一种防治溃疡性结肠炎的口服结肠定位制剂的制作方法

1.本发明涉及中药制剂领域，尤其涉及一种防治溃疡性结肠炎的口服结肠定位制剂、制备方法及其应用。


背景技术：

2.溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，uc)是一种发病机制不太清楚的结肠和直肠慢性非特异性炎症性疾病，发病年龄段大多集中于20～50岁附近，通常情况下，uc临床表现主要为腹泻、腹痛、里急后重和黏液脓血便等，部分患者会出现如关节和肝胆管类疾病以及眼睛、皮肤损伤等肠外并发症，甚至还会伴随不同程度的全身症状，最重要的是此病变易反复，发生癌变的机会比正常人高5～10倍，被称为“不是癌症的癌症”，给患者的平日生活带来了巨大的影响，甚至会危及到生命安全，该病已被世界卫生组织列为现代难治病之一。
3.溃疡性结肠炎，其发病机理较复杂，是多种因素相互作用从而导致体内免疫系统失调，进而细胞因子网络平衡被破坏，大量炎症细胞被活化并向炎症部位趋化募集，释放多种炎症因子，从而引起肠组织的炎症反应。目前西医临床治疗的药物基本以氨基水杨酸类(5
‑
amin
‑
osalicylic acid，5
‑
asa)、糖皮质激素类(glucocorticosteroids，gcs)和免疫抑制剂类为主，其中柳氮磺胺吡啶，美沙拉嗪占了很大的比例，还有一些奥沙拉嗪、巴柳氮钠等。但因其疗效不够稳定，药物使用过程中存在一定的不良反应，需要长期坚持治疗，易反复，患者往往中途停药导致病程兀长，轻中型患者往往不容易接受，同时还伴随一定的肝肾脏毒性和药物依赖性等问题给患者带来很大困扰，具有一定的局限性。
4.uc在中医中属泄泻、肠癖、痢疾、肠风、脏毒等范畴，其主要病因为脾胃虚弱、肾阳虚衰、湿热内蕴和血瘀肠络等，外感六淫、饮食不节、情志失调均能损伤脾胃而诱发本病。临床应用发现中药在uc的治疗中具有独特的优势，对患者免疫失调有很强的矫正作用，且能够多环节、多方位、多靶点的作用，特别是其作用比较全面、不良反应较少，成为广大学者研究的重点，展现出广阔的应用前景。临床上中医药治疗uc药物主要以白术芍药散、参芩白术散、大黄牡丹汤等方剂加减化裁而来，其效果明显，不易复发，但也存在一定的局限性，其有效的给药方法主要为灌肠和栓剂给药，如若长期以往，多数患者很不易接受和依从，给uc患者的治疗带来了极大的不便，而市面上常用的口服中成药如固肠止泻丸、固本益肠丸、肠胃宁胶囊(片)，虎地肠溶胶囊等均缺少一定的结肠定位性能，疗效有待提高。
5.大黄白及散是经过临床加减的验方，在临床治疗胃肠道溃疡出血上取得了非常好的效果。由大黄、白及等药组成，组方简单，方中大黄可清热泻火，导滞通便；白及可清热消肿，收敛止血，生肌收口；两药合用，共奏清热解毒、祛腐生肌、活血祛瘀、以进溃疡愈合之功效，临床实践显示，大黄白及散对胃肠道溃疡性病症疗效明确、复发率低，具有较好的开发前景。
6.由于uc病灶主要在结肠，当中以乙状结肠最为常见，其病理表现为肠道黏膜长期被中性粒细胞等炎症细胞浸润，导致上皮细胞凋亡，从而引起肠粘膜的损伤，进一步引起出血等现象，所以使药物准确递送到病变部位，延长药物的滞留时间，修复溃疡面是治疗的关
键。而临床上应用均以栓剂或灌肠为主，虽疗效显著，但患者依从性不高，而常规的普通口服制剂缺少结肠定位特性，很难完好到达病灶部位，即使能够到达其药量也所剩无几，很难达到治疗目的。
7.而口服结肠靶向给药系统(oral colon
‑
targeted targeting drug deliverysystem，octdds)是指药物制剂经口服给药后，在上消化道不释放，使制剂顺利经过胃和小肠，到达回盲部或结肠部位才定位释放药物从而发挥局部或全身治疗作用的一种新型给药系统，可分为ph依赖型、时滞依赖型、酶触发型、生物黏附型等几类，其在结肠性疾病上的应用具有广泛意义。


技术实现要素：

8.为解决上述技术问题，本发明的实施方式提供了一种防治溃疡性结肠炎的口服结肠定位制剂，该制剂包括载药丸芯，载药丸芯的外部依次包裹酶促内层以及ph依赖外层，其中：载药丸芯中的原料药的含量为载药丸芯重量的20％～40％；酶促内层的重量为载药丸芯重量的15％～20％；ph依赖外层的重量为酶促内层与载药丸芯重量之和的20％～30％；且载药丸芯中的原料药包含具有防治溃疡性结肠炎的大黄白及散有效组份
‑‑
大黄总蒽醌提取物和大黄多糖提取物。
9.优选的，所述大黄总蒽醌提取物和大黄多糖提取物的用量比为1:2。
10.优选的，本发明的大黄总蒽醌提取物采用本技术人已申请的下述中国专利cn201711324744.9(一种大黄总蒽醌的提取纯化方法及其在改善脑缺血再灌注损伤中的应用)中公开的方法提取得到。本发明的大黄多糖提取物的制备：以cn201711324744.9中公开的方法提取大黄总蒽醌后的大黄药材作为原料，采用微波辅助水提醇沉法进行提取，以水为提取溶剂，料液比1:50，提取功率500w、提取温度80℃、提取时间15min，并经过s
‑
8大孔树脂脱色纯化后即得。
11.优选的，所述酶促载药内层包括酶促型包衣材料、增塑剂以及抗粘剂，其用量分别为丸芯重量的3
‑
5％，40
‑
55％，20
‑
30％；所述ph依赖外层包括ph依赖性包衣材料、增塑剂以及抗粘剂，其用量分别为丸芯重量90
‑
110％，10
‑
30％，25
‑
50％。
12.优选的，所述酶促型包衣材料为白及多糖提取物。更为优选的，本发明的白及多糖提取物采用申请人已申请的下述中国专利cn201910217453.2一种白芨多糖提取物及其制备方法中公开的制备方法制备。其最终提取物中白及多糖纯度50％～70％。
13.优选的，所述酶促载药内层的包衣增重为0％～20％。
14.优选的，所述酶促载药内层的增塑剂为柠檬酸三乙酯，所述增塑剂用量为所述酶促型包衣材料重量的5～10倍；所述酶促载药内层的抗粘剂为微粉硅胶，且所述抗粘剂的用量为所述酶促型包衣材料重量的3～5倍。
15.优选的，所述ph依赖性包衣材料为丙烯酸树脂s100。
16.优选的，所述ph依赖外层的包衣增重为20％～50％。
17.优选的，所述ph依赖外层中的增塑剂为柠檬酸三乙酯，所述增塑剂的重量为所述ph依赖性包衣材料的10％～30％；所述ph依赖外层中的抗粘剂为滑石粉，所述抗粘剂的重量为所述ph依赖性包衣材料的20％～40％。
18.本发明为解决上述技术问题，本发明的实施方式还提供了一种防治溃疡性结肠炎
的口服结肠定位制剂的制备方法，该方法包括如下步骤：
19.(1)制备载药丸芯：将配方量的大黄总蒽醌提取物和大黄多糖提取物与药用辅料混匀，采用挤出滚圆法制备载药丸芯；
20.(2)制备酶促内层：将酶促型包衣材料溶解在2％醋酸水溶液中；持续搅拌下，依次缓慢加入配方量的增塑剂、润滑剂，充分搅拌后得到酶促内层包衣液，用所述酶促内层包衣液对步骤(1)制得的载药丸芯进行包衣，即得酶促内层包衣微丸；
21.(3)制备ph依赖外层：在搅拌下，将ph依赖性包衣材料加入到乙醇中，完全溶解后，依次加入配方量的增塑剂及润滑剂，充分搅拌得到ph依赖外层包衣液，用所述ph依赖外层包衣液对步骤(2)制得的酶促内层包衣微丸进行包衣、老化即得到防治溃疡性结肠炎的结肠定位制剂。
22.本发明实施方式相对于现有技术而言，该制剂通过在载药丸芯上依次包覆酶促内层以及ph依赖外层，且酶促内层同时也是上药的过程，具有药辅统一性。这使得结肠定位制剂靶向性强、稳定性好、疗效佳，从而达到防治溃疡性结肠炎的目的。且该制剂服用方便、药物副作用小。
附图说明
23.为了更清楚地说明本技术的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
24.图1为本技术实施例提供的防治溃疡性结肠炎的口服结肠定位制剂的体外释放曲线；图中，a：实施例1；b：实施例2；c：实施例3。
25.图2为本技术实施例提供的防治溃疡性结肠炎的口服结肠定位制剂的丸芯外观图；
26.图3为本技术实施例提供的防治溃疡性结肠炎的口服结肠定位制剂的酶促层包衣小丸外观图。
27.图4为本技术实施例提供的防治溃疡性结肠炎的口服结肠定位制剂的ph依赖层包衣小丸外观图。
具体实施方式
28.为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明的各实施方式进行详细的阐述。然而，本领域的普通技术人员可以理解，在本发明各实施方式中，为了使读者更好地理解本技术而提出了许多技术细节。但是，即使没有这些技术细节和基于以下各实施方式的种种变化和修改，也可以实现本技术所要求保护的技术方案。
29.口服结肠靶向给药系统是指药物制剂经口服给药后，在上消化道不释放，使制剂顺利经过胃和小肠，到达回盲部或结肠部位才定位释放药物从而发挥局部或全身治疗作用的一种新型给药系统。可分为ph依赖型、时滞依赖型、酶触发型、生物黏附型等几类，其有以下优点：(1)能延长药物在体内的作用时间，减少给药次数，提高患者依从性；(2)降低不必要的高血药浓度，减少毒副作用；(3)增加药物的靶向性，服用方便，提高疗效；(4)提高生物利用度。
30.以下各实施例模拟人体内胃肠道环境进行体外释放试验。试验按照2015版《中国
药典》四部配制不同ph溶出介质，按照《中国药典》(2015版)四部0931溶出度与释放度测定法第一法进行，采用转蓝法，溶出介质分别为750ml人工胃液(ph＝1.2)、人工小肠液(ph＝6.8)、人工结肠液(ph＝7.4)，温度为37℃
±
0.5℃，转速为50rpm，于人工胃液2h，人工小肠液3h，人工结肠液7h，并按前期建立的溶出度含量测定方法进行测定，计算平均累积释放度。
31.人工胃液(ph1.2)：量取16.4ml稀盐酸加超纯水定容至1000ml，充分混匀即得。(稀盐酸的配制：取盐酸234ml，加水至1000ml混匀即得。)
32.人工小肠液(ph6.8)：取0.2mol/l磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/l氢氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。
33.人工结肠液(ph7.6)：称取磷酸二氢钾27.22g，加水使溶解成1000ml，取50ml，加0.2mol/l氢氧化钠溶液42.4ml，再加水稀释至200ml，即得。
34.实施例1
35.原料药的制备：1)大黄总蒽醌的制备：参照cn201711324744.9中公开的方法制备得到大黄总蒽醌的提取物；2)白及多糖提取物的制备：参照cn201910217453.2中公开的方法制备得到白芨多糖提取物；3)大黄多糖提取物的制备：以cn201711324744.9中公开的方法提取大黄总蒽醌后的大黄药材作为原料，采用微波辅助水提醇沉法进行提取，以水为提取溶剂，料液比1:50，提取功率500w、提取温度80℃、提取时间15min，并经过s
‑
8大孔树脂脱色纯化后即得。
36.载药丸芯处方：包含原料药和辅料。
37.原料药为大黄有效组份，占载药丸芯重量的20％，其中大黄总蒽醌提取物：大黄多糖提取物的质量比1:2。
38.辅料包含：填充剂微晶纤维素，占载药丸芯重量的50％，润湿剂水，占载药丸芯重量的30％。但是本实施方式不应以此为限，填充剂包括但不限于微晶纤维素，也可以是乳糖、预交化淀粉以及微晶纤维素中的一种或一种以上组合物；润湿剂包括但不限于超纯水，也可以是10％乙醇、20％乙醇的一种。
39.酶促内层处方：白及多糖提取物为包衣上药材料，柠檬酸三乙酯重量百分比25％，微粉硅胶占白及多糖提取物重量的5倍，包衣增重16％。
40.ph依赖外层处方：甲基丙烯酸树脂s100(eudragit s100)为包衣材料，柠檬酸三乙酯占eudragit s100重量百分比25％，滑石粉占eudragit s100重量百分比25％，包衣增重25％。
41.制备工艺：
42.1)制备载药丸芯：将上述处方量的大黄有效组分、微晶纤维素等预先混匀，加入润湿剂，湿法制软材，挤出滚圆法制20～40目微丸，60℃干燥；丸芯外观图见图2；
43.2)制备酶促内层包衣液：将白及多糖提取物溶解在2％醋酸溶液中，持续搅拌，依次加入柠檬酸三乙酯、微粉硅胶，充分搅拌后得到酶促内层包衣液；
44.3)酶促内层包衣：流化床中，投丸20g，以glatt流化床进行包衣，包衣条件：底喷包衣，流速：1
‑
1.5ml/77s；物料温度：33
‑
35℃；流化量：25
‑
30m3/h；喷雾压力：0.8
‑
1.2bar；进口温度：4,0
‑
46℃，开始喷雾包酶促内层，包衣完毕后，40℃活化2h，得白及多糖包衣小丸，外观见图3；
45.4)制备ph依赖外层包衣液：在磁力搅拌下，将eudragit s100加入至乙醇中，完全溶解后，依次加入柠檬酸三乙酯和滑石粉，充分搅拌即得ph依赖外层包衣液；
46.5)ph依赖外层包衣：流化床中，投丸20g，以glatt流化床进行包衣，包衣条件：底喷包衣，流速：1
‑
1.5ml/77s；物料温度：33
‑
35℃；流化量：25
‑
30m3/h；喷雾压力：0.8
‑
1.2bar；进口温度：4,0
‑
46℃，开始喷雾包酶促内层，包衣完毕后，40℃活化2h，得最终包衣小丸，外观见图4。
47.6)体外释放结果见表1：
48.表1：在不同ph介质中包衣小丸的体外释放结果(实施例1)
[0049][0050][0051]
实施例2
[0052]
大黄总蒽醌提取物、大黄多糖提取物和白及多糖提取物的制备参照实施例1载药丸芯处方：包含原料药和辅料。
[0053]
大黄有效组份，占载药丸芯重量的25％，其中大黄总蒽醌：大黄多糖＝1:2。
[0054]
辅料包含：填充剂微晶纤维素，占载药丸芯重量的60％，润湿剂水，占载药丸芯重量的15％。但是本实施方式不应以此为限，填充剂包括但不限于微晶纤维素，也可以是乳糖、预交化淀粉以及微晶纤维素中的一种或一种以上组合物；润湿剂包括但不限于超纯水，也可以是10％乙醇、20％乙醇的一种。
[0055]
酶促内层处方：白及多糖提取物为包衣上药材料，柠檬酸三乙酯重量百分比25％，微粉硅胶占白及多糖提取物重量的4倍，包衣增重10％。
[0056]
ph依赖外层处方：甲基丙烯酸树脂s100(eudragit s100)为包衣材料，柠檬酸三乙
[0057]
酯占eudragit s100重量百分比20％，滑石粉占eudragit s100重量百分比20％，包衣增重20％。
[0058]
制备工艺：
[0059]
1)制备载药丸芯：将上述处方量的大黄有效组分、微晶纤维素等预先混匀，加入润湿剂，湿法制软材，挤出滚圆法制20～40目微丸，60℃干燥；
[0060]
2)制备酶促内层包衣液：将白及多糖提取物溶解在2％醋酸溶液中，持续搅拌，依次加入柠檬酸三乙酯、微粉硅胶，充分搅拌后得到酶促内层包衣液；
[0061]
3)时滞内层包衣：流化床中，投丸20g，以glatt流化床进行包衣，包衣条件：底喷包衣，流速：1
‑
1.5ml/77s；物料温度：33
‑
35℃；流化量：25
‑
30m3/h；喷雾压力：0.8
‑
1.2bar；进口温度：4,0
‑
46℃，开始喷雾包酶促内层，包衣完毕后，40℃活化2h，得白及多糖包衣小丸；
[0062]
4)制备ph依赖外层包衣液：在磁力搅拌下，将eudragit s100加入至乙醇中，完全溶解后，依次加入柠檬酸三乙酯和滑石粉，充分搅拌即得ph依赖外层包衣液；
[0063]
5)ph依赖外层包衣：流化床中，投丸20g，以glatt流化床进行包衣，包衣条件：底喷
包衣，流速：1
‑
1.5ml/77s；物料温度：33
‑
35℃；流化量：25
‑
30m3/h；喷雾压力：0.8
‑
1.2bar；进口温度：4,0
‑
46℃，开始喷雾包酶促内层，包衣完毕后，40℃活化2h，得最终包衣小丸。
[0064]
6)体外释放结果见表2：
[0065]
表2：在不同ph介质中包衣小丸的体外释放结果(实施例2)
[0066][0067]
实施例3
[0068]
大黄总蒽醌提取物、大黄多糖提取物和白及多糖提取物的制备参照实施例1载药丸芯处方：包含原料药和辅料。
[0069]
大黄有效组份，占载药丸芯重量的15％，其中大黄总蒽醌：大黄多糖＝1:2。
[0070]
辅料包含：填充剂微晶纤维素，占载药丸芯重量的60％，润湿剂水，占载药丸芯重量的25％。但是本实施方式不应以此为限，填充剂包括但不限于微晶纤维素，也可以是乳糖、预交化淀粉以及微晶纤维素中的一种或一种以上组合物；润湿剂包括但不限于超纯水，也可以是10％乙醇、20％乙醇的一种。
[0071]
酶促内层处方：白及多糖提取物为包衣上药材料，柠檬酸三乙酯重量百分比20％，微粉硅胶占白及多糖提取物重量的6倍，包衣增重20％。
[0072]
ph依赖外层处方：甲基丙烯酸树脂s100(eudragit s100)为包衣材料，柠檬酸三乙
[0073]
酯占eudragit s100重量百分比30％，滑石粉占eudragit s100重量百分比30％，包衣增重30％。
[0074]
制备工艺：
[0075]
1)制备载药丸芯：将上述处方量的大黄活性组分、微晶纤维素等预先混匀，加入30％的乙醇水溶液，湿法制软材，挤出滚圆法制20～40目微丸，60℃干燥；
[0076]
2)制备酶促内层包衣液：将白及多糖提取物溶解在2％醋酸溶液中，持续搅拌，依次加入柠檬酸三乙酯、微粉硅胶，充分搅拌后得到酶促内层包衣液；
[0077]
3)时滞内层包衣：流化床中，投丸20g，以glatt流化床进行包衣，包衣条件：底喷包衣，流速：1
‑
1.5ml/77s；物料温度：33
‑
35℃；流化量：25
‑
30m3/h；喷雾压力：0.8
‑
1.2bar；进口温度：4,0
‑
46℃，开始喷雾包酶促内层，包衣完毕后，40℃活化2h，得白及多糖包衣小丸；
[0078]
4)制备ph依赖外层包衣液：在磁力搅拌下，将eudragit s100加入至乙醇中，完全溶解后，依次加入柠檬酸三乙酯和滑石粉，充分搅拌即得ph依赖外层包衣液；
[0079]
5)ph依赖外层包衣：流化床中，投丸20g，以glatt流化床进行包衣，包衣条件：底喷包衣，流速：1
‑
1.5ml/77s；物料温度：33
‑
35℃；流化量：25
‑
30m3/h；喷雾压力：0.8
‑
1.2bar；进口温度：4,0
‑
46℃，开始喷雾包酶促内层，包衣完毕后，40℃活化2h，得最终包衣小丸。
[0080]
6)体外释放结果见表3：
[0081]
表3：在不同ph介质中包衣小丸的体外释放结果(实施例3)
[0082][0083]
本发明以酶促层包衣材料白及多糖提取物和ph敏感性包衣材料丙烯酸树脂将载药丸芯层层包裹，形成一种层层包裹的包衣小丸。本发明依据人体空腹时胃
‑
小肠
‑
结肠微环境的特性，一是不同部位ph的不同，胃液ph在1.0
‑
1.2左右，小肠液ph在6.5
‑
7.0左右，结肠液ph在7.0
‑
7.6左右；二是根据药物在不同部位的滞留时间不同，通常在胃部滞留0
‑
2h，小肠段滞留2
‑
4h，结肠段滞留5
‑
12h。参见图1，本技术制备的包衣小丸在体外释放试验中，在模拟胃酸的环境下2h能基本不释放，在模拟小肠液的环境中3h释放较少，只在10％左右，在模拟结肠液的环境中7h能释放达到90％以上。
[0084]
本发明制备的口服结肠定位制剂
‑
包衣小丸，因最外层为ph敏感的包衣材料丙烯酸树脂s100，该材料在ph＜7的环境中基本不太会被溶蚀，所以该包衣小丸在胃液、小肠液中不释放或者基本不释放；当到结肠液环境中因其＞7的弱碱性环境以及其丰富的菌群，不仅能溶蚀外层的ph敏感包衣层，也能酶解内层白及多糖的包衣层，从而使药物裸露在结肠的微环境中，从而达到定位、快速释放，提高疗效。本发明不同于一般的口服制剂，具有结肠定位性能，且不同于一般的直肠给药、灌肠制剂，具有服用方便性。
[0085]
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明的保护范围应以所附权利要求为准。