包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:ryava(seq id no:43)cdr2:aitwssgridyadsvkg(seq id no:44)cdr3:drrprstgrsgtgspstydy(seq id no:45)，
‑
具有下列cdr序列的第二isvd：cdr1:igamg(seq id no:46)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)，及
‑
包含下列cdr序列的白蛋白结合isvd：cdr1:sfgms(seq id no:54)cdr2:sisgsgsdtlyadsvkg(seq id no:55)cdr3:ggslsr(seq id no:56)。
[0099]
cdr序列的此特定组合例如包含在下文中称为lrp5#7及lrp5#8的lrp5拮抗剂中。
[0100]
在本发明的一些实施例中，该lrp5拮抗剂包括包含以下的多肽：
‑
包含下列cdr序列的第一isvd：cdr1:ryava(seq id no:43)cdr2:aitwssgridyadsvkg(seq id no:44)
cdr3:drrprstgrsgtgspstydy(seq id no:45)，
‑
包含下列cdr序列的第二isvd：cdr1:inamg(seq id no:49)cdr2:avssggstyyvdsvkg(seq id no:47)cdr3:etgpygppkrdy(seq id no:48)，及
‑
包含下列cdr序列的白蛋白结合isvd：cdr1:sfgms(seq id no:54)cdr2:sisgsgsdtlyadsvkg(seq id no:55)cdr3:ggslsr(seq id no:56)。
[0101]
cdr序列的此特定组合例如包含在下文中称为lrp5#9的lrp5拮抗剂中。
[0102]
在一些实施例中，在上文lrp5拮抗剂中如由isvd的cdr序列定义的这些isvd经布置使得该白蛋白结合isvd直接或间接(例如经由(a)接头肽)连接第一及第二isvd。
[0103]
在优选实施例中，上文提及的alb11 isvd的序列如下：evqlvesggglvqpgnslrlscaasgftfssfgmswvrqapgkglewvssisgsgsdtlyadsvkgrftisrdnakttlylqmnslrpedtavyyctiggslsrssqgtlvtvss(＝alb11域；＝seq id no:60)上文提及的cdr序列汇总于表1a、1b及1c中：表1a：干扰wnt3a信号传递的isvd的cdr序列：表1b：干扰wnt1信号传递的isvd的cdr序列：
表1c：结合至血清白蛋白的isvd的cdr序列(alb11域)：结合至血清白蛋白的isvd的cdr序列(alb11域)：
[0104]
本技术描述的三种优选lrp5拮抗剂如下：第一优选lrp5拮抗剂(lrp5#6)：包含以下的多肽：
‑
包含如seq id no:62中显示的氨基酸序列的第一(lrp5结合)isvd；
‑
包含如seq id no:60中显示的氨基酸序列的白蛋白结合isvd；
‑
包含如seq id no:53中显示的氨基酸序列的第二(lrp5结合)isvd；以此顺序，或以上文三个域改变的顺序。
[0105]
第二优选lrp5拮抗剂(lrp5#7)：包含以下的多肽：
‑
包含如seq id no:51中显示的氨基酸序列的第一(lrp5结合)isvd；
‑
包含如seq id no:60中显示的氨基酸序列的白蛋白结合isvd；
‑
包含如seq id no:52中显示的氨基酸序列的第二(lrp5结合)isvd；以此顺序，或以上文三个域改变的顺序。
[0106]
第三优选lrp5拮抗剂(lrp5#2)：包含以下的多肽：
‑
包含如seq id no:50中显示的氨基酸序列的第一(lrp5结合)isvd；
‑
包含如seq id no:60中显示的氨基酸序列的白蛋白结合isvd；
‑
包含如seq id no:61中显示的氨基酸序列的第二(lrp5结合)isvd；以此顺序，或以上文三个域改变的顺序。
[0107]
在甚至更具体的优选实施例中，该白蛋白结合isvd位于两个结合isvd的lrp5之间。
[0108]
上文提及的vhh的序列汇总于表2a、2b及2c中：表2a：干扰wnt3a信号传递的isvd的vhh序列：干扰wnt3a信号传递的isvd的vhh序列：表2b：干扰wnt1信号传递的isvd的vhh序列：
表2c：结合至血清白蛋白的isvd的序列(alb11域)：在本发明的优选实施例中，lrp5拮抗剂包含选自seq id no:57、58及59的序列(这些优选lrp5拮抗剂在本技术中也分别称为lrp5#6、lrp5#7及lrp5#2)，其中精确的氨基酸序列可取自下表2d：表2d：
上述lrp5拮抗剂的制造及治疗用途揭示于wo2018/220080a1中。特定而言，此文献提供制备本发明中使用的lrp5拮抗剂的方法的充分的公开内容。
[0109]
抗pd
‑
1抗体于本发明的含义内的抗pd
‑
1抗体(本技术中也称为“pd
‑
1抗体”)及其所有实施例是抑制pd
‑
1与其配体的相互作用的化合物。优选地，该抗pd
‑
1抗体是人源化或完全人类抗pd
‑
1抗体。这些抗体中的任何一者可为重组人类抗体。
[0110]
pd
‑
1基因编码55kda i型跨膜蛋白，其是ig基因超家族的一部分(agata等(1996)int immunol.8:765
‑
72)。完整的pd
‑
1序列可在基因库登录编号u64863下找到。虽然结构上类似于ctla
‑
4，但pd
‑
1缺乏myppy基质(seq id no:39)，其对b7
‑
1及b7
‑
2结合而言是重要的。
[0111]
pd
‑
1是t细胞调节因子的经扩展的cd28/ctla
‑
4家族的抑制成员。cd28家族的其他成员包括cd28、ctla
‑
4、icos及btla。提议pd
‑
1作为单体存在，缺乏其他cd28家族成员的未配对半胱氨酸残基特性。pd
‑
1表达于经活化的b细胞、t细胞及单核细胞上(okazaki等(2002)curropinimmunol 14:391779
‑
82；bennett等(2003)j.immunol.170:711
‑
8)。已识别pd
‑
1的两个配体，pd
‑
l1(b7
‑
h1)及pd
‑
l2(b7
‑
dc)，已显示其经结合至pd
‑
1即下调t细胞活化(freeman等(2000)j.exp.med.192:1027
‑
34；carter等(2002)eur.j.immunol.32:634
‑
43)。pd
‑
l1及pd
‑
l2两者均为结合至pd
‑
1的b7同源物。pd
‑
l1大量存在于各种人类癌症中(dong等(2002)nat.med.8:787
‑
9)。
[0112]
pd
‑
1被称为负调节tcr信号的免疫抑制蛋白(ishida,y.等(1992)embo j.11:3887
‑
3895；blank,c.等(2006)immunol.immunother.56(6):739
‑
745)。pd
‑
1与pd
‑
l1之间的相互作用可充当免疫检查点，其可导致(例如)肿瘤浸润的淋巴球的减少、由t细胞受体介导的增殖的减少，及/或癌细胞的免疫逃避(dong等(2003)j.mol.med.81:281
‑
7；blank等
(2005)cancer immunol.immunother.54:307
‑
314；konishi等(2004)clin.cancer res.10:5094
‑
100)。免疫抑制可通过抑制pd
‑
1与pd
‑
l1或pd
‑
l2的局部相互作用逆转；当阻断pd
‑
1与pd
‑
l1及pd
‑
l2两者的相互作用时效应为加成的(iwai等(2002)proc.nat’l.acad.sci usa 99:12293
‑
7；brown等(2003)j.immunol.170:1257
‑
66)。
[0113]
在本发明的一个方面中，抗pd
‑
1抗体由如表3中显示的序列借助于seq id编号定义的抗体pd1
‑
1、pd1
‑
2、pd
‑1‑
3、pd1
‑
4及pd1
‑
5中的任何一者，其中vh表示重链可变域，vl表示轻链可变域，hc表示(全长)重链及lc表示(全长)轻链：表3：cdr、vh、vl、hc及lc序列的seq id no且其中seq id编号的氨基酸序列(及序列名称)如下表4中显示：表4：
具体而言，本技术描述的抗pd
‑
1抗体分子包含：(a)包含seq id no:1(hcdr1)、seq id no:2(hcdr2)及seq id no:3(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:4(lcdr1)、seq id no:5(lcdr2)及seq id no:6(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr；或(b)包含seq id no:7(hcdr1)、seq id no:8(hcdr2)及seq id no:9(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:10(lcdr1)、seq id no:11(lcdr2)及seq id no:12(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr；或(c)包含seq id no:13(hcdr1)、seq id no:14(hcdr2)及seq id no:15(hcdr3)的氨基酸序列的重链cdr及包含seq id no:16(lcdr1)、seq id no:17(lcdr2)及seq id no:18(lcdr3)的氨基酸序列的轻链cdr。
[0114]
在一些实施例中，该抗pd
‑
1抗体分子包括包含选自seq id no:19、21、23、25及27的氨基酸序列的重链可变域。
[0115]
在一些实施例中，该抗pd
‑
1抗体分子包括包含选自seq id no:20、22、24、26及28的氨基酸序列的轻链可变域。
[0116]
在一些实施例中，该抗pd
‑
1抗体分子包含：
(a)包含seq id no:19的氨基酸序列的重链可变域及包含seq id no:20的氨基酸序列的轻链可变域，(b)包含seq id no:21的氨基酸序列的重链可变域及包含seq id no:22的氨基酸序列的轻链可变域，(c)包含seq id no:23的氨基酸序列的重链可变域及包含seq id no:24的氨基酸序列的轻链可变域，(d)包含seq id no:25的氨基酸序列的重链可变域及包含seq id no:26的氨基酸序列的轻链可变域，或(e)包含seq id no:27的氨基酸序列的重链可变域及包含seq id no:28的氨基酸序列的轻链可变域。
[0117]
在一些实施例中，该抗pd
‑
1抗体包含：(a)包含seq id no:29的氨基酸序列的重链及包含seq id no:30的氨基酸序列的轻链，(b)包含seq id no:31的氨基酸序列的重链及包含seq id no:32的氨基酸序列的轻链，(c)包含seq id no:33的氨基酸序列的重链及包含seq id no:34的氨基酸序列的轻链，(d)包含seq id no:35的氨基酸序列的重链及包含seq id no:36的氨基酸序列的轻链，或(e)包含seq id no:37的氨基酸序列的重链及包含seq id no:38的氨基酸序列的轻链。
[0118]
在优选实施例中，该抗pd
‑
1抗体pd1
‑
1。
[0119]
在优选实施例中，该抗pd
‑
1抗体pd1
‑
2。
[0120]
在优选实施例中，该抗pd
‑
1抗体pd1
‑
3。
[0121]
在优选实施例中，该抗pd
‑
1抗体pd1
‑
4。
[0122]
在优选实施例中，该抗pd
‑
1抗体pd1
‑
5。
[0123]
在一个方面中，本发明提供一种治疗及/或预防过度增生性疾病，优选癌症的方法，其包括向有此需要的病患投与治疗有效量的lrp5拮抗剂(例如如由表1a、1b、1c、2a、2b、2c的cdr及/或vhh序列定义的lrp5#1、lrp5#2、lrp5#3、lrp5#4、lrp5#5、lrp5#6、lrp5#7、lrp5#8、lrp5#9中的任何一者)及治疗有效量的抗pd
‑
1抗体(例如，如由表3及4的cdr及/或vh/vl序列定义的pd1
‑
1、pd1
‑
2、pd1
‑
3、pd1
‑
4、pd1
‑
5中的任何一者)。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:29的氨基酸序列的重链及包含seq id no:30的氨基酸序列的轻链。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:31的氨基酸序列的重链及包含seq id no:32的氨基酸序列的轻链。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:33的氨基酸序列的重链及包含seq id no:34的氨基酸序列的轻链。
[0124]
在另一方面中，本发明提供本技术描述的lrp5拮抗剂(例如如由表1a、1b、1c、2a、
2b、2c的cdr及/或vhh序列定义的lrp5#1、lrp5#2、lrp5#3、lrp5#4、lrp5#5、lrp5#6、lrp5#7、lrp5#8、lrp5#9中的任何一者)与本技术描述的抗pd
‑
1抗体(例如，如由表3及4的cdr及/或vh/vl序列定义的pd1
‑
1、pd1
‑
2、pd1
‑
3、pd1
‑
4、pd1
‑
5中的任何一者)的组合，尤其用于治疗及/或预防过度增生性疾病，优选癌症的方法中，其中该方法包括向将有此需要的病患投与治疗有效量的该组合。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:29的氨基酸序列的重链及包含seq id no:30的氨基酸序列的轻链。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:31的氨基酸序列的重链及包含seq id no:32的氨基酸序列的轻链。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:33的氨基酸序列的重链及包含seq id no:34的氨基酸序列的轻链。
[0125]
在另一方面中，本发明涉及本技术描述的lrp5拮抗剂(例如如由表1a、1b、1c、2a、2b、2c的cdr及/或vhh序列定义的lrp5#1、lrp5#2、lrp5#3、lrp5#4、lrp5#5、lrp5#6、lrp5#7、lrp5#8、lrp5#9中的任何一者)，其用于治疗及/或预防过度增生性疾病，优选癌症的方法中，其中该方法包括将向有此需要的病患投与在与本技术描述的抗pd
‑
1抗体(例如，如由表3及4的cdr及/或vh/vl序列定义的pd1
‑
1、pd1
‑
2、pd1
‑
3、pd1
‑
4、pd1
‑
5中的任何一者)的组合中的治疗有效量的该lrp5拮抗剂。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:29的氨基酸序列的重链及包含seq id no:30的氨基酸序列的轻链。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:31的氨基酸序列的重链及包含seq id no:32的氨基酸序列的轻链。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:33的氨基酸序列的重链及包含seq id no:34的氨基酸序列的轻链。
[0126]
在另一方面中，本发明涉及本技术描述的抗pd
‑
1抗体(例如，如由表3及4的cdr及/或vh/vl序列定义的pd1
‑
1、pd1
‑
2、pd1
‑
3、pd1
‑
4、pd1
‑
5中的任何一者)，其用于治疗及/或预防过度增生性疾病，优选癌症的方法中，其中该方法包括将向有此需要的病患投与治疗有效量的该抗pd
‑
1抗体与本技术描述的lrp5拮抗剂(例如如由表1a、1b、1c、2a、2b、2c的cdr及/或vhh序列定义的lrp5#1、lrp5#2、lrp5#3、lrp5#4、lrp5#5、lrp5#6、lrp5#7、lrp5#8、lrp5#9中的任何一者)的组合。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:29的氨基酸序列的重链及包含seq id no:30的氨基酸序列的轻链。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:31的氨基酸序列的重链及包含seq id no:32的氨基酸序列的轻链。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:33的氨基酸序列的重链及包含seq id no:34的氨基酸序列的轻链。
[0127]
在另一方面中，本发明涉及试剂盒，其在一或多个容器中包含：
·
包含本技术描述的lrp5拮抗剂(例如如由表1a、1b、1c、2a、2b、2c的cdr及/或vhh序列定义的lrp5#1、lrp5#2、lrp5#3、lrp5#4、lrp5#5、lrp5#6、lrp5#7、lrp5#8、lrp5#9中的任何一者)，及任选地一或多种医药上可接受的载剂、赋形剂及/或媒剂的第一医药组合物
或剂型，及
·
包含如本技术描述的抗pd
‑
1抗体(例如，如由表3及4的cdr及/或vh/vl序列定义的pd1
‑
1、pd1
‑
2、pd1
‑
3、pd1
‑
4、pd1
‑
5中的任何一者)，及任选地一或多种医药上可接受的载剂、赋形剂及/或媒剂的第二医药组合物或剂型；
·
及任选地包含印刷说明书的包装插页。
[0128]
在本发明的试剂盒的优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:29的氨基酸序列的重链及包含seq id no:30的氨基酸序列的轻链。在本发明的试剂盒的优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:31的氨基酸序列的重链及包含seq id no:32的氨基酸序列的轻链。在本发明的试剂盒的优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:33的氨基酸序列的重链及包含seq id no:34的氨基酸序列的轻链。
[0129]
优选地，该包装插页包含用于如本技术描述，在有此需要的病患中，用于同时、并行、依序、连续、交替或分别，治疗及/或预防过度增生性疾病，特定而言的癌症的印刷说明书。
[0130]
在另一方面中，本发明涉及用于治疗及/或预防过度增生性疾病，优选癌症的方法中的上述试剂盒，如本技术描述。
[0131]
在另一方面中，本发明涉及包含以下的医药组合物：
·
本技术描述的lrp5拮抗剂(例如如由表1a、1b、1c、2a、2b、2c的cdr及/或vhh序列定义的lrp5#1、lrp5#2、lrp5#3、lrp5#4、lrp5#5、lrp5#6、lrp5#7、lrp5#8、lrp5#9中的任何一者)，
·
本技术描述的抗pd
‑
1抗体(例如，如由表3及4的cdr及/或vh/vl序列定义的pd1
‑
1、pd1
‑
2、pd1
‑
3、pd1
‑
4、pd1
‑
5中的任何一者)，及
·
任选地，一或多种医药上可接受的载剂、赋形剂及/或媒剂。
[0132]
在本发明的医药组合物的优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:29的氨基酸序列的重链及包含seq id no:30的氨基酸序列的轻链。在该医药组合物的优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:31的氨基酸序列的重链及包含seq id no:32的氨基酸序列的轻链。在该医药组合物的优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:33的氨基酸序列的重链及包含seq id no:34的氨基酸序列的轻链。
[0133]
在另一方面中，本发明涉及本技术描述的lrp5拮抗剂(例如如由表1a、1b、1c、2a、2b、2c的cdr及/或vhh序列定义的lrp5#1、lrp5#2、lrp5#3、lrp5#4、lrp5#5、lrp5#6、lrp5#7、lrp5#8、lrp5#9中的任何一者)用于制备用于治疗及/或预防过度增生性疾病，优选癌症的方法中的医药组合物的用途，如本技术描述，其中该lrp5拮抗剂将与如本技术描述的pd
‑
1抗体(例如，如由表3及4的cdr及/或vh/vl序列定义的pd1
‑
1、pd1
‑
2、pd1
‑
3、pd1
‑
4、pd1
‑
5中的任何一者)组合使用。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58
或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:29的氨基酸序列的重链及包含seq id no:30的氨基酸序列的轻链。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:31的氨基酸序列的重链及包含seq id no:32的氨基酸序列的轻链。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:33的氨基酸序列的重链及包含seq id no:34的氨基酸序列的轻链。
[0134]
在另一方面中，本发明涉及如本技术描述的pd
‑
1抗体(例如，如由表3及4的cdr及/或vh/vl序列定义的pd1
‑
1、pd1
‑
2、pd1
‑
3、pd1
‑
4、pd1
‑
5中的任何一者)用于制备用于治疗及/或预防过度增生性疾病，优选癌症的方法中的医药组合物的用途，如本技术描述，其中该pd
‑
1拮抗剂将与本技术描述的lrp5拮抗剂(例如如由表1a、1b、1c、2a、2b、2c的cdr及/或vhh序列定义的lrp5#1、lrp5#2、lrp5#3、lrp5#4、lrp5#5、lrp5#6、lrp5#7、lrp5#8、lrp5#9中的任何一者)组合使用。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:29的氨基酸序列的重链及包含seq id no:30的氨基酸序列的轻链。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:31的氨基酸序列的重链及包含seq id no:32的氨基酸序列的轻链。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:33的氨基酸序列的重链及包含seq id no:34的氨基酸序列的轻链。
[0135]
在另一方面中，本发明涉及lrp5拮抗剂(例如表1a、1b、1c、2a、2b、2c的cdr及/或vhh序列所定义的lrp5#1、lrp5#2、lrp5#3、lrp5#4、lrp5#5、lrp5#6、lrp5#7、lrp5#8、lrp5#9中的任一者)及pd
‑
1抗体(例如表3及4的cdr及/或vh/vl序列所定义的pd1
‑
1、pd1
‑
2、pd1
‑
3、pd1
‑
4、pd1
‑
5中的任一者)用于制备用于治疗及/或预防过度增生性疾病(优选癌症，如本技术所述)的方法中的医药组合物的用途。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:29的氨基酸序列的重链及包含seq id no:30的氨基酸序列的轻链。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:31的氨基酸序列的重链及包含seq id no:32的氨基酸序列的轻链。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:33的氨基酸序列的重链及包含seq id no:34的氨基酸序列的轻链。
[0136]
在另一方面中，本发明涉及根据本发明的组合、医药组合物或试剂盒，各如本技术所述，包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：lrp5拮抗剂(例如表1a、1b、1c、2a、2b、2c的cdr及/或vhh序列所定义的lrp5#1、lrp5#2、lrp5#3、lrp5#4、lrp5#5、lrp5#6、lrp5#7、lrp5#8、lrp5#9中的任一者)及抗pd
‑
1抗体(例如表3及4的cdr及/或vh/vl序列所定义的pd1
‑
1、pd1
‑
2、pd1
‑
3、pd1
‑
4、pd1
‑
5中的任一者)，用于治疗及/或预防过度增生性疾病(优选癌症，如本技术所述)的方法中。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:29的氨基酸序列的重链及包含seq id no:30的氨基酸序列的轻链。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:
31的氨基酸序列的重链及包含seq id no:32的氨基酸序列的轻链。在优选实施例中，该lrp5拮抗剂包含seq id no:57、seq id no:58或seq id no:59的氨基酸序列及该pd
‑
1抗体包括包含seq id no:33的氨基酸序列的重链及包含seq id no:34的氨基酸序列的轻链。
[0137]
关于lrp5拮抗剂lrp5#1、lrp5#2、lrp5#3、lrp5#4、lrp5#5、lrp5#6、lrp5#7、lrp5#8、lrp5#9的实施例与关于pd
‑
1拮抗剂pd1
‑
1、pd1
‑
2、pd1
‑
3、pd1
‑
4、pd1
‑
5的实施例的排列导致应全部视为经明确公开的具体组合及本发明的实施例及其用于使用的组合、组合物、试剂盒、方法、用途及化合物中的所有，包括如下文详细说明的应用特定投与的方法/给药方案及/或用于治疗如下文详细描述的特定癌症的方法。
[0138]
用于如本技术描述的lrp5拮抗剂及/或抗pd1抗体的投与途径包括(但不限于)非经肠(例如肌内、腹膜内、静脉内、经皮或皮下注射或植入)、经口、经肠胃、经鼻、经阴道、经直肠或局部投与。在优选实施例中，投与途径静脉内投与，尤其静脉内输注或注射。本发明的化合物可单独或一起调配成含有适用于各投与途径的常规无毒医药上可接受的载剂、赋形剂及/或媒剂的合适的剂量单位调配物。更优选地，调配物包括固体、半固体或液体剂型，例如冻干剂、液体溶液(例如可注射及可输注溶液)、分散液或悬浮液、脂质体及栓剂。优选模式取决于预期投与模式及治疗应用。尤其优选的实施例包括液体调配物及冻干剂。在冻干剂的情况下，冻干物可在液体(优选水)中重构。
[0139]
如本技术描述，抗pd
‑
1抗体的投与可(例如)通过注射(例如皮下或静脉内)，以约0.1至30mg/kg的病患体重，例如约0.5至25mg/kg的病患体重、约1至20mg/kg的病患体重、约2至5mg/kg的病患体重，或约3mg/kg的病患体重的剂量。
[0140]
在一些实施例中，抗pd
‑
1抗体以约10至20mg/kg的病患体重的剂量每两周投与。抗体分子可通过静脉内输注以大于20mg/min，例如，20至40mg/min，及通常大于或等于40mg/min的速率投与以达成约35至440mg/m2，通常约70至310mg/m2，及更通常，约110至130mg/m2的剂量。在一些实施例中，约110至130mg/m2的输注速率达成约3mg/kg的病患体重的浓度。在其他实施例中，该抗体分子可通过静脉内输注以小于10mg/min，例如，小于或等于5mg/min的速率投与以达成约1至100mg/m2，例如，约5至50mg/m2、约7至25mg/m2，或约10mg/m2的剂量。在一些实施例中，该抗体输注约30min的时间。
[0141]
用于本技术描述的抗pd
‑
1抗体的优选剂量方案包括经由静脉内投与1mg/kg的病患体重或者3mg/kg的病患体重，及该抗体每三周或每四周给定。
[0142]
本技术描述的lrp5拮抗剂或包含其的组合物可(例如)静脉内(i.v.)、皮下(s.c.)、肌内(i.m.)、腹膜内(i.p.)、透皮、经口、舌下(例如以置于舌下及通过黏膜吸收至舌下的毛细血管网内的舌下片剂、喷雾剂或滴剂形式)、(鼻内)经鼻(例如以鼻喷雾剂的形式及/或作为气雾剂)、局部、借助于栓剂、通过吸入或任何其他合适的方式以有效的量或剂量投与。
[0143]
本技术描述的lrp5拮抗剂将一般以在0.005与20.0mg每公斤病患体重之间，优选在0.05与10.0mg/kg/剂量之间，及更优选在0.5与10mg/kg/剂量之间的量及剂量投与，但可变化，尤其取决于将治疗的特定疾病、失调症或病症、欲使用的特定lrp5拮抗剂的效价、使用的特定投与途径及特定医药调配物或组合物。因此，在一些情况下，使用小于上文给定的最小剂量可足够的，然而在其他情况下，可必须超过上限。当大量投与时，将其等分为分布在一天中的许多较小剂量可取的。
[0144]
应注意剂量值可随欲缓解的病症的类型及严重程度变化。应进一步了解就任何特定个体而言，具体剂量方案应根据个体需求及投与组合物或监管组合物的投与者的专业判断随时间调整。
[0145]
如本技术描述的lrp5拮抗剂及抗pd1抗体可以治疗有效量以单一剂量或以适当的时间间隔投与的分次剂量进行投与。治疗有效量指在达成所需治疗结果必需的剂量及时间周期下有效的量且为预防、减轻或治疗疾病或失调症必需的最小量。本技术描述的化合物的治疗有效量可根据例如个体的疾病状态、年龄、性别及体重，及化合物在个体中引起所需反应的能力的因素变化。治疗有效量还为其中治疗有利的效应超过化合物的任何毒性或有害效应的量。治疗有效剂量优选抑制可测量的参数，例如相对于未治疗的个体或相对于将治疗的相同个体的先前未治疗周期，抑制肿瘤生长速率至少约20％，更优选至少约40％，甚至更优选至少约60％，及仍更优选至少约80％。
[0146]
活性化合物可以在单一疗法中治疗有效的这些剂量，或以低于或高于单一疗法中使用的剂量的这些剂量投与，但当组合时导致所需(共同)的治疗有效量。此可例如适用于避免、限制或减少与一或多种物质的用途或当这些物质以其一般量使用时，同时仍获得所需医药或治疗效应的原则相关联的任何非所需的副作用。
[0147]
用于治疗中所需的本技术描述的化合物的量可适于所选的特定化合物、投与途径、治疗中的病症的性质及病患的年龄及病症且最终将由主治医师或临床医生自由裁量。同样，本技术描述的化合物的剂量可取决于靶细胞、肿瘤、组织、植入物或器官进行调整。
[0148]
两者均如本技术描述的lrp5拮抗剂或抗pd
‑
1抗体的所需剂量可作为每次投与固定量或作为推注投与，以在病患中达成设定血液浓度。
[0149]
在本发明内，将知晓lrp5拮抗剂及抗pd1抗体可依赖地(即，一起混合成一种组合物)或独立地(即，作为不同组合物)调配投与，其中此投与在病患体内提供两种化合物的治疗有效浓度。后者还适用于鸡尾酒疗法，例如三种或更多种活性剂的投与。换言之，该lrp5拮抗剂及抗pd1抗体可作为相同医药组合物/剂型的一部分，或优选地，以不同医药组合物/剂型投与。就以不同医药组合物/剂型投与而言，应了解根据本发明该投与设想活性剂或组分的同时、并行、依序或交替投与。
[0150]
术语“同时”(本技术中还称为“伴随”)指大体上同时投与化合物/组合物两者。
[0151]
并行投与包括在相同一般时间周期内投与活性剂，例如同一天但未必同时。
[0152]
依序投与包括在第一时间周期内(例如在几小时、几天或一周内)使用一或多个剂量投与一种药剂，接着在第二时间周期内(例如在几小时、几天或一周内)使用一或多个剂量投与另一药剂。也可采用重叠的时间表，其包括在治疗周期内的不同天，未必根据规则依序投与活性剂。或者，还设想连续投与，一旦完成第一化合物的投与，立即进行第二投与步骤。本领域技术人员已知如何确定第一投与步骤的完成，借此使得其可确定适用于开始第二投与步骤的时间点。
[0153]
交替投与包括在一段时间内投与一种药剂，例如在几小时、几天或一周内，接着在后续时间周期内投与另一药剂，例如在几小时、几天或一周内，及然后将模式重复一或多个周期，其中重复的总次数取决于所选剂量方案。
[0154]
也可采用这些一般指导方针的变化，例如根据所用的药剂及个体的病症。
[0155]
在本发明的优选实施例中，在根据本发明的方法中，各如本技术描述的lrp5拮抗
剂及抗pd1抗体在第一周期内同时或并行(例如，通过静脉内输注或皮下)投与，接着在第二周期内，投与抗pd1抗体(例如，通过静脉内输注或皮下)及未投与lrp5拮抗剂。
[0156]
在一些实施例中，第一周期为3或6周，当lrp5拮抗剂及pd1抗体每三周投与。
[0157]
在一些实施例中，第一周期为4或8周，当lrp5拮抗剂及pd1抗体每四周投与。
[0158]
尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#2及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
1，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。
[0159]
尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#6及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
1，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。
[0160]
尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#7及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
1，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。
[0161]
尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#2及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
2，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。
[0162]
尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#6及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
2，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。
[0163]
尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#7及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
2，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。
[0164]
尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#2及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
3，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。
[0165]
尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#6及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
3，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。
[0166]
尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#7及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
3，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难
治性或抗性的任何实体瘤。
[0167]
在本发明的另一优选实施例中，如本技术描述的lrp5拮抗剂及抗pd1抗体在第一周期内每三周(例如3或6周)一起投与(通过静脉内输注或皮下同时或并行)及然后投与抗pd1抗体，例如，在第二周期内每三周(例如，通过静脉内输注或皮下)投与。例如，该lrp5拮抗剂及抗pd1抗体在(i)第1周内或(ii)在第1周及第4周内同时或并行(例如，通过静脉内输注或皮下)投与，及然后(例如)在第7、10周及任何后续第三周(第13、16周等)内投与pd1抗体，直至治疗结束。在选择(i)的情况下，该pd1抗体已在第4周内单独投与(即，代替如在选择(ii)中，与lrp5拮抗剂组合投与)。
[0168]
尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#2及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
1，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#6及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
1，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#7及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
1，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#2及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
2，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#6及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
2，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#7及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
2，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#2及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
3，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#6及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
3，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#7及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
3，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。
[0169]
在本发明的另一优选实施例中，如本技术描述的lrp5拮抗剂及抗pd1抗体在第一周期内每四周(例如4或8周)一起投与(通过静脉内输注或皮下同时或并行)及然后投与抗
pd1抗体，例如，在第二周期内每四周(例如，通过静脉内输注或皮下)投与。例如，该lrp5拮抗剂及抗pd1抗体在(i)第1周内或(ii)在第1周及第5周内同时或并行(例如，通过静脉内输注或皮下)投与，及然后(例如)在第9、13周及任何后续第四周(第17、21周等)内投与pd1抗体，直至治疗结束。在选择(i)的情况下，该pd1抗体已在第5周内单独投与(即，代替如在选择(ii)中，与lrp5拮抗剂组合投与)。
[0170]
尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#2及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
1，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#6及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
1，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#7及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
1，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#2及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
2，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#6及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
2，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#7及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
2，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#2及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
3，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#6及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
3，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#7及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
3，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。
[0171]
优选地，如本技术描述的lrp5拮抗剂(例如，以约0.5至10mg/kg的病患体重的剂量)及如本技术描述的抗pd1抗体(例如以2、3、4或5mg/kg的病患体重中的任何一者的剂量)在第一周期内每三或四周(例如对应于1或2个剂量)一起投与(通过静脉内输注或皮下同时或并行)及然后投与抗pd1抗体，例如在第二周期内每隔三或四周(例如，通过静脉内输注或皮下)投与。
[0172]
尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#2及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
1，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#6及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
1，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#7及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
1，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#2及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
2，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#6及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
2，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#7及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
2，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#2及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
3，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#6及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
3，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。尤其优选地，采用此投与时间表以lrp5拮抗剂为lrp5#7及抗pd
‑
1抗体为pd1
‑
3，甚至更优选地，其用于治疗胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌或肺癌(包括对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的胃肠道癌、黑色素瘤、膀胱癌及肺癌)或对检查点抑制剂疗法而言为难治性或抗性的任何实体瘤。
[0173]
在本发明的一些实施例中，如本技术描述的lrp5拮抗剂及抗pd1抗体在第一周期内每三或四周(例如对应于1或2个剂量)一起投与(通过静脉内输注或皮下同时或并行)及然后在第二周期内每周、每隔一周、每三周或每月投与(例如，通过静脉内输注或皮下)抗pd1抗体。
[0174]
取决于欲治疗的疾病，如本技术定义的组合疗法可单独使用或与一或多种额外治疗剂，特定而言的选自抑制癌细胞中的血管生成、信号转导通路或有丝分裂检查点的化学治疗剂或治疗活性化合物进一步组合。
[0175]
额外治疗剂可与lrp5拮抗剂及/或pd1抗体同时投与，任选地作为相同医药制剂的组分，或在投与lrp5拮抗剂及/或pd1抗体之前或之后投与。
[0176]
这/这些额外治疗剂可(各)选自下列(不限于此)：
·
免疫治疗剂，例如下列检查点抑制剂的调节物：tim3、pd
‑
l1、pd
‑
l2、ctla
‑
4、vista、btla、tigit、cd160、lair1、2b4、ceacam；
·
癌症疫苗；
·
dna破坏剂；
·
血管生成的抑制剂；
·
信号转导通路的抑制剂；
·
有丝分裂检查点的抑制剂；及激素、激素类似物及抗激素(例如他莫昔芬(tamoxifen)、托瑞米芬(toremifene)、雷洛昔芬(raloxifene)、氟维司群(fulvestrant)、乙酸甲地孕酮(megestrol acetate)、氟他胺(flutamide)、尼鲁米特(nilutamide)、比卡鲁胺(bicalutamide)、氨基导眠能(aminoglutethimide)、乙酸环丙孕酮(cyproterone acetate)、非那雄胺(finasteride)、乙酸布塞林(buserelin acetate)、氟可的松(fludrocortisone)、氟甲睾酮(fluoxymesterone)、甲羟孕酮(medroxyprogesterone)、奥曲肽(octreotide))、芳香酶抑制剂(例如阿那曲唑(anastrozole)、来曲唑(letrozole)、利拉唑(liarozole)、伏洛唑(vorozole)、依西美坦(exemestane)、阿他美坦(atamestane))、lhrh促效剂及拮抗剂(例如乙酸戈舍瑞林(goserelin acetate)、亮丙瑞林(luprolide))、生长因子抑制剂(生长因子，例如“血小板衍生的生长因子(pdgf)”、“成纤维细胞生长因子(fgf)”、“血管内皮生长因子(vegf)”、“表皮生长因子(egf)”、“胰岛素样生长因子(igf)”、“人类表皮生长因子(her，例如her2、her3、her4)”及“肝细胞生长因子(hgf)”)，抑制剂是例如“生长因子”抗体、“生长因子受体”抗体及酪氨酸激酶抑制剂，例如例如西妥昔单抗(cetuximab)、吉非替尼(gefitinib)、伊马替尼(imatinib)、拉帕替尼(lapatinib)、博舒替尼(bosutinib)及曲妥珠单抗(trastuzumab))；抗代谢物(例如抗叶酸剂，例如甲氨喋呤(methotrexate)、雷替曲塞(raltitrexed)、嘧啶类似物，例如5
‑
氟尿嘧啶(5
‑
fu)、卡培他滨(capecitabine)及吉西他滨(gemcitabine)、嘌呤及腺苷类似物，例如巯基嘌呤(mercaptopurine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)、克拉屈滨(cladribine)及喷司他丁(pentostatin)、阿糖胞苷(cytarabine)(ara c)、氟达拉滨(fludarabine))；抗肿瘤抗生素(例如蒽环类药物，例如多柔比星(doxorubicin)、阿霉素(doxil)(聚乙二醇化脂质体多柔比星盐酸盐、柔比星(myocet)(非聚乙二醇化脂质体多柔比星)、柔红霉素(daunorubicin)、表柔比星(epirubicin)及伊达比星(idarubicin)、丝裂霉素
‑
c(丝裂霉素(mitomycin)
‑
c)、博来霉素(bleomycin)、放线菌素(dactinomycin)、普卡霉素(plicamycin)、链脲菌素(streptozocin))；铂衍生物(例如顺铂(cisplatin)、奥沙利铂(oxaliplatin)、卡铂(carboplatin))；烷化剂(例如雌莫司汀(estramustin)、甲氯乙胺(meclorethamine)、美法仑(melphalan)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、白消安(busulphan)、达喀尔巴嗪(dacarbazin)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、异环磷酰胺(ifosfamide)、替莫唑胺(temozolomide)、亚硝基脲，例如卡莫司汀(carmustin)及洛莫司汀(lomustin)、噻替哌(thiotepa))；抗有丝分裂剂(例如长春花生物碱(vinca alkaloid)例如长春花碱(vinblastine)、长春地辛(vindesin)、长春瑞滨(vinorelbin)及长春新碱(vincristine)；及紫杉烷类例如紫杉醇(paclitaxel)、多西他赛(docetaxel))；血管生成抑制剂(例如他喹莫德(tasquinimod))、微管蛋白抑制剂；dna合成抑制剂(例如沙巴他滨(sapacitabine))、
parp抑制剂、拓扑异构酶抑制剂(例如表鬼臼毒素(epipodophyllotoxin)例如依托泊苷(etoposide)及依托泊磷(etopophos)、替尼泊苷(teniposide)、胺沙林(amsacrin)、拓扑替康(topotecan)、伊立替康(irinotecan)、米托蒽醌(mitoxantrone))、丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂(例如pdk 1抑制剂、raf抑制剂、a
‑
raf抑制剂、b
‑
raf抑制剂、c
‑
raf抑制剂、mtor抑制剂、mtorc1/2抑制剂、pi3k抑制剂、pi3kα抑制剂、双重mtor/pi3k抑制剂、stk 33抑制剂、akt抑制剂、plk 1抑制剂、cdk的抑制剂、aurora激酶抑制剂)、酪氨酸激酶抑制剂(例如ptk2/fak抑制剂)、蛋白质蛋白质相互作用抑制剂(例如iap活化剂、mcl
‑
1、mdm2/mdmx)、mek抑制剂(例如匹马赛替尼(pimasertib))、erk抑制剂、flt3抑制剂(例如奎扎替尼(quizartinib))、brd4抑制剂、igf
‑
1r抑制剂、trailr2促效剂、bcl
‑
xl抑制剂、bcl
‑
2抑制剂(例如维奈托克(venetoclax))、bcl
‑
2/bcl
‑
xl抑制剂、erbb受体抑制剂、bcr
‑
abl抑制剂、abl抑制剂、src抑制剂、雷帕霉素(rapamycin)类似物(例如依维莫司(everolimus)、西罗莫司(temsirolimus)、地磷莫司(ridaforolimus)、西罗莫司(sirolimus))，雄激素合成抑制剂(例如阿比特龙(abiraterone)、tak
‑
700)，雄激素受体抑制剂(例如恩杂鲁胺(enzalutamide)、arn
‑
509)、免疫疗法(例如西普赛尔
‑
t(sipuleucel
‑
t))、dnmt抑制剂(例如sgi 110、替莫唑胺、沃沙罗辛(vosaroxin))、hdac抑制剂(例如伏立诺他(vorinostat)、恩替司他(entinostat)、普罗斯奈塞(pracinostat)、帕比司他(panobinostat))、ang1/2抑制剂(例如特班尼布(trebananib))、cyp17抑制剂(例如加利酮(galeterone))、放射性药物(例如镭
‑
223、氯化镭
‑
223(alpharadin))、免疫治疗剂(例如基于痘病毒的疫苗、伊匹单抗(ipilimumab)、免疫检查点抑制剂)及各种化学治疗剂例如氨磷汀(amifostin)、阿那格雷利德(anagrelid)、氯膦酸盐(clodronat)、非格司亭(filgrastin)、干扰素、干扰素α、亚叶酸(leucovorin)、利妥昔单抗(rituximab)、前卡巴嗪(procarbazine)、左旋咪唑(levamisole)、美司钠(mesna)、米托坦(mitotane)、帕米膦酸(pamidronate)及卟吩姆(porfimer)；2
‑
氯脱氧腺苷、2
‑
氟脱氧胞苷、2
‑
甲氧基雌二醇、2c4、3
‑
阿勒欣(3
‑
alethine)、131
‑
i
‑
tm
‑
601、3cpa、7
‑
乙基
‑
10
‑
羟基喜树碱、16
‑
氮杂
‑
埃博霉素b、abt
‑
199、abt
‑
263/纳维托克斯(navitoclax)、abt
‑
737、a 105972、a 204197、阿地白介素(aldesleukin)、阿立塞替(alisertib)/mln8237、阿利维甲酸(alitretinoin)、异维菌素
‑
7(allovectin
‑
7)、六甲蜜胺(altretamine)、艾尔考地比(alvocidib)、阿莫那肽(amonafide)、蒽吡唑(anthrapyrazole)、ag
‑
2037、ap
‑
5280、阿帕喹酮(apaziquone)、阿波明(apomine)、阿拉伯糖(aranose)、精蛋白(arglabin)、阿佐昔芬(arzoxifene)、阿他美坦、阿曲生坦(atrasentan)、澳瑞他汀pe(auristatin pe)、avlb、az10992、abx
‑
egf、amg
‑
479(加尼他单抗(ganitumab))、amg
‑
232、amg
‑
511、amg 2520765、amg 2112819、arry 162、arry 438162、arry
‑
300、arry
‑
142886/azd
‑
6244(司美替尼(selumetinib))、arry
‑
704/azd
‑
8330、atsp
‑
7041、ar
‑
12、ar
‑
42、as
‑
703988、axl
‑
1717、azd
‑
1480、azd
‑
4547、azd
‑
8055、azd
‑
5363、azd
‑
6244、azd
‑
7762、arq
‑
736、arq 680、as
‑
703026(普瑞马替尼(primasertib))、阿瓦斯汀(avastin)、azd
‑
2014、阿扎胞苷(azacitidine)(5
‑
氮杂)、氮杂蒽酮b、阿佐那非(azonafide)、巴拉塞替尼(barasertib)/azd1152、bay
‑
43
‑
9006、bay 80
‑
6946、bbr
‑
3464、bbr
‑
3576、贝伐单抗(bevacizumab)、bez
‑
235/达索替尼(dactolisib)、二柠檬酸双利哥达(biricodar dicitrate)、比瑞纳潘(birinapant)、bcx
‑
1777、bkm
‑
120/布帕利布(buparlisib)、博莱霉素(bleocin)、blp
‑
25、bms
‑
184476、bms
‑
247550、bms
‑
188797、bms
‑
275291、bms
‑
663513、bms
‑
754807、bnp
‑
1350、bnp
‑
7787、bibw 2992/阿法替尼(afatinib)、bibf 1120/尼达尼布(nintedanib)、bi 836845、bi 2536、bi 6727/伏拉塞替(volasertib)、bi 836845、bi 847325、bi 853520、biib
‑
022、博来霉素酸、博来霉素a、博来霉素b、布里瓦尼(brivanib)、苔藓虫素
‑
1、硼替佐米(bortezomib)、溴霉素(brostallicin)、白消安、byl
‑
719/阿培利司(alpelisib)、ca
‑
4前药、ca
‑
4、卡巴他赛(cabazitaxel)、卡博替尼(cabozantinib)、帽细胞(capcell)、骨化三醇(calcitriol)、卡奈替(canertinib)、甘草磷酰胺(canfosfamide)、卡培他滨、羧酞铂(carboxyphthalatoplatin)、cci
‑
779、cc
‑
115、cc
‑
223、cep
‑
701、cep
‑
751、cbt
‑
1头孢克肟(cbt
‑
1cefixime)、高三尖杉酯碱(ceflatonin)、头孢曲松(ceftriaxone)、塞来昔布(celecoxib)、西莫白介素(celmoleukin)、赤霉素(cemadotin)、cgm
‑
097、ch4987655/ro
‑
4987655、氯三苯胺(chlorotrianisene)、西仑吉肽(cilengitide)、环孢素(ciclosporin)、cd20抗体、cda
‑
ii、cdc
‑
394、ckd
‑
602、cki
‑
27、氯法拉滨(clofarabine)、秋水仙素(colchicin)、康他汀a4(combretastatin a4)、cot抑制剂、chs
‑
828、ch
‑
5132799、cll
‑
thera、cmt
‑
3隐藻素52、cpi
‑
613、ctp
‑
37、ctla
‑
4单克隆抗体(例如伊匹单抗)、cp
‑
461、克唑替尼(crizotinib)、cv
‑
247、氰基吗啉多柔比星、阿糖胞苷、d 24851、达沙替尼(dasatinib)、地西他滨(decitabine)、亚德里亚霉素(deoxorubicin)、脱氧柔红霉素(deoxyrubicin)、脱氧福霉素(deoxycoformycin)、缩肽(depsipeptide)、脱氧埃博霉素b、地塞米松(dexamethasone)、右雷佐生(dexrazoxanet)、己烯雌酚(diethylstilbestrol)、地氟替康(diflomotecan)、迪多克斯(didox)、dmdc、多拉司他汀10(dolastatin 10)、多拉硝唑(doranidazole)、ds
‑
7423、ds
‑
3032、e7010、e
‑
6201、依达曲酯(edatrexat)、依托肽(edotreotide)、依法西拉(efaproxiral)、依氟鸟氨酸(eflornithine)、egfr抑制剂、ekb
‑
569、ekb
‑
509、恩扎妥林(enzastaurin)、伊利司莫(elesclomol)、依沙芦星(elsamitrucin)、埃博霉素b、依帕珠单抗(epratuzumab)、epz
‑
004777、er
‑
86526、厄洛替尼(erlotinib)、et
‑
18
‑
och3、乙炔基胞苷、乙炔基雌二醇、依沙替康(exatecan)、甲磺酸依沙替康、依西美坦、依昔舒林(exisulind)、芬维a胺(fenretinide)、菲珠单抗(figitumumab)、氟尿苷(floxuridine)、叶酸(folic acid)、folfox、folfox4、folfiri、福美坦(formestane)、福他替尼(fostamatinib)、替莫司汀(fotemustine)、加拉比星(galarubicin)、麦芽酚镓(gallium maltolate)、甘菊糖蛋白(ganetespib)、吉非替尼(gefinitib)、吉妥单抗(gemtuzumab)、吉妥单抗奥佐米星(gemtuzumabozogamicin)、吉马坦(gimatecan)、glufosfamide、gcs
‑
ioo、gdc
‑
0623、gdc
‑
0941(pictrelisib)、gdc
‑
0980、gdc
‑
0032、gdc
‑
0068、gdc
‑
0349、gdc
‑
0879、g17dt免疫原、gmk、gmx
‑
1778、gpx
‑
100、gp100
‑
肽疫苗、gsk
‑
5126766、gsk
‑
690693、gsk
‑
1120212(曲美替尼(trametinib))、gsk
‑
1995010、gsk
‑
2118436(达拉非尼(dabrafenib))、gsk
‑
2126458、gsk
‑
2132231a、gsk
‑
2334470、gsk
‑
2110183、gsk
‑
2141795、gsk
‑
2636771、gsk
‑
525762a/i
‑
bet
‑
762、gw2016、格拉司琼(granisetron)、赫赛汀(herceptine)、六甲基三聚氰胺(hexamethylmelamine)、组胺(histamine)、高三尖杉酯碱(homoharringtonine)、透明质酸(hyaluronic acid)、羟基脲、羟基己酸孕酮、hdm
‑
201、伊班膦酸(ibandronate)、替伊莫单抗(ibritumomab)、依鲁替尼(ibrutinib)/pci
‑
32765、依沙替林(idasanutlin)、依达曲酯(idatrexate)、依达拉西布(idelalisib)/cal
‑
101、烯雌酚(idenestrol)、idn
‑
5109、igf
‑
1r抑制剂、imc
‑
1c11、imc
‑
a12(西昔单抗(cixutumumab))、免疫学(immunol)、吲地苏兰姆(indisulam)、干扰素α
‑
2a、干扰素α
‑
2b、聚乙二醇化干扰素α
‑
2b、白介素
‑
2、ink
‑
1117、ink
‑
128、insm
‑
18、伊奥纳法尼布(ionafarnib)、异丙基铂(iproplatin)、伊洛夫林(irofulven)、异卤甲胆酸
‑
b(isohomohalichondrin
‑
b)、异黄酮(isoflavone)、异维甲酸(isotretinoin)、伊沙匹隆(ixabepilone)、jrx
‑
2、jsf
‑
154、jq
‑
1、j
‑
107088、共轭雌激素、卡哈利德f(kahalid f)、酮康唑(ketoconazole)、kw
‑
2170、kw
‑
2450、ku
‑
55933、lcl
‑
161、洛巴铂(lobaplatin)、来氟米特(leflunomide)、来那度胺(lenalidomide)、来格司亭(lenograstim)、亮丙瑞林(leuprolide)、亮波林(leuporelin)、利西多南(lexidronam)、lgd
‑
1550、利奈唑胺(linezolid)、洛伐他汀(lovastatin)、特沙弗林镥(lutetium texaphyrin)、洛美曲索(lometrexol)、氯尼达明(lonidamine)、氯黄酮(losoxantrone)、lu 223651、卢比丁(lurbinectedin)、鲁托替康(lurtotecan)、ly
‑
s6akt1、ly
‑
2780301、ly
‑
2109761/加尼西替尼(galunisertib)、马磷酰胺(mafosfamide)、马马司他(marimastat)、马丙考(masoprocol)、甲氯乙胺(mechloroethamine)、mek抑制剂、mek
‑
162、甲基睾丸激素(methyltestosteron)、甲基泼尼松龙(methylprednisolone)、medi
‑
573、men
‑
10755、mdx
‑
h210、mdx
‑
447、mdx
‑
1379、mgv、米哚妥林(midostaurin)、米诺膦酸(minodronic acid)、丝裂霉素(mitomycin)、米伏布尔(mivobulin)、mk
‑
2206、mk
‑
0646(达洛珠单抗(dalotuzumab))、mln518、mln
‑
0128、mln
‑
2480、莫特沙芬钆(motexafin gadolinium)、ms
‑
209、ms
‑
275、mx6、神经氨酸酯(neridronate)、拉替尼(neratinib)、索拉菲尼(nexavar)、新伐他汀(neovastat)、尼罗替尼(nilotinib)、尼美舒利(nimesulide)、硝酸甘油(nitroglycerin)、洛拉曲克(nolatrexed)、诺瑞林(norelin)、n
‑
乙酰半胱氨酸、nu
‑
7441 06
‑
苯甲基鸟嘌呤、奥利美生(oblimersen)、奥美拉唑(omeprazole)、奥拉帕尼(olaparib)、噬菌体(oncophage)、oncovex
gm
‑
csf
、奥米铂(ormiplatin)、奥他赛紫杉醇(ortataxel)、ox44抗体、osi
‑
027、osi
‑
906(林西替尼(linsitinib))、4
‑
1bb抗体、奥沙他唑(oxantrazole)、雌激素(oestrogen)、奥那司酮(onapristone)、帕博西尼(palbociclib)/pd
‑
0332991、帕尼单抗(panitumumab)、帕比司他、帕妥匹隆(patupilone)、帕唑帕尼(pazopanib)、吡非司亭(pegfilgrastim)、pck
‑
3145、吡非司亭、pbi
‑
1402、pbi
‑
05204、pd0325901、pd
‑
1及pd
‑
l1抗体(例如派姆单抗(pembrolizumab)、尼武单抗(nivolumab)、吡地唑单抗(pidilizumab)、medi
‑
4736/杜鲁伐单抗(durvalumab)、rg
‑
7446/阿妥珠单抗(atezolizumab))、pd
‑
616、peg
‑
紫杉醇、白蛋白稳定化紫杉醇、pep
‑
005、pf
‑
05197281、pf
‑
05212384、pf
‑
04691502、pf
‑
3758309、pha
‑
665752、pht
‑
427、p
‑
04、pkc412、p54、pi
‑
88、培利替尼(pelitinib)、培美曲塞(pemetrexed)、潘曲克斯(pentrix)、哌立福新(perifosine)、紫苏醇(perillylalcohol)、帕妥珠单抗(pertuzumab)、培维酮(pevonedistat)、pi3k抑制剂、pi3k/mtor抑制剂、pg
‑
txl、pg2、plx
‑
4032/ro
‑
5185426(威罗非尼(vemurafenib))、plx
‑
3603/ro
‑
5212054、pt
‑
100、pwt
‑
33597、px
‑
866、皮克铂(picoplatin)、新戊酰氧基甲基丁酸酯(pivaloyloxymethylbutyrate)、匹克酮(pixantrone)、苯氧二酚o(phenoxodiol o)、pki166、普来曲塞(plevitrexed)、普卡霉素、聚烯瑞尼酸(polyprenic acid)、帕那替尼(ponatinib)、泊非霉素(porfiromycin)、泊沙康唑(posaconazole)、强的松(prednisone)、泼尼松龙(prednisolone)、prt
‑
062607、奎那米德(quinamed)、奎奴普丁(quinupristin)、奎扎替尼/ac220、r115777、raf
‑
265、雷莫司琼(ramosetron)、兰皮酶(ranpirnase)、rdea
‑
119/bay 869766、rdea
‑
436、蝴蝶霉素(rebeccamycin)类似物、受体酪氨酸激酶(rtk)抑制剂、沙利度胺衍生物(revimid)、rg
‑
7167、rg
‑
7112、rg
‑
7304、rg
‑
7421、rg
‑
7321、rg
‑
7356、rg 7440、rg
‑
7775、根硫辛(rhizoxin)、rhu
‑
mab、瑞格西替林加酸盐(rigosertib rinfabate)、利塞膦酸盐(risedronate)、利妥昔单抗、罗巴单抗(robatumumab)、罗非昔布(rofecoxib)、罗米地辛(romidepsin)、ro
‑
4929097、ro
‑
31
‑
7453、ro
‑
5126766、ro
‑
5068760、rpr 109881a、红比腙(rubidazone)、鲁比替康(rubitecan)、r
‑
氟比洛芬(r
‑
flurbiprofen)、rx
‑
0201、鲁索替尼(ruxolitinib)、s
‑
9788、沙巴比星(sabarubicin)、saha、沙巴他滨、sar
‑
405838、沙格司亭(sargramostim)、赛特铂(satraplatin)、sb
‑
408075、sb
‑
431542、se
‑
015/ve
‑
015、su5416、su6668、sdx
‑
101、赛灵索(selinexor)、司马汀(semustin)、西奥骨化醇(seocalcitol)、sm
‑
11355、sn
‑
38、sn
‑
4071、sr
‑
27897、sr
‑
31747、sr
‑
13668、srl
‑
172、索拉非尼(sorafenib)、螺铂(spiroplatin)、角鲨胺(squalamine)、stf
‑
31、苯胺基异羟肟酸(suberanilohydroxamic acid)、索坦(sutent)、t 900607、t 138067、tae
‑
684、tak
‑
733、tas
‑
103、他西他林(tacedinaline)、他拉泊芬(talaporfin)、丹皮霉素(tanespimycin)、特罗凯(tarceva)、塔里基塔尔(tariquitar)、他斯索兰(tasisulam)、泰索帝(taxotere)、紫杉素(taxoprexin)、他扎罗汀(tazarotene)、替加氟(tegafur)、替莫唑胺(temozolamide)、替米尼(tesmilifene)、睾酮(testosterone)、丙酸睾酮、替米尼、四铂(tetraplatin)、河豚毒素(tetrodotoxin)、替扎西他滨(tezacitabine)、沙利度胺(thalidomide)、泰拉卢(theralux)、特罗比星(therarubicin)、胸腺法辛(thymalfasin)、胸腺素(thymectacin)、噻唑呋林(tiazofurin)、替比法尼(tipifarnib)、替拉帕明(tirapazamine)、托卡地辛(tocladesine)、拓优得(tomudex)、托莫芬(toremofin)、托司他(tosedostat)、曲贝替定(trabectedin)、transmid
‑
107、视黄酸(transretinic acid)、曲妥珠单抗(traszutumab)、曲美单抗(tremelimumab)、维甲酸(tretinoin)、三乙酰尿苷(triacetyluridine)、曲安平(triapine)、曲西立滨(triciribine)、曲美曲酯(trimetrexate)、tlk
‑
286txd 258、泰立沙(tykerb)/拉帕替尼(tyverb)、尿嘧啶(urocidin)、丙戊酸(valproic acid)、戊柔比星(valrubicin)、凡德他尼(vandetanib)、瓦他拉尼(vatalanib)、长春新碱、长春氟宁(vinflunine)、毒力素(virulizin)、维莫德吉(vismodegib)、沃沙罗辛、wx
‑
uk1、wx
‑
554、维克替比(vectibix)、xav
‑
939、卡培他滨(xeloda)、xelox、xl
‑
147、xl
‑
228、xl
‑
281、xl
‑
518/r
‑
7420/gdc
‑
0973、xl
‑
765、ym
‑
511、ym
‑
598、zd
‑
4190、zd
‑
6474、zd
‑
4054、zd
‑
0473、zd
‑
6126、zd
‑
9331、zdi839、zstk
‑
474、唑来膦酸钠(zoledronat)及佐苏圭达(zosuquidar)。
[0177]
在一些实施例中，如本技术描述的组合疗法涉及如本技术描述的lrp5拮抗剂及抗pd
‑
1抗体而无任何额外化学治疗剂。
[0178]
过度增生性疾病/癌症根据本发明使用的组合、组合物、试剂盒、用途、方法及化合物(包括所有实施方案)适用于治疗及/或预防过度增生性失调症，特别是癌症。
[0179]
在某些实施例中，根据本发明使用的组合、组合物、试剂盒、用途、方法及化合物(包括所有实施例)适用于治疗过度增生性失调症，特别是癌症。
[0180]
如本技术使用，“过度增生性疾病”指其中细胞生长增加超过正常水平的病症。例如，过度增生性疾病或失调症包括恶性疾病(例如食道癌、结肠癌、胆道癌)及非恶性疾病(例如动脉粥样硬化、良性增生、良性前列腺肥大)。
[0181]
在优选实施例中，该过度增生性失调症是癌症。
[0182]
癌症可以两种方式分类：根据其中该癌症起源的组织类型(组织学类型)及根据其中该癌症首先发展的体内主要位点或位置。其中癌症发展的最常见位点包括皮肤、肺、乳房、前列腺、结肠及直肠、子宫颈与子宫及血液腔室。
[0183]
根据本发明使用的组合、组合物、试剂盒、用途、方法及化合物(包括所有实施例)可适用于治疗各种过度增生性失调症，特别是癌症，包括(例如，但不限于)以下：
·
胃肠道癌，例如食道癌(例如，胃食道连接处癌)、胃(胃部)癌、肝细胞癌、胆道癌(例如，胆管癌)、胆囊癌、胰脏癌或结肠直肠癌(crc)；
·
黑色素瘤；
·
膀胱癌；及
·
肺癌(例如nsclc)。
[0184]
在本发明的一些实施例中，根据本发明使用的组合、组合物、试剂盒、用途、方法及化合物(包括所有实施例)用于治疗胃肠道癌，优选食道癌(例如，胃食道连接处癌)、胃(胃部)癌、肝细胞癌、胆道癌(例如，胆管癌)、胆囊癌、胰脏癌或结肠直肠癌(crc)。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
1作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症的。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
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2作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
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2作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
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3作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
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‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。
[0185]
在本发明的一些实施例中，根据本发明使用的组合、组合物、试剂盒、用途、方法及化合物(包括所有实施例)用于治疗黑色素瘤。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
1作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
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1作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
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2作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
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2作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
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3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
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3作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。
[0186]
在本发明的一些实施例中，根据本发明使用的组合、组合物、试剂盒、用途、方法及化合物(包括所有实施例)用于治疗膀胱癌。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
1作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
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2作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
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2作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
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2作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作
为lrp5拮抗剂及pd1
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3作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
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3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。
[0187]
在本发明的一些实施例中，根据本发明使用的组合、组合物、试剂盒、用途、方法及化合物(包括所有实施例)用于治疗肺癌(例如非小细胞肺癌(nsclc))。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
1作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
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1作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
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2作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
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2作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
2作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
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3作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。
[0188]
在本发明的另一实施例中，根据本发明使用的组合、组合物、试剂盒、用途、方法及化合物(包括所有实施例)用于治疗癌症病患(例如罹患(i)胃肠道癌，例如食道癌胃部癌症、肝细胞癌、胆道癌胆囊癌、胰脏癌或结肠直肠癌，(ii)黑色素瘤，(iii)膀胱癌或(iv)肺癌的病患)，其为未进行关于使用检查点抑制剂或免疫调节剂的治疗者，即，例如，未进行关于使用抗pd
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1抗体的治疗的病患。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
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1作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
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1作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
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1作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
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2作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
2作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
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2作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
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3作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
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3作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。
[0189]
在本发明的另一实施例中，根据本发明使用的组合、组合物、试剂盒、用途、方法及化合物(包括所有实施例)用于治疗癌症病患(例如罹患(i)胃肠道癌，例如食道癌胃部癌症、肝细胞癌、胆道癌胆囊癌、胰脏癌或结肠直肠癌，(ii)黑色素瘤，(iii)膀胱癌或(iv)肺癌的病患)，其为在使用检查点抑制剂或免疫调节剂的治疗期间、随后或之后复发者，即，例如，在使用pd
‑
1拮抗剂(例如抗pd
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1抗体)的治疗期间、随后或之后复发的病患。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
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1作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
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1作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
1作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
2作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
2作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
2作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
3作为抗pd
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
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1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
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‑
1抗体治疗这些癌症。
[0190]
根据本发明的组合疗法的治疗适用性可包括一线、二线、三线或其他线治疗病患(例如罹患(i)胃肠道癌例如食道癌、胃部癌症、肝细胞癌、胆道癌胆囊癌、胰脏癌或结肠直肠癌，(ii)黑色素瘤，(iii)膀胱癌或(iv)肺癌的病患)。该癌症对一或多种抗癌治疗而言可为转移性、周期性、复发性、抗性或难治性的。因此，这些病患可未进行治疗，或可已接受一或多种先前抗癌疗法，这些疗法仍未完全治愈该疾病。
[0191]
复发及/或对一或多种抗癌剂(例如组合的单一组分，或标准化学治疗剂)具有抗性的病患也适合根据本发明的组合治疗，例如适合二线或三线治疗周期(任选地与一或多种其他抗癌剂进一步组合)，例如作为附加组合或作为替代治疗。
[0192]
因此，本技术揭示的本发明的组合疗法中的一些在治疗个体(例如罹患(i)胃肠道癌，例如食道癌、胃部癌症、肝细胞癌、胆道癌胆囊癌、胰脏癌或结肠直肠癌，(ii)黑色素瘤，(iii)膀胱癌或(iv)肺癌的病患)时是有效的，这些个体的癌症已复发，或这些个体的癌症已变得耐药或多药耐药，或使用一或多种抗癌剂(例如组合的单一组分，或标准化学治疗剂)的单一疗法或组合疗法的一线、二线或更多线已对这些个体的癌症不起作用。
[0193]
对抗癌药物具有初始反应的癌症可复发且当抗癌药物不再有效治疗患有该癌症的个体时，该癌症对该抗癌药物可变得具有抗性，例如即使投与剂量增加的抗癌药物。已对两种或更多种抗癌药物产生抗性的癌症被称为多药耐药的。
[0194]
在优选实施例中，根据本发明使用的组合、组合物、试剂盒、用途、方法及化合物(包括所有实施例)用于治疗癌症病患(例如罹患(i)胃肠道癌，例如食道癌、胃部癌症、肝细胞癌、胆道癌胆囊癌、胰脏癌或结肠直肠癌，(ii)黑色素瘤，(iii)膀胱癌或(iv)肺癌的病患)，其先前未经一或多种免疫检查点抑制剂及/或免疫调节剂，例如一或多种pd
‑
1拮抗剂(例如抗pd1抗体)治疗。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
1作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
1作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
1作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
2作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
2作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
2作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。
[0195]
在另一优选实施例中，根据本发明使用的组合、组合物、试剂盒、用途、方法及化合物(包括所有实施例)用于治疗癌症病患(例如罹患(i)胃肠道癌，例如食道癌、胃部癌症、肝细胞癌、胆道癌胆囊癌、胰脏癌或结肠直肠癌，(ii)黑色素瘤，(iii)膀胱癌或(iv)肺癌的病患)，其对检查点抑制剂疗法(例如对使用一或多种免疫检查点抑制剂及/或免疫调节剂，例如一或多种pd
‑
1拮抗剂(例如抗pd1抗体)的治疗)而言为难治性或抗性的。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
1作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
1作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
1作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
2作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
2作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
2作为抗pd
‑
1抗体治疗这些
癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。
[0196]
在一替代优选实施例中，根据本发明使用的组合、组合物、试剂盒、用途、方法及化合物(包括所有实施例)用于治疗罹患对检查点抑制剂疗法(例如对使用一或多种免疫检查点抑制剂及/或免疫调节剂，例如一或多种pd
‑
1拮抗剂(例如抗pd1抗体)的治疗)而言为难治性或抗性的任何实体瘤的癌症病患。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
1作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
1作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
1作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
2作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
2作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
2作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。实体瘤的实例在本领域中为众所周知的。同样，术语难治性或抗性也是本领域技术人员已知的且在本技术中根据本领域中采用的定义使用。
[0197]
对检查点抑制剂疗法为难治性或抗性的肿瘤在本技术中也称为“抗免疫治疗肿瘤”或“抗免疫治疗非t细胞发炎肿瘤”。近期已发现在许多肿瘤的微环境中，可发现特异性免疫细胞的高表达。此在本领域中被称为“t细胞发炎的表型”及已观测到此表型与顺从使用包括治疗疫苗及检查点阻断抗体(例如抗pd
‑
1抗体)的多重免疫疗法的治疗的这些肿瘤相关。另一方面，某些肿瘤缺乏免疫细胞在其微环境中的此表达。这些肿瘤在本领域中被称为“非t细胞发炎肿瘤”及发现其缺乏对免疫疗法(尤其使用抗pd
‑
1抗体的免疫疗法)的临床益处。根据本发明，具有活性wnt信号传递的后者类型的肿瘤是本发明主张的组合疗法的优选靶点。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
1作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
1作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
1作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
2作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
2作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
2作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#2作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#6作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。尤其优选地，以lrp5#7作为lrp5拮抗剂及pd1
‑
3作为抗pd
‑
1抗体治疗这些癌症。
[0198]
本发明不限于本技术描述的具体实施例的范围内。除本技术描述的那些之外，本领域技术人员可自本发明揭示内容对本发明的各种修饰变得显而易见。这些修饰意欲落于随附申请专利范围的范围内。
[0199]
本技术引用的所有专利申请案以全文引用的方式并入本技术中。
[0200]
实施例1例示性lrp5拮抗剂与小鼠pd
‑
1抗体的组合在自balb/c小鼠中的乳腺癌细胞系emt6衍生的皮下同基因小鼠模型中的抗肿瘤活性测试例示性lrp5拮抗剂作为单一药剂及与小鼠pd
‑
1抗体组合在s.c.细胞系衍生
的小鼠乳腺癌(emt6)同基因模型中的效用。
[0201]
于此研究中使用balb/cjbomtac小鼠。每只小鼠注射1x106个emt6乳腺癌细胞以建立肿瘤。肿瘤体积使用卡尺每周至少测量三次。当肿瘤已达成约120mm3的中值肿瘤体积时开始治疗及在30天后结束。
[0202]
以例示性lrp5拮抗剂静脉内(i.v.)每周两次及每周两次i.p.抗pd
‑
1抗体或两种化合物的组合治疗十只荷瘤动物。十只动物用于媒剂/同型对照
‑
治疗组中。出于道德原因基于肿瘤块(肿瘤≥1.5cm3)在研究结束时将动物安乐死。
[0203]
细胞emt6细胞获得自atcc(目录编号crl2755
tm
)。建立主细胞库(mcb)及工作细胞库(wcb)。在37℃及5％co2下将细胞培养于t175组织培养瓶中。所用培养基为以15％胎牛血清(fetal bovine serum characterized；目录编号sh30071.03；由thermo scientific提供)，及2mm l
‑
谷氨酰胺(l
‑
谷氨酰胺200mm(100x)；参考25030
‑
024；由gibco by life technologies的提供)补充的韦氏mb 752/1。培养物以1:10/1:15的比率每二至三天分离。
[0204]
小鼠小鼠为购买自taconic,denmark的7至8周龄balb/cjbomtac。在到达动物设施后，容许小鼠对周围条件适应至少5天，然后将其用于实验。在标准化条件下在21.5
±
1.5℃及55
±
10％湿度下将这些小鼠以每组十只饲养于iii型笼中。随意提供标准化辐照饮食(provimi kliba)及经高压灭菌的自来水。使用在异氟烷麻醉下经皮下植入的微芯片以识别各小鼠。笼卡显示研究编号、动物编号、化合物及剂量、投与途径及在整个研究过程中这些动物所保持的时间表。
[0205]
测试化合物的投与将lrp5拮抗剂悬浮于组氨酸缓冲液ph 6.5中且在最初两周以15mg/kg的剂量每周两次i.v.投与10ml/kg的施用体积。
[0206]
将pd
‑
1抗体稀释于pbs中并以每只小鼠10ml/kg的体积每周两次以10mg/kg的剂量腹膜内注射直至研究结束。
[0207]
监测肿瘤生长及疾病进展肿瘤直径每周三次(周一、周三及周五)以卡尺测量。各肿瘤的体积[以mm3计]根据式“肿瘤体积＝长度*直径2*π/6”计算。为监测治疗的副作用，每天检查小鼠的异常并每天测定体重。在研究结束时处死动物。在研究期间出于道德原因将具有坏死性肿瘤或肿瘤尺寸超过1500mm3的动物尽早处死。
[0208]
结果以抗pd
‑
1的小鼠抗体或lrp5拮抗剂治疗etm6肿瘤导致中度肿瘤生长抑制。该lrp5拮抗剂与该pd
‑
1抗体的组合导致当相较于单一药剂投与时显着增加的效用，当相较于单一治疗时当在较少数量的小鼠中观测到肿瘤消退(以单一药剂pd
‑
1抗体或lrp5拮抗剂治疗的10只小鼠中分别1及3只可观测到肿瘤消退)时，该组合在10只小鼠的5只中引起肿瘤消退。结果证实组合投与相较于单一治疗的协同效应的结果显示于图1中。此外，当相较于单一治疗时，lrp5拮抗剂与pd
‑
1抗体的组合增加表5中作为自治疗开始至当肿瘤体积达至少
500mm3时的时间的天数间隔记录的增加的存活。
[0209]
表5显示lrp5拮抗剂作为单一药剂及与小鼠pd
‑
1抗体组合的抗肿瘤活性。中值指自治疗开始至当肿瘤体积达至少500mm3的时间的间隔(天)。表5