一种用于治疗禽流感的中药制剂及其制备方法与流程

1.本发明属于兽药技术领域，具体涉及一种用于治疗禽流感的中药制剂及其制备方法。


背景技术：

2.甲型流感病毒是一种高度变异的病原体，可感染多种宿主物种。流感病毒为单链负rna病毒，基因组由8条单股负链rna构成，每个片段编码一种或两种蛋白质。表面糖蛋白血凝素(ha)和神经氨酸酶(na)是将甲型流感病毒分为亚型的基础。根据病毒ha和na的抗原性差异，到目前为止，aiv可划分为18个ha亚型和11个na亚型。h9n2禽流感(aiv)是由h9n2亚型aiv引起的一种禽类病毒性传染病，被认为是集约化养鸡场的重要疫病之一，该病广泛分布于世界各地，威胁着养鸡业的发展，常常造成严重的经济损失。据统计，1996
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2000年间，h9n2 aiv感染的鸡群占93.89％，这表明从19世纪末到20世纪初，h9n2是影响家禽养殖的主要亚型。直到今天，除了臭名昭著的h5n1和新兴的h7n9新秀之外，h9n2仍然是破坏家禽业的三种主要ai亚型之一。可以说，h9n2 aiv是全球家禽群体中检测到的最常见的流感病毒亚型。近期，临床上出现许多呼吸道症状的家禽病例，通过实验室病毒分离鉴定为h9n2禽流感和支原体混合感染导致鸡喉头栓塞，气管环出血。
3.单纯h9n2亚型禽流感疫苗不能100％控制发病，养殖场生物安全不到位，或者饲养管理操作不当，都会给鸡群造成一定的应激，就有可能导致h9的爆发。同时由于病原不断产生变异，流感疫苗研发的速度，往往跟不上病原变异速度，导致许多养殖场免疫了疫苗，偶尔还会爆发禽流感。病毒病发生后，没有特效的药物疗法，发病后及时采用对症进行治疗可显著减低动物死亡率。虽然在生产过程中适当添加抗生素可以在一定程度上降低该病的发生率，但应用抗生素主要是针对病毒感染引起的并发症，而且随着大量抗菌药特别是广谱抗菌药在养殖业中的广泛应用，抗菌药物的耐药性问题日趋突出，公众健康、经济可持续增长和全球经济的稳定均受到抗生素耐药问题的严重威胁，畜禽养殖安全用药面临的形势严峻。农业农村部在出台促进兽药行业健康发展的指导意见中明确要加快中兽药产业发展，保障食品和公共卫生安全。结合我国得天独厚的中药资源和久远的中药历史，中兽药及其副产品无疑将成为我国抗生素替代品开发得天独厚的资源。
4.针对目前对禽流感没有完备的防控治疗措施以及存在抗生素残留的缺陷和问题，所以需要研发一种对h9n2亚型流感病毒有显著的抑制作用的中兽药组方，能够在临床上针对h9n2亚型禽流感有良好的预防和治疗效果。


技术实现要素：

5.针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种用于治疗禽流感的中药制剂及其制备方法。本发明的组方科学简约，制备方法简单；无任何毒性、安全无残留，在治疗和预防禽流感的同时能够保证食品安全。
6.为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
7.本发明的第一方面，提供一种用于治疗禽流感的中药组合物，包括以下重量份的中药原料：
8.炙麻黄2～4份，杏仁2～4份，石膏8～10份，板蓝根5～7份，鱼腥草5～7份，霍香2～4份，大黄5～7份，荆芥2～4份，甘草2～4份。
9.优选的，包括以下重量份的中药原料：
10.炙麻黄3份，杏仁3份，石膏9份，板蓝根6份，鱼腥草6份，霍香3份，大黄6份，荆芥3份，甘草3份。
11.本发明的第二方面，提供上述中药组合物的制备方法，所述方法为：
12.(1)将中药原料混合均匀，加入25℃水，浸泡30分钟，加热至沸腾并保持1小时，过滤得到第一提取液，向过滤后的中药原料中加入50℃水，加热至沸腾并保持45分钟，过滤得到第二提取液；
13.(2)将第一提取液和第二提取液混合，即为中药组合物。
14.优选的，步骤(1)中，所述中药原料与25℃水的加入量为1g:(10～15)ml。
15.优选的，步骤(2)中，所述中药原料与50℃水的加入量为1g:(5～7)ml。
16.本发明的第三方面，提供中药组合物在制备治疗禽流感的中药制剂中的应用。
17.优选的，所述禽流感为h9n2亚型流感。
18.本发明的第四方面，提供一种用于治疗禽流感的中药制剂，以中药组合物为有效成分。
19.优选的，所述中药制剂还包括医药学上可接受的辅料。
20.本发明的有益效果：
21.本发明的中药制剂严格按照君臣佐使进行配伍，以麻杏石苷为基础进行组方优化后制备的中药制剂对h9n2亚型流感病毒具有极好的抑制效果，在临床应用中总有效率为100％，而且该制剂为纯中药制剂，组方科学简约，制备方法简单，在使用浓度时剂量小(大于100倍稀释)、成本低、无任何毒性、安全无残留，在治疗和预防禽流感的同时能够保证食品安全，具有广阔的市场前景。
附图说明
22.图1：鸡胚发育情况对比，其中a.按照实施例1制备的中药原液，b.中药原液10倍稀释，c.中药原液100倍稀释，d.正常对照；
23.图2：鸡胚发育情况对比，其中a、b为按照实施例1的方法制备的中药10倍稀释；c、d为按照实施例1的方法制备的中药100倍稀释；mxsg为传统麻杏石甘水提液10倍稀释组。1表示：中药 病毒，2表示：病毒对照，3表示：中药对照。
具体实施方式
24.应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本技术提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本技术所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
25.正如背景技术部分介绍的，目前针对对禽流感没有完备的防控治疗措施以及存在抗生素残留的缺陷等问题。
26.基于此，本发明的目的是提供一种用于治疗禽流感的中药制剂及其制备方法，剂量小、成本低、无任何毒性、安全无残留。本发明以麻杏石苷为基础进行组方进行优化，将麻杏石苷的用量减少一半左右，增加板蓝根，鱼腥草，霍香，大黄和荆芥；原料药的总用量与传统配方麻杏石甘的用量基本相当，但治疗h9n2亚型流感的效果要远远好于麻杏石甘。
27.为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本技术的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本技术的技术方案。
28.本发明实施例中所用的试验材料均为本领域常规的试验材料，均可通过商业渠道购买得到。
29.实施例1
30.称取炙麻黄3g，杏仁3g，石膏9g，板蓝根6g，鱼腥草6g，霍香3g，大黄6g，荆芥3g，甘草3g，混合均匀放入容器中，加入500ml的25℃清水，浸泡30分钟，加热至沸腾并保持1小时，收集提取液，再次加入250ml的50℃清水，加热至沸腾并保持45分钟，收集提取液；将两次的提取液混合后进行过滤即为中药复方水提取液。
31.实施例2
32.称取炙麻黄2g，杏仁4g，石膏8g，板蓝根7g，鱼腥草5g，霍香4g，大黄5g，荆芥4g，甘草2g，混合均匀放入容器中，加入500ml的25℃清水，浸泡30分钟，加热至沸腾并保持1小时，收集提取液，再次加入250ml的50℃清水，加热至沸腾并保持45分钟，收集提取液；将两次的提取液混合后进行过滤即为中药复方水提取液。
33.实施例3
34.称取炙麻黄4g，杏仁2g，石膏10g，板蓝根5g，鱼腥草7g，霍香2g，大黄7g，荆芥2g，甘草4g。混合均匀放入容器中，加入500ml的25℃清水，浸泡30分钟，加热至沸腾并保持1小时，收集提取液，再次加入250ml的50℃清水，加热至沸腾并保持45分钟，收集提取液；将两次的提取液混合后进行过滤即为中药复方水提取液。
35.对比例
36.制备传统麻杏石甘水提液
37.称取炙麻黄6g，杏仁6g，石膏18g，甘草6g，混合均匀放入容器中，加入500ml的25℃清水，浸泡30分钟，加热至沸腾并保持1小时，收集提取液，再次加入250ml的50℃清水，加热至沸腾并保持45分钟，收集提取液；将两次的提取液混合后进行过滤即为中药复方水提取液。
38.试验例1：药物安全性评价
39.实验材料：
40.鸡胚：10日龄spf鸡胚，由山东省农业科学院家禽研究所spf中心提供。
41.实验方法：按照实施例1的制备方法制备中药复方水提取液并平均分成三份，一份不做处理记为原液，第二份稀释10倍记为10倍，第三方稀释100倍记为100倍，按照100ul/胚的剂量接种10日龄spf鸡胚，去掉24h以内死亡的鸡胚，记录鸡胚死亡情况，并在5天后观察鸡胚发育情况。
42.实验结果：如图1所示，与空白对照组鸡胚相比，实施例1制备的中药复方水提取液以及经过10倍和100倍稀释后使用，均不影响鸡胚发育，鸡胚均无死亡。
43.由此可见，本发明的中药复方具有很好的安全性，对鸡胚无毒。
44.试验例2：药物抗流感病毒效果评价
45.实验材料
46.鸡胚：10日龄spf鸡胚，由山东省农业科学院家禽研究所spf中心提供；
47.病毒株：h9n2亚型流感流行毒株由山东省农业科学院畜牧兽医研究所分离鉴定并进行纯化扩增。
48.实验方法
49.病毒半数感染量(eid
50
)测定：将h9n2流感病毒10倍系列稀释，接种10日龄spf鸡胚，每个稀释度5枚接胚(0.1ml/胚)，去掉24h以内死亡的鸡胚，在5天后收集尿囊液测定病毒效价，计算病毒的半数感染剂量。
50.药物抗病毒效果评价：根据测定的eid
50
建立h9n2流感病毒感染鸡胚模型，进行抗病毒效果评价，按照实施例1的方法将制备的药物分别进行10倍稀释和100倍稀释后，与流感病毒进行等量混合孵育，按照200ul/胚的剂量接种10日龄spf鸡胚。对比例制备的传统麻杏石甘药物进行10倍稀释，与流感病毒进行等量混合孵育，按照200ul/胚的剂量接种10日龄spf鸡胚。去掉24h以内死亡的鸡胚，记录鸡胚死亡情况，并在5天后收集尿囊液测定病毒效价，观察鸡胚发育情况。
51.实验结果：如表1和图2所示，按照实施例1的方法将制备的中药复方10倍和100倍稀释后能够有效控制流感病毒在鸡胚中的复制。实施例1制备的中药复方稀释100倍后的效果略好于对比例的传统经典配方麻杏石甘稀释10倍的效果，实施例1的中药复方稀释10倍后的效果显著优于对比例的传统经典配方麻杏石甘稀释10倍的效果。说明本发明的配方在治疗h9n2流感上效果显著。
52.由此可见，本发明的中药复方具有很好的抗病毒效果。
53.表1
[0054] mxsg(10倍)mxsg(10倍)a(10倍)b(10倍)c(100倍)d(100倍)药 毒9/0/010/0/00/0/00/0/09/0/00/0/0毒对照11/11/1110/10/911/11/1110/10/911/10/1010/9/9药对照0/0/00/0/00/0/00/0/00/0/00/0/0
[0055]
表注：表格中数字代表鸡胚尿囊液血凝效价(即鸡胚中病毒含量)，加粗字体代表该鸡胚在5天内死亡，未加粗字体代表鸡胚5天内存活。
[0056]
试验例3：临床应用效果(治疗例)
[0057]
养殖场a应用效果：地点：枣庄。
[0058]
26万只大肉食，24日龄，风机时控60％，通风量过大，当天外界温度迅速下降，没有及时减风机和小窗，鸡出现感冒，眼睛变长，炸毛，有呼吸道症状，不增料，发病鸡群采集典型病料，实验室检测为h9n2禽流感阳性。
[0059]
治疗上按照实施例1的方法制备中药复方制剂，按照每毫升中药复方制剂混合8斤水，连续使用4天后，大群呼吸道没有发展，慢慢减轻，鸡群死淘没增加，吃料恢复，最后出栏成绩：体重5.77，成活率96％，料比1.58(使用新玉米料比偏高)，43天出鸡，欧指：408。隔壁鸡场也出现了相同的症状，按照其他的方案治疗，控制不住，死淘很高。
[0060]
试验例4：临床应用效果(预防例)
[0061]
养殖场b应用效果：地点：河南。
[0062]
下面两个养殖户为邻居，养殖品种均为817肉鸡，笼养，40日龄，一个1.6万只，另一个1.8万只。1.6万只的养殖户使用按照实施例1的方法制备的中药复方制剂，按照每毫升中药复方制剂混合8斤水，连续使用三天；1.8万只的养殖户没有使按照实施例1的方法制备的中药复方制剂；43日龄突然刮风降温，1.6万只使用中药的没有发病，鸡群正常；1.8万只没用中药的发病了，有呼吸道症状同时减料，说明本发明的中药复方制剂起到预防感冒效果。
[0063]
以上所述仅为本技术的优选实施例而已，并不用于限制本技术，对于本领域的技术人员来说，本技术可以有各种更改和变化。凡在本技术的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本技术的保护范围之内。